下调GABA受体基因对癫痫模型大鼠海马神经细胞凋亡的影响及作用机制

目的 探讨下调GABA受体基因对癫痫模型大鼠海马神经细胞凋亡的影响及作用机制。方法 选择30只SD健康雄性大鼠,建立癫痫模型,建模成功后分为模型组、上调组、下调组各10只; 进行细胞转染建立稳定转染的GABA上调组、GABA下调组; 检测3组大鼠海马神经细胞凋亡及PI3K、AKt、mTOR、Bax、Caspase-3蛋白表达水平。结果 上调组大鼠各时间点海马神经细胞凋亡率高于模型组(P<0.05); 下调组大鼠各时间点海马神经细胞凋亡率低于模型组(P<0.05); 下调组大鼠各时间点海马神经细胞凋亡率低于上调组(P<0.05)。上调组大鼠各时间点海马神经细胞增殖率、Bcl-2、p-PI3K、p-AKt、p-mTOR蛋白表达水平均低于模型组,而Bax、Caspase-3蛋白表达水平高于模型组(P<0.05); 下调组大鼠各时间点海马神经细胞增殖率、Bcl-2、p-PI3K、p-AKt、p-mTOR蛋白表达水平均高于模型组,而Bax、Caspase-3蛋白表达水平低于模型组(P<0.05); 下调组大鼠各时间点海马神经细胞增值率、Bcl-2、p-PI3K、p-AKt、p-mTOR蛋白表达水平均高于上调组,而Bax、Caspase-3蛋白表达水平低于上调组(P<0.05)。结论 下调GABA受体基因可能是通过调节PI3K/AKt/mTOR来作用于下游凋亡靶基因,最终抑制癫痫模型大鼠海马神经细胞凋亡     

脑出血大鼠颅内溶血磷脂酸受体1与血肿周围 水肿区细胞凋亡的相关性研究

目的 研究脑出血大鼠颅内溶血磷脂酸受体1(LPA-1)与血肿周围水肿区细胞凋亡的相关性。方法 选取134例Wistar大鼠,随机分为正常组和脑出血组,正常组60例,脑出血组74例,脑出血组大鼠采用立体定向脑内注入法构建脑出血模型; 采用RT-PCR检测LPA-1、Caspase-3表达水平,采用双盲法测定神经功能评分,采用Western blot检测Bax蛋白、Bcl-x蛋白表达水平,采用流式细胞术检测各种细胞水平及细胞凋亡水平,根据Pearson相关性分析法大鼠颅内溶血磷脂酸受体1(LPA-1)、Bax蛋白、Bcl-x蛋白及细胞凋亡的相关性。结果 脑出血组LPA-1、Caspase-3表达水平均明显高于正常组(P<0.05); 脑出血组神经功能评分明显高于正常组(P<0.05); 脑出血组Bax蛋白表达水平显著高于正常组,脑出血组Bcl-x蛋白表达水平明显低于正常组(P<0.05); 脑出血组LPA-1、Caspase-3、Bax蛋白表达水平及神经功能评分持续升高,Bcl-x蛋白表达持续降低,直到第3 d到达顶峰后缓慢恢复,到第7 d恢复到正常评分的80%左右。脑出血组中性粒细胞、淋巴细胞、巨噬细胞、小胶质细胞、细胞凋亡率均明显高于正常组(P<0.05); 脑出血组性粒细胞、淋巴细胞、巨噬细胞、小胶质细胞、细胞凋亡率持续升高,直到第3 d到达顶峰后缓慢降低,到第7 d降低更加显著。LPA-1与Bax蛋白的表达水平呈正相关(r=0.33,P<0.05); LPA-1与Bcl-x蛋白的表达水平呈负相关(r=0.25,P<0.05); LPA-1表达水平与细胞凋亡率呈正相关(r=0.81,P<0.05); Bax蛋白与Bcl-x蛋白的表达水平呈负相关(r=-0.22,P<0.05); Bax蛋白表达水平与细胞凋亡率呈正相关(r=0.71,P<0.05); Bcl-x蛋白表达水平与细胞凋亡率呈负相关(r=0.74,P<0.05)。结论 LPA-1与Caspase-3在大鼠脑出血中高表达,神经功能评分在大鼠脑出血中评分过高,Bax蛋白在大鼠脑出血中高表达,Bcl-x蛋白在大鼠脑出血中低表达,脑出血大鼠细胞凋亡率过高,LPA-1、Bax蛋白、Bcl-x蛋白及细胞凋亡在大鼠脑出血中关系密切,可能具有相关性。     

芍药苷对蛛网膜下腔出血早期脑损伤大鼠NLRP3炎性小体表达的影响

目的 探究芍药苷(Paeoniflorin,PAE)对蛛网膜下腔出血(Subarachnoid hemorrhage,SAH)早期脑损伤大鼠NLR家族Pyrin域蛋白3(NLR family Pyrin domain containing 3,NLRP3)炎性小体表达的影响。方法 将60只大鼠随机分为假手术(Sham)组、模型(SAH)组、芍药苷低剂量(PAE-L)组、芍药苷高剂量(PAE-H)组; Sham组不刺破血管,其余各组采用血管内穿孔法构建SAH大鼠模型; PAE-L组、PAE-H组腹腔注射对应剂量的芍药苷(10、20 mg/kg),Sham组、SAH组腹腔注射等量0.9%氯化钠溶液,2次/d,共3 d; 采用Garcia评分法评估大鼠神经功能; SAH评分法评估蛛网膜下腔出血情况; 脑组织含水量测定评估脑水肿; 伊文思蓝(Evans blue,EB)染色评估血脑屏障通透性; 苏木精-伊红(Hematoxylin-eosin,HE)染色观察大鼠脑组织病理损伤; TdT介导的dUTP末端标记法(TdT-mediated dUTP nick-end labeling,TUNEL)染色检测神经元凋亡; 免疫荧光染色检测NLRP3、离子钙结合衔接分子-1(Ionized calcium binding adapter molecule-1,Iba-1)和髓过氧化物酶(Myeloperoxidase,MPO)表达水平; 免疫组化染色检测NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(Apoptosis-associated speck-like protein containing CARD,ASC)、半胱氨酸天冬氨酸酶-1(Cysteinyl aspartate-specific proteinase,Caspase-1)表达水平; Western Blot检测B细胞淋巴瘤-2(B cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X的蛋白质(Bcl-2-Associated X protein,Bax)、Caspase-3,NLRP3,ASC,Caspase-1、白介素-1β(Interleukin-1 β,IL-1β)、IL-18、肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)、Iba-1和MPO表达水平。采用氧化血红蛋白(Oxygenated hemoglobin,OxyHb)构建原代皮层神经元体外SAH模型,并将其分为对照(Control)组、模型(OxyHb)组、芍药苷低剂量(PAE-L)组和芍药苷高剂量(PAE-H)组; Control组正常培养,OxyHb组、PAE-L组、PAE-H组神经元在含20 uM OxyHb的神经元培养基中培养,PAE-L组、PAE-H组分别加入对应剂量的芍药苷(10、20 uM); 各组神经元孵育48 h; 采用细胞计数试剂盒8(Cell counting kit 8,CCK8)法和TUNEL染色检测神经元活性及凋亡; Western Blot检测Bcl-2,Bax,Caspase-3的表达水平。结果 动物模型显示,Sham组大鼠脑组织未见积血,脑组织细胞结构清晰可辨; 与Sham组比较,SAH组脑组织可见大量积血,脑组织细胞排列松散,Garcia评分降低(P<0.05),SAH评分、脑含水量、EB渗出量升高(P<0.05),神经元TUNEL阳性细胞数增加(P<0.05),Bcl-2表达水平降低,Bax,Caspase 3,NLRP3,ASC,Caspase-1,IL-1β,IL-18,TNF-α表达水平升高(P<0.05),Iba-1和MPO阳性细胞数增加(P<0.05); 与SAH组比较,PAE-L组、PAE-H组脑组织积血减少,脑组织细胞状态趋于正常,Garcia评分升高(P<0.05),SAH评分、脑含水量、EB渗出量降低(P<0.05),神经元TUNEL阳性细胞数减少(P<0.05),Bcl-2表达水平升高,Bax,Caspase 3,NLRP3,ASC,Caspase-1,IL-1β,IL-18,TNF-α表达水平降低(P<0.05),Iba-1和MPO阳性细胞数减少(P<0.05)。细胞模型显示,Control组神经元形态正常; 与Control组比较,OxyHb组神经元肿胀,突触丧失,神经元活性降低,凋亡率增高(P<0.05),Bcl-2表达水平降低,Bax,Caspase 3表达水平升高(P<0.05); 与OxyHb组比较,PAE-L组、PAE-H组细胞损伤减轻,神经元活性升高,凋亡率降低(P<0.05),Bcl-2表达水平升高,Bax,Caspase 3表达水平降低(P<0.05)。结论 芍药苷能够减轻SAH后大鼠脑水肿、细胞凋亡和神经损伤,其机制可能为通过抑制NLRP3炎性小体的激活,并抑制小胶质细胞和中性粒细胞浸润,改善SAH后早期脑损伤。     

当归含药血清通过调控miR-129表达对阿尔茨海默病细胞模型的保护作用

目的 探讨当归含药血清通过调控微小RNA-129(MicroRNA-129,miR-129)表达对阿尔茨海默病PC12细胞的保护作用。方法 分别以1.5 g/kg当归药液及等量生理盐水对SD(Sprague Dawley)大鼠灌胃处理,配制成10%含药血清及正常血清培养液; 将PC12细胞分为空白组、模型组、药物组、药物+Control小干扰RNA(Small interference RNA,siRNA)组、药物+miR-129 siRNA组,除空白组外,其余各组均用30 μL的Aβ_25-35溶液诱导细胞损伤24 h构建阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)细胞模型,空白组及模型组用空白血清培养液培养,其余各组用10%含药血清培养液培养,培养48 h后收集各组细胞观察细胞形态学; 实时荧光定量聚合酶链反应(Quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)法检测其中miR-129表达水平,采用甲基噻唑蓝(Methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测各组细胞的增殖抑制率; 流式细胞仪检测各组细胞的凋亡及周期情况; 蛋白免疫印迹(Western blot,WB)检测细胞凋亡相关因子蛋白的表达水平; 酶联免疫吸附(Enzyme-linked immunoSorbent assay,ELISA)试剂盒检测乳酸脱氢酶(Lactate dehydrogenase,LDH)、丙二醛(Malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(T-superoxide dismutase,T-SOD)水平。结果 与空白组比较,模型组PC12细胞贴壁功能受损,miR-129、B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)蛋白水平、S期及G2/M期细胞数目、T-SOD水平降低(P<0.05),细胞抑制率、凋亡率、半胱氨酸蛋白酶-3(Cysteinyl aspartate specific proteinase,Caspase-3)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax),G0/G1期细胞数目、LDH,MDA水平升高(P<0.05); 与模型组比较,药物组细胞贴壁功能改善,miR-129,Bcl-2蛋白水平、S期及G2/M期细胞数目、T-SOD水平升高(P<0.05),细胞抑制率、凋亡率、Caspase-3,Bax,G0/G1期细胞数目、LDH,MDA水平下降(P<0.05); 与药物组、药物+Control siRNA组比较,细胞贴壁功能受损,miR-129,Bcl-2蛋白水平、S期及G2/M期细胞数目、T-SOD水平降低(P<0.05),细胞抑制率、凋亡率、Caspase-3,Bax,G0/G1期细胞数目、LDH,MDA水平升高(P<0.05)。结论 当归含药血清对于阿尔茨海默病细胞模型具有一定的保护作用,其机制可能与上调miR-129表达有一定关系。     

木香烃内酯通过调控LncRNA LINC01116/miR-9-5p的表达来减轻过氧化氢诱导的大鼠脑微血管内皮细胞损伤

目的 探讨木香烃内酯(Cos)对过氧化氢(H₂O₂)诱导的大鼠脑微血管内皮细胞的氧化应激、凋亡的影响及其对长链非编码RNA LINC01116(LncRNA LINC01116)/微小RNA-9-5p(miR-9-5p)的调控作用。方法 原代分离培养大鼠脑微血管内皮细胞,并随机分成Con组、H₂O₂组、Cos-L组、Cos-M组、Cos-H组、Cos-H+pcDNA组、Cos-H+pcDNA-LINC01116组; 采用化学比色法检测丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)的水平及超氧化物歧化酶(SOD)的活性; 流式细胞术检测细胞凋亡率; 实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测LINC01116、miR-9-5p的表达水平; 双荧光素酶报告实验验证LINC01116与miR-9-5p的靶向关系; 蛋白免疫印迹法(Western blot)检测B淋巴细胞瘤-2相关蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)的表达水平。结果 H₂O₂处理后MDA的水平显著升高(P<0.05),GSH水平与SOD活性显著降低(P<0.05),细胞凋亡率显著升高(P<0.05),Bax蛋白水平显著升高(P<0.05),Bcl-2蛋白水平显著降低(P<0.05),LINC01116的表达水平显著升高(P<0.05),miR-9-5p的表达水平显著降低(P<0.05); Cos处理后MDA的水平显著降低(P<0.05),GSH水平与SOD活性显著升高(P<0.05),细胞凋亡率显著降低(P<0.05),Bax蛋白水平显著降低(P<0.05),Bcl-2蛋白水平显著升高(P<0.05),LINC01116的表达水平显著降低(P<0.05),miR-9-5p的表达水平显著升高(P<0.05),且Cos-L组、Cos-M组、Cos-H组上述指标的水平比较均有明显差异(P<0.05); 双荧光素酶报告实验证实LINC01116可靶向结合miR-9-5p; LINC01116过表达可减弱木香烃内酯对H₂O₂诱导的大鼠脑微血管内皮细胞凋亡及氧化应激的作用。结论 木香烃内酯可能通过抑制LINC01116的表达及促进miR-9-5p的表达来抑制H₂O₂诱导的大鼠脑微血管内皮细胞的氧化应激及细胞凋亡,从而减轻细胞损伤。     

曲札茋苷对二氯化钴诱导PC12细胞氧化应激的保护作用

目的 探讨曲札茋苷注射液对二氯化钴诱导PC12细胞氧化应激的保护作用及其机制。方法 取对数生长期PC12细胞随机分为5组:对照组、模型组、曲札茋苷低水平组、曲札茋苷高水平组、依达拉奉组; 甲基三氯硅烷(Methyltrichlorosilane,MTS)法检测细胞活力:分光光度法检测超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)活性、乳酸脱氢酶(Lactate dehydrogenase,LDH)水平; 荧光探针法检测活性氧(Reactive oxygen species,ROS)荧光强度; Western Blot法检测细胞中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Cysteinyl aspartate specific proteinase-3,Caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2基因(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2-相关X(Bcl-2-Associated X,Bax)蛋白的表达水平。结果 与对照组比较,模型组细胞活力下降,SOD活性降低,LDH释放增加,活性氧水平增高,Caspase-3,Bax蛋白的表达水平上升,Bcl-2蛋白表达水平下降(P<0.05); 与模型组比较,曲札茋苷组、依达拉奉组细胞活力上升,SOD活性升高,LDH释放较少,活性氧水平降低,Caspase-3,Bax蛋白的表达水平下降,Bcl-2蛋白表达水平上升(P<0.05)。结论 曲札茋苷可明显升高氧糖剥夺/复糖复氧PC12细胞的存活率,其机制可能是通过调控相关凋亡蛋白的表达,从而抑制细胞的凋亡。     

天麻素注射液对蛛网膜下腔出血大鼠NF-κB/Bax/Caspase-3通路及神经元凋亡的影响

目的 探讨天麻素注射液对蛛网膜下腔出血(Subarachnoid hemorrhage,SAH)大鼠核转录因子-κB/B细胞淋巴瘤-2基因相关X蛋白/半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(Nuclear factor-κB,NF-κB/B cell lymphoma-2 associated X protein,Bax/Cysteinyl aspartate specific proteinase-3,Caspase-3)通路及神经元凋亡的影响。方法 血管穿刺法建立SAH大鼠模型,模型成功50只,随机分为模型组、天麻素低、中、高剂量组(腹腔注射5、10、20 mg·kg^-1·d^-1天麻素注射液)、阳性对照组(腹腔注射0.5 mg·kg^-1·d^-1地塞米松磷酸钠注射液),每组各10只,另10只大鼠设为假手术组; 干预3周后测定大鼠神经功能评分; 流式细胞术检测脑皮层细胞凋亡情况; 原位末端标记法(TdT-mediated dUTP-biotin nick end labeling assay,TUNEL)检测神经元凋亡状态; 蛋白免疫印迹(Western blot,WB)检测大鼠脑皮层NF-κB,Bax,Caspase-3、生长相关蛋白-43(Growth-associated protein-43,GAP-43)、突触素(Synaptophysin,SYN)蛋白表达水平。结果 与假手术组比较,模型组神经功能评分、脑皮层神经元凋亡率、脑组织中NF-κB,Bax,Caspase-3蛋白表达水平升高,脑皮层组织中GAP-43,SYN蛋白表达水平降低(P<0.05)。与模型组比较,天麻素中、高剂量组、阳性对照组神经功能评分、脑皮层神经元凋亡率、脑组织中NF-κB,Bax,Caspase-3蛋白表达水平降低,脑皮层组织中GAP-43,SYN蛋白表达水平升高(P<0.05); 天麻素低剂量组脑皮层神经元凋亡率、脑组织中NF-κB,Bax,Caspase-3蛋白表达水平降低,脑皮层组织中GAP-43,SYN蛋白表达水平升高(P<0.05); 随着天麻素注射液剂量的升高,神经功能评分、脑皮层神经元凋亡率、脑组织中NF-κB,Bax,Caspase-3蛋白表达水平降低,脑皮层组织中GAP-43,SYN蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论 天麻素注射液可能通过抑制NF-κB/Bax/Caspase-3通路来实现对神经元凋亡的缓解和对SAH大鼠的脑保护。     

大鼠脑创伤后海马CA3区细胞凋亡及相关基因表达研究

目的研究弥漫性脑损伤后不同时间,大鼠海马CA3区细胞凋亡及相关基因Bcl-2、Bax和Caspase-3蛋白的表达情况,探讨脑创伤后神经细胞凋亡的分子生物学机制.方法应用流式细胞仪和免疫组化法,分别检测脑创伤后不同时间海马CA3区细胞凋亡率及Bcl-2,Bax和Caspase-3基因在蛋白质水平的表达情况.结果脑创伤后海马CA3区存在不同程度细胞凋亡,Bcl-2在脑损伤后表达下降,而Bax和Caspase-3在脑创伤后表达升高;Caspase-3表达的峰值时间(72 h)出现在Bax之后(48 h).结论弥漫性脑损伤后,大鼠海马CA3区存在细胞凋亡及Bcl-2,Bax和Caspase-3的表达变化.Bcl-2/Bax表达比值下降早于Caspase-3的上升,Bcl-2/Bax表达比值改变可能与Caspase-3活化有关,进而启动并加重脑损伤后神经细胞凋亡.     

大鼠脑缺血再灌注后Caspase-3、Bcl-2和Bax的表达

目的探讨大鼠脑缺血再灌注后caspase-3、Bcl-2和Bax在脑皮质神经元中的表达。方法将动物随机分为假手术组及缺血组,参照zea longa线栓法建立大鼠左侧大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)局灶性脑缺血再灌注模型,各组大鼠分别在左侧MCAO2h再灌注不同时间点断头取脑,脑皮质神经元中caspase-3、Bcl-2和Bax的表达通过免疫组化法来测定。结果缺血组大鼠脑皮质caspase-3的表达较假手术组显著增强(P<0.01),缺血组大鼠脑皮质Bcl-2的表达较假手术组显著增强(P<0.01),缺血组大鼠脑皮质Bax的表达较假手术组显著增强(P<0.01)。结论短暂性脑缺血再灌注上调脑皮质神经元中caspase-3和Bax的表达促细胞凋亡,上调脑皮质神经元中Bcl-2的表达抗细胞凋亡。     

脑出血灶周组织Bax、Bcl-2的表达与神经元凋亡关系的实验研究

目的 检测脑出血灶周组织Bax、Bcl-2的表达,探讨与神经元凋亡的关系。方法 对健康家犬30只在DSA介入下刺破大脑中动脉制作脑出血模型,选择出血后6h、12h、24h、48h、72h及96h共6个时间点,每点5只,均于相应时间点处死后取脑．检测出血灶周Bax、Bcl-2及神经元凋亡的表达。结果 Bax及神经元凋亡的表达均于48h达高峰,至96h皆明显下降（与48h比较。P〈0．01）;Bcl-2出血后72h达高峰,至96h末见明显下降（与72h比较,P〉0．05）;Bax的表达与神经元凋亡呈正相关（P〈0．05）;Bcl-2与神经元凋亡的表达出血后48h前均呈正相关（P〈0．05）,48h后均呈负相关倾向,但无统计学差异（P〉0．05）。结论 Bax及Bel-2 参与了ICH后出血灶周神经元凋亡的过程,前者诱导和加重了神经元凋亡,后者有抑制凋亡作用,但显示其强度不足。     

Ginkgo biloba leaf extract effects on inducible nitric oxide synthase, Bcl-2, and Bax expression in rat models of spinal cord injury★

BACKGROUND:Ginkgo biloba leaf extract exhibits neuroprotective effects in spinal cord injury. However, the mechanisms of action remain unclear. OBJECTIVE: To investigate inducible nitric oxide synthase (iNOS) and Bcl-2/Bax expression in the injured spinal cord, and to explore the neuroprotective mechanisms of ginkgo biloba leaf extract in rats with spinal cord injury. DESIGN, TIME AND SETTING: The randomized, controlled, cell molecular biology experiment was performed at Soochow University, China from March...     

吴茱萸碱对人胶质瘤U251细胞增殖及凋亡影响的研究

目的研究吴茱萸碱(evodiamine)对人胶质瘤U251细胞增殖和凋亡的影响及其可能的作用机制。方法体外培养人胶质瘤U251细胞,并将其分为空白对照组及25、50、100μg/mL吴茱萸碱4组。应用MTT法检测吴茱萸碱对U251细胞的增殖抑制作用;Hoechst33258荧光染色法检测吴茱萸碱诱导胶质瘤U251细胞凋亡;采用Annexin V-FITC/PI双染法检测各组早期凋亡率;Western blot法分析凋亡相关蛋白的变化。结果与空白对照组同期比较,25、50、100μg/mL吴茱萸碱组生长抑制率在24、48、72 h均增加,差异有统计学意义。Hoechst 33258荧光染色显示吴茱萸碱作用24 h后U251细胞出现典型的细胞凋亡特征,各处理组均可见凋亡小体。与空白对照组自发早期凋亡率3.12%比较,25、50、100μg/mL吴茱萸碱组早期凋亡率分别为8.65%、19.47%及28.97%,差异均有统计学意义。Western blot实验显示,与空白对照组同期比较,25、50、100μg/mL吴茱萸碱上调了FAS、FADD、Caspase-8及Caspase-3蛋白表达,Bcl-2蛋白表达明显下降,Bax蛋白表达明显上升,差异均有统计学意义。上述指标均呈时间和剂量依赖性。结论吴茱萸碱对U251细胞具有明显的抑制细胞增殖和促进细胞凋亡的作用,其机制可能与上调Fas途径和下调Bcl-2/Bax有关。     

H2S对急性脑梗死大鼠神经功能的保护作用及机制

目的 探讨H2S对急性脑梗死大鼠神经功能的保护作用以及相关机制.方法 将48只健康雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、生理盐水组和H2S干预组.采用改良Longa法制备大鼠急性脑梗死模型,建模前25min,H2S干预组给予腹腔注射NaHS 28μmol/kg,生理盐水组给予等量生理盐水,分别于苏醒后和术后72h,评估各组大鼠的神经功能缺损.采用TTC染色法检测各组大鼠脑梗死面积,TUNEL法检测各组大鼠脑组织中细胞凋亡情况,Western blot法检测各组大鼠脑组织中PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt、Bcl-2、Bax蛋白的表达.结果 与模型组和生理盐水组相比,H2S干预组大鼠神经功能缺损程度评分、脑梗死面积和细胞凋亡指数均降低,差异均有统计学意义(P<0.05).与模型组和生理盐水组相比,H2S干预组大鼠脑组织中PI3K、Akt、Bcl-2蛋白相对表达量均升高,而p-PI3K、p-Akt、Bax蛋白相对表达量均降低,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 H2S可能通过抑制PI3K/Akt信号通路而改变Bcl-2/Bax比例,减小急性脑梗死大鼠脑梗死面积及细胞凋亡指数,保护神经功能.     

3-硝基丙酸预处理对大鼠局灶性脑缺血Bcl-2和Bax mRNA表达的影响

目的探讨3-硝基丙酸(3-NPA)预处理对大鼠局灶性脑缺血半暗带Bc l-2和Bax mRNA表达的影响。方法将大鼠腹腔注射3-NPA 20 mg/kg,3 d后制作局灶性脑缺血再灌注模型;采用逆转录聚合酶链反应,观察3-NPA预处理对脑缺血再灌注1 h、6 h、12 h、24 h及48 h额顶部皮质Bc l-2和Bax mRNA表达的影响,并与假手术组和缺血再灌注组比较。结果与假手术组比较,缺血再灌注组和3-NPA预处理组各时间点Bc l-2和Bax mRNA表达极显著增强(均P<0.01);与缺血再灌注组比较,3-NPA预处理组各时间点Bc l-2mRNA表达显著增强(均P<0.05),再灌注12~48 h Bax mRNA的表达显著降低(均P<0.05)。结论增强Bc l-2的表达、抑制Bax的表达,可能是3-NPA预处理抑制细胞凋亡、诱导脑缺血耐受的机制之一。