喉鳞状细胞癌中表皮生长因子受体基因过表达的研究

目的：研究喉鳞状细胞癌中表皮生长因子受体（EGFR）基因的异常表达与喉鳞状细胞癌发生的相关性.方法：应用RT-PCR方法检测50例喉鳞状细胞癌患者组织标本和喉癌Hep-2细胞系中EGFR基因mRNA表达水平.结果：在60%（30/50）喉鳞状细胞癌及喉癌Hep-2细胞系中检测到EGFR基因的过表达.结论：EGFR基因的过表达与喉癌发生及发展有关.     

喉鳞状细胞癌中表皮生长因子受体的表达与临床病理特征的关系

为了解喉部鳞状细胞癌中表皮生长因子受体（ＥＧＦ－Ｒ）的表达与临床特征、细胞分化及预后的关系，作者通过免疫组织化学方法（Ｓ－Ｐ法）检测了３６例喉部鳞状细胞癌的石蜡标本，发现２４例出现ＥＧＦ－Ｒ阳性表达，其表达率为６６．７％，作为对照组的２５例喉旁正常组织中只有１例出现ＥＧＦ－Ｒ阳性表达；ＥＧＦ－Ｒ阳性表达与患者的年龄（≤６０岁、〉６０岁）、肿瘤部位无相关性（Ｐ〉０．０５）；而与ＴＮＭ分期、组织分化程     

表皮生长因子受体3和4在喉鳞状细胞癌中的表达及意义

目的：探讨表皮生长因子受体3（ErbB3）与ErbB4基因在喉鳞状细胞癌中的表达及其与喉癌生物学、临床病理特征的关系。方法：采用RT-PCR法,分别对36例喉鳞状细胞癌患者的癌组织、14例切缘正常黏膜及11例良性增生性病变中ErbB3与ErbB4基因的表达进行检测。结果：在喉癌与良性增生性病变中,ErbB3 mRNA过度表达阳性率分别为66.7%和18.2%（P〈0.01）;ErbB4 mRNA过度表达阳性率分别为25.0%和9.1%（P〉0.05）。ErbB3和ErbB4在喉癌组织与切缘正常黏膜中的表达差异均无统计学意义（均P〉0.05）。ErbB3与ErbB4的表达与喉癌的临床病理特征无显著相关。结论：ErbB3与ErbB4在喉癌的发生、发展中具有不同的作用,在切缘正常黏膜中的过度表达对肿瘤复发可能起着一定的作用。     

喉癌组织中表皮生长因子受体mRNA含量测定

目的建立TagMan探针逆转录一实时荧光定量PCR技术测定喉癌组织中表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor，EGFR）mRNA水平的方法，分析其应用价值。方法设计高特异性引物和探针，以TagMan探针逆转录．实时荧光定量PCR技术对32例喉鳞状细胞癌组织和癌旁组织学正常喉黏膜组织EGFR mRNA表达水平进行测定。构建含有EGFR的重组质粒，进行测序鉴定。结果经测序分析证实，含EGFR的重组质粒构建成功，喉癌组织中EGFRmRNA相对含量（中位数0．025）高于癌旁正常喉黏膜组织中EGFRmRNA相对含量（中位数0。008），两者间的差异经Wilcoxon秩和检验，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论TagMan探针逆转录一实时荧光定量PCR技术可作为一种喉癌组织中EGFRmRNA水平定量测定的新方法。     

喉癌及喉粘膜不典型增生组织中表皮生长因子受体的表达

本研究采用免疫组化ＬＳＡＢ法及图象分析技术，用抗ＥＧＦ－Ｒ的单克隆抗体对８例正常喉粘膜、２５例喉粘膜不典型增生及５３例喉鳞癌组织进行标记及分析。     

表皮生长因子受体及血管内皮生长因子在喉乳头状瘤中的表达

目的探讨表皮生长因子受体（EGFR）和血管内皮生长因子（VEGF）在喉乳头状瘤（IJP）中的表达及意义。方法采用免疫组化二步法检测10例成人型喉乳头状瘤（ALP）、19例幼年型喉乳头状瘤（JLP）石蜡标本中EGFR、VEGF的表达与分布;并以10例声带息肉作为对照组。结果EGFR和VEGF在ALP、JLP组上皮层的表达水平明显高于对照组（P〈0．05）。EGFR在ALP、JLP表皮组织全层均有强阳性表达,VEGF呈现以基底层、棘层细胞显著表达,到颗粒层表达逐渐减弱的模式。VEGF在ALP、JLP和对照组间质的血管内皮细胞、炎症细胞、成纤维细胞中也有表达,但3组问VEGF的表达元显著统计学差异（P〉0．05）。JLP组上皮中VEGF的表达评分结果（7．133±0．061）比ALP组（6．934±0．041）高,两组比较有统计学意义（P〈0．05）。结论VEGF、EGFR在LP组织中的过度表达可能在LP的上皮细胞过度增生和血管大量形成中发挥重要作用,JLP比ALP具有更强的增殖活性。     

喉鳞状细胞表皮生长因子受体mRNA的表达及其意义

目的：了解喉部鳞状细胞表皮生长因子受体（ＥＧＦ－Ｒ）ｍＲＮＡ的表达情况及其与喉部鳞癌的特征,组织分化的关系。方法;用斑点杂交法检测２０例喉鳞状细胞癌活体标本。结果：１５例出现ＥＧＦ－Ｒ ｍＲＮＡ表达,其表达率为７５Ａ％。ＥＧＦ－Ｒ ｍＲＮＡ表达与患者年龄,肿瘤的部位无关;而与ＴＮＭ分期,组织分化程度有关,Ｔ３,Ｔ４期的表达高于Ｔ１,Ｔ２期;分化程度低的肿瘤,其ＥＧＦ－Ｒ ｍＲＮＡ表达高于分化程度中     

喉癌表皮生长因子受体表达的免疫组化定量分析

运用免疫组化方法检测了喉癌、喉粘膜不典型增生、声带从组织各１８便中表皮生长因子受全（ＧＦＲ）的表达水平，结合显微图像分析仪进行定量分析，结果表明：在声带息肉组织中ＥＧＦＲ存在于基底细胞层，偶见于棘细胞层，而在喉粘膜不典型增生及喉癌组织的各层细胞均有表达。喉癌细胞中ＥＧＦＲ含量明显高于声带息肉及喉粘膜不典型增生细胞（均为Ｐ〈０．０１），病理分级不同的喉癌细胞ＥＧＦＲ含量不同，Ⅱ、Ⅲ级鳞状细胞癌中均较     

表皮生长因子受体介导的多肽载体系统对人喉鳞状细胞癌的基因导入研究

目的　检测一种新的以头颈肿瘤细胞表面受体为靶向的多肽基因导入系统对人喉鳞状细胞癌 (简称鳞癌 )的基因导入效果。方法　链霉亲和素标记生物素 (labeledstreptavidinbiotin ,LSAB)法检测喉癌组织标本和培养的Hep2喉癌细胞表皮生长因子受体 (epidermalgrowthfactorreceptor,EGFR)的表达。建立人喉癌裸鼠移植瘤模型 ,分别构建绿色荧光蛋白标记基因和多肽载体系统、半乳糖苷酶报告基因和多肽载体系统四元复合物 ,分别进行报告基因和标记基因的体内外导入实验。结果　EGFR在 6 5 % (15 / 2 3)喉癌组织标本呈阳性表达。Hep2细胞的EGFR亦呈阳性表达。EGFR主要位于细胞膜 ,部分位于细胞质内。绿色荧光蛋白基因转染Hep2后 4 8h显微镜下可见荧光 ,72h达高峰 ,导入率大于 80 % (78/ 97)。β 半乳糖苷酶报告基因荷人喉癌裸鼠移植瘤瘤内转染 12h即表达蓝染 ,2 4h蓝染程度加深 ,72h仍有表达。　结论　EGFR广泛存在于人喉癌细胞 ,新的多肽基因导入系统借助于EGFR可靶向性将报告或标记基因导入体内外人喉癌细胞 ,并得到高效表达 ,为头颈鳞癌的基因治疗提供了一个新的靶向高效的基因导入系统。     

表皮生长因子受体介导的多肽载体系统对人喉鳞状细胞癌的基因导入研究

目的检测一种新的以头颈肿瘤细胞表面受体为靶向的多肽基因导入系统对人喉鳞状细胞癌(简称鳞癌)的基因导入效果。方法链霉亲和素标记生物素(1abeled streptavidin biotin，LSAB)法检测喉癌组织标本和培养的Hep2喉癌细胞表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor，EGFR)的表达。建立人喉癌裸鼠移植瘤模型，分别构建绿色荧光蛋白标记基因和多肽载体系统、半乳糖苷酶报告基因和多肽载体系统四元复合物，分别进行报告基因和标记基因的体内外导入实验。结果EGFR在65％(15／23)喉癌组织标本呈阳性表达。Hep2细胞的EGFR亦呈阳性表达。EGFR主要位于细胞膜，部分位于细胞质内。绿色荧光蛋白基因转染Hep2后48h显微镜下可见荧光，72h达高峰，导入率大于80％(78／97)。β-半乳糖苷酶报告基因荷人喉癌裸鼠移植瘤瘤内转染12h即表达蓝染，24h蓝染程度加深，72h仍有表达。结论EGFR广泛存在于人喉癌细胞，新的多肽基因导入系统借助于EGFR可靶向性将报告或标记基因导人体内外人喉癌细胞，并得到高效表达，为头颈鳞癌的基因治疗提供了一个新的靶向高效的基因导入系统。     

表皮生长因子受体在喉癌中的表达

为探讨表皮生长因子受体（enidermalgrowthfactorreceptor，EGFR）的表达在喉癌预后中的作用，运用免疫组化标记链霉菌素－生物素技术检测了60例喉癌和20例正常喉粘膜组织中EGFR的表达，发现20例正常喉粘膜组织全部为阴性，60例喉癌组织中44例出现EGFR阳性表达（阳性率73．3％）。EGFR的表达与喉爆发生部位、肿瘤分期和淋巴结转移之间无明显相关性，而与组织分化程度，患者生存率之间显著相关。低分化喉癌EGFR的表达较中、高度分化喉癌明显增高（P＜0．05）。具有EGFR阳性表达的喉癌患者3年生存率明显低于阴性患者（P＜0．01）。结果提示，EGFR的表达在喉癌的发生发展中起一定作用，并可作为判断喉癌生物行为和预后的一个参考指标。     

喉癌组织中核表皮生长因子受体与Aurora-A激酶的表达及其临床意义

目的 分析喉癌组织中核表皮生长因子受体(nuclear EGFR)、Aurora-A激酶的表达及其在评价喉癌生物学行为和预后中的价值。方法 回顾性分析50例喉癌患者临床病理资料及随访结果,免疫组化法检测肿瘤组织中核表皮生长因子受体(EGFR)、Aurora-A激酶的表达。结果 50例喉癌患者的组织中,核EGFR、Aurora-A激酶阳性表达率分别为50%(25/50)、58%(29/50),均高于癌旁组织(P<0.05);核EGFR的表达与喉癌的原发灶分期、区域淋巴结转移、复发有关(P均<0.05);Aurora-A的表达与原发灶分期、区域淋巴结转移有关(P值均<0.05);核EGFR与Aurora-A表达的相关分析差异有统计学意义(r=0.446,P<0.05);Kaplan Meier生存分析显示患者3年和5年生存率分别为84.0%和67.8%,Log-rank检验显示原发灶分期、区域淋巴结转移、核EGFR、Aurora-A的表达和患者预后有关(P<0.05)。Cox比例分析模型分析显示原发灶分期、区域淋巴结转移、核EGFR表达为影响喉癌患者预后的独立危险因素(P<0.05)。结论 在喉癌发生和发展过程中存在核EGFR、Aurora-A激酶的异常表达,并与肿瘤的生物学行为和预后有关。     

MGMT和EGFR蛋白在喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的 探讨喉鳞状细胞癌组织中O6-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶(MGMT)、表皮生长因子受体(EGFR)的表达与临床病理特征及其相互之间的关系,研究其在肿瘤发生发展以及治疗中的作用。 方法 采用免疫组织化学染色法检测MGMT、EGFR的表达,分析103例喉癌组织标本与临床病理特征的关系。 结果 MGMT的表达与分化程度、T分期以及临床分期呈正相关(χ2为13.302、8.394、11.403,P值分别为0.001、0.039、0.010<0.05);EGFR的表达与T分期以及临床分期呈正相关(χ2为14.933、16.603,P值分别为0.002、 0.001<0.05)。分层分析发现,MGMT、EGFR 两者的表达强度存在正相关(χ2=5.369, P=0.019<0.05)。 结论 喉鳞状细胞癌中 MGMT、EGFR的表达与T分期、临床分期均有相关性,测定两者的表达水平可评估喉鳞状细胞癌的恶性程度并指导喉癌的治疗。     

Prognostic significance of epidermal growth factor receptor in squamous cell carcinoma of the maxillary sinus

Summary The expression of epidermal growth factor receptor (EGFR) was determined immunohistochemically in two groups of maxillary sinus squamous cell carcinomas, one with recurrences at the primary site after combination therapy with radiotherapy, chemotherapy and/or surgery and one without local recurrences. Using a four-graded scale (-,+,++,+++), 9 of the 10 recurrent carcinomas had a staining intensity and proportion of stained cells of ++ or more. A comparable staining intensity was found in 9 of the 18 non-recurrent carcinomas. This difference is statistically significant (Fisher's exact probability test, P < 0.05). These results indicate that an increased expression of EGFR may influence the recurrence rate of squamous cell carcinoma of the maxillary sinus after combined therapy.     

Expression of epidermal growth factor receptor in the inverted papilloma and squamous cell carcinoma of nasal cavity

The present study was undertaken to compare positive rate of immunostaining (PR) and positive intensity of immunostaining (PI) of epidermal growth factor receptor (EGFR) in inverted papilloma (IP), synchronous carcinoma with IP and metachronous carcinoma with IP of the nasal cavity. Ten subjects with nasal polyps, ten subjects with inverted papilloma (IP), five subjects with synchronous carcinoma with IP and ten subjects with metachronous carcinoma with IP were enrolled with a control group of ten subjects of inferior turbinate. Each specimen was divided into two portions: one for RNA isolation and the other for detection of EGFR protein. Positive rate of immunostaining, positive intensity of immunostaining for EGFR protein and EGFR mRNA were significantly up-regulated in the IP, synchronous carcinoma with IP and metachronous carcinoma with IP when comparing polyp and normal mucosa. A role for EGFR in the malignant transformation from IP to SCC of the nasal cavity is suggested.     

Signal transduction-related gene transfer leads to inhibition of proliferation and induction of differentiation in laryngeal squamous cell carcinoma in vitro

The aim of this study is to target the interference therapy of signal transduction which is a novel therapeutic strategy in laryngeal squamous cell carcinoma (LSCC). We successfully constructed recombinant adenoviruses Ad-p14^ARF, and Ad-antisense EGFR using AdEasy-1 vector System. Clonogenic cell assay, western blotting assay, 3′(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide (MTT) assay, flow cytometer (FCM) assay, and immunocytochemical technique were designed to examine the inhibition of proliferation, protein expression of p14^ARF and EGFR and induction of differentiation, respectively. Furthermore the synergistic effect of Ad-p14^ARF and Ad-antisense EGFR on Hep-2 cell was examined. We successfully used AdEasy-1 vector system to construct recombinant adenoviruses Ad-p14^ARF and Ad-antisense EGFR. The activity of proliferation of Hep-2 cells was inhibited markedly by infecting Ad-p14^ARF or Ad-antisense EGFR by comparing Ad-sense EGFR (P = 0.005) with vector control (Ad-Ctrl) (P = 0.005) and with PBS (P = 0.003). This effect, combining Ad-antisense-EGFR with Ad-p14^ARF became more noticeable than alone (P = 0.01, P = 0.02, respectively). P14 (ARF) protein overexpression, EGFR protein down expression, and inhibition of proliferation were observed in Hep-2 cells infected by either Ad-p14^ARF or Ad-antisense EGFR. FCM revealed that the proportion of apoptosis cells transfected by Ad-p14^ARF and Ad-antisense EGFR increased more obviously than the control. The proportion of (Hep-2 cells in) G₀/G₁ phases was increased by up to 78.5, 77.7, and 86.9% in Ad-antisense EGFR, Ad-p14^ARF, and Ad-antisense EGFR + Ad-p14^ARF, respectively. Our findings demonstrated that not only EGFR but p14^ARF also plays a major role on the genesis and in modulating the cell growth and differentiation of human laryngocarcinoma. They efficaciously blocked the signal transduction of human laryngocarcinoma cell, and may therefore, be an effective potential target of gene therapy to prevent human laryngocarcinoma cell proliferation.     

真核细胞翻译起始因子4E和血管内皮生长因子在喉鳞状细胞癌中的表达及相关性研究

目的：通过检测真核细胞翻译起始因子4E(eIF4E)与血管内皮生长因子(VEGF)在喉鳞状细胞癌(LSCC)中的表达,探讨二者与LSCC的关系及其相互之间的内在联系。方法：采用Western-blot法检测20例新鲜LSCC标本的癌中心区(TC)、过渡区(TR)及病理证实的无癌区(TF)中eIF4E及VEGF的表达情况。结果：eIF4E在LSCC的TF、TR及TC的表达水平呈递进性增高;VEGF在LSCC的TC的表达水平显著高于TR及TF;eIF4E与VEGF二者密切相关。结论：过表达的eIF4E是LSCC恶性改变及判断其恶性程度的一个分子标志;VEGF的高表达与LSCC的生长及转移密切相关,其或许可以作为判断预后的指标之一。二者在LSCC中的表达具有相关性,可为LSCC的基因治疗提供一定的理论基础。