左卡尼汀对动脉粥样硬化血管平滑肌细胞肉碱棕榈酰转移酶1表达的干预研究

目的探讨左卡尼汀对动脉粥样硬化模型兔主动脉平滑肌细胞层肉碱棕榈酰转移酶1（CPT-1）的表达变化。方法 45只新西兰大白兔分成对照组、高脂组和干预组。高脂组与干预组予以高脂饲料（每单位质量含5%猪油及1%胆固醇）,在此基础上,干预组给予左卡尼汀,100 mg/kg剂量肌肉注射每天1次。在饲养24周后,采用逆转录聚合酶链反应及免疫组化方法检测血管壁平滑肌细胞层CPT-1 mRNA及蛋白的表达水平。结果同对照组比较,高脂组及干预组CPT-1 mRNA及蛋白的表达明显减少,且高脂组减少更为明显（F=192.282、93.329,P均〈0.05）。结论左卡尼汀可通过增加血管平滑肌CPT-1的表达从而起到抗动脉粥样硬化的作用。     

血清可溶性神经纤毛蛋白-1、肉碱棕榈酰转移酶1A、网膜素-1水平与乳腺癌患者临床特征及预后关系研究

目的 探讨血清可溶性神经纤毛蛋白-1(NRP-1)、肉碱棕榈酰转移酶1A(CPT1A)、网膜素-1(Omentin-1)水平与乳腺癌患者临床特征及预后的关系。方法 选取自2017年1月至2018年12月收治的乳腺癌患者135例（乳腺癌组）。另选同期的健康体检者100例（健康组）。检测各组血清sNRP-1、CPT1A、Omentin-1水平。随访2年,详细记录患者的预后状况,并应用多因素Logistics回归分析影响患者临床预后的相关因素。结果 乳腺癌组血清sNRP-1、CPT1A显著高于健康组,Omentin-1水平低于健康组,差异均有统计学意义（P<0.05）。不同肿瘤分化程度、淋巴结转移情况及临床分期的乳腺癌患者,血清sNRP-1、CPT1A、Omentin-1水平比较,差异均有统计学意义（P<0.05）。乳腺癌患者预后不良组血清sNRP-1、CPT1A水平高于预后良好组,血清Omentin-1水平低于预后良好组,差异有统计学意义（P<0.05）。多因素分析结果显示,肿瘤低分化、淋巴结转移、临床分期Ⅲ期、血清sNRP-1和CPT1A升高、血清Omentin-1降低...     

牛磺酸抑制THP-1细胞酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶-1表达

目的:观察牛磺酸对人单核细胞系THP-1细胞酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶-1(ACAT-1)表达的影响。方法:在有或无干扰素-γ(INF-γ)的条件下,用不同浓度的牛磺酸与THP-1持续孵育不同的时间,RT-PCR检测ACAT-1mRNA水平,WesternBlot检测其蛋白表达。结果:牛磺酸显著下调THP-1的ACAT-1mRNA和蛋白表达水平(P<0.05～0.01,n=3),并呈时间和剂量依赖性效应。INF-γ促进ACAT-1mRNA和蛋白表达(P<0.05),该作用被牛磺酸部分抑制(P<0.01)。结论:牛磺酸抑制ACAT-1的基础表达和由INF-γ诱导的表达,这可能是其抗动脉粥样硬化的机制之一。     

甾醇-O-酰基转移酶1介导的线粒体分裂促进血管钙化

目的 阐明甾醇-O-酰基转移酶1(SOAT1)介导的线粒体分裂在血管钙化（VC）中的作用。方法 将小鼠血管平滑肌细胞（VSMCs）分成4组：si-NC+Con(SOAT1阴性对照siRNA转染到VSMCs中)、siNC+β-甘油磷酸（β-GP）(SOAT1阴性对照siRNA转染到VSMCs中)、si-SOAT1+Con(SOAT1 siRNA转染到VSMCs中)和si-SOAT1+β-GP(SOAT1 siRNA转染到VSMCs中)。进行CCK-8、伤口愈合试验和茜素红染色评估VSMCs的增殖、迁移、成骨分化。分析VSMCs的线粒体形态和氧化应激水平。20只C57BL/J小鼠随机分为四个不同的组,每组5只：对照组（Ctrl组）、5/6肾切除加高磷酸盐饮食治疗组（NTP组）、NTP+si-NC组和NTP+si-SOAT1组。免疫荧光分析小鼠主动脉侏儒相关转录因子2(RUNX2)、SOAT1和α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达。结果 在β-GP中培养的不同时间段（0、1、3、5、7 d和14 d）,VSMCs中成骨标记RUNX2、SOAT1的蛋白水平以时间依赖性方式逐渐增强（P <0...     

L-精氨酸对动脉粥样硬化兔可溶性血管细胞黏附分子1表达的影响

目的：观察L-精氨酸对动脉粥样硬化模型兔血中可溶性血管细胞黏附分子1的影响,并探讨血中可溶性血管细胞黏附分子1水平与血管局部血管细胞黏附分子1表达的关系.方法：①实验于2003-9/2004-04在上海市第一人民医院心内科研究室完成.选用健康雄性新西兰大白兔24只,随机分为3组,每组8只：模型组、L-精氨酸组、对照组.②模型组、L-精氨酸组予高脂饮食10 d后,球囊拉伤右髂外动脉.继续喂以高脂饮食30 d后处死动物,L-精氨酸组从术后第2天起经饮水给予L-精氨酸1g/d.对照组以普通饲料喂养.③以双抗体夹心酶联免疫吸附实验检测实验前、术前及术后30 d各组兔血清中可溶性血管细胞黏附分子1水平.组织冰冻切片以原位杂交检测血管细胞黏附分子1 mRNA的表达,抽提蛋白行免疫印迹检测血管细胞黏附分子1蛋白.④计量数据间差异性比较采用t检验.结果：兔24只均进入结果分析.①血管细胞黏附分子1 mRNA表达：血管损伤后30 d,模型组明显增多,L-精氨酸组较轻,对照组阴性.②血管细胞黏附分子1蛋白表达：血管损伤后30 d,模型组明显增多,L-精氨酸组少于模型组,对照组少量.③血清可溶性血管细胞黏附分子1水平：各组3个时间点无差异（P＞0.05）.术后30 d,模型组明显高于术前（P＜0.05）;模型组明显高于对照组及L-精氨酸组（P＜0.01,0.05）,而L-精氨酸组与对照组差异不明显（P＞0.05）.结论：口服L-精氨酸能够降低动脉粥样硬化兔血中可溶性血管细胞黏附分子1水平,血中可溶性血管细胞黏附分子1水平可以反映球囊损伤血管局部的血管细胞黏附分子1变化.     

坏死血管平滑肌细胞释放IL-1对其周围正常肌细胞迁移能力的影响

[目的]观察坏死的血管平滑肌细胞对周围正常细胞迁移能力的影响,并探讨其可能的作用机制.[方法]采用无血清无糖低氧条件制备血管平滑肌细胞坏死模型,并收集坏死细胞培养上清液(简称坏死上清)干预正常细胞.实验设置坏死上清干预组(A组)、IL-1干预组(B组)、坏死上清与IL-1拮抗剂联合干预组(C组)以及无血清低糖DMEM培养的对照组(D组).RT-PCR检测各组细胞基质金属蛋白酶(MMP)2、MMP-9 mRNA的表达;Western blot检测各组细胞MMP-2、MMP-9蛋白的表达;Transewell检测各组细胞的迁移能力.[结果]A组和B组MMP 2、MMP9mRNA的表达均显著高于D组,差异具有统计学意义(P＜0.05),C组MMP-2、MMP-9mRNA的表达显著低于A组和B组,差异具有统计学意义(P＜0.05).A组和C组MMP 2、MMP-9蛋白的表达显著高于D组(P ＜0.05),且具有时间依赖性.C组MMP-2、MMP-9蛋白的表达显著低于A组和B组(P＜0.05).条件培养液培养24 h,B组细胞迁移能力显著高于D组(P＜0.05),C组迁移细胞数显著低于A组和B组(P＜0.01),A组细胞迁移能力无显著变化.条件培养液培养48 h,A组和B组细胞迁移个数显著高于D组(P＜0.01),C组迁移细胞数显著低于A组和B组(P ＜0.01).[结论]坏死的血管平滑肌细胞可能通过释放IL-1促进了周围正常平滑肌细胞MMP-2、MMP-9的表达,进而促进细胞的迁移.     

L-精氨酸对动脉粥样硬化兔可溶性血管细胞黏附分子1表达的影响

目的:观察L-精氨酸对动脉粥样硬化模型兔血中可溶性血管细胞黏附分子1的影响,并探讨血中可溶性血管细胞黏附分子1水平与血管局部血管细胞黏附分子1表达的关系。方法:①实验于2003-9/2004-04在上海市第一人民医院心内科研究室完成。选用健康雄性新西兰大白兔24只,随机分为3组,每组8只:模型组、L-精氨酸组、对照组。②模型组、L-精氨酸组予高脂饮食10d后,球囊拉伤右髂外动脉。继续喂以高脂饮食30d后处死动物,L-精氨酸组从术后第2天起经饮水给予L-精氨酸1g/d。对照组以普通饲料喂养。③以双抗体夹心酶联免疫吸附实验检测实验前、术前及术后30d各组兔血清中可溶性血管细胞黏附分子1水平。组织冰冻切片以原位杂交检测血管细胞黏附分子1mRNA的表达,抽提蛋白行免疫印迹检测血管细胞黏附分子1蛋白。④计量数据间差异性比较采用t检验。结果:兔24只均进入结果分析。①血管细胞黏附分子1mRNA表达:血管损伤后30d,模型组明显增多,L-精氨酸组较轻,对照组阴性。②血管细胞黏附分子1蛋白表达:血管损伤后30d,模型组明显增多,L-精氨酸组少于模型组,对照组少量。③血清可溶性血管细胞黏附分子1水平:各组3个时间点无差异(P>0.05)。术后30d,模型组明显高于术前(P<0.05);模型组明显高于对照组及L-精氨酸组(P<0.01,0.05),而L-精氨酸组与对照组差异不明显(P>0.05)。结论:口服L-精氨酸能够降低动脉粥样硬化兔血中可溶性血管细胞黏附分子1水平,血中可溶性血管细胞黏附分子1水平可以反映球囊损伤血管局部的血管细胞黏附分子1变化。     

辛伐他汀抑制兔腹主动脉支架植入后α-平滑肌肌动蛋白的转化

目的：观察辛伐他汀对支架植入术后免腹主动脉平滑肌细胞增殖、移动和凋亡的影响。 方法：实验于2003—02／12在河南省人民医院心内科实验室及河南省分子医学重点学科开放实验室进行。取15只健康的新西兰雄性大白兔，数字表法随机分为正常饮食组、对照组和辛伐他汀组3组（n=5）。正常饮食组饲以正常饲料，其他2组饲以含15g／L胆固醇的高脂饲料，高脂喂养3d后行腹主动脉内皮剥脱术。术后第10周高脂饮食的10只兔行腹主动脉二维超声、彩色多普勒、脉冲多普勒观察。一旦超声检查证实腹主动脉形成≥50％狭窄，辛伐他汀组即开始服用辛伐他汀（商品名舒降之，杭州默沙东制药有限公司）5mg／d，15d后对照组和辛伐他汀组在数字减影引导下在狭窄部位植入支架。行支架植入术30d后取腹主动脉含支架段血管，做Western blot分析，检测收缩型平滑肌细胞分化标志物α-平滑肌肌动蛋白在3组表达的变化。 结果：经补充后15只兔进入结果分析。Westem blot结果显示腹主动脉α-平滑肌肌动蛋白的表达对照组比正常饮食组低55，4％，辛伐他汀组比对照组低28．7％（P〈0．05）。 结论：辛伐他汀可能对平滑肌细胞的表型转化有干预作用，阻止或减少支架植入术后收缩型平滑肌细胞向合成型平滑肌细胞的转化，从分子生物学的一个侧面支持了辛伐他汀对新生内膜平滑肌细胞有抑制作用。     

川芎嗪对兔血管平滑肌细胞增殖及c-fos和c-myc基因表达的影响

目的:观察川芎嗪对血管平滑肌细胞(VSMC)增殖及c-fos、c-myc基因表达的影响.方法:对高脂诱导动脉粥样硬化模型兔体外培养的主动脉VSMC增殖模型应用3H-TdR掺入、流式细胞仪和cDNA探针原位杂交方法观察川芎嗪对VSMC增殖和c-fos、c-myc基因表达的影响.结果:川芎嗪可显著抑制兔VSMC增殖,使处于G1期的VSMC显著增多,S期和G2+M期的细胞减少;同时抑制VSMC中c-fos和c-myc基因的表达.结论:川芎嗪对VSMC增殖有显著抑制作用,其机制可能与抑制VSMC中c-fos和c-myc基因表达有关.     

大黄素对IL-1β诱导血管平滑肌细胞增殖的影响及机制研究

[目的]观察大黄素对IL-1诱导下血管平滑肌细胞增殖的影响并探讨其作用机制.[方法]将IL-1β作用于平滑肌细胞,并用大黄素进行干预,实验设置对照组、IL-1β组、大黄素干预组.MTT法检测各组细胞的增殖能力;流式细胞术检测各组细胞的周期变化;RT-PCR检测各组细胞PCNA、CyclinD1 mRNA的表达;Western blot检测各组细胞PCNA、CyclinD1蛋白的表达以及JAK2、STAT 3的磷酸化情况.[结果]与对照组相比IL-1β组细胞的增殖能力显著增加(P＜0.01),与IL-1β组相比大黄素干预组细胞的增殖能力显著降低(P＜0.01).IL-1β组S期细胞所占比例(50.71±4.17)％,显著高于对照组(30.91±2.04)％(P＜0.01).大黄素干预组S期细胞所占比例(32.34±4.35)％,显著低于IL-1β组(P＜0.05),同时其G0～G1期细胞所占比例(48.83±4.55)％显著高于IL-1β组的(33.88±1.67)％(P ＜0.01).与对照组相比IL-1β组PCNA、CyclinD1 mRNA以及蛋白的表达都显著升高(P ＜0.01),而大黄素干预组PCNA、CyclinD1 mRNA以及蛋白的表达显著低于IL-1β组(P ＜0.05).与对照组相比IL-1β组JAK2、STAT3蛋白磷酸化程度显著增加(P＜0.05),与IL-1β组相比大黄素干预组JAK2、STAT 3蛋白磷酸化程度显著降低(P＜0.05).[结论]大黄素能够抑制IL-1β诱导的血管平滑肌细胞增殖,并且其抑制作用与JAK2/STAT 3信号通路的阻断有关.     

辛伐他汀抑制兔腹主动脉支架植入后α-平滑肌肌动蛋白的转化

目的:观察辛伐他汀对支架植入术后兔腹主动脉平滑肌细胞增殖、移动和凋亡的影响。方法:实验于2003-02/12在河南省人民医院心内科实验室及河南省分子医学重点学科开放实验室进行。取15只健康的新西兰雄性大白兔,数字表法随机分为正常饮食组、对照组和辛伐他汀组3组(n=5)。正常饮食组饲以正常饲料,其他2组饲以含15g/L胆固醇的高脂饲料,高脂喂养3d后行腹主动脉内皮剥脱术。术后第10周高脂饮食的10只兔行腹主动脉二维超声、彩色多普勒、脉冲多普勒观察。一旦超声检查证实腹主动脉形成≥50%狭窄,辛伐他汀组即开始服用辛伐他汀(商品名舒降之,杭州默沙东制药有限公司)5mg/d,15d后对照组和辛伐他汀组在数字减影引导下在狭窄部位植入支架。行支架植入术30d后取腹主动脉含支架段血管,做Westernblot分析,检测收缩型平滑肌细胞分化标志物α-平滑肌肌动蛋白在3组表达的变化。结果:经补充后15只兔进入结果分析。Westernblot结果显示腹主动脉α-平滑肌肌动蛋白的表达对照组比正常饮食组低55.4%,辛伐他汀组比对照组低28.7%(P<0.05)。结论:辛伐他汀可能对平滑肌细胞的表型转化有干预作用,阻止或减少支架植入术后收缩型平滑肌细胞向合成型平滑肌细胞的转化,从分子生物学的一个侧面支持了辛伐他汀对新生内膜平滑肌细胞有抑制作用。     

兔血管平滑肌细胞在低剂量电离辐射后的分子生物学变化

目的:观察体外培养的兔动脉平滑肌细胞(smoothmusclecells,SMCs)对γ射线照射的分子生物学机制。方法:取新西兰白兔(n=2)SMCs培养至第5～7代,对静止期SMCs分别给予γ射线2.5,5.0,10.0,20.0及30.0Gy一次性照射后继续培养4,24或72h。通过原位杂交方法观察γ射线对SMCs的c-fos与p53基因表达的影响。结果:低剂量γ射线照射后早期(4h左右)SMCsc-fosmRNA表达减少,p53mRNA表达增加,而高剂量γ射线照射及低剂量γ射线照射24h及72h时c-fos与p53基因表达无明显变化。结论:SMCs在低剂量电离辐射后,早期发生了c-fos与p53基因改变,c-fos与p53基因的改变可能参与了γ射线抑制SMCs的增殖过程。     

血管平滑肌细胞功能调节中血管紧张素1型受体表达和生物学作用的变化

目的:探讨血管平滑肌细胞(vascularsmoothmusclecell,VSMC)转染表达血管紧张素II(angiotensinII,AngII)2型受体(angiotensinIItype2receptor,AT2R)后其1型受体(angiotensinIItype1receptor,AT1R)表达所受的影响。方法:用同源重组方法构建带AT2R基因的重组复制缺陷型腺病毒载体(AdCMV-AT2R),体外转染VSMC,分别用流式细胞仪检测AT1R、AT2R细胞转染表达率、用免疫组织化学法和免疫荧光法检测其膜表达、以反转录聚合酶链式反应法(RT-PCR)和蛋白印迹法检测其mRNA和蛋白表达。结果:AdCMV-AT2R转染后,随着转染表达时间延长,AT2R细胞表达率呈显著增加趋势,48h最高表达率达89.51%,AngII作用与否及不同浓度AngII作用对AT2R表达无显著影响。而转染前后AT1R表达相对较稳定,受不同浓度AngII作用,其表达明显呈增加趋势。AT2R峰值表达时,免疫组织化学法和免疫荧光法检测其膜表达结果也提示AT2R表达随转染表达时间延长显著增加,转染前后AT1R表达无明显变化,在一定浓度范围内,AngII刺激对AT2R表达无显著影响,却显著增加AT1R的膜表达。RT-PCR法和蛋白印迹法检测AT1R和AT2R的mRNA和蛋白表达结果与其细胞表达率和膜表达的检测结果相一致。结论:AT2R转染表达并发挥其生物学作用时,对AT1R的表达无明显影响,VSMC转染表达AT2R后,     

白细胞介素1对加压素介导期高血压患者血管平滑肌细胞增殖肥大的调节作用

目的:研究白细胞介素1(interleukin-1,IL-1)对加压素(argininevaso-pressin,AVP)介导高血压者和血压正常者动脉血管平滑肌细胞(vascularsmoothmusclecell,VSMC)的一氧化氮合酶(nitric-oxidesyn-thase,NOS)活性和一氧化氮(nitricoxide,NO)含量、细胞数量、每细胞蛋白质含量、细胞周期、细胞增殖指数(proliferationindex,PI)的影响。方法:选择因胃癌住院的患者10例,收缩压≥160mmHg(1mmHg=0.133kPa)或舒张压≥90mmHg,原发性高血压史长达5年以上。术中取出肠系膜动脉2.0～2.5cm,剥除动脉的内外膜。按组织块法进行体外培养,实验用3～5代。结果:①在AVP作用下,高血压组VSMC的NO含量、NOS活性低于对照组(t=-8.79,3.96;P均<0.05)。②在AVP作用下,高血压组动脉VSMC的S期的百分率、PI、细胞数量、每细胞蛋白质含量均高于对照组(t=-30.013～2.547;P均<0.05)。③在AVP+IL-1联合作用下,高血压组VSMC的NO含量、NOS活性低于对照组(t=-8.79,8.96;P均<0.05)。④在AVP+IL-1联合作用下,高血压组动脉VSMC的S期的百分率、PI、细胞数量、每细胞蛋白质含量均高于对照组(t=-30.527～7.359;P均<0.05)。结论:①IL-1不能完全纠正患者VSMC的NOS活性低下的缺陷。②IL-1不能完全拮抗AVP的促VSMC的增殖肥大的作用。     

淀粉样β蛋白（1-40）诱导血管平滑肌细胞损伤与利福平的保护效应

目的:采用淀粉样β蛋白诱导种植在人工基底胶上的血管平滑肌细胞损伤,观察利福平对血管平滑肌细胞的保护作用。方法:实验于2005-09/2006-09在武汉协和医院神经科实验室进行。①实验材料:100～150g清洁级SD大鼠;淀粉样β蛋白(1-40)(北京博奥森生物工程公司);利福平(华北制药厂)。②实验干预及分组:体外培养大鼠颈动脉平滑肌细胞;实验前所有的细胞培养板孔底经人工基底胶预处理。实验分为2组,实验组细胞培养板孔底沉积淀粉样β蛋白(1-40),对照组细胞培养板孔底无淀粉样β蛋白(1-40)沉积,实验组和对照组根据利福平终浓度不同分别分为7组(0,0.1,1,2,5,10,20g/L)。③实验评估:在显微镜下观察给药前后平滑肌细胞的形态学变化,用四甲基偶氮唑盐比色实验检测平滑肌细胞活性,依据乳酸脱氢酶漏出率检测平滑肌细胞膜的损伤程度。结果:①血管平滑肌细胞形态学变化:对照组内不同浓度利福平下细胞形态均基本正常,实验组细胞形态均异常,但经利福平处理后均有改善,并成剂量依赖关系。②细胞活性:对照组内四甲基偶氮唑盐染色吸光值无明显变化,实验组四甲基偶氮唑盐染色吸光值下降但经利福平处理也呈剂量依赖性上升。③乳酸脱氢酶漏出率:对照组中乳酸脱氢酶漏出率在利福平低浓度时无改变,高浓度时有所增加;实验组中乳酸脱氢酶漏出率均增加,在利福平浓度≤2g/L时,随利福平浓度增加,成剂量依赖关系的下降;在利福平浓度>2g/L时,乳酸脱氢酶漏出率又开始增加。结论:利福平在一定浓度范围内对淀粉样β蛋白(1-40)诱导的大鼠血管平滑肌细胞损伤有保护作用。     

渥曼青霉素阻断罗格列酮对人巨噬细胞酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶-1表达的影响

目的:研究过氧化体增殖物激活型受体-γ(peroxisome proliferator activated receptors-γ,PPAR-γ)配体罗格列酮对巨噬细胞酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶-1(Acyl-CoA:cholesterol acyltransferase-1,ACAT-1)表达的影响及可能机制。方法:在RPMI 1640培养基中培养人单核细胞株(THP-1),加入佛波酯培养48h,细胞贴壁呈巨噬细胞样分化。将细胞分为空白对照组、不同浓度罗格列酮组和罗格列酮 渥曼青霉素(wortmannin)组,运用实时定量PCR和Western blot,观察巨噬细胞ACAT-1 mRNA和蛋白表达水平的变化。结果:罗格列酮可明显抑制ACAT-1 mRNA和蛋白的表达,且呈浓度依赖性;加入磷酯酰肌醇三磷酸激酶(phosphate dylinositol 3-kinase,PI3K)信号途径抑制剂渥曼青霉素后ACAT-1表达较罗格列酮组高,较空白对照组低。结论:PPAR-γ配体罗格列酮通过PI3K途径抑制ACAT-1表达发挥其抗动脉粥样硬化的作用。     

Na+/H+交换器-1抑制诱导大鼠肺动脉平滑肌细胞凋亡的可能机制

背景肺动脉平滑肌细胞( pulmonary artery smooth muscle cells,PASMC)的增殖在缺氧肺动脉高压肺血管重构中起重要作用.解放军第三军医大学附属新桥医院全军呼吸研究所在前期实验中通过构建 Na+ /H+交换器- 1( sodium/proton exchanger isoform-1, Na+ /H+ exchanger isoform-1, Na+ /H+ antiporter isoform-1, NHE-1)特异性核酶基因逆转录病毒载体,转染入体外培养的大鼠 PASMC内表达,发现 NHE-1抑制可诱导细胞内酸化而抑制 PASMC增殖,并促进其凋亡.但这种促凋亡作用是通过什么途径来完成,尚不清楚.目的探讨 Bcl-2、 Bax蛋白表达在 NHE-1抑制而诱导大鼠 PASMC凋亡中的作用.设计分组对照实验.地点和材料实验在解放军第三军医大学附属新桥医院全军呼吸内科研究所完成.转染表达 NHE-1特异性核酶基因的体外培养大鼠 PASMC( PRZ细胞)、转染 PLXSN空载体的大鼠 PASMC( PX细胞)、未处理大鼠 PASMC细胞( PA细胞)为前期实验所制备.干预已构建 NHE-1特异性核酶基因逆转录病毒载体,转染入体外培养的大鼠 PASMC内表达,同时转染 pLXSN空载体入另一组大鼠 PASMC内,后者与未转染的大鼠 PASMC细胞为对照组.用荧光指示剂( Fura-2/AM)测定法检测转染 NHE-1特异性核酶基因的大鼠 PASMC内 Ca2+( [Ca2+ ]i)变化; RT-PCR方法检测细胞内 Bcl-2和 Bax mRNA表达变化,免疫组化法检测细胞内 Bcl-2和 Bax蛋白表达变化.主要观察指标①转染 NHE-1特异性核酶基因的大鼠 PASMC内 Ca2+( [Ca2+ ]i)变化.②细胞内 Bcl-2和 Bax mRNA表达变化.③细胞内 Bcl-2和 Bax蛋白表达变化.结果转染 NHE-1特异性核酶基因后,大鼠 PASMC内 [Ca2+ ]i显著升高,细胞内 [Ca2+ ]i在 PA细胞 [(95.94± 6.39) nmol/L]与 PX细胞 [(98.08± 7.37) nmol/L]之间差异无显著性意义( P 》0.05),而 PRZ细胞 [(198.08± 16.59) nmol/L]显著高于 PA细胞及 PX细胞 , 差异有显著性意义( P《 0.001).Bcl-2 mRNA及蛋白表达显著降低( PA细胞、 PX细胞、 PRZ细胞的平均积分光密度分别为 2.21± 0.18, 2.09± 0.30, 1.45± 0.20), Bax mRNA和蛋白表达显著增加( PA细胞、 PX细胞、 PRZ细胞的 ABax/Aβ-actin分别为 0.17± 0.02, 0.23± 0.06, 0.59± 0.08).结论 NHE-1抑制诱导的 PASMC凋亡与 [Ca2+ ]i增加、 Bcl-2表达降低及 Bax表达增加有关.     

非小细胞肺癌组织中溶血卵磷脂胆碱酰基转移酶1表达与临床病理特征及预后的关系

目的 观察非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者癌组织溶血卵磷脂胆碱酰基转移酶1(lysophosphatidylcholine acyltransferase 1,LPCAT1)的表达情况,探讨其与临床病理特征及预后的关系.方法 97例NSCLC患者,取手术切除的癌组织和...     

血管回声跟踪技术评价动脉粥样硬化和高胆固醇血症兔模型动脉僵硬度的实验研究

目的血管回声跟踪(ET)技术评价动脉粥样硬化和高胆固醇血症兔腹主动脉僵硬度的研究。方法52只新西兰兔随机分为对照组1、高胆固醇血症组、对照组2和动脉粥样硬化组,以普通或高胆固醇饲养建立相应的模型。导管测量兔股动脉血压。在基础点和模型建立后,取兔左肾动脉起始部远心端约1.5~2cm处的腹主动脉长轴切面,ET技术检测动脉僵硬度。结果动脉粥样硬化组腹主动脉弹性系数(Eρ)和硬度指数(β)较对照组高(P<0.01),动脉顺应性(AC)差异无显著意义(P>0.05)。高胆固醇血症组和对照组之间Eρ、β及AC差异均无显著性意义(P>0.05)。Eρ与血管舒张期内径及低密度脂蛋白(LDL-C)呈正相关(P<0.05),β及AC则否。Eρ、β及AC与收缩压、舒张压、心率、血管收缩期内径、血糖(GLU)、血清胆固醇(CH)、血清甘油三脂(TG)及高密度脂蛋白(HDL-C)均不相关(P>0.05)。结论动脉粥样硬化兔模型腹主动脉僵硬度增高,高胆固醇血症兔则否。僵硬度指标中,Eρ和β敏感性较高,AC则否。     

恒磁场对血管紧张素Ⅱ作用下人血管平滑肌细胞分泌与表达单核细胞趋化蛋白-1的影响

目的:观察不同强度恒磁场对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)作用下人血管平滑肌细胞(vascularsmoothmusclecells,VSMC)分泌与表达单核细胞趋化蛋白-1(monocytechemoattractantprotein-1,MCP-1)的影响。方法:采用体外培养第4～6代的人脐动脉VSMC,实验分为6组,即对照组、AngⅡ(1×10-6mol/L)组及AngⅡ+不同磁感应强度(1,5,10,50Gs)的恒磁场组。各组细胞于培养及恒磁场作用24h后收集标本,用酶联免疫吸附试验(enzyme-linkedimmunoadsordentassay,ELISA)检测MCP-1的分泌量,免疫细胞化学检测MCP-1的蛋白表达。结果:AngⅡ1×10-6mol/L刺激VSMC24h,MCP-1的分泌量显著增高(P<0.05);而1,5,10,50Gs恒磁场组细胞MCP-1的分泌量显著低于AngⅡ组(F=752.89,P<0.05)。AngⅡ1×10-6mol/L与VSMC孵育24h后,MCP-1的表达显著增加(P<0.05和对照组);而1,5,10,50Gs恒磁场组MCP-1的表达显著低于AngⅡ组(F=238.26,P<0.05)。结论:1～50Gs的恒磁场可拮抗AngⅡ的作用,抑制VSMC分泌与表达MCP-1。