肾移植受者T细胞亚群绝对计数动态监测对感染的预警作用

目的探讨长期监测T细胞亚群绝对计数水平对肾移植受者术后感染的预警作用。 方法回顾性分析2017年1月至2021年5月在上海交通大学医学院附属瑞金医院26例行肾移植术后新发感染受者临床资料(感染组,感染发生在移植后1～240个月)。选择129例同期肾移植术后无感染、健康受者作为对照组。感染组连续或定期测量外周血T细胞亚群CD3^＋、CD4^＋和CD8^＋绝对计数,并与对照组检测数据进行比较。根据移植后采样时间将感染组和对照组各分为6个亚组,分析感染亚组与其相应对照亚组之间T细胞亚群绝对计数的差异。正态分布计量资料采用两独立样本t检验和单因素方差分析比较,非正态分布计量资料采用Mann-Whitney U检验比较,计数资料采用χ²检验比较。使用受试者工作特征(ROC)曲线分析T细胞亚群绝对计数在肾移植术后预警感染性疾病的最优值。P<0.05为差异有统计学意义。 结果感染组和对照组受者CD4^＋/CD8^＋比值分别为(1.2±0.5)、(1.3±0.6),差异无统计学意义(t＝0.610,P>0.05)。感染组受者CD3^＋、CD4^＋和CD8^＋ T细胞绝对计数[(367±212)、(189±117)和(161±92)个/μL]均低于对照组[(1 374±663)、(695±334)和(626±377)个/μL],差异均有统计学意义(t＝14.036、13.541和12.311,P均<0.05)。CD3^＋、CD4^＋和CD8^＋ T细胞绝对计数在6个感染亚组受者中差异均无统计学意义(P均>0.05)。对照亚组1受者CD3^＋、CD4^＋和CD8^＋ T细胞绝对计数均低于对照亚组5,差异均有统计学意义(P均<0.05)。CD4^＋、CD8^＋和CD3^＋绝对计数预测肾移植术后感染性疾病最优截断值分别为712、362和255个/μL,敏感度分别为94.6%、92.2%和96.1%,特异度分别为92.3%、96.2%和88.5%。 结论肾移植受者低T细胞亚群绝对计数水平具有预示及预警感染风险的作用。     

与大鼠胰岛细胞联合移植的骨髓间充质干细胞的免疫调节作用

目的 研究同种异体或自体的大鼠骨髓间充质干细胞(MSC)与胰岛肝内联合移植对胰岛移植物的免疫调节作用及其机制.方法 以链佐星制备Lewis大鼠的糖尿病模型,作为胰岛移植受者,分为3组:单纯移植组大鼠经门静脉单独移植SD大鼠胰岛6000 IEQ/kg;同系MSC组大鼠经门静脉共同移植1×109/L的Lewis大鼠MSC 1 ml与SD大鼠胰岛6000 IEQ/kg;同种MSC组大鼠经门静脉共同移植1×109/L的SD大鼠MSC 1 ml与SD大鼠胰岛6000 IEQ/kg.检测受鼠的血糖变化,术后1、3 d大鼠外周血γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-2、IL-4和IL-10的含量.结果 3组大鼠术后第1天血糖均下降到13.9 mmol/L以下.同系MSC组移植物存活时间为(11.38±4.03)d,同种MSC组为(5.50±2.07)d,单纯移植组为(2.88±1.25)d(P＜0.01).术后1、3 d,单纯移植组IFN-γ和IL-2的含量显著高于同系MSC组和同种MSC组(P＜0.01),同种MSC组IFN-γ和IL-2的含量高于同系MSC组(P＜0.05);单纯移植组IL-10的含量低于同系MSC组和同种MSC组(P＜0.01),同系MSC组IL-10的含量与司种MSC组相比较,差异无统计学意义(P＞0.05);各组IL-4含量的差异无统计学意义(P＞0.05).结论 MSC与同种胰岛共移植可以延长胰岛移植物存活时间,应用同系MSC的效果优于同种异体MSC.共移植的MSC主要通过减少TH1类细胞因子(IFN-y和IL-2)的表达使受者TH1/TH2平衡向TH2方向偏移.

Abstract：

Objective To compare the immune regulation of syngenic and allogenic mesenchymal stem cells (MSCs) in the transplantation combined with islets. Methods After induction of diabetes in 30 Lewis rats with streptozotocin (STZ), the recipient Lewis rats received islets from SD rats combined with syngenic (group B) or allogenic (group C) MSCs injection via the portal vein. The group of islets transplanted alone served as control (group A). The survival time of grafts in all groups was assessed by the level of blood glucose. ELISA was used to detect the levels of interferon-γ (IFN-γ), interleukin 2 (IL-2), IL-4 and IL-10 in the peripheral blood on the 1st and 3rd day after transplantation. Results The blood glucose levels in all three groups were decreased in a normal range (13. 9 mmol/L) and the survival time of grafts in group B (11.38 ± 4. 03 days) was significantly longer than in group C (5. 50± 2. 07 days) as well as group A (2. 88 ± 1.25 days). On the 1 st and 3rd day after transplantation, the levels of TH 1 cytokines IFN-γ and IL-2 in group A were significantly higher than in groups C and B (P＜0.05). Meanwhile the levels of TH 2 cytokine IL-10were increased in group B, but there was no significant difference between groups A and C (P＞0.05). The levels of IL-4 had no significant difference among these three groups (P ＞ 0.05).Conclusion Islet transplantation combined with MSCs could prolong the survival time of grafts.Syngenic MSCs, superior to allogenic ones, were more effective in changing the balance of TH1/TH2to TH2. Decreased expression of TH1 cytokine (IFN-γ, IL-2), which was closely related to the induction of immune tolerance, was beneficial to the long-term survival of grafts.     

抗原特异性CD4+CD25+T细胞对同种异体胰岛移植影响及作用机制研究

目的:探讨抗原特异性CD4+CD25+Treg细胞免疫对同种异体胰岛急性移植排斥反应的影响和机制。方法:用MACS分选供体抗原特异性CD4+CD25+Treg细胞免疫糖尿病BALB/cByJ受体小鼠，以ICR小鼠胰岛为供体行同种异体胰岛移植。观察移植后小鼠的存活时间、移植前后外周血CD4+和CD8+T细胞亚群的变化和移植物中Th1/Th2细胞因子mRNA表达水平的变化。结果:抗原特异性Treg细胞联合胰岛移植组(C组)胰岛移植物平均生存期为(34.57±17.15)d，显著长于单纯胰岛移植组(B组)的(10.6±1.82) d (P<0.01)；移植后第3天，C组外周血CD4+/CD8+的值显著低于B组(P<0.01)；C组移植物中IL-10,TGF-β mRNA表达比B组显著增强。B组移植物中IL-1β，IL-2及IFN-γ mRNA表达明显强于C组。结论:抗原特异性CD4+CD25+ Treg细胞可通过调节Th2/Th1之间的反应平衡而延长同种异体胰岛移植物的存活时间。     

新生猪Sertoli细胞与大鼠胰岛细胞联合移植延长大鼠移植胰岛的存活时间

目的 探讨新生猪Sertoli细胞(NPSCs)与大鼠胰岛细胞联合移植对延长大鼠同种异体胰岛移植物存活时间的作用及其主要的机制.方法 将糖尿病Wistar大鼠随机分为3组.(1)单纯移植组(n=6):单纯移植1500个胰岛当量(IEQ)的SD大鼠胰岛细胞至糖尿病大鼠的左肾包膜下;(2)分侧移植组(n=4):将1500个IEQ的SD大鼠胰岛细胞移植到糖尿病大鼠的左肾包膜下,同时将1×10~7个NPSCs移植到糖尿病大鼠的右肾包膜下;(3)混合移植组(n=6):将1500个IEQ的SD大鼠胰岛细胞和1×10~7个NPSCs混合移植到糖尿病大鼠的左肾包膜下.移植后每天监测各组的血糖水平,以了解移植物的存活时间;移植后发生排斥反应时获取移植物标本,行HE和免疫组织化学染色,观察移植物中CD3~+T淋巴细胞浸润情况及细胞凋亡调控基因(Bcl-2)和血红素氧合酶1(HO-1)基因的表达水平.结果 单纯移植组、分侧移植组和混合移植组胰岛移植物存活时间分别为(5.7±1.0)d、(5.3±0.5)d和(16.3±1.4)d,混合移植组存活时间较其他两组显著延长(P<0.05).单纯移植组移植区可见大量淋巴细胞浸润,主要为CD3+T淋巴细胞;混合移植组移植区Bcl-2基因呈高表达;各组移植区HO-1基因均有表达,差异不明显.结论 NPSCs与大鼠胰岛细胞联合移植可以延长大鼠同种异体胰岛移植物的存活时间,其机制可能与NPSCs抑制移植物淋巴细胞浸润、促进Bcl-2基因高表达的局部免疫调节作用有关.     

第三方脐血细胞辅助输注对小鼠单倍型造血干细胞移植后造血重建的影响

目的分析以脐血细胞作为第三方细胞辅助输注对小鼠单倍型造血干细胞移植后造血重建的影响。 方法以CB6/F1雄性小鼠为供鼠,以BALB/C小鼠为受鼠。受鼠经Co60全身照射清髓后回输供鼠干细胞,建立单倍型造血干细胞移植模型。将40只受鼠分为对照组和实验组,每组各20只,对照组受鼠回输供鼠干细胞,实验组受鼠回输供鼠干细胞＋脐血单个核细胞。于移植后＋7 d、＋14 d、＋21 d、＋28 d和＋50 d对存活受鼠进行断尾采血,检测白细胞、血红蛋白和血小板,分析造血重建情况。处死小鼠时取外周血1 mL,采用荧光原位杂交技术检测Y染色体比例,计算嵌合率。两组受鼠各时间点白细胞、血红蛋白及血小板检测结果采用成组t检验进行比较,嵌合率采用卡方检验进行比较。P<0.05为差异有统计学意义。 结果移植后＋14 d实验组和对照组白细胞数量分别为(8.4±2.6)×10⁹/L和(3.8±1.0)×10⁹/L,差异有统计学意义(t＝6.968,P<0.05);其他时间点两组白细胞数量差异无统计学意义。移植后两组受鼠各时间点血红蛋白检测结果差异均无统计学意义。移植后＋7 d实验组和对照组血小板数量分别为(125±40)×10⁹/L和(64±15)×10⁹/L,移植后＋14 d分别为(282±47)×10⁹/L和(163±41)×10⁹/L,差异均有统计学意义(t＝6.366和8.093,P均<0.05);其他时间点两组血小板数量差异无统计学意义。 结论使用脐血细胞作为第三方细胞辅助输注后,可促进单倍型造血干细胞移植受鼠早期白细胞和血小板较快恢复。     

抗CD40L单克隆抗体在异种胰岛移植排斥反应中的作用

目的 探讨抗CD40L单克隆抗体在异种胰岛移植排斥反应中的作用及其机理.方法 建立人-大鼠异种胰岛移植模型,用抗CD40L单克隆抗体进行干预治疗,观察糖尿病大鼠行异种胰岛移植后的血糖变化,糖尿病大鼠和移植物的生存情况及移植物病理形态学改变,采用 ELISA法检测糖尿病大鼠细胞因子IL-2和TNF-α水平的变化.结果 ①全部糖尿病大鼠在胰岛移植后第(2.3±0.2) d血糖降至正常,对照组血糖在移植后第(8.1±0.6) d开始明显升高,治疗组血糖在移植后第(18.5±1.2) d开始明显升高,明显晚于对照组(P＜0.01).②治疗组移植物存活时间[(22±8.2) d]较对照组[(10±2.1) d]显著延长(P＜0.01).③糖尿病大鼠生存时间,治疗组[(35±6.5) d]显著长于对照组[(21±5.7) d ],P＜0.05.④对照组在移植后第(3.2±0.3) d IL-2及TNF-α的水平均急剧上升,至移植后第(7.3±0.5) d达到高峰; 治疗组IL-2及TNF-α的水平在移植后第(22.6±1.7) d开始明显上升,至移植后第(28.5±2.2) d达到高峰,明显晚于对照组(P＜0.01).结论 抗CD40L单克隆抗体可抑制异种胰岛移植的排斥反应,延长受体大鼠和移植物的存活时间.     

青藤碱对同种异体胰岛刺激淋巴细胞的免疫抑制作用

目的研究青藤碱(SIN)对同种异体胰岛刺激淋巴细胞的免疫抑制作用以及对胰岛活性和功能的影响。 方法以Wistar大鼠胰岛作为刺激原,Lewis大鼠脾淋巴细胞作为反应细胞体外共同培养,分为4组：SIN组为SIN＋胰岛＋淋巴细胞共培养;他克莫司(Tac)组为Tac＋胰岛＋淋巴细胞共培养;阴性对照组为胰岛＋淋巴细胞共培养;空白对照组为单纯淋巴细胞培养。四甲基噻唑蓝法检测各组淋巴细胞增殖情况,ELISA法检测上清液细胞因子(IFN-γ、IL-2、IL-10)浓度以及胰岛素分泌量,吖啶橙－碘化丙啶染色检测胰岛细胞活性。采用单因素方差分析比较4组混合淋巴细胞培养后OD值、细胞增殖率、上清液细胞因子浓度、胰岛素分泌量及胰岛素刺激指数等指标,采用LSD法进行组间两两比较。 结果混合淋巴细胞培养第3天,阴性对照组、SIN组、Tac组和空白对照组OD值分别为0.524±0.048、0.438±0.032、0.429±0.037、0.327±0.026;SIN组OD值低于阴性对照组、高于空白对照组,差异均有统计学意义(P均<0.05),但与Tac组相比差异无统计学意义(P>0.05)。计算淋巴细胞增殖率SIN组和Tac组分别为(33.9±2.8)%、(33.2±3.0)%,均低于阴性对照组(P均<0.05),但SIN组和Tac组差异无统计学意义(P>0.05)。SIN组上清液IFN-γ、IL-2浓度分别为(67±6)、(322±21) pg/mL,均低于阴性对照组,高于空白对照组(P均<0.05),但与Tac组差异无统计学意义(P>0.05);IL-10浓度为(76±4) pg/mL,高于其他3组,差异均有统计学意义(P均<0.05)。SIN组高糖及低糖刺激下胰岛素分泌量分别为(14.7±2.1)、(8.3±1.2) mU/L,计算胰岛素刺激指数为1.73±0.24,胰岛细胞存活率为(82.5±4.7)%,均优于Tac组和阴性对照组(P均<0.05)。 结论SIN对同种异体胰岛刺激的淋巴细胞具有免疫抑制作用,同时可减轻胰岛免疫损伤;与他克莫司相比,能更好地保持胰岛细胞活性及分泌功能。     

肝星状细胞对同种异体胰岛移植物的保护作用

目的 研究小鼠肝星状细胞对同种异体胰岛移植物的保护作用.方法 将糖尿病小鼠随机分为三组,分别为糖尿病组、单纯胰岛移植组及与肝星状细胞共同移植组.单纯移植组于肾被膜下移植入同种异体胰岛300个;共同移植组移植入肝星状细胞(3×105个)与同种异体胰岛(300个)混合物.分别于移植术后监测受体小鼠血糖值及正常血糖维持时间;血糖正常一周后移植组及糖尿病组小鼠分别采血检测血清中TGF-β,TNF-α,IL-1β,IFN-γ的含量,同时取出移植物进行免疫组织化学检测.结果 术后共同移植组受体正常血糖维持时间为(23.75±8.96)d,单纯胰岛移植组受体正常血糖维持时间为(11.9±6.92)d,差异有统计学意义(P<0.05);三组受体血清中TNF-α、IL-1β、IFN-γ含量差异无统计学意义(P>0.05),共同移植组受体血清中TGF-β含量为(2292.31±5.87)pg/ml,单纯移植组为(1246.55±38.91)pg/ml,两组比较差异有统计学意义(P<0.05);病理学结果显示共同移植组胰岛素表达量大,并且在移植物周围有生物包膜形成.结论 在同种异体移植模型中,肝星状细胞可能通过高分泌TGF-β、局部形成包囊等方式保护胰岛移植物并延长其存活时间.     

基因转移CTLA4-Ig和抗CD154抗体在异种胰岛移植排斥反应中的作用

目的 探讨基因转移细胞毒性T细胞相关抗原4免疫球蛋白(CTLA4-Ig)和抗T细胞分化群154(CD154)抗体在异种胰岛移植排斥反应中的作用及机理.方法 建立人-大鼠异种胰岛移植模型,用携带CTLA4-Ig基因的重组腺病毒感染移植胰岛细胞,并用抗CD154抗体进行治疗,观察糖尿病大鼠胰岛移植后血糖变化、生存情况及移植物病理形态学改变,检测移植物CTLA4-Ig、胰岛素的表达和移植大鼠白细胞介素2(IL-2)、肿瘤坏死因子(TNF)-α的水平变化.结果 (1)糖尿病大鼠移植后2 d血糖降至正常,对照组血糖平均在移植后8 d升高,抗体治疗组、转染组和联合治疗组血糖分别在18、25和36 d升高.(2)对照组、抗体治疗组、转染组和联合治疗组的移植物存活时间分别为(10.0±2.1)d、(22.0±8.2)d、(28.0±6.5)d和(37.0±9.3)d,各组间比较差异有统计学意义(P＜0.05);移植大鼠生存时间分别为(21.0±5.7)d、(35.0±6.5)d、(48.0±8.5)d和(65.0 ±12.5)d,各组间比较差异有统计学意义(P＜0.05).(3)对照组在移植后1周内,IL-2、TNF-α的水平均急剧上升,较移植前显著升高(P＜0.01).(4)各治疗组移植物见成片的胰岛细胞团,未见淋巴细胞浸润,转染组和联合治疗组移植物可见CTLA4-Ig和胰岛素的表达.结论 基因转移CTLA4-Ig和抗CD154抗体均可抑制异种胰岛移植排斥反应,二者联合效果优于单独使用.     

骨髓间充质干细胞移植途径对胰岛移植物免疫排斥反应的影响

目的:探讨骨髓间充质干细胞(MSC)与胰岛共移植对诱导胰岛移植物免疫耐受的作用,并比较MSC不同途径移植的效果。方法:SD大鼠和Lewis大鼠分别作为供、受体。取SD大鼠股骨,贴壁培养法分离和扩增MSC,胶原酶V分离胰岛。应用链脲佐菌素制备Lewis大鼠糖尿病模型后,将其随机均分为A组(将BrdU标记的MSC与胰岛经门静脉混合输入),B组(将胰岛经门静脉输入,BrdU标记的MSC经尾静脉输入),C组(胰岛经门静脉输入,联合应用环孢素A)和D组(单纯胰岛门静脉移植)。观察各组术后血糖变化,比较各组胰岛移植物存活时间。术后第7天切取各组部分存活大鼠肝脏、胸腺、脾脏行免疫组化染色观察MSC归巢位置。结果:A,B两组大鼠术后正常血糖维持时间最长,C组次之,D组最短;各组胰岛存活时间A组为(12.1±2.3)d,B组为(8.6±1.4)d,C组为(13.2±1.9)d,D组为(2.2±0.6)d;MSC归巢部位观察显示,A组BrdU阳性的MSC主要分布于肝脏,并在植入胰岛周围形成"类微囊化效应",B组BrdU阳性的MSC主要分布于胸腺、脾脏。结论:MSC与胰岛共移植能诱导胰岛移植物免疫耐受,且MSC和胰岛混合经门静脉移植效果优于胰岛门静脉移植联合MSC外周静脉移植。     

Revascularization and function of pancreatic islet isografts in diabetic rats following transplantation

In pancreatic islet transplantation, revascularization is crucial for the graft's survival and function. In this study, the endothelium of isolated islets and revascularization and function of islet isografts in diabetic rat were investigated. Islets were isolated from Lewis rats by collagenase digestion method and were examined using immunohistochemistry (CD31 stain) on days 0, 1, 3, and 7 after isolation. The number of CD31-positive cells in these isolated islets was counted (mean +/- SD %). Isografts (freshly isolated islets: group A, and islets cultured for 7 days: group B) transplanted in the renal subcapsule of streptozotocin-induced diabetic Lewis rats were examined using immunohistochemistry (CD31 stain) on days 3, 5, and 7 after transplantation. Intravenous glucose tolerance tests (IVGTT) were performed on days 3 and 7 after transplantation. The number of CD31-positive cells in the isolated islets on days 0, 1, 3, and 7 after isolation were: 17.3 +/- 4.1%, 8.2 +/- 0.7%, 2.1 +/- 0.8%, and 0.8 +/- 0.5%, respectively (p < 0.05). On day 5 after transplantation, CD31-positive cells were not detected in group A and B grafts, but were detected in both groups in periphery of the islets. On day 7, CD31-positive microvessels were present throughout the entire graft. IVGTT values in groups A and B on days 3 and 7 after transplantation did not show significant differences. In renal subcapsular isografts in diabetic rats, revascularization into islet grafts occurs from the surrounding host tissue 5 days after transplantation, but has no influence on the response to glucose during this period.     

宫颈上皮内病变患者人乳头状瘤病毒感染与Th17细胞、Treg细胞及相关细胞因子表达的相关性

目的探讨宫颈上皮内病变（CIN）患者人乳头状瘤病毒（HPV）感染与Th17细胞、Treg细胞及相关细胞因子表达的相关性。 方法选择2017年2月至2018年9月于新疆自治区人民医院就诊的CIN患者共140例进行回顾性分析,根据是否感染HPV分为感染组（86例）和非感染组（54例）,采用免疫组织化学方法比较两组患者T细胞CD3、CD4及CD8水平以及Treg和Th17的表达水平,采用流式细胞技术比较两组患者的外周血T细胞亚群含量（CD3⁺ T细胞、CD4⁺ T细胞、CD8⁺ T细胞的百分比）、Treg细胞和Th17细胞百分含量（CD4⁺CD25⁺ Treg、CD8⁺CD25⁺CD127^-Treg、CD4⁺Foxp3⁺ Treg、CD8⁺CD25⁺Foxp3⁺ Treg和CD4⁺IL17⁺Th17以及Th17/Treg比值）以及相关细胞因子[肿瘤坏死因子（TGF）-β、白细胞介素（IL）-10、IL-17和干扰素（IFN）-γ]含量的差异,应用多因素Logistic回归模型分析CIN患者感染HPV的危险因素。 结果免疫组织化学结果显示,两组患者CIN组织中T细胞CD3、CD4和CD8的表达水平差异无统计学意义,感染组患者CIN组织中T细胞抗-FOX3（Treg）和Th17表达水平显著高于非感染组。流式细胞术检测结果显示两组患者CD3⁺ T细胞、CD4⁺ T细胞、CD8⁺ T细胞百分比差异无统计学意义（t = 0.870、1.509、0.236;P = 0.385、0.133、0.813）,感染组患者CD4⁺CD25⁺ Treg、CD8⁺CD25⁺CD127^—Treg、CD4⁺Foxp3⁺ Treg、CD8⁺CD25⁺Foxp3⁺ Treg、CD4⁺IL17⁺ Th17以及Th17/Treg比值均显著高于非感染组（P均< 0.05）。感染组患者外周血TGF-β、IL-10和L-17均高于非感染组（t =－11.601、－42.251、－40.31,P均< 0.001）,而IFN-γ低于非感染组（t = 10.316、P < 0.001）。多因素Logistic回归分析显示,CD4⁺CD25⁺ Treg（OR = 3.673、P = 0.031）、CD4⁺IL17⁺Th17（OR = 1.974、P = 0.021）和Th17/Treg（OR = 3.585、P = 0.024）均为CIN患者感染HPV的危险因素,IFN-γ（OR = 0.612、P = 0.028）为CIN患者感染HPV的保护因素。 结论CIN患者HPV感染与Treg细胞、Th17细胞及IFN-γ因子存在相关性,HPV感染的CIN患者Treg和Th17细胞增高,IFN-γ降低。     

剖宫产产妇术后切口感染者血清炎性应激指标与应激激素和免疫应答的相关性

目的探讨剖宫产产妇术后切口感染者血清炎性应激指标与应激激素及免疫应答的相关性。 方法选取2015年12月至2017年12月于重庆市开州区人民医院行剖宫产并发术后切口感染产妇46例作为观察组，选取同期于本院行剖宫产但术后未出现切口感染的产妇116例作为对照组，分别采集两组产妇肘静脉血5 ml，离心后取其上清液，ELISA法检测血清白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1（IL-1）、白细胞介素-8（IL-8）、血管紧张素Ⅱ（AT-Ⅱ）、皮质醇（Cor）、胰岛素（INS）以及去甲肾上腺素（NE）含量。应用流式细胞仪检测CD16⁺CD25⁺ NK细胞、CD3⁺CD4⁺ T细胞和CD3⁺CD8⁺ T细胞含量；油镜下对免疫黏附促进因子（FEER）、直向肿瘤红细胞花环率（DTER）、免疫黏附抑制因子（FEIR）、肿瘤红细胞花环（ATER）和自然肿瘤红细胞花环率（NTER）计数。 结果观察组产妇血清IL-6、IL-1、IL-8及TNF-α含量均高于对照组，差异均有统计学意义（t = 9.057、6.432、8.746、15.072，P = 0.002、0.005、0.001、0.001）；观察组产妇血清CD16⁺CD25⁺ NK细胞、CD3⁺CD4⁺ T细胞含量低于对照组（t = 3.147、6.382，P = 0.026、0.001），血清CD3⁺CD8⁺ T细胞含量高于对照组（t = 10.453，P = 0.008）；Pearson相关分析显示，观察组产妇血清IL-8、IL-6、IL-1和TNF-α含量和血清CD3⁺CD8⁺ T细胞、FEIR含量呈正相关，与CD16⁺CD25⁺ NK、CD3⁺CD4⁺ T细胞、FEER、DTER、NTER、ATER、AT-Ⅱ、Cor、INS及NE含量呈负相关（P均< 0.05）。 结论剖宫产产妇术后切口感染可引起炎性因子过度分泌，而机体炎症反应的异常激活与应激激素分泌及免疫应答变化密切相关。     

泡状棘球蚴感染诱导免疫耐受的研究

目的 观察泡状棘球蚴感染对纯系大鼠异位移植心脏存活时间的影响并探讨发生机制.方法 建立Brwon norway(BN)大鼠到Lewis (LEW)大鼠的颈部异位心脏移植模型.对照组(n=12)以健康的LEW大鼠为受者;实验组(n=12)以感染泡状棘球蚴的LEW大鼠为受者.术后观察移植心的存活时间、组织病理学变化,测定血清内白细胞介素-4(IL-4)和y-干扰素(IFN-γ)水平.FACS 流式检测实验组和对照组大鼠脾内CD4+ CD25+调节性T细胞(CD4+ CD25+ Treg细胞)的数量水平.结果 实验组与对照组移植心的存活时间分别为(16.17±3.19)d及(7.92±1.93)d,两组差异有统计学意义(P＜0.05).实验组移植心的组织病理学分级(平均分级为3.38级)与对照组(平均分级为3.79级)比较,差异无统计学意义(P＞0.05).发生排斥反应后,实验组血清内IL-4水平为(152.21 ±45.62) ng/L高于对照组(50.85±22.15) ng/L,而实验组血清内IFN-γ水平为(12.35±1.02) ng/L水平低于对照组(42.63±4.15) ng/L,两组差异均有统计学意义(P ＜0.05);FACS流式检测结果提示实验组大鼠脾内CD4+ CD25+ Treg细胞数量为10.8％,高于对照组的6.1％,两组差异有统计学意义(P＜0.01).结论 泡状棘球蚴感染造成Th1/Th2向Th2类细胞因子偏移,通过介导CD4+ CD25+ Treg细胞数量增加而导致大鼠异位移植心脏存活时间延长,它可能是诱导移植免疫耐受的原因之一.     

手足口病患儿外周血CXC趋化因子配体10表达、T细胞及细胞因子与预后的相关性

目的检测手足口病（HFMD）患儿外周血中的CXC趋化因子配体10（CXCL-10）表达水平、T淋巴细胞亚群及相关细胞因子与HFMD患儿预后的相关性。 方法选取2016年4月至2017年5月徐州市儿童医院收治的HFMD患儿60例为研究对象,根据病情诊断标准分为重症组（10例）和轻症组（50例）;根据随访结果又分为预后良好组（58例）和预后不良组（2例）。选择同期体检正常婴幼儿52例为对照组。采用ELISA法检测两组研究对象外周血CXCL-10表达水平;采用流式细胞仪检测外周血T淋巴细胞亚群,采用ELISA法检测外周血中白细胞介素-17（IL-17）、IL-22、IL-23以及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平。 结果重症组患儿外周血CXCL10水平、IL-17、IL-22、IL-23和TNF-α水平显著高于对照组和轻症组患儿（P均< 0.001）。轻症组患者细胞因子CXCL-10、IL-17、IL-22、IL-23和TNF-α水平高于对照组（P均< 0.005）。重症组HFMD患儿外周血CD3⁺ T、CD4⁺ T、CD8⁺ T以及CD4⁺/CD8⁺淋巴细胞比例显著低于轻症组患儿和对照组（P均< 0.05）;轻症组患儿外周血CD3⁺ T、CD4⁺ T、CD8⁺ T、CD4⁺/CD8⁺淋巴细胞比例与对照组差异有统计学意义（P均< 0.05）;经Pearson相关系数分析,HFMD患儿外周血CXCL-10表达水平与T淋巴细胞亚群CD3⁺T、CD4⁺ T、CD8⁺ T、CD4⁺/CD8⁺表达水平均负相关（r =－0.609、－0.714、－0.514、－0.524,P = 0.014、0.023、0.001、0.006）,HFMD患儿外周血中IL-17、IL-22、IL-23和TNF-α水平与外周血CXCL-10水平正相关（r = 0.519、0.473、0.418、0.459,P = 0.002、0.006、0.009、0.007）;预后不良组患儿外周血CXCL-10表达水平显著高于预后良好组（t = 2.055、P = 0.044）,外周血CD3⁺ T、CD4⁺ T、CD8⁺ T淋巴细胞比例显著低于预后良好组,差异均有统计学意义（t = 2.508、P = 0.015,t = 3.830、P < 0.001,t = 2.222、P = 0.030）。 结论手足口病患者外周血CXCL-10、T淋巴细胞亚群检测对病情监测及判断预后有重要价值。     

清胰陷胸汤联合血液净化对重症急性胰腺炎患者临床疗效及免疫功能的影响

目的:探讨清胰陷胸汤联合血液净化对重症急性胰腺炎患者临床疗效及免疫功能的影响.方法:选取重症急性胰腺炎患者92例,依据随机数表法均分为观察组和对照组.两组均给予常规干预治疗,包括胃肠减压/禁食、抗感染、抑酸、抑制腺体分泌、维持水/电解质平衡、营养支持治疗,必要时给予经口气管插管机械通气.对照组在常规治疗基础上,给予连续...     

EV71感染手足口病患儿T细胞亚群表达

目的分析EV71感染手足口病患儿T细胞亚群的表达。 方法选取2015年10月至2017年10月于惠州市中心人民医院接受治疗的手足口病患儿共302例,其中EV71感染患儿110例,依据EV71感染患儿中枢神经有无被累及分成轻症组（69例）与重症组（41例）,选取同期于本院体检的健康儿童110例作为对照组;流式细胞仪对T淋巴细胞亚群CD3⁺、CD3⁺CD8^－、CD3⁺CD8⁺、CD3⁺CD8^－/CD3⁺CD8⁺、Th1、Th2、Th1/Th2、Tc1、Tc2、Tc1/Tc2、Th17、Tc17、调节性T淋巴细胞（Treg）及Th17/Treg所占比率进行检测,ELISA法检测各组对象血清内转化生长因子-β1（TGF-β1)、白细胞介素4（IL-4）、白细胞介素17A（IL-17A）及γ干扰素（IFN-γ）含量变化。 结果轻症组患儿血清Th1、Th1/Th2、Tc1和Tc1/Tc2所占比率为（9.59 ± 2.15）%、（8.67 ± 2.19）%、（28.82 ± 5.49）%和（56.39 ± 10.48）%,重症组分别为（13.58 ± 2.74）%、（9.45 ± 2.29）%、（40.46 ± 6.37）%和（54.87 ± 9.61）%,均显著高于对照组患儿,差异均有统计学意义（F= 12.159、11.470、13.925、10.542,P = 0.016、0.013、0.008、0.035）;轻症组患儿血清IFN-γ和IL-17A水平分别为（11.32 ± 2.76）pg/ml和（6.38 ± 2.10）pg/ml,重症组分别为（11.38 ± 2.65）pg/ml和（12.59 ± 3.58）pg/ml,均显著高于对照组患儿,差异均有统计学意义（F= 12.590、11.664,P = 0.024、0.019）。 结论EV71感染后手足口患儿机体内Th17/Treg与Th1/Th2比例失衡。