反复不明原因自然流产孕妇外周血单核细胞中lncRNASNHG5、KLF4表达及临床意义

目的：探讨反复不明原因自然流产(URSA)孕妇外周血单核细胞中长链非编码RNA(lncRNA)SNHG5、KLF4表达水平及临床意义。方法：选取2018年4月-2019年12月本院收治的URSA孕妇40例为流产组，正常妊娠要求人工流产孕妇40例为早孕组，健康非孕妇女40例为非孕组。测定外周血单核细胞中lncRNA SNHG5、KLF4表达水平，血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素4(IL-4)、IL-12水平。采用多因素logistic回归模型分析URSA发生相关因素。结果：非孕组、早孕组、流产组外周血单核细胞中lncRNA SNHG5 mRNA、KLF4 mRNA和蛋白表达，血清TNF-α、IL-4、IL-12水平均依次升高(均P<0.05)。外周血单核细胞中lncRNA SNHG5 mRNA、KLF4 mRNA和蛋白表达与血清TNF-α、IL-4、IL-12均呈正相关(均P<0.05)。异常高水平lncRNA SNHG5 mRNA、KLF4 mRNA和蛋白均为URSA发生的相关因素(P<0.05)。结论：URSA孕妇外周血单核细胞中lncRNA SNHG5...     

PEG10在不明原因复发性流产患者绒毛组织及配偶精子中的甲基化状态及表达情况

目的研究不明原因复发性流产(URSA)绒毛组织与配偶精子PEG10的甲基化水平及其蛋白和mRNA表达情况。方法收集2014年1月-2016年10月在广东医科大学附属医院生殖中心就诊的URSA患者100例为G2组,其配偶100例为G4组;早期妊娠自愿人工流产者100例为G1组,其配偶100例为G3组。免疫组化法及蛋白免疫印迹法检测PEG10印记基因的蛋白水平,RT-PCR法检测PEG10 mRNA水平。在所有队列中严格匹配URSA患者及配偶和早期妊娠自愿人工流产患者及配偶各3例,包括6份绒毛样本及6份精液样本行甲基化芯片检测PEG10的甲基化水平。结果 PEG10基因的DMR区平均甲基化水平在URSA绒毛组织和早期妊娠自愿人工流产绒毛组织间比较,差异有统计学意义(P0.05);PEG10基因的DMR区平均甲基化水平在URSA患者配偶精子和早期妊娠自愿人工流产患者配偶精子间比较,差异无统计学意义(P0.05)。免疫组化结果显示,PEG10在URSA绒毛组织的表达水平与早期妊娠自愿人工流产绒毛组织比较表达较弱。蛋白免疫印迹法结果显示,PEG10蛋白在URSA绒毛组织中的表达水平与早期妊娠自愿人工流产绒毛组织比较明显降低(P0.001)。RT-PCR法结果显示,PEG10mRNA在URSA绒毛组织中的表达水平与早期妊娠自愿人工流产绒毛组织比较明显降低(P0.001)。结论父本印记基因PEG10与胚胎早期的发育有相关性,其低表达是URSA的可能原因之一,通过检测精子PEG10的甲基化水平不能推断早期胚胎发育的情况。     

稽留流产患者绒毛组织中Netrin-1、DCC、UNC5B和VEGF表达

目的:探讨神经轴突导向因子(Ntrin-1)、结直肠癌缺失基因(dDCC)、不协调同源基因5B(BUNC5B)与血管内皮生长因子(VEGF)在稽留流产绒毛组织表达。方法:收集2020年2月-2020年8月在本院就诊的孕妇60例,其中正常早孕待行人工流产30例为对照组,稽留流产并待行人工流产30例为稽留流产组,采用实时荧光定量聚合酶链式反应技术及免疫组织化学技术检测两组绒毛组织中Netrin-1、DCC、UNC5B、VEGF mRNA及蛋白表达。结果:稽留流产组绒毛组织中Neterin-1、DCC和VEGF mRNA的相对表达量均低于对照组,UNC5B mRNA高于对照组(P0.05);Netrin-1(0.78±0.22)、DCC(0.52±0.15)、VEGF(0.81±0.23)蛋白相对表达量均低于对照组(1.24±0.29、1.09±0.25、1.42±0.35)(P0.05),UNC5B蛋白(1.82±0.34)高于对照组(1.04±0.21)(P0.05)。结论:稽留流产患者绒毛组织中Netrin-1、DCC、VEGF蛋白及mRNA表达均低于正常孕妇,UNC5B蛋白及mRNA表达高于正常孕妇,这种异常表达与稽留流产绒毛血管的生成障碍可能有关。     

原因不明复发性流产患者血清IL-35含量与绒毛组织中凋亡、侵袭、血管新生分子的相关性研究

目的研究URSA患者血清IL-35含量与绒毛组织中凋亡、侵袭、血管新生分子的相关性。方法选择2015年3月-2018年在本院诊断为URSA的患者作为研究组,另选取同期要求人工流产的正常妊娠者70例作为对照组。测定血清IL-35含量以及绒毛组织中凋亡、侵袭、血管新生分子的表达量。结果 URSA组患者血清中IL-35的含量明显低于对照组差异有统计学意义(P0.05);URSA组患者绒毛组织中Bcl-2、Survivin、Livin、MMP2、MMP9、HIF-1α、VEGF、VEGFR2、TGF-β1的mRNA表达量明显低于对照组且与血清IL-35呈正相关(P0.05),Bax、Smac、TIMP1、TIMP2的mRNA表达量明显高于对照组且与血清IL-35呈负相关(P0.05);绒毛组织中VEGFR1的mRNA表达量与对照组比较无明显差异(P0.05)。结论 URSA患者血清中IL-35的减少与绒毛组织中细胞凋亡过度、侵袭及血管新生不足有关。     

miR-200、 miR -155及血管新生因子与复发性流产的相关性分析

目的 研究miR-200、miR-155及血管新生因子与原因不明复发性流产(unexplained recurrent spontaneousabortion,URSA)的相关性分析。 方法 选择2015年3月—2018年1月在青岛市妇女儿童医院妇产科就诊的URSA患者作为URSA组、要求终止妊娠的正常早孕患者作为对照组,检测绒毛组织中微小RNA(microRNA, miR)miR-200、miR-155、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、可溶性FMS样酪氨酸激酶1(soluble FMS like tyrosine kinase-1,sFlt-1)的表达量及血清中VEGF、sFlt-1的含量,对miR-200、miR-155靶向结合VEGF、sFlt-1进行生物信息学分析。 结果 URSA组的绒毛组织中miR-200(1.78±0.32 vs. 0.91±0.15)、sFlt-1(1.87±0.35 vs. 1.06±0.21)的相对表达量及血清中sFlt-1的含量[(12.39±2.31)ng/ml vs. (6.51±0.95)ng/ml]均高于对照组,差异有统计学意义(均P<0.05)。绒毛组织中miR-155相对表达量(0.60±0.10 vs. 0.93±0.16)、VEGF mRNA相对表达量(0.59±0.09 vs. 1.02±0.16)及蛋白表达量(0.62±0.07 vs. 1.04±0.18)、血清中VEGF的含量[(601.25±94.39)ng/ml vs. (935.12±132.47)ng/ml]低于对照组,差异有统计学意义(均P<0.05);URSA组患者绒毛组织中miR-200的表达量与血清中VEGF的含量、绒毛组织中VEGF的表达量均呈负相关,绒毛组织中miR-155的表达量与血清中sFlt-1的含量和绒毛组织中sFlt-1的表达量均呈负相关;miR-200、miR-155分别靶向结合VEGF、sFlt-1基因的3’UTR。 结论 miR-200表达增多、miR-155表达减少与URSA发生有关,miR-200靶向VEGF、miR-155靶向sFlt-1是介导该过程的可能机制。     

HIF-1α及其靶基因VEGF在双胎输血综合征患者胎盘组织中的表达

目的:探讨双胎输血综合征(TTTS)患者胎盘组织中缺氧诱导因子-1(HIF-1)及其靶基因血管内皮细胞生长因子(VEGF)的表达情况。方法:选取2010年1月~2014年7月在该院分娩的单绒毛膜双胎妊娠产妇68例,其中TTTS患者18例作为观察组,未发生TTTS患者50例作为对照组,对胎盘组织HIF-1α及其靶基因VEGF进行定位检测,并检测HIF-1α及其靶基因VEGF蛋白以及mRNA表达情况。结果:HIF-1α主要分布在胎盘的合体滋养细胞以及细胞滋养细胞,而VEGF主要分布在滋养细胞、血管内皮细胞、绒毛间质细胞胞核和胞质中;观察组胎盘组织HIF-1α表达平均面积、平均灰度和IOD值(面积×平均灰度)分别为(0.36±0.11)m2、(147.35±7.54)和(51.74±12.34),VEGF表达平均面积、平均灰度和IOD值分别为(0.47±0.13)m2、(141.27±8.24)和(49.67±11.38),均明显高于对照组(P<0.05);观察组HIF-1、mRNA和VEGF mRNA表达量分别为(0.41±0.04)和(0.38±0.06),明显高于对照组(P<0.05)。结论:HIF-1α和VEGF表达增强可能影响单绒毛膜双胎妊娠胎盘血管生成,从而致双胎输血综合征发生。     

长链非编码RNA在神经胶质瘤分级的诊断价值分析

目的探究长链非编码RNA在神经胶质瘤中的表达及对疾病分级的检测价值。方法选取2017年10月—2019年6月期间的60例神经胶质瘤患者为观察组,同时期的30例颅脑损伤患者为对照组。比较两组的长链非编码RNA(XIST、ANRIL及DANCR)表达情况,同时比较观察组中不同分级患者的表达情况,并采用Pearson相关性分析上述指标与神经胶质瘤分级的关系。结果观察组的长链非编码RNA(XIST、ANRIL及DANCR)表达均高于对照组,且分级较高者的表达水平高于分级较低者,差异均有统计学意义(P<0.05),且Pearson相关性分析显示,上述指标与神经胶质瘤分级呈正相关(P<0.05)。结论长链非编码RNA在神经胶质瘤中的表达相对较高,且对疾病分级的检测价值较高。     

胚胎停育绒毛组织中PRX3、PLGF、PSG1的表达

目的：分析过氧化物还原酶3(PRX3)、胎盘生长因子胚胎生长因子(PLGF)、妊娠特异性糖蛋白1(PSG1)在胚胎停育患者绒毛组织中的表达。方法：选取2020年1月-2022年8月本院收治的84例胚胎停育患者作为观察组，60例正常早孕行人工流产者作为对照组；采用PCR及western blot法检测两组绒毛组织中PRX3、PLGF、PSG1的mRNA及蛋白水平，logistics模型分析绒毛组织PRX3、PLGF、PSG1与胚胎停育关系。结果：观察组PRX3及PSG1 mRNA(3.43±0.84、3.31±1.34)和蛋白水平(1.74±0.39、2.39±0.54)均高于对照组(1.54±0.42、2.26±0.43、1.01±0.27、1.83±0.39),PLGF mRNA(0.34±0.05)和蛋白水平(0.51±0.11)均低于对照组(0.42±0.06、0.93±0.24);绒毛组织中高PRX3、PSG1水平和低PLGF水平均与胚胎停育有关(均P<0.05)。结论：相较于正常早孕，胚胎停育患者绒毛组织中PRX3、PSG1明显偏高，PLGF水平明显偏低。     

HIF-1α和VEGF在稽留流产患者血清和绒毛中的表达研究

目的:探讨稽留流产患者缺氧诱导因子(HIF-1α)与血管内皮生长因子(VEGF)在其血清和绒毛中的表达情况并进行二者相关性研究。方法:采用ELISA试验和SP法分别测定66例稽留流产患者(流产组)与54例正常早孕孕妇(对照组)血清和绒毛中HIF-1α和VEGF的表达水平,并将稽留流产组按有无明确原因分为有因组和无因组;同时根据胚胎死亡后稽留宫内时间分为>4周组、2~4周组和<2周组分析相关性。结果:流产组血清HIF-1α和VEGF的水平分别为(317.3±116.8)ng/L和(34.2±4.9)ng/L,对照组分别为(416.8±121.1)ng/L和(51.4±55.2)ng/L,两组差异有统计学意义(P<0.05);流产组患者绒毛中HIF-1α和VEGF的表达量分别为(3.1±2.2)ng/L和(3.7±2.1)ng/L,对照组分别为6.1±4.2和6.9±3.4,两组差异有统计学意义(P<0.05)。两组血清VEGF和HIF-1α的表达成呈正相关(P<0.05),两组绒毛中VEGF与HIF-1α表达呈正相关(P<0.05);但稽留宫内时间<2周组、2~4周组和>4周组血清和绒毛中HIF-1α和VEGF的表达比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:HIF-1α和VEGF在血清和绒毛中的低表达可能是导致稽留流产的重要原因之一。     

血管内皮生长因子表达与宫颈癌预后的相关性分析

目的分析血管内皮生长因子A(VEGFA)亚型、血管内皮生长因子C(VEGFC)及血管内皮生长因子D(VEGFD)与宫颈癌预后的关系。方法选择2019年6月—2020年10月在诸暨市第三人民医院就诊的宫颈癌患者为研究对象,共收集120例宫颈癌组织样本为对照组,100例正常宫颈组织为对照组。采用RT-PCR分析VEGFA亚型(VEGF165、VEGF121)、VEGFC、VEGFD的表达水平。结果与正常宫颈组织相比,宫颈癌组织中VEGF165表达显著升高(0.154±0.062 vs.0.125±0.085,P<0.05),VEGFC与VEGFD表达均显著降低(均P<0.05)。相关分析显示:VEGF165表达与VEGF121表达呈正相关(r^(2)=0.388,P<0.05),VEGFC表达与VEGFD表达呈正相关(r^(2)=0.452,P<0.05)。多变量分析显示:VEGF121、VEGFC和肿瘤生长类型显著相关(r=5.569,4.096,均P<0.05),VEGF165与淋巴结转移存在显著正相关(r=4.693,P<0.05)。VEGF165高表达的患者复发率明显较高(0.165±0.022 vs.0.133±0.019,P<0.05);组织学研究显示:复发的鳞状细胞癌患者VEGF165表达显著高于无复发者(0.165±0.028 vs.0.124±0.017,P<0.05)。与VEGF165高表达患者相比,低表达患者的无病生存期(DFS)更高[(52.012±6.501)个月vs.(41.213±3.623)个月]。结论VEGF165与宫颈癌患者淋巴结转移、疾病复发、无病生存率显著相关,可以作为宫颈癌的重要的预后相关因素之一。     

不明原因复发性流产患者血清及母胎界面中IL-2、IL-10的表达及意义

目的:研究不明原因复发性流产患者的血清、蜕膜和绒毛组织中IL-2、IL-10的表达水平及意义,探讨其免疫学机制,为其早期诊断及治疗提供理论依据。方法:用酶联免疫法测定血清中的IL-2、IL-10含量,同时应用免疫组织化学染色方法检测IL-2、IL-10在绒毛和蜕膜组织中的局部表达。结果:不明原因复发性流产组血清中IL-2的浓度为(12.31±2.64)pg/ml明显高于正常早孕组的(5.74±1.22)pg/ml,差异有统计学意义(P<0.05);血清中IL-10的浓度为(7.97±3.02)pg/ml与正常早孕组的(17.6±5.12)pg/ml比较差异有统计学意义(P<0.05);血清中IL-10/IL-2比值为(0.71±0.39)与正常早孕组的比值(3.37±1.49)比较差异有统计学意义(P<0.05)。血清中两种细胞因子浓度与复发性流产组中不同流产次数之间差异无统计学意义(P>0.05);IL-2在复发性流产组蜕膜细胞胞浆和绒毛滋养叶细胞中的表达均明显高于正常早孕组(P<0.05),IL-10在复发性流产组蜕膜细胞胞浆和绒毛滋养叶细胞中的表达均低于正常早孕组(P<0.05)。结论:IL-10有利于妊娠的顺利进行,而IL-2增多可能对妊娠有害。Th1/Th2细胞平衡向IL-2偏移时可能导致流产。     

颗粒酶B和CD8在不明原因复发性流产蜕膜组织中的表达

目的:比较不明原因复发性流产(URSA)与正常早孕蜕膜CD8和颗粒酶B的表达,从蛋白水平探讨不明原因复发性流产的发病机制。方法:用免疫组织化学方法测定两组蜕膜CD8和颗粒酶B蛋白表达,采用双盲法随机取5个视野,400倍下观察蜕膜组织处阳性细胞,计数后取其平均数进行半定量分析。结果:与正常早孕相比,URSA组蜕膜组织处颗粒酶B表达明显升高(P<0.01);CD8的表达两组比较无明显差异(P>0.05)。结论:早孕期蜕膜组织颗粒酶B蛋白表达异常是URSA的机制之一;颗粒酶B死亡途径可能是早期诱导URSA发生的重要因素。     

复发性流产患者Th1/Th2细胞因子失衡及淋巴细胞主动免疫治疗的疗效

目的:探讨不明原因反复流产(URSA)患者Th1/Th2细胞因子失衡关系及淋巴细胞主动免疫治疗的疗效。方法:采用细胞因子体外诱生技术对72例URSA患者和30例正常妇女的外周血单个核细胞进行诱生培养68h后,采用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测上清液中的Th1(IFN-γ)和Th2(IL-4)细胞因子水平;URSA患者分为淋巴细胞主动免疫治疗组和常规HCG保胎组,前瞻性研究淋巴细胞主动免疫治疗前后IFN-γ、IL-4细胞因子变化及两组的妊娠结局。结果:URSA患者IL-4水平低于正常对照组(P<0.05),Th1/Th2比值偏向Th1。经主动免疫治疗后,URSA患者IFN-γ水平降低(P<0.05),IL-4水平升高(P<0.05),Th1/Th2比值降低,偏向Th2(P<0.05)。主动免疫妊娠成功率达到85.71%。结论:URSA的发生可能与Th1/Th2平衡失调有关,主动免疫治疗可以有效纠正Th1/Th2平衡失调,对URSA患者是一种有效的治疗方法。     

VEGF在复发性流产患者绒毛及蜕膜中的表达

目的:探讨VEGF(血管内皮生长因子)在复发性流产(RSA)患者绒毛及蜕膜中的表达。方法:以免疫组织化学方法观察20例复发性流产(RSA)患者绒毛及蜕膜组织中VEGF的表达及分布,并以20例正常早孕妇女作为对照组。结果:RSA患者绒毛及蜕膜组织中VEGF的表达显著低于正常早孕组(P<0.05)。结论:VEGF在早期妊娠的维持中起重要作用,其表达水平降低可能与RSA的发生有关。     

雌激素受体1基因多态性与不明原因复发性流产关系

目的:探究雌激素受体1(ESR1)基因多态性与不明原因复发性自然流产(URSA)关系。方法:选取本院88例URSA患者为URSA组,70例正常者为对照组,采用聚合酶链式反应-限制性片段多态性法检测外周血ESR1基因rs22234693、rs9340799、rs2046210位点多态性,酶联免疫吸附法检测血清雌二醇(E2)水平,化学发光法检测促卵泡刺激素(FSH)水平;胶体金法检测血清促黄体生成素(LH)水平,Hardy-weinberg遗传平衡定律验证基因型频率;logistic回归分析ESR1基因型与URSA发生风险关系;分析各位点基因型与激素水平关系。结果:URSA组FSH水平高于对照组,E2、LH水平低于对照组(P<0.05)。两组ESR1基因rs22234693、rs9340799、rs2046210位点基因频率符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律。rs22234693位点T等位基因频率、rs9340799位点G等位基因频率、rs2046210位点T等位基因频率均高于对照组(P<0.05)。rs22234693、rs9340799、rs2046210位点突变型者血清E2、LH水平低于对照组(P<0.05)。rs22234693 TT和TC基因携带者发生URSA风险的相对危险度分别为CC等位基因的1.756倍和2.432倍,rs9340799 GG、AG基因携带者的发生URSA风险的相对危险度分别为AA等位基因的1.237倍和1.746倍,rs2046210 TT和TC基因携带者的发生URSA风险的相对危险度分别为CC等位基因的1.354倍和1.824倍。结论:ESR1基因rs22234693、rs9340799、rs2046210位点多态性与URSA发生有关,rs22234693位点C→T突变、rs9340799 A→G突变、rs2046210 C→T突变可增加URSA的发病风险。     

血清VEGF及其可溶性受体sFlt-1与原因不明复发性流产

目的:研究血管内皮生长因子(VEGF)及可溶性血管内皮生长因子受体-1(sFlt-1)在正常早孕和原因不明复发性流产(URSA)患者外周血中水平,探讨VEGF及其可溶性受体sFlt-1与原因不明复发性流产的相关性。方法:采用酶联免疫吸附试验法测定35例原因不明复发性流产胚胎停育患者和35例正常早孕孕妇血清VEGF及其sFlt-1水平。结果:原因不明复发性流产胚胎停育患者血清VEGF及其sFlt-1水平较正常早孕孕妇明显增高,两者差异有统计学意义(P<0.01)。结论:血清VEGF及sFlt-1与原因不明复发性流产具有相关性。     

环孢素A联合淋巴细胞治疗URSA对患者血清T细胞亚群、ACA及妊娠结局影响

目的:探讨环孢素A(CsA)联合淋巴细胞主动免疫(LIT)对原因不明复发性流产(URSA)患者血清T细胞亚群、抗心磷脂抗体(ACA)水平变化及妊娠结局的影响。方法:选择2015年1月—2017年1月本院妇产科收治的URSA患者100例,随机分为两组各50例,观察组采用CsA联合LIT治疗,对照组采用LIT治疗。观察两组治疗前后T淋巴细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+)、ACA抗体(ACA-IgM、ACA-IgG)水平,对比两组妊娠结局。结果:治疗后两组CD3+、CD4+、CD4+/CD8+升高、CD8+降低,且观察组变化幅度优于对照组(均P<0.05)。两组ACA-IgM、ACA-IgG均下降,且观察组低于对照组(均P<0.05)。观察组成功分娩率(92.0%)高于对照组(72.0%),流产率(4.0%)、妊娠期高血压发生率(2.0%)低于对照组(18.0%、16.0%)(均P<0.05)。结论:CsA联合LIT治疗可显著降低ACA抗体水平,提高免疫功能,降低流产率,改善妊娠结局,效果优于单独LIT治疗。     

血管内皮生长因子在自然流产胚胎和人工流产胚胎中的表达

目的 探讨自然流产胚胎和人工流产胚胎中血管内皮生长因子(VEGF)表达量的差异. 方法 按照孕周分组,采用免疫组化法检测30例自然流产胚胎(病例组)绒毛组织中VEGF的表达,同时收集50例人工流产的胚胎绒毛组织(对照组)检测VEGF进行对照分析研究. 结果 在不同的孕周,病例组其VEGF的表达量均较对照组降低,且对照组VEGF的表达量随着孕周的增加而增加,在病例组中却没有这样的趋势. 结论 自然流产的胚胎组织与同孕周的人工流产的胚胎组织相比其VEGF表达量下降,提示VEGF表达量下降可能与自然流产相关.     

米非司酮对人早孕绒毛、蜕膜组织血管生成的影响探讨

目的:探讨米非司酮对早孕绒毛与蜕膜组织血管生成的影响。方法:取服米非司酮及米非司酮配伍米索前列醇后的早孕绒毛与蜕膜组织,以负压吸引流产术的绒毛与蜕膜组织为对照组,应用免疫组织化学技术,观察米非司酮对血管内皮生长因子(VEGF)与微血管密度(MVD)的影响。结果:服用米非司酮、米非司酮配伍米索前列醇后,绒毛、蜕膜组织的VEGF分别由对照组的1.61±0.65分、1.61±0.77分,下降至0.83±0.58分、0.83±0.39分和0.80±0.63分、0.70±0.67分(P<0.05);其MVD值分别由10.70±2.24个、28.08±8.81个,下降至5.25±1.95个、18.58±4.83个和4.30±1.06个、17.80±4.29个(P<0.001、P<0.01)。服用米非司酮与米非司酮配伍米索前列醇,绒毛、蜕膜组织VEGF与MVD值无显著性差异。结论:米非司酮使早孕绒毛与蜕膜组织的VEGF与MVD值下降,这可能是米非司酮终止早孕的机理之一。