甲磺司特对哮喘大鼠气道炎症及IL-5的影响

目的 探讨甲磺司特（suplatast tosilate, IPD） 对哮喘大鼠IL-5 水平及气道炎症的影响。方法 50 只雄性成年Sprague-Dawley 大鼠（4 周龄）随机分为5 组：对照组、模型组、布地奈德组、IPD 早期干预组和IPD 晚期干预组,每组10 只。采用卵清白蛋白（OVA）致敏、激发,建立支气管哮喘大鼠气道炎症模型。观察肺泡灌洗液（BALF）炎性细胞总数和EOS 百分比,RT-PCR 检测肺组织IL-5 mRNA 的表达,ELISA测定BALF 上清液中IL-5 的含量。结果 模型组BALF 中炎性细胞总数及EOS 百分比、IL-5 含量及肺组织IL-5mRNA 表达量均较对照组明显增高（PP结论 IPD 可减轻哮喘气道炎症反应,可能与其抑制 IL-5 mRNA 的转录有关。     

布地奈德对哮喘大鼠内源性H2S、CSE、CBS 体系的调节机制

目的：观察布地奈德对哮喘大鼠血浆硫化氢（H2S）含量和胱硫醚-γ-裂解酶（CSE）、胱硫醚-β-合成酶(CBS) mRNA的表达,探讨内源性H2S、CSE、CBS体系在哮喘发病机制中的作用。方法：Sprague-Dawley大鼠30只随机分成对照组、哮喘组、布地奈德组,每组10只。用鸡卵白蛋白（OVA）致敏与激发建立大鼠哮喘模型。分光光度法测定血浆H2S的含量,RT-PCR 法测定肺组织CSE、CBS mRNA的表达水平。结果：哮喘组血浆H2S的含量（61±16 μmol/L）显著低于对照组（84±15 μmol/L）（P0.05）。哮喘组肺组织CSE mRNA和CBS mRNA的表达水平显著低于对照组（P<0.01）,布地奈德组CSE mRNA和CBS mRNA表达显著低于对照组但高于哮喘组（均P<0.01）。相关性分析结果显示血浆H2S含量和支气管肺泡灌洗液(BALF)中炎症细胞总数表达呈显著负相关(n=30, r=-0.549,P<0.01)。结论：哮喘大鼠H2S、CSE、CBS的表达下降,它们的表达下降可能促进了炎症细胞在气道中的聚集,布地奈德改善哮喘炎症的机制可能部分通过内源性H2S、CSE、CBS体系起作用。［中国当代儿科杂志,2010,12（8）：654-657］     

布地奈德对哮喘大鼠肺部炎症及血清白细胞介素-5水平的影响

目的比较布地奈德雾化液与地塞米松对哮喘大鼠肺部过敏性炎症抑制作用及其对血清IL-5的影响,探讨布地奈德治疗哮喘与全身用糖皮质激素的差异。方法健康Wistar大鼠26只随机分为正常组、哮喘组、布地奈德组和地塞米松组。以卵清蛋白致敏激发法制作哮喘大鼠模型。布地奈德组每次激发前予布地奈德雾化吸入,地塞米松组每次激发予地塞米松(0.2mg/kg)腹腔注射。用ELISA试剂盒测定大鼠血IL-5水平。采血后取肺,作病理切片,HE染色观察。结果哮喘组大鼠肺及支气管的病理改变与其他各组比较有显著差异,布地奈德组与地塞米松组无显著差异,但两组与正常组比较有差异。哮喘组血清IL-5水平明显升高,与正常组比较有显著性差异(P<0.01)。布地奈德组及地塞米松组血清IL-5水平均下降,与正常组相比无显著性差异(P>0.05),与哮喘组相比均有显著性差异(P<0.01)。结论布地奈德局部吸入治疗可明显抑制哮喘大鼠肺部过敏性炎症反应,改善过敏性哮喘症状。     

布地奈德对哮喘小鼠树突状细胞的影响

目的探讨布地奈德（BUD）对哮喘小鼠树突状细胞（DC）及呼吸道炎性反应的影响。方法选择雌性昆明小鼠40只,随机分为4组,每组各10只。哮喘模型组：小鼠分别于第1、14天腹腔注射以9g/L盐水溶解的鸡卵清蛋白（OVA）50μg和氢氧化铝1mg混悬液0.2mL致敏,第21天予以10g/LOVA雾化吸入激发,1次/d,30min/次,吸入14d。治疗对照组：致敏和激发方法同哮喘模型组,每次激发前1h吸入9g/L盐水,1次/d,30min/次,吸入14d。BUD治疗组：致敏和激发方法同哮喘模型组,每次激发前1h吸入BUD1mg,1次/d,30min/次,吸入14d。正常对照组：致敏和激发方法同哮喘模型组,以9g/L盐水代替OVA致敏和激发。取小鼠肺组织行苏木素-伊红染色,过碘酸-雪呋染色,计算机图像分析测定小鼠肺组织呼吸道周围单位面积内苏木素-伊红染色嗜酸性粒细胞（EOS）个数表示呼吸道周围EOS浸润情况、单位基底膜长度过碘酸-雪呋染色阳性面积表示呼吸道黏液分泌情况。采用免疫组织化学计算机图像分析法测定小鼠肺组织DC的表达。结果哮喘模型组小鼠呼吸道EOS浸润、黏液分泌、DC表达均较正常对照组增多,差异有统计学意义（Pa〈0.05）;与治疗对照组小鼠比较差异均无统计学意义（Pa〉0.05）。BUD治疗组呼吸道周围DC浸润、呼吸道黏液分泌、呼吸道周围DC表达均较哮喘模型组明显减少,差异均有统计学意义（Pa〈0.05）。呼吸道周围DC表达与EOS数呈正相关（r=0.7818P〈0.01）,与呼吸道黏液分泌程度呈正相关（r=0.7333P〈0.01）。结论BUD通过抑制哮喘小鼠肺组织增多的EOS、黏液分泌和DC发挥其抗呼吸道炎性反应作用,DC有望成为研究哮喘防治药物的重要作用靶点。     

RANTES在哮喘大鼠肺组织中的表达及维生素D的干预作用

目的：探讨维生素D对哮喘大鼠肺组织中调节正常T细胞表达和分泌的趋化因子（RANTES）表达的影响及维生素D参与控制哮喘气道炎症及与激素协同作用的作用机制。方法：40只雌性Wistar大鼠随机分为正常对照组、哮喘组、维生素D干预组、布地奈德干预组、布地奈德联合维生素D干预组,每组8只。采用苏木精-伊红染色观察肺组织病理改变;免疫组化方法测定肺组织RANTES蛋白的表达;ELISA检测肺泡灌洗液（BALF）中RANTES的含量;实时定量PCR测定RANTES mRNA的表达。结果：哮喘组大鼠气道炎症反应最明显,出现炎症细胞浸润、气道狭窄变形及平滑肌的断裂,各个干预组较哮喘组有不同程度的缓解,其中布地奈德干预组的缓解程度优于维生素干预D组;联合干预组的病理改变最轻,与正常对照组相近。哮喘组大鼠肺组织及BALF中RANTES蛋白的表达明显高于正常对照组（P＜0.05）,各干预组的表达较哮喘组有不同程度下降,除维生素D干预组与哮喘组BALF中RANTES蛋白的表达差异无统计学意义外,其余各干预组与哮喘组之间的差异均有统计学意义（P＜0.05）,且联合干预组肺组织及BALF中RANTES蛋白表达量均低于单独使用布地奈德及维生素D组（P＜0.05）;哮喘组RANTES mRNA的表达较正常对照组显著升高（P＜0.05）,各干预组较哮喘组有不同程度的下降（P＜0.05）,但各干预组间差异无统计学意义,且联合干预组RANTES mRNA表达的下降幅度最大,与正常对照组比较差异无统计学意义。结论：哮喘大鼠BALF、肺组织中的RANTES蛋白及其mRNA的表达水平明显增高;维生素D干预可以降低其表达水平,提示维生素D可以通过调节RANTES的表达来减轻气道炎症反应;且维生素D可以协同布地奈德进一步降低RANTES蛋白及mRNA的表达水平。     

布地奈德对哮喘大鼠模型肺组织血红素氧合酶-1的调控作用

目的：研究大鼠哮喘模型肺组织血红素氧合酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)蛋白及基因表达特点,以及布地奈德(budesonide,BUD)对HO-1蛋白及基因表达的影响。方法：用卵清蛋白(OVA)致敏、激发大鼠建立哮喘动物模型,并在致敏、激发过程中分别经地塞米松(DXM) 、血晶素(Hemin)及BUD处理。分别测定激发后各组动物全血COHb 的百分比含量;计算肺泡灌洗液（BALF）沉渣中细胞总数和分类百分比;进行支气管周围炎性细胞浸润评分;利用免疫组化和RT-PCR检测方式观察HO-1在哮喘大鼠肺组织的蛋白及基因表达。结果：肺组织的病理改变及BALF细胞学检测显示Hemin (H)组、DXM (D)组和BUD (B)组炎性细胞浸润较哮喘(A)组有显著减轻(P<0.01或P<0.05）。与对照(C)组相比,A、H、D和B组HO-1蛋白、基因表达以及碳氧血红蛋白(COHb)含量显著性升高(P<0.01);而与A组相比,H、D和B组HO-1蛋白及mRNA表达亦显著升高(P<0.01或P<0.05）;D组和H组COHb含量显著升高（P<0.05）。结论：哮喘大鼠的肺组织HO-1表达水平及活性显著增加,提示HO-1可能参与了哮喘的发病过程;HO-1对大鼠哮喘模型气道炎症有保护作用;BUD和DXM对大鼠哮喘模型气道炎症有保护作用,可能通过上调肺组织HO-1表达实现。     

黏附分子CD44在哮喘气道炎症反应中的作用

目的：观察不同时段哮喘大鼠肺组织黏附分子CD44在哮喘气道炎症反应中的作用。方法：32只Sprague-Dawley大鼠随机分成4组：哮喘模型组（激发1周组、2周组）与正常对照组(对照1周组,对照2周组),每组8只。以卵蛋白致敏制备大鼠哮喘模型,分别在激发后的1周、2周取肺组织,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学S-P方法研究肺组织CD44的表达;收集支气管肺泡灌洗液(BALF)行细胞分类计数。结果：哮喘激发后1周和2周后哮喘大鼠BALF中淋巴细胞和嗜酸性粒细胞比例显著增加(P<0.05),巨噬细胞比例显著降低（P<0.05）,哮喘激发后1周中性粒细胞比例也显著增加(P<0.05)。CD44在mRNA和蛋白水平的表达与BLAF中淋巴细胞、嗜酸性粒细胞呈显著正相关（均P<0.05）,与激发1周时的巨噬细胞百分比呈显著负相关(P<0.05)。结论：哮喘肺组织CD44的过度表达与炎性细胞向哮喘气道炎症组织趋化浸润密切相关,在哮喘气道炎症反应过程中发挥着重要作用。［中国当代儿科杂志,2009,11（2）：142-145］     

瘦素及其受体在哮喘BALB/c小鼠肺组织中的表达及布地奈德的干预作用

目的 探讨不同严重程度哮喘小鼠及布地奈德干预后肺组织中瘦素及其受体表达的变化规律。方法 将40 只Balb/c 小鼠随机分成对照组、诱喘3 d 组、诱喘7 d 组和布地奈德干预组, 每组10 只。采用卵清蛋白(OVA)致敏后分别激发3 d 和7 d 建立小鼠哮喘模型;布地奈德干预组于激发前1 h 雾化吸入布地奈德混悬液干预;对照组不予任何处理。苏木精- 伊红染色观察各组小鼠气道炎症情况;免疫组化、Western blot 和Real-time PCR 方法检测肺组织中的瘦素及其受体蛋白和mRNA 的表达。结果 哮喘组气道病理学改变较对照组、布地奈德干预组明显, 而哮喘组中, 诱喘7 d 组改变较诱喘3 d 组明显。肺组织中瘦素蛋白及mRNA 表达在诱喘3 d 组较对照组显著增高(P<0.01), 诱喘7 d 组较3 d 组显著增高(P<0.01);瘦素受体蛋白表达在诱喘3 d组较对照组显著降低(P<0.01), 布地奈德干预组较诱喘7 d 组明显增高(P<0.01);瘦素受体mRNA 表达在4组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 哮喘肺组织中瘦素呈高表达, 而瘦素受体呈低表达;布地奈德可以上调瘦素受体的表达, 而对瘦素表达无明显影响。     

槐杞黄对哮喘大鼠模型的作用及其机制研究

目的 探索槐杞黄在哮喘大鼠模型中的作用及相关机制。方法 将40只Sprague-Dawley大鼠随机分为对照组、哮喘模型组、布地奈德组和槐杞黄组（n=10）。通过卵白蛋白致敏并激发建立哮喘大鼠模型,布地奈德组在每次激发前以布地奈德2 mg雾化,槐杞黄组在每次激发前以槐杞黄4 g/kg溶于水中灌胃。苏木精-伊红染色观察各组大鼠肺组织病理变化;计数肺泡灌洗液（BALF）中嗜酸性粒细胞比例;ELISA法检测各组BALF中细胞因子IL-3、IL-4、IL-5、IL-10、INF-γ及IgE浓度;流式细胞术检测外周血及脾脏中Th1/Th2细胞比例;RT-PCR法检测肺组织中T-bet、GATA-3 mRNA表达;应用Western bolt检测肺组织中T-bet、GATA-3蛋白表达。结果 与对照组相比,哮喘组大鼠气道炎症程度明显增加;BALF中嗜酸性粒细胞比例显著升高;IL-3、IL-4、IL-5、IgE浓度显著升高,而IL-10、INF-γ浓度明显下降;外周血及脾脏Th1细胞比例明显降低,Th2细胞比例明显升高;肺组织T-bet mRNA及其蛋白表达水平明显降低,GATA-3 mRNA及其蛋白表达水平明显升高（P < 0.05）。槐杞黄及布地奈德均能明显改善哮喘大鼠气道炎症及上述指标水平（P < 0.05）,且效果相当;但与对照组比较,差异仍有统计学意义（P < 0.05）。结论 槐杞黄能改善哮喘大鼠气道炎症,缓解哮喘症状,其机制可能与调节相关细胞因子水平及Th1/Th2比例有关,这一作用可能经T-bet和GATA-3通路进行调控。     

Rock2和TGF-β1在哮喘大鼠中的表达及药物干预

目的：探讨Rho激酶2（Rock2）和转化生长因子-β1（TGF-β1）在哮喘急性发作期的作用及糖皮质激素干预对其表达的影响。方法：48只大鼠随机分为哮喘组（AST组）、对照组（CON组）、地塞米松治疗组（DXM组）和布地奈德治疗组（BUD）4组,每组12只。用改良卵白蛋白进行致敏和激发制备大鼠哮喘模型,观察大鼠肺组织病理变化、分析支气管肺泡灌洗液（BALF）中的细胞计数。采用免疫组织化学法测定Rock2蛋白质表达和原位杂交法测定TGF-β1 mRNA表达。结果：BUD组和DXM组大鼠病理变化较哮喘组明显减轻。哮喘组BALF细胞总数、嗜酸性粒细胞（EOS）、多形核粒细胞（PMN）和淋巴细胞（Lym）百分率均显著高于CON组（P﹤0.01）,巨噬细胞（Mф）百分率显著低于对照组（P﹤0.01）,而BUD和DXM组中BALF中细胞总数及EOS、Lym百分率低于哮喘组,Mф百分率显著高于哮喘组。哮喘组肺组织中Rock2及TGF-β1 mRNA表达显著高于CON、BUD和DXM组（P﹤0.01）,而BUD、DXM组与对照组相比,差异均无统计学意义（P>0.05）。结论：哮喘急性发作期Rock2和TGF-β1的表达显著增加;糖皮质激素干预可降低Rock2和TGF-β1的表达水平,从而减轻哮喘气道炎症。［中国当代儿科杂志,2010,12(11)：877-881］     

哮喘小鼠TSLP及其受体表达和布地奈德干预的影响

目的观察哮喘小鼠胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)及其受体(TSLPR)的表达和布地奈德(BUD)干预对其表达的影响。方法30只雌性昆明小鼠随机分成哮喘组、BUD干预组及正常对照组,每组10只。用卵清蛋白(OVA)进行致敏和激发,建立哮喘模型,同时进行BUD干预。酶联免疫吸附(ELISA)法测定血清TSLP的水平及肺组织和脾脏中TSLP和TSLPR的表达。结果哮喘组小鼠外周血TSLP的水平较正常对照组明显上升,两组比较差异有统计学意义(P<0.01);而BUD干预组小鼠外周血TSLP的水平较哮喘组明显下降,差异有统计学意义(P<0.01);BUD干预组虽高于正常对照组,但差别无统计学意义(P>0.05)。各组小鼠肺组织及脾脏TSLP和TSLPR的组间比较结果均与血清TSLP组间比较结果相似。结论哮喘小鼠血清TSLP的表达及肺组织和脾脏内TSLP和TSLPR的表达均增高。TSLP可能在哮喘中起着重要作用,BUD可明显抑制哮喘小鼠TSLP和TSLPR的表达,TSLP或TSLPR可能成为治疗哮喘的潜在靶点。     

哮喘大鼠气道重塑中尾加压素-的表达变化

目的：研究哮喘大鼠气道重塑血清和支气管肺泡灌洗液（BALF）中尾加压素 Ⅱ（U-II）含量的变化及其作用。方法：32只雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为正常对照组、哮喘2周组、哮喘4周组和哮喘8周组,每组8只。以卵清白蛋白(OVA)致敏与激发建立哮喘大鼠气道重塑模型,图像分析技术测量大鼠支气管壁总面积和平滑肌面积,计算单位基底膜周径(Pbm)的支气管壁厚度(Wat)和平滑肌厚度(Wam),ELISA法测定血清和BALF中U-II的含量。结果：哮喘各组Wat及Wam均明显高于正常对照组（P<0.01）;哮喘组血清和BALF中U-II含量均显著高于正常对照组（P<0.01）,其中哮喘8周组血清和BALF中U-II含量显著高于哮喘4周组和哮喘2周组（P<0.01）,哮喘4周组也显著高于哮喘2周组（P<0.01）。各组大鼠BALF中的U-II含量与Wat及Wam呈正相关,BALF与血清中U-II含量亦呈正相关。结论：哮喘大鼠气道重塑血清和BALF中U-II含量增加;且U-II含量的变化与气道重塑相关。［中国当代儿科杂志,2010,12（4）：287-289］     

小鼠哮喘模型胸腺中胸腺基质淋巴生成素、Foxp3的表达及调节

目的通过建立小鼠哮喘模型，探讨胸腺在过敏性疾病发病机制中的作用，以及胸腺肽干预哮喘模型的作用和可能的机制。方法40只小鼠随机分为哮喘模型组、卵清蛋白（OVA）＋胸腺肽组、对照组和胸腺肽组，每组各10只。①采用OVA腹腔注射和超声雾化吸入建立BALB/c小鼠哮喘模型；②通过血清总IgE水平和肺组织病理学检查评价哮喘模型；③用Real time PCR检测哮喘模型和胸腺肽干预下，小鼠肺组织和胸腺中胸腺基质淋巴生成素（TSLP）以及胸腺Foxp3 mRNA表达变化，并通过血清总IgE水平和肺组织病理学评价胸腺肽干预下哮喘模型的过敏状态。结果①哮喘模型组与对照组相比，血清总IgE浓度明显增高，肺组织病理学检查示气道炎症明显，胸腺和肺组织TSLP mRNA表达均显著增高，胸腺Foxp3 mRNA表达显著降低；②OVA＋胸腺肽组肺组织病理学检查示气道炎症减轻，胸腺TSLP mRNA表达显著低于哮喘模型组。结论 ①OVA哮喘模型胸腺TSLP mRNA的表达水平上调、Foxp3 mRNA的表达水平下调，提示OVA可影响中枢性免疫器官--胸腺；②OVA哮喘模型引起胸腺Foxp3 mRNA表达降低，提示胸腺功能的改变可能与过敏性疾病的发生有关；③胸腺肽可改善过敏状况，其作用机制至少部分是通过胸腺而发挥。     

吸入干扰素-γ对支气管哮喘大鼠肺组织表达半胱氨酰白三烯受体1的影响及意义

目的研究半胱氨酰白三烯受体1(CysLT1)在支气管哮喘(哮喘)大鼠肺组织中的表达,探讨炎性因子IFN-γ是否参与调节哮喘大鼠肺组织CysLT1的表达。方法以卵清蛋白致敏激发制作大鼠哮喘模型,然后测定不同质量浓度组胺时大鼠呼吸道压力,再取其肺组织,采用免疫组织化学法、反转录-聚合酶链反应法检测IFN-γ干预前后哮喘大鼠肺组织中CysLT1 mRNA的表达。结果当各实验组大鼠吸入组胺质量浓度为0 mg·L-1、10 mg·L-1和20 mg·L-1时,测得呼吸道阻力值,任意2组比较差异均有统计学意义(Pa<0.01);免疫组织化学(IHC)法检测正常对照组(N组)、哮喘模型组(A组)、哮喘鼠雾化吸入低剂量IFN-γ干预组(L组)及高剂量干预组(H组)的CysLTl阳性细胞表达计数分别为11.889±2.369、19.333±3.240、26.000±5.522、33.222±4.493,任意2组比较差异均有统计学意义(Pa<0.01);RT-PCR法检测N组、A组、L组及H组的CysLT1 mRNA/β-actin相对密度分别为0.218±0.050、0.323±0.084、0.447±0.083、0.670±0.108,任意2组比较差异均有统计学意义(Pa<0.01)。结论高、低剂量IFN-γ均能上调CysLT1在哮喘大鼠肺组织的表达,其中炎性因子IFN-γ可能通过上调CysLT1的表达水平而参与哮喘的发生发展。     

缬沙坦恢复哮喘大鼠气道肝细胞生长因子的生成及其意义

目的：探讨血管紧张素受体拮抗剂(AT1)缬沙坦,对恢复哮喘大鼠气道肝细胞生长因子(HGF)的生成与哮喘气道重塑的关系和意义。方法：SD清洁级大鼠32只,体重在100±10g,随机分为4组:A组:正常对照组,B组:卵蛋白(OVA)激发2周组,C组:OVA激发4周组,D组:OVA激发4周后缬沙坦干预组。用免疫组化法测定各组大鼠气道的HGF,AngII和TGF-β1的表达变化,苏木精-伊红染色观察气道病理变化。结果：A组HGF较B组有明显差异[(5.49±1.34)%vs(10.69±0.96)%,P<0.05],C组为(11.85±0.87)%,较A组升高(P<0.05),D组为(15.58±1.06)%,较B组、C组升高。AngII和TGF-β1的表达则随着OVA激发时间的延长而增加,在使用缬沙坦后两者都明显下降。经抗原致敏和激活的大鼠气道上皮脱落炎性细胞堆积呈现明显的病理改变,而缬沙坦干预组的病理改变较轻,上皮细胞较完整,炎性细胞和纤维细胞较少。结论：①HGF随着气道重塑变化浓度有所改变,说明早期HGF即有保护气道作用,和TGF-β1呈负相关性,有拮抗纤维化的作用;②AT1可改善气道重塑过程,可能是通过升高气道HGF水平达到抗纤维化的作用。     

孟鲁司特对幼年哮喘气道重塑大鼠感觉神经肽受体NK1R表达的影响

目的：探讨孟鲁司特对幼年哮喘气道重塑大鼠中感觉神经肽受体NK1R表达的影响。方法：24只Sprague-Dawley（SD）大鼠随机分为对照组、哮喘组和孟鲁司特组,每组8只。应用卵白蛋白（OVA）雾化吸入法建立哮喘大鼠模型,对照组大鼠应用生理盐水代替致敏液和1%OVA,孟鲁司特组于每次激发前2 h以孟鲁司特（15 mg/kg）灌胃,共持续8 周。采用免疫组化、real-time PCR和Western blot等方法,从mRNA和蛋白水平动态观察NK1R在哮喘大鼠气道重塑中的表达水平及孟鲁司特对其表达的影响。结果：哮喘组NK1R mRNA及蛋白的表达水平均较对照组明显增加,差异有统计学意义(P<0.01);孟鲁司特干预后NK1R mRNA及蛋白表达水平较哮喘组减少(P<0.05),但仍高于对照组(P<0.01)。结论哮喘：诱发大鼠气道NK1R的表达增加,孟鲁司特能够下调哮喘大鼠气道重塑中NK1R的表达水平。     

氯雷他定对哮喘豚鼠白细胞介素5及嗜酸性粒细胞凋亡的影响

目的研究氯雷他定对哮喘豚鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)和血清IL-5的表达及肺组织嗜酸性粒细胞(EOS)凋亡延迟状态的影响。方法豚鼠32只随机分为正常对照组、哮喘组、氯雷他定低剂量组、氯雷他定高剂量组。经3次20 g·L-1卵清蛋白(OVA)腹腔注射致敏后,10 g·L-1OVA雾化吸入40 min诱发哮喘发作。氯雷他定低、高剂量组豚鼠分别予2 mg·kg-1·d-1、10mg·kg-1·d-1氯雷他定灌服14 d,每天1次;哮喘组、正常对照组给予9 g·L-1盐水作对照。ELISA法检测其血清和BALF中IL-5水平,罗氏TUNEL原位细胞凋亡检测试剂盒检测其凋亡细胞,HE染色切片随机计数每张切片下200个EOS中凋亡细胞数。结果1.正常对照组、哮喘组、氯雷他定低剂量组、氯雷他定高剂量组血清IL-5水平分别为(0.27±0.04)ng·L-1、(0.41±0.03)ng·L-1、(0.38±0.02)ng·L-1、(0.31±0.03)ng·L-1;BALF中IL-5水平分别为(0.10±0.01)ng·L-1、(0.38±0.04)ng·L-1、(0.33±0.05)ng·L-1、(0.23±0.09)ng·L-1,血清及BALF中IL-5水平4组间两两比较差异均有统计学意义(Pa<0.05)。2.正常对照组、哮喘组、氯雷他定低剂量组、氯雷他定高剂量组豚鼠肺组织EOS发生凋亡的细胞数分别为33个、95个、129个、182个,两两比较差异有统计学意义(χ2=114.5,P<0.05)。其中哮喘组与氯雷他定低剂量组间差异无统计学意义(χ2=10.0,P>0.008 3)。结论氯雷他定对IL-5相关的EOS凋亡延迟状态有抑制作用,能改善肺组织变应性炎症状态,对哮喘的控制具有潜在的积极作用。     

褪黑素对哮喘大鼠肺组织活性氧产生的影响(英文)

目的　支气管哮喘是慢性气道炎症性疾病 ,肺组织活性氧产生可以导致气道炎症 ,本研究目的探讨褪黑素 (MT)对哮喘模型大鼠肺组织活性氧 (ROS)生成以及气道炎症的影响。方法　将 2 4只大鼠随机分为 3组 :哮喘组 (n=8) :用 10 %鸡卵白蛋白 (OVA) 1ml、氢氧化铝凝胶 10 0mg无菌腹腔注入 ,2周后用 1%OVA超声雾化吸入 2 0min ,连续激发 1周致其哮喘发作 ;MT组 (n =8) :模型制作同哮喘组 ,在每次激发前 30min腹腔注入MT 10mg/kg ;对照组 (n =8) :以生理盐水代替OVA吸入。每组分别于最后一次激发后 6h测定气道反应性 ;取支气管肺泡灌洗液 (BALF)进行白细胞计数、分类 ;取肺组织进行活性氧产量测定。结果　MT组大鼠气道反应性及BALF中炎性细胞数明显低于哮喘组 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 )。肺组织活性氧产量在哮喘组、MT组及对照组分别为 (114 .8± 11.3)U/mgprot、(95 .2± 5 .9)U/mgprot及 (87.5± 7.4 )U/mgprot,哮喘组高于其它两组 ,差异均有显著性 (P <0 .0 5 )。结论　哮喘组大鼠肺组织活性氧产量增加。MT干预可以降低肺组织活性氧产生 ,降低气道炎症和气道高反应性 ,这可能是其治疗哮喘的保护机制。     

褪黑素对哮喘大鼠核因子-κB表达的影响及抗炎作用

目的　探讨褪黑素 (MT)对支气管哮喘 (BA)大鼠模型肺组织核因子 κB(NF κB)表达的影响及其抗炎作用。方法　将 2 4只体重 12 0～ 170克的健康雄性SD大鼠随机分为 3组 ,每组 8只 :(1)哮喘组 :用 10 %鸡卵白蛋白 (OVA) 1ml、氢氧化铝 10 0mg无菌腹腔注入 ,2周后用 1%OVA超声雾化每天吸入激发 2 0min ,连续激发 1周致其哮喘发作 ,在每次激发前 30min腹腔注入生理盐水(NS) 1m/只。 (2 )MT组 :诱喘方法同哮喘组 ,在每次激发前 30分钟腹腔注入MT 10mg/kg。 (3)对照组 :以NS代替诱喘剂和腹腔注入药。每组分别于最后一次激发后 6h测定气道反应性 ,随后处死大鼠 ,并行支气管肺泡灌洗液 (BALF)中细胞计数、分类 ;用硝酸还原酶法测定BALF中一氧化氮(NO)含量 ,以及肺组织中诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)和结构型一氧化氮合酶 (cNOS)活性 ;用免疫组织化学染色法观察气道上皮细胞NF κB的表达。结果　 (1)MT组大鼠气道反应性及BALF中淋巴细胞、嗜酸性粒细胞数明显低于哮喘组 (P <0 .0 1) ;(2 )MT组BALF中NO含量、肺组织中iNOS低于哮喘组 (P <0 .0 1) ,且等级相关分析显示哮喘组BALF中NO含量与肺组织iNOS高度正相关 (r =0 .83P <0 .0 1) ;(3)免疫组织化学染色显示哮喘组、MT组、对照组NF κB表达胞核阳性的上皮细胞占气道     

感觉神经肽P物质对气道平滑肌细胞收缩幅度的影响

目的 探讨感觉神经肽P物质对气道平滑肌细胞(airway smooth muscle cell,ASMC)收缩幅度的影响.方法 将10只Wistar大鼠按照随机分组原则分成正常对照组及哮喘模型组,卵蛋白吸入法制作哮喘大鼠模型;原代培养两组大鼠气道平滑肌细胞;激光共聚焦显微镜观察ASMC在不同干预因素干预前后细胞形态及收缩的长度的变化,计算各组细胞收缩百分比,对各组ASMC收缩长度百分比进行统计学分析.结果 乙酰胆碱干预组及P物质干预组ASMC体积明显变小,细胞直径缩短,胞浆减少,细胞排列密集.P物质受体拮抗剂干预组及尼莫地平干预组ASMC细胞体积与正常对照组细胞体积大小相仿,细胞呈梭形,胞浆丰富,细胞排列规则.乙酰胆碱干预组细胞收缩百分比最大(19.60 ±3.47)％,尼莫地平干预组细胞收缩百分比最小(3.25±1.14)％,P物质受体拮抗剂干预组细胞收缩百分比(3.56±1.03)％较正常对照组(3.54±1.26)％大,但较乙酰胆碱干预组(19.60±3.47)％、哮喘组(14.36±2.37)％及P物质干预组(17.79±3.19)％小,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 感觉神经肽P物质会增加ASMC收缩幅度,但其收缩幅度较乙酰胆碱小;其受体拮抗剂有抑制平滑肌细胞收缩能力的作用,但其抑制能力较尼莫地平弱.感觉神经肽P物质通过增加气道平滑肌细胞收缩力参与哮喘急性发作.