MiR-148a对肺癌细胞放射敏感性的影响

目的探讨miR-148a对肺癌A549、H460以及H1299细胞放射敏感性的影响。方法根据不同的处理方法,分别按以下方式将肺癌A549、H460和H1299细胞进行分组。（1）将肺癌A549和H460细胞分为3组:空白对照组、4 Gy γ射线照射组和8 Gy γ射线照射组。采用实时定量PCR检测miR-148a的表达水平;（2）将肺癌A549细胞分为2组:空白对照组、miR-148a转染组;同时,将肺癌H460细胞分为2组:空白对照组、anti-miR-148a转染组。分别对转染2组细胞进行不同剂量的γ射线照射,并采用克隆形成实验方法来检测细胞增殖;（3）将肺癌A549和H1299细胞分为3组:空白对照组、miR-148a单独处理组、miR-148a和雌激素受体（ER）共转染组。分别对3组细胞进行不同剂量的γ射线照射,并采用克隆形成实验方法检测细胞生长情况。采用Student t-test对数据进行统计学分析,P < 0.05表示差异有统计学意义。结果实时定量PCR实验结果显示,γ射线照射能够显著下调肺癌A549和H460细胞中miR-148a的表达水平。克隆形成实验结果显示,与空白对照组相比,miR-148a转染能够显著增强肺癌A549细胞的放射敏感性,差异有统计学意义（t=12.16,P < 0.01）,而anti-miR-148a转染能够显著降低肺癌H460细胞的放射敏感性,差异有统计学意义（t=11.93,P < 0.01）。同时,miR-148a过表达可以明显下调肺癌A549细胞中ER的mRNA及蛋白表达水平;而anti-miR-148a能够显著上调肺癌H460细胞中ER的mRNA及蛋白表达水平。另外,与miR-148a单独处理组相比,miR-148a和ER共转染组中miR-148a对肺癌A549和H1299细胞增殖的影响显著降低,差异有统计学意义（t=11.34、12.68,均P < 0.01）。结论照射可以诱导miR-148a的表达水平降低,人为过表达miR-148a能够抑制ER的蛋白表达水平,进而降低肺癌A549和H1299细胞的增殖能力,同时增强其放射敏感性。     

CD133+ U87人脑胶质瘤干细胞放射敏感性和DNA双链断裂损伤修复的实验研究

目的 探讨CD133+ U87人脑胶质瘤干细胞放射敏感性及DNA双链断裂损伤修复的情况。 方法 选择人脑胶质瘤U87细胞系,采用免疫流式分选技术分选出CD133+、CD133-细胞;采用克隆形成实验研究细胞的放射敏感性;采用中性单细胞凝胶电泳实验检测4 Gy X射线垂直照射后不同时间点的DNA双链断裂;采用间接免疫荧光技术检测不同时间点磷酸化组蛋白H2AX（γ-H2AX）荧光灶、Rad51（一种同源重组修复蛋白）荧光灶的表达。 结果 假照射条件下,CD133+细胞克隆的形成率明显高于CD133-细胞（t=3.66,P < 0.01）;CD133+细胞经4 Gy照射后的克隆形成率无明显变化（t=0.71,P > 0.05）,而CD133-细胞经4 Gy照射后的克隆形成率下降（t=2.91,P < 0.05）。4 Gy照射后0.5 h,CD133+、CD133-细胞间尾力矩差异无统计学意义（t=1.44,P > 0.05）,照射后6、24 h,CD133+细胞尾力距下降程度大于CD133-细胞（t=5.31和8.09,P < 0.01）;照射后0.5、6 h,CD133+、CD133-细胞间γ-H2AX灶的表达率差异均无统计学意义（t=0.12和0.99,P > 0.05）,照射后24 h,CD133+细胞的γ-H2AX灶的表达率下降程度大于CD133-细胞（t=4.99,P < 0.01）;照射后0.5 h,CD133+、CD133-细胞间Rad51灶的表达率差异无统计学意义（t=1.12,P > 0.05）,照射后6、24 h,CD133-细胞的Rad51灶的表达率与CD133+细胞相比明显下降（t=22.88和12.43,P < 0.01）,而CD133+细胞无明显变化。 结论 CD133+ U87人脑胶质瘤干细胞具有放射抵抗性,可能与其照射后DNA双链的断裂修复能力较高有关。     

长链非编码RNA NBR2对乳腺癌细胞放射敏感性的影响

目的探讨长链非编码RNA（lncRNA）BRCA1相邻基因2（NBR2）（BRCA1为乳腺癌易感基因1）对乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231细胞放射敏感性的影响。方法根据处理方法的不同,分别按以下方式将乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231进行分组。（1）分为3组:空白对照组、4 Gy γ射线照射组和8 Gy γ射线照射组,采用实时定量PCR检测lncRNA NBR2的表达。（2）分为4组:空白对照组、NBR2转染组、4 Gy γ射线照射组以及NBR2转染+γ射线照射联合组,采用3-（4,5-二甲基噻唑-2）-2,5-二苯基四氮唑溴盐（MTT）方法来检测细胞增殖情况。（3）分为3组:空白对照组、NBR2单独转染组、NBR2+B细胞淋巴瘤2（BCL2）共转染组,对3组细胞进行不同剂量的γ射线照射,并采用MTT和克隆形成实验方法检测细胞生长情况。采用Student t-test对数据进行统计学分析,P<0.05表示差异有统计学意义。结果实时定量PCR结果显示,与空白对照组相比,4 Gy γ射线照射和8 Gy γ射线照射能够显著下调lncRNA NBR2的表达水平,差异有统计学意义（MCF-7:t=10.75、11.17,MDA-MB-231:t=11.22、12.31,均P<0.01）。MTT实验结果显示,与4 Gy γ射线照射组相比,NBR2转染+γ射线照射联合组的乳腺癌细胞增殖率明显降低,差异有统计学意义（MCF-7:t=10.55,MDA-MB-231:t=11.97,均P<0.01）。同时,lncRNA NBR2过表达可以明显下调BCL2的mRNA及蛋白表达水平。另外,与NBR2单独转染组相比,NBR2+BCL2共转染组中NBR2对细胞增殖的影响显著降低,差异有统计学意义（MCF-7:t=10.87,MDA-MB-231:t=11.37,均P<0.01）。结论辐照可以诱导lncRNA NBR2的表达水平降低,人为过表达NBR2能够抑制BCL2的蛋白表达水平,进而降低乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231细胞的增殖能力,同时增强其放射敏感性。     

乙肝病毒X蛋白连接蛋白抑制辐射诱导的乳腺癌细胞自噬调节的研究

目的 探讨乙肝病毒X蛋白连接蛋白（HBXIP）对电离辐射诱导的乳腺癌细胞自噬的影响。方法 将实验细胞分为对照组、HBXIP转染组、si-HBXIP转染组、HBXIP和si-STAT3共转染组。各处理组给予4 Gy γ射线照射后,0、24、48和72 h采用流式细胞技术检测含嗜酸性自噬体的乳腺癌细胞数;Western blot方法检测LC3-I/II、HBXIP、STAT3蛋白和STAT3（Y705）磷酸化蛋白表达水平的改变。结果 与对照组相比,外源性过表达HBXIP明显减少含有辐射诱导的嗜酸性自噬体的乳腺癌MDA-MB-231细胞数（t_{24 h}=3.67,P<0.05;t_{48 h}=9.74,P<0.01;t_{72 h}=10.15,P<0.01）和自噬相关蛋白LC3-II蛋白的表达;相反,采用siRNA降低HBXIP表达则明显增加含有嗜酸性自噬体的细胞数（t_{24 h}=3.5,P<0.05;t_{48 h}=4.15,P<0.05;t_{72 h}=12.12,P<0.01）和LC3-II的表达。提高HBXIP表达导致剂量依赖性的辐射诱导的STAT3（Y705）磷酸化水平提高;反之,降低HBXIP表达可降低受照细胞中STAT3（Y705）磷酸化水平的表达。采用siRNA-STAT3降低STAT3表达水平,明显降低了HBXIP对辐射诱导的自噬（t_{24 h}=5.57,P<0.05;t_{48 h}=13.65,P<0.01;t_{72 h}=12.47,P<0.01）和LC3-I/II表达调节能力。结论 HBXIP可通过调节p-STAT3（Y705）磷酸化的表达从而调节辐射诱导的乳腺癌细胞自噬。     

抑制γ-突触核蛋白表达对乳腺癌T47D细胞放射敏感性的影响

目的探讨γ突触核蛋白（γ-synuclein,SNCG）对乳腺癌细胞辐射敏感性的影响。方法合成SNCG的siRNA干扰序列并转染T47D细胞。用RT-PCR和Western blot法分别从基因水平和蛋白水平检测SNCG基因的表达。实验设SNCG siRNA干扰组（干扰组）、阴性对照组、空白对照组。各组细胞分别接受不同剂量γ射线照射,集落形成实验检测细胞放射敏感性,CCK-8实验检测细胞增殖能力变化,Western blot法检测AKT及mTOR磷酸化变化。结果 SNCG siRNA干扰组较空白对照组的SNCG基因和蛋白表达都明显下降。在4、6、8 Gy照射下干扰组的乳腺癌细胞数量明显低于未转染SNCG的对照组（t=5.449、8.882、21.503,P<0.05）,其中6 Gy照射时,干扰组的细胞增殖能力在照后24、48、72 h均较其他对照组低（t=5.603、4.839、6.115,P<0.05）,且干扰组AKT及mTOR磷酸化水平降低,而总的AKT及mTOR未见明显变化。结论抑制SNCG的表达可增强乳腺癌细胞对射线的放射敏感性,其机制可能与AKT信号通路被抑制有关。     

smac基因的克隆及过表达对宫颈癌HeLa细胞γ射线敏感性的影响

目的 克隆smac（the second mitochondria-derived activator of caspases,smac）基因,构建真核表达载体pcDNA3.1/smac,并转染宫颈癌HeLa细胞,探讨smac基因过表达对宫颈癌HeLa细胞γ射线敏感性的影响.方法 用RT-PCR的方法从HeLa细胞总RNA中克隆smac基因,连入pcDNA3.1载体并测序.将测序正确的pcDNA3.1/smac载体转染HeLa细胞系,利用RT-PCR法及Western blot鉴定HeLa细胞内smac基因的表达.γ射线照射后48 h利用MTT法检测各组细胞生长抑制率.结果 测序结果表明成功的从HeLa细胞总RNA中扩增了全长smac基因.RT-PCR及Western blot结果表明,转染pcDNA3.1/smac的HeLa/smac细胞中,smac基因表达量明显高于未转染的HeLa细胞及转染空载体pcDNA3.1的HeKa/pcDNA3.1细胞的表达量.不同剂量的γ射线照射48 h后,MTT结果表明,γ射线对转染pcDNA3.1/smac的HeLa/smac细胞的生长抑制率（38.85%）显著高于空白组HeLa细胞（17.64%）及转染空载体pcDNA3.1的HeLa/pcDNA3.1细胞（20.32%）.结论 成功地克隆了smac基因,在宫颈癌HeLa细胞中过表达外源smac基因能够提高其对γ射线的敏感性,有望开辟提高宫颈癌放疗敏感性的新途径.     

ASTL抗体中和ASTL对人宫颈癌ME-180细胞放射敏感性的影响

目的:探讨龙虾肽酶样金属内肽酶（ASTL）抗体中和ASTL对人宫颈癌ME-180细胞放射敏感性的影响。方法:培养人宫颈癌ME-180、HeLa细胞,根据细胞处理方法的不同,按以下方式进行分组。（1）将ME-180细胞分为4组：对照组、照射组（4 Gy）、ASTL抗体组、ASTL抗体+照射组（4 Gy）,采用5-乙炔基-...     

电离辐射对原代成骨细胞M-CSF表达的影响

目的 研究辐射对于原代成骨细胞巨噬细胞集落刺激因子（M-CSF）表达的影响,进而研究辐射导致骨损伤的分子机理。 方法 采用原代骨髓间充质干细胞诱导分化为成骨细胞,经0、2、4 Gy 137Cs γ射线照射后,采用实时定量PCR以及Western blot方法检测辐射对M-CSF mRNA和蛋白表达水平的影响。 结果 2 Gy和4 Gy γ射线照射均能引起成骨细胞M-CSF mRNA（t=-17.329, P < 0.01;t=-3.841, P < 0.05）和蛋白表达水平上调。4 Gy照射后则会导致成骨前体细胞M-CSF mRNA表达水平上调（t=-4.478, P < 0.05）,但与对照组比较,两者的蛋白表达水平未见显著差异。 结论 2 Gy和4 Gy γ射线照射后,成骨细胞M-CSF表达水平上调能增强核因子κB受体活化因子配体对破骨细胞分化、成熟的促进作用,有助于增强破骨细胞的骨吸收能力。     

肺癌细胞A549和H460对137Cs γ射线辐射敏感性差异的研究

目的研究肺癌细胞A549和H460对137Cs γ射线的辐射敏感性差异及核因子E2相关因子2（Nrf2）蛋白含量的差异。方法使用2、4、6 Gy 137Cs γ射线照射A549和H460细胞;1、2、4、6 Gy 137Cs γ射线照射H460细胞,用克隆形成法检测细胞增殖能力,单细胞凝胶电泳检测细胞DNA损伤修复情况,casp_1.2.3b1彗星分析软件分析olive尾距值和尾部DNA含量,蛋白质印迹法检测Nrf2蛋白表达量。克隆形成率、olive尾距值和尾部DNA含量采用独立样本t检验进行比较。结果经2、4、6 Gy 137Cs γ射线照射后,肺癌A549细胞的克隆形成率分别为（73.78±14.69）%、（42.26±3.19）%、（17.50±2.18）%;H460细胞的克隆形成率分别为（56.38±6.28）%、（23.82±8.25）%、（4.66±0.87）%,肺癌A549细胞克隆形成率高于H460细胞,且差异均有统计学意义（t=7.99,P=0.015;t=6.75,P=0.019;t=12.03,P=0.005）。4 Gy照射后2 h,肺癌H460细胞的olive尾距值（1.27±0.05）和尾部DNA含量（4.51±0.19）%明显高于A549细胞[0.68±0.04、（2.12±0.14）%],且差异均有统计学意义（t=8.69、10.30,均P < 0.05）。蛋白质印迹实验结果显示,肺癌A549比H460细胞系的Nrf2蛋白丰度高,照射后两种细胞中的Nrf2蛋白水平均升高,但肺癌A549细胞明显高于H460细胞。结论肺癌A549细胞系对137Cs γ射线的辐射抗性强于H460细胞系,这种辐射抗性差异可能与两种细胞系内Nrf2蛋白的含量相关。     

褪黑素对人结肠癌细胞辐射敏感性的影响

目的 分析褪黑素联合γ射线照射对体外和体内人结肠癌HCT 116细胞生长的影响,探讨褪黑素在人结肠癌HCT 116细胞辐射敏感性中的作用。 方法 将人结肠癌HCT 116细胞分为4组,即:空白对照组（不给予任何处理）、褪黑素组（给予褪黑素,给药浓度为1 mmol/L,给药时间为2 h）、照射组（接受6 Gy γ射线照射）及褪黑素+照射组（在照射前2 h给予褪黑素,给药浓度为1 mmol/L,然后接受6 Gy γ射线照射）。体外实验:人结肠癌HCT 116细胞分别进行2、4、6、8 Gy照射,采用克隆形成实验检测细胞的增殖能力;人结肠癌HCT 116细胞进行6 Gy照射,采用流式细胞术检测24 h后细胞周期以及24 h和48 h后细胞的凋亡;采用彗星实验检测2 h后细胞DNA的损伤。体内实验:将人结肠癌HCT 116细胞接种于裸鼠体内建立肿瘤模型,检测结肠癌瘤体体积和瘤体质量的变化并计算抑瘤率。两组间比较采用t检验。 结果 ①体外实验:照射前给予褪黑素处理的人结肠癌HCT 116 细胞的克隆形成数目明显少于对照组,差异有统计学意义（t=3.83,P=0.005）;褪黑素+照射组停留在G₂期的人结肠癌HCT 116细胞比例显著增加（53.04%±4.67%）,与照射组（42.83%±7.10%）和褪黑素组（12.95%±0.96%）相比,差异均有统计学意义（t=2.94、20.66,P=0.017、P<0.01）;褪黑素+照射组在处理后24 h和 48 h大量人结肠癌HCT 116细胞发生细胞凋亡,凋亡率分别达到（12.15±0.41）%和（30.57±1.91）%,与照射组（9.00%±0.70%、8.69%±0.71%）和褪黑素组（3.03%±0.42%、12.56%±0.89%）相比,差异均有统计学意义（t=7.46、17.75、29.12、14.80,均P<0.01）;褪黑素+照射组HCT 116细胞的尾部DNA含量、尾长、尾矩和Olive尾矩均明显高于照射组（t=4.72、4.16、4.74、4.50,均P<0.01）和褪黑素组（t=20.27、22.80、13.81、18.85,均P<0.01）,差异均有统计学意义。②体内实验:褪黑素+照射组结肠癌生长速度减慢,到处理后的第15天肿瘤体积明显小于照射组和褪黑素组,差异有统计学意义（t=3.51、2.72, P=0.006、P=0.021）;褪黑素+照射组抑瘤率最高（54.7%±8.0%）,远远高于照射组和褪黑素组（t=7.50、4.12,均P<0.01）。 结论 褪黑素联合辐射对人结肠癌细胞生长有显著的抑制效应,提高了细胞对γ射线辐射的敏感性。     

干扰血管内皮生长因子表达联合γ射线对食管癌细胞移植瘤的影响

目的 研究反义cDNA干扰血管内皮生长因子(VEGF)表达联合γ射线对裸鼠移植瘤的影响,并观察各组裸鼠肿瘤病理组织学和细胞生物学特征的变化,为VEGF基因治疗联合放射治疗食管癌提供理论依据。方法 将32只Balb/c/nu裸鼠随机分为4组:对照组、单纯照射组、反义组和反义+照射组,使用已转染和未转染反义VEGFcDNA TE-1食管癌细胞株,分别建立裸鼠爪垫移植瘤模型, 瘤体直径0.8~1.0 cm,⁶⁰Co γ射线18 Gy单次照射单纯照射组与反义+照射组裸鼠移植瘤,对比观察各组移植瘤生长情况,检测移植瘤组织中VEGF mRNA和蛋白的表达,并分析肿瘤组织中细胞凋亡情况。结果 与未转染两组比较,转染两组瘤体生长速度慢,成瘤潜伏期延长(t=13.898, P<0.01)。反义组肿瘤体积为(1207.50±97.07)mm³,反义+照射组为(1057.5±91.50)mm³,两者差异无统计学意义(t=1.124,P>0.05),而此2组与对照组(5442.50±185.08)mm³ 和单纯照射组(2922.50±152.773)mm³ 体积间差异有统计学意义(t=9.475~21.238,P<0.01)。反义组与反义+照射组VEGF mRNA和蛋白表达较对照组和单纯照射组差异有统计学意义(F=387.394、13.519, P<0.01)。结论 抗VEGF治疗可有效地抑制裸鼠移植瘤的生长,但单纯抑制VEGF表达对增加裸鼠移植瘤放射治疗增敏效果有限,需进一步研究。     

18氟-氟代脱氧葡萄糖对Lewis肺癌细胞增殖的影响

目的 研究不同浓度¹⁸氟-氟代脱氧葡萄糖(¹⁸F-FDG)对Lewis肺癌细胞增殖的影响,探讨其作用机制。方法 以0、0.37、1.85、3.70 和 7.4 (×10⁶ Bq/ml) ¹⁸F-FDG处理细胞24 h,用倒置显微镜与电子显微镜观察细胞形态学改变,流式细胞术检测细胞凋亡与细胞周期时相分布,³H-TdR掺入法检测细胞DNA合成,比色法检测细胞脂质过氧化水平,免疫组织化学法检测细胞Bcl-2和Bax蛋白的表达。结果 细胞的累积吸收剂量分别为0、0.11、0.55、1.10与2.20 Gy。受照细胞出现凋亡形态学改变,在0～2.20 Gy剂量范围内,细胞凋亡率由(4.05±0.01)%增大为(25.6±0.28)%(t=188, P<0.01),³H-TdR掺入率从100%下降为(22.0±0.51)%( t=27.6, P<0.05),细胞内丙二醛(MDA)含量由(0.08±0.03)上升到(0.67±0.12)μmol/L(t=11.7, P<0.01)。Bcl-2蛋白表达降低,Bax蛋白表达增高,细胞周期发生G₂/M期阻滞。结论 ¹⁸F-FDG能诱导Lewis肺癌细胞凋亡,抑制细胞增殖。     

辐射增强启动子调控的p53基因联合照射对肿瘤细胞的作用

目的 研究辐射增强启动子调控的野生型-p53抑癌基因系统联合照射对人肿瘤细胞系HeLa和A549细胞的特异性杀伤作用。方法 构建辐射增强启动子pE6（TATA）-p53,Western blot检测不同射线剂量诱导下人肺腺癌A549细胞系和人宫颈癌HeLa细胞系中P53蛋白的表达水平,筛选出最适的照射剂量;AnnexinV-FITC试剂盒检测肿瘤细胞系早期凋亡率;利用克隆形成实验检测此系统对肿瘤细胞放射敏感性的影响。结果 在HeLa和A549细胞中,P53蛋白表达均受放射线诱导增高,且在6 Gy时辐射诱导活性最高;实验组质粒的细胞早期凋亡率与转染对照组质粒的细胞早期凋亡率相比有明显提高（F=11.018、10.736,P<0.05）。HeLa细胞和A549细胞的放射增敏比（SER）分别为2.56和2.36。结论 辐射增强启动子调控的p53基因系统具有显著的诱导肿瘤细胞凋亡的作用,可以提高肿瘤细胞的辐射敏感性,对肿瘤的治疗提供了新思路。     

低剂量X射线照射对脐带间充质干细胞增殖及成脂成骨分化的影响

目的 探讨低剂量照射对人脐带间充质干细胞(hucMSCs)增殖及成脂、成骨分化的影响.方法 采用组织块贴壁法从人脐带沃顿胶样组织中分离出hucMSCs,并采用流式细胞术检测表面特异性标记.随机分为未予照射的对照组,以及50、100和200 mGy照射组.采用MTT法检测hucMSC在不同照射剂量和不同时间(1～7 d)的增殖情况.取第3代细胞,随机分为照射组(给予200 mGy照射)和对照组(不予照射),在体外诱导其向脂肪、成骨细胞分化,并通过油红O染色、检测碱性磷酸酶(ALP)活性,用RT-PCR检测成骨细胞核结合因子α1的mRNA表达,比较照射组与对照组细胞成脂、成骨分化的不同.结果 9～12 d开始有成纤维细胞从组织块游出贴壁,2周左右达到80%.低剂量照射后2、3、4、5和6 d,不同照射剂量组的细胞增殖均高于对照组(F=159.17、448.81、265.15、183.93、181.83,均P＜0.01),其中以100 mGy组促进细胞增殖作用最明显.照射组成脂诱导2 d后细胞内即有脂滴出现,且第21天成脂率明显高于对照组(t=28.25,P＜0.01).成骨诱导后,照射组ALP活性明显高于对照组(t=16.87,P＜0.01),且成骨细胞核结合因子α1的mRNA水平明显增高(t=14.16,P＜0.01).结论 低剂量照射可以促进hucMSC增殖,并加速其向成脂、成骨细胞分化.

Abstract：

Objective To observe the effects of low dose irradiation (LDR) on proliferation,adipogenesis and osteogenic potential of human umbilical cord mesenchymal stem cells (hucMSCs).Methods hucMSCs were isolated from Wharton's jelly tissue of human umbilical cord by modified tissuepiece inoculation,and flow cytometry was used to detect the expression of specific marker in the hucMSCs.The hucMSCs were randomly divided into two groups:irradiation group undergoing irradiation with the doses 50,100,or 200 mGy respectively,and control group without irradiation.MTT method was applied to evaluate the proliferation of the hucMSCs at different time points with various doses irradiation.The third passage hucMSCs were randomly divided into two groups:irradiation group undergoing low dose irradiation of 200 mGy,and control group without irradiation,and then underwent induction by adipocytic and oesteocytic differentiation induction fluids respectively so as to differentiate into adipocytes and osteoblasts.Oil red O staining was used to detect the activity of alkaline phophatase (ALP),and RT-PCR was used to detect the mRNA expression of core binding factor alpha 1 in human osteoblast.Results After 9-12days,fibroblasts began to swim out of the tissue piece with a confluence rate of 80% 2 weeks later.Within 7 days the absorption values of the hucMSCs undergoing different irradiation doses 2,3,4,5,and 6 days later were all significantly higher than those of the control group(F = 159.17,448.81,265.15,183.93,and 181.83 ,all P <0.01),with the proliferation rates of the 100 mGy subgroup being the highest.After being induced liquid,vacuoles were observed in the irradiated group 2 days later.21 days later,the adipogenic rates of irradiated group was significantly higher than that of the control group (t = 28.25,P <0.01).The ALP activity increased in the irradiated group compared with control group (t=16.87,P <0.01) .The expression level of Cbf-α1 mRNA was up-regulated obviously (t = 14.16,P＜0.01).Conclusions LDR promotes the proliferation of hucMSCs,and accelerates the hucMSCs' differentiation into adipocytes and osteoblasts.     

低剂量辐射对恶性肿瘤患者自体CIK细胞免疫功能影响的实验研究

目的 观察低剂量辐射对恶性肿瘤患者自体CIK细胞增殖、表型和杀伤活性的影响,为临床应用CIK细胞过继免疫治疗提供依据。方法 取10例恶性肿瘤患者外周血,常规分离出单个核细胞,用不同细胞因子培养诱导CIK细胞。培养10 d后,以30、50、80、100和200 mGy X射线照射,24 h后采用³H-TdR掺入法检测对CIK细胞增殖的影响;流式细胞术检测对CD3+CD56+表型CIK细胞百分率的影响;³H-TdR释放法检测对其杀伤活性的影响。采用³H-TdR释放法检测80 mGy X射线照射对自体CIK细胞在12、24、48和72 h杀伤活性的影响,及80 mGy连续照射3 d对CIK细胞杀伤活性的影响。结果 CIK细胞增殖活性与对照组(0 mGy)相比均有明显增高(t =2.2、3.5、3.3和2.2, P ＜0.05)。50、80和100 mGy组的CD3+CD56+细胞的百分率均有显著性增高(t =2.3、4.2和2.4, P ＜0.05)。CIK细胞接受LDI,80 mGy组和100 mGy组与对照组(0 mGy)相比,CIK细胞杀伤活性均有显著性增高(t =3.3和2.3, P ＜0.05)。80 mGy照射后24 h,CIK细胞的杀伤活性出现高峰,为(54.2±5.0)%(t =3.2, P ＜0.01),48和72 h下降到正常水平。80 mGy连续照射3 d,24和48 h CIK细胞杀伤活性分别为(55.2±5.3)%和(61.9±4.4)%,72 h达到最高水平为(67.2±5.7)%(t =2.6、4.7和5.7, P ＜0.05)。结论 低剂量辐射对肿瘤患者CIK细胞显示兴奋效应,具有临床应用前景。     

塞来昔布对人肺腺癌细胞株A549的放射增敏效应及细胞迁移力的影响

目的 观察选择性COX-2抑制剂塞来昔布(celecoxib)对人肺腺癌细胞株A549的放射增敏效应及抑制细胞迁移力的作用。方法 选用人肺腺癌细胞株A549作为研究对象。选择适当浓度的塞来昔布,设置对照组、药物组、单纯放射组和放射加药组,成克隆分析法测定塞来昔布对细胞的放射增敏效应,细胞划痕试验观察A549细胞的迁移力,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测细胞培养上清液中基质金属蛋白酶(MMP)-2的含量。结果 细胞划痕试验结果显示,放射加药组比单纯放射组和药物组的无细胞划痕区均增宽,细胞迁移力均明显下降,且随着药物浓度的增加,抑制细胞迁移的能力增强。30和50 μmol/L 塞来昔布对A549细胞显示出浓度依赖性放射增敏作用,放射加药与单纯放射组相比, SF₂、D₀、D\-q出现不同程度的下调。ELISA检测发现,细胞培养上清液中MMP-2的含量,药物组较对照组,放射加药组较单纯放射组均明显下降(t=3.78、5.79,P<0.05),但单纯放射组和对照组对细胞分泌MMP-2的抑制效应不明显(t=2.73、2.38,P>0.05)。结论 塞来昔布在体外试验中对肺腺癌细胞株A549具有浓度依赖性放射敏感性,机制可能为降低了细胞对放射的亚致死损伤修复能力。塞来昔布可能通过抑制A549细胞分泌MMP-2,从而抑制细胞的迁移能力。