pp65抗原血症检测法诊断婴儿巨细胞病毒感染的研究

目的　探讨pp65抗原血症检测方法（AA）对新生儿和小婴儿巨细胞病毒（CMV）感染的诊断价值。方法　对21例有典型CMV感染症状患儿及42例无典型症状的患儿,进行外周血AA、尿PCR及血清ELISA法IgM检测,比较3种方法的检测结果,结合抗原血症的量化结果及对部分患儿的短期随访,分析AA的临床应用价值。结果　（1）63例中CMV症状性感染15例,亚临床型感染8例。症状性感染组AA、PCR、ELISA阳性检出率分别为93%（14/15）、100%（15/15）和80%（12/15）;亚临床型感染组阳性检出率分别为50%（4/8）,75%（6/8）和38%（3/8）。AA相对于PCR的敏感性为86%(18/21),特异性为100%。（2）症状性感染通常伴高水平抗原血症［(4～206)个/1.5×105多形核白细胞（PMNL）］,亚临床型感染通常抗原血症水平较低［（0～3）个/（1.5×105）PMNL］,症状性感染组抗原血症水平明显高于亚临床型感染组（P＜0.01）。（3）症状性感染组中4例婴儿肝炎患儿恢复期AA转为阴性或低水平。结论　pp65抗原血症检测方法是一种敏感、特异的检测方法,量化结果有助于诊断活动感染及监测病情。     

pp65抗原血症检测法监测婴儿巨细胞病毒肝炎的研究

目的探讨pp65抗原血症检测方法(AA)对婴儿巨细胞病毒(HCMV)肝炎临床应用价值。方法对2001年11月～2002年10月入院的76例婴儿肝炎患儿应用间接荧光染色法检测外周血pp65抗原血症,并与血清ELISA法检测HCMVIgM进行比较。对部分婴儿HCMV肝炎患儿应用更昔洛韦治疗后短期随访。结果76例中64例为HCMV肝炎。AA、ELISA法HCMV阳性检出率分别为92.2%(59/64例)、64.1%(41/64例)。抗原血症呈高水平、中水平者所占比例分别为81.4%(48/59例)、18.8%(11/59例),无低水平者。47例婴儿HCMV肝炎更昔洛韦治疗2周,治疗前、后抗原血症水平,经卡方检验,P<0.01。治疗后随访中肝功能正常与肝功能异常组,抗原血症水平经精确概率法检验,P<0.01。结论pp65抗原血症检测方法有助于监测婴儿巨细胞病毒肝炎的动态变化,指导治疗。     

人类巨细胞病毒感染的抗原血症检测方法

人类巨细胞病毒 ( Humancytomegalovirus,HCMV)是引起先天和围产期感染 ,导致先天畸形、智力低下、发育迟缓等后遗症的最常见病原 [1 ,2 ]。先天 HCMV感染的发病率为 0 .5 %～ 2 .5 % ,国外报道 :有症状者病死率 30 % ,存活者后遗症发生率70 % ,无症状患儿 5 %～ 1 5 %生长发育中出现异常 [1 ] ,早期、快速、准确的诊断 HCMV活动感染是近年儿科尤其是新生儿科医师一直关心的问题 ,然而目前仍缺少鉴别潜伏和活动感染的有效手段。病毒活动感染时 ,受累的外周白细胞表达病毒抗原 ,用单克隆抗体通过免疫染色检测病毒抗原的方法称为抗原血…     

流式细胞术检测PP65抗原血症对婴幼儿巨细胞病毒感染的诊断价值

目的 探讨流式细胞术检测PP65抗原血症对婴幼儿巨细胞病毒(CMV)感染的临床诊断价值.方法 对79例尿定量CMV-DNA检测阳性、年龄1 d～2.5岁患儿,运用流式细胞术检测外周血淋巴细胞PP65抗原,同时利用酶联免疫捕获法检测血清CMV-IgM,并结合临床资料进行分析.结果 PP65抗原阳性,CMV-IgM阴性13例.PP65抗原及CMV-IgM均阳性24例.PP65抗原阴性,CMV-IgM阳性3例.PP65抗原及CMV-IgM均阴性39例.PP65抗原检测阳性率(46.8%)明显高于CMV-IgM检测阳性率(34.2%),差异有显著性(X2=5.062 5,P<0.05).结论 流式细胞术检测CMVPP65抗原血症对诊断活动性CMV感染是一种快速、敏感、特异的方法 ,有助于早期诊断及评价感染状态.     

人巨细胞病毒pp65基因疫苗的研制

目的探讨人巨细胞病毒（HCMV）基因疫苗的研制及其预防和治疗HCMV原发和再发感染的效果。方法应用聚合酶链式反应（PCR）扩增HCMVpp65基因全长、巨细胞病毒（CMV）启动子的上下游序列,转化至质粒并载体,测序;合成分泌肽基因,构建自制的含CMV启动子、pp65基因和分泌肽基因的pcDNA5.0转染载体,即HCMVpp65基因疫苗。将该载体疫苗通过脂质转染法转至中国仓鼠卵巢（CHO）细胞,Western点杂交检测CHO细胞上清中pp65蛋白。结果克隆pp65基因全长测序结果与HCMVAD169株上的pp65标准序列比较：一致性为99.99%。构建了含有分泌肽、CMV启动子（含有增强子和内含子）和pp65全长pcDNA5.0的转染载体,即HCMV基因疫苗。转染至CHO细胞,其上清培养提取物Western点杂交阳性。结论含有分泌肽、CMV启动子和pp65cDNA的pcDNA5.0真核载体即粗制的HCMV基因疫苗可成功构建。     

流式细胞术检测PP65抗原血症在诊断巨细胞病毒感染上的应用

目的　探讨流式细胞技术检测PP6 5抗原血症对巨细胞病毒 (CMV)感染的诊断价值。方法　对 136例CMV感染患儿流式细胞技术检测血PP6 5抗原、实时荧光定量PCR(RFQ PCR)检测尿CMVDNA及血清ELISA法检测CMVIgM ,比较 3种方法的检测结果 ,并以 35例非CMV感染的患儿作为PP6 5检测的阴性对照。对 18例PP6 5抗原阳性患儿进行短期随访。结果　 136例CMV感染患儿从血单个核细胞 (MNC)中检出PP6 5抗原 118例 (118/ 136 ,阳性率 86 8% )。其中 5 3例患儿分别作MNC和多形核白细胞 (PMNL)检测 ,从MNC中检出PP6 5抗原 4 5例 (45 / 5 3,阳性率 84 9% ) ,PMNL中检出PP6 5抗原 4 3例 (43/ 5 3,阳性率 81 1% ) ,MNC与PMNL阳性率差异无统计学意义 (χ2 m=0 2 5 ,P >0 0 5 )。PP6 5与尿CMVDNA2种方法所检测的结果间差异无统计学意义 (χ2 m=1 78,P >0 0 5 ) ;但PP6 5与血CMVIgM检测结果间差异有统计学意义 (χ2 m=5 2 92 ,P <0 0 1)。PP6 5抗原水平与CMV感染的病情程度有明显相关性 ,全身性感染通常伴高水平抗原血症 ,单脏器感染抗原水平相对较低或阴性(χ2 =38 5 1,P <0 0 0 5 )。PP6 5在感染恢复期转为阴性或低水平 ,病情恶化时明显增高。结论　流式细胞技术检测PP6 5抗原血症是诊断活动性CMV感染的有效手段 ,量化结     

新生儿高胆红素血症与人巨细胞病毒感染的关系

为了解高胆红素血症（简称高胆）新生儿中人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）感染状况。方法：用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术对１２０例１２～２８天高胆新生儿的血、尿进行ＨＣＭＶ－ＤＮＡ序列测定。结果：因出生有窒息史、感染致高胆的新生儿中ＨＣＭＶ－ＤＮＡ阳性率分别为３．１％（１／３２）,８．１％（３／３７）。因高胆入院而找不到任何原因的数生儿占１２０例高胆新生儿的１９．２％,与高胆低出生体重儿的ＨＣＭＹ－ＤＮＡ阳性率     

新生儿高胆红素血症与人巨细胞病毒感染的关系

为了解高胆红素血症(简称高胆)新生儿中人巨细胞病毒(HCMV)感染状况.方法用聚合酶链反应(PCR)技术对120例12～28天高胆新生儿的血、尿进行HCMV-DNA序列测定.结果因出生有窒息史、感染致高胆的新生儿中HCMV-DNA阳性率分别为3.1%(1/32),8.1%(3/37).因高胆入院而找不到任何原因的新生儿占120例高胆新生儿的19.2%,与高胆低出生体重儿的HCMV-DNA阳性率分别为43.5%,36.8%.结论部分未明原因的高胆新生儿和高胆低出生体重儿为HCMV感染者.     

人巨细胞病毒感染的实验室检测与诊断

人巨细胞病毒(HCMV)是儿童先天性感染和出生后获得性感染的重要病原,可引起多种急、慢性感染和神经系统迟发后遗症。早期、准确诊断HCMV感染意义重大,但仅依靠临床表现难以对HCMV感染做出明确诊断。现简要介绍HCMV感染的实验室检测及诊断新技术。     

先天性和围产期人巨细胞病毒感染的临床特征分析

报告１０７例活动性人巨细胞病毒感染的临床表现，所有病例（ＣＭＶ－ＩｇＭ抗体皆阳性。先天性感染组７９例，围产期感染组２８例，两组均以出现早，程度重，消退迟或退而复现的病理性黄疸或伴肝脾肿大，肝功能有异常为主，余为先天畸形和神经系统异常。３１例中１７例有所通路传导障碍。先天组中新生儿窒息２０例，如遇此等表现，应警惕ＣＭＶ感染的存在。     

病毒编码微小RNA在人巨细胞病毒感染中的作用

微小RNA是存在于大多数真核细胞与某些病毒之中的一类非编码小分子RNA,可通过转录后抑制作用调控基因表达,由于其不具有免疫原性,可作为病毒逃避免疫系统攻击的一种高效工具,并且在病毒感染阶段的溶解性复制与潜伏感染的转换中起重要作用.人巨细胞病毒(HCMV)感染在人群中广泛流行,HCMV编码微小RNA通过影响病毒靶基因与细胞靶基因表达,在病毒潜伏感染中发挥重要作用,有望成为诊断和治疗HCMV感染的新靶点.该文就HCMV编码微小RNA在病毒感染中作用的研究进展进行综述.     

儿童巨细胞病毒感染与甘露聚糖结合凝集素表达相关性研究

目的探讨甘露聚糖结合凝集素(MBL)基因多态性及血浆蛋白水平与儿童巨细胞病毒(HCMV)感染的相关性。方法收集2007年3～11月在浙江大学医学院附属儿童医院诊断为HCMV感染的患儿作为HCMV感染组，选择同期行健康体检的儿童作为对照组。对两组行MBL基因检测和分型，并对HCMV感染组进行随访，分别测定其急性期和恢复期血浆MBL蛋白水平。分别比较两组基因变异频率和血浆MBL蛋白水平。结果HCMV感染组纳入104例，对照组纳入105例；HCMV感染组有50例患儿进行随访，HCMV感染组MBL基因启动子区-550位点的L型变异频率明显高于对照组(56.7% vs 34.3%, P=0.001)，野生单体基因型HYPA的频率明显低于对照组(47.6% vs 62.8%, P=0.002)，完整基因型中高水平表达基因型(YA/YA)的频率低于对照组(41.3% vs 60.0%, P=0.007)，而低水平表达基因型(YA/XA, YA/YB, XA/XA)的频率高于对照组(52.9% vs 29.5%, P=0.001)。HCMV感染组急性期和恢复期血浆MBL蛋白水平均低于对照组(P=0.019和0.000)。HCMV感染组急性期血浆MBL蛋白水平高于恢复期（P＝0.000）。结论MBL基因多态性导致的血浆MBL蛋白水平低下与儿童HCMV感染相关，提示MBL可能对儿童HCMV感染具有保护作用。     

儿童130例人巨细胞病毒感染的血液学有关表现

目的探讨儿童人巨细胞病毒(humancytomegalovirus,HCMV)感染的血液学表现。方法回顾性分析130例人巨细胞病毒感染患儿的临床特征、血象、骨髓象和免疫学指标的变化及治疗和转归。结果130例中有64例出现外周血象的改变(49·2%)。其中贫血46例(35,4%),血小板减少35例(26·9%),粒细胞减少4例(3·1%),全血细胞减少5例(3·8%),外周血出现异型淋巴细胞11例(8·5%)。29例出现血液系统并发症(22·3%),包括传染性单核细胞增多综合征、特发性血小板减少性紫癜(ITP)、自身免疫性溶血性贫血(AIHA)、病毒相关性噬血细胞综合征(VAHS)等。部分行免疫功能检查的患儿中,27·5%的病人存在体液免疫异常,71·4%存在细胞免疫异常。结论儿童是HCMV感染的易感人群。HCMV几乎可以感染人体所有组织,造血系统受累,可引起多种造血功能紊乱,甚至发生多种CMV感染相关性血液系统疾病。早期足疗程地应用更昔洛韦,配合对症、支持、免疫调节等综合治疗,可明显提高疗效。     

小儿巨细胞病毒活动性感染的两种诊断方法比较

目的　通过血清人巨细胞病毒 (HCMV)IgM和尿快速培养HCMV检测临床标本的比较 ,进一步评价血清特异性IgM诊断活动性HCMV感染的价值。 方法　①ELISA法检测患儿血抗HCMV IgG、IgM。②通过检测尿培养物中HCMV即刻早期抗原 (IEA)快速诊断活动性HCMV感染。结果　① 119例尿培养阳性者 ,血抗HCMV IgG均为阳性。②与尿快速培养法相比 ,血IgM的特异性和敏感性分别达到 97 7%和 6 9 7% ;血IgM阳性数与尿快速培养阳性数比率在≤ 1个月、～ 1岁和～ 3岁组分别为 4 5 8%、75 75和 82 4 % ,表明IgM检测结果在各年龄组均有假阴性 ,其中尤以 1个月以下婴儿多见。③ 2例 3个月左右患儿血IgM阳性而尿培养阴性。 11例随访患儿中 ,9例在结束更昔洛韦治疗后 1个月复查 ,3例IgM迟于尿培养转阴 ,2例尿培养阴性而血IgM仍为阳性 ,表明IgM检测结果可有假阳性。 结论　血清特异性IgM检测可用于诊断活动性CMV感染 ,但其意义有一定局限性 ,应结合其他指标综合判断     

自然杀伤细胞受体与人巨细胞病毒感染的研究进展

人巨细胞病毒( human cytomegalovirus,HCMV)感染非常普遍,在孕妇、器官移植受者和免疫功能低下患者(如艾滋病)可引起致命性后果。近年来,越来越多学者认为自然杀伤细胞在抗HCMV感染中发挥重要作用。自然杀伤细胞的活性主要由细胞表面抑制性受体和活化性受体的平衡所调节。 HCMV感染中,对自然杀伤细胞受体的研究意义重大,有利于HCMV感染的基础研究和临床治疗。该文就自然杀伤细胞受体、其发挥效应机制及在 HCMV 感染时自然杀伤细胞相关受体表达变化的研究进展进行综述。     

Long-term outcome in preterm children with human cytomegalovirus infection transmitted via breast milk

Aim: To investigate neurodevelopmental outcome and hearing in preterm children with breast milk transmitted human cytomegalovirus (HCMV) infection. Methods: Forty‐one preterm children (born before 32 weeks of gestation or birth weight <1500 g; 20 HCMV positive, 21 HCMV negative) from an original cohort of 44 children were examined at school age. Assessments included neurological examination, assessment of motor [Movement Assessment Battery for Children (M‐ABC)] and cognitive function [Kaufman Assessment Battery for Children (K‐ABC)], audiological tests and anthropometric measures. Results: In both groups, irrespective of the presence or absence of a history of HCMV infection, performance in assessments of cognitive and motor function was within the normal range. However, significant differences between the HCMV‐positive and the HCMV‐negative group were found in both motor and cognitive function, with poorer performance in the HCMV‐positive group. There were no significant differences in anthropometric parameters, and all 20 HCMV‐positive children had normal hearing function. Conclusions: In this study, cognitive and motor function in preterm children with early postnatally acquired HCMV infection transmitted via breast milk was within the normal range. However, the findings suggest that their outcome is poorer than outcome in preterm children without HCMV infection. These findings need to be replicated in larger scale studies.     

Correlation and clinical utility of pp65 antigenemia and quantitative polymerase chain reaction assays for detection of cytomegalovirus in pediatric renal transplant patients

Rha B, Redden D, Benfield M, Lakeman F, Whitley RJ, Shimamura M. Correlation and clinical utility of pp65 antigenemia and quantitative polymerase chain reaction assays for detection of cytomegalovirus in pediatric renal transplant patients. Abstract:  qPCR and pp65 antigenemia assays are used to monitor CMV infection in renal transplant recipients, but correlation of assays in a pediatric population has not been evaluated. Paired CMV real‐time qPCR and pp65 antigenemia tests from 882 blood samples collected from 115 pediatric renal transplant recipients were analyzed in this retrospective cohort study for the strength of association and clinical correlates. The assays correlated well in detecting infection (κ = 0.61). Higher qPCR values were demonstrated with increasing levels of antigenemia (p < 0.01). Discordant test results were associated with antiviral treatment (OR 4.33, p < 0.01) and low‐level viremia, with odds of concordance increasing at higher qPCR values (OR 3.67, p < 0.01), and no discordance occurring above 8500 genomic equivalents/mL. Among discordant samples, neither test preceded the other in detecting initial infection or in returning to negative while on treatment. Only two cases of disease occurred during the two‐yr study period. With strong agreement in the detection of CMV infection, either qPCR or pp65 antigenemia assays can be used effectively for monitoring pediatric renal transplant patients for both detection and resolution of infection.     

Clinical importance of cytomegalovirus antigenemia for intrauterine cytomegalovirus infection

Background:  Little is known about the clinical importance of cytomegalovirus (CMV) antigenemia for intrauterine-CMV-infected newborns. The aims of the present study were to evaluate the diagnostic accuracy of CMV antigenemia during the neonatal period and its association with clinical manifestations.
Methods:  CMV antigenemia was analyzed using neonatal blood from 25 patients suspected of having intrauterine infection because of abnormal clinical manifestations in the mother, fetus, and newborn. Neonatal urine samples were collected for diagnosis of intrauterine infection. The diagnostic accuracy of the antigenemia analysis was evaluated by comparing it with the results of urinary CMV analyses. The clinical manifestations of antigenemia-positive and -negative infected newborns were compared in the infected newborns.
Results:  Fifteen newborns were congenitally infected and 10 were uninfected as diagnosed on virus isolation from neonatal urine. Six of 15 infected newborns were positive for CMV antigenemia. CMV antigenemia had a positive predictive value of 100%, a negative predictive value of 52.6%, a sensitivity of 40%, and a specificity of 100%. CMV retinitis and pneumonitis were more prevalent among antigenemia-positive newborns (4/6) than antigenemia-negative newborns (0/9; P  < 0.05).
Conclusions:  Antigenemia was significantly associated with retinitis and pneumonia, but it was not sensitive enough to diagnose intrauterine CMV infection.     

婴幼儿巨细胞病毒感染对红细胞系统造血功能的影响

目的 探讨人巨细胞病毒感染对婴幼儿红细胞系统(简称红系)造血功能的影响.方法 对2007年1至10月收治于我院儿科血液病房的21例伴有红系改变的巨细胞病毒感染婴幼儿的临床资料进行回顾性分析.结果 巨细胞病毒感染的婴幼儿可发生红系造血改变如贫血、急性溶血、急性造血功能停滞、急性白血病、噬血细胞综合征、传染性单核细胞增多综合征等多种疾病.结论 婴幼儿巨细胞病毒感染能通过多系统多靶位影响红系造血,增加红系破坏,甚至造成骨髓恶性增殖性疾病,应受到高度重视.     

母婴传播HCMV感染致胎/婴儿造血系统疾病的研究进展

人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)是引起新生儿先天性感染常见的病原体.母亲孕期原发性或再发性HCMV感染都可将病毒传播给胎儿,导致胎/婴儿先天性HCMV感染,部分病例出现血液系统异常.该文综述HCMV垂直传播所致血液系统疾病的临床表现和发生机制,以及HCMV垂直传播的诊断、高危因素及其干预措施.