他克莫司对创伤性脑损伤大鼠神经行为和记忆能力的影响

背景目前他克莫司对周围神经保护作用的研究比较多,而其是否具有促进中枢神经再生和保护作用.目的通过神经行为学观察和检测突触素的表达及细胞凋亡数量,探讨他克莫司对大鼠脑液压伤后神经行为和记忆的影响.设计随机分组,平行对照(自我前后对照、相互对照)实验.单位大连医科大学附属第二医院神经外科和复旦大学附属中山医院神经外科.材料实验于2002-11在上海长征医院神经外科实验室完成.选择由复旦大学实验动物科学部提供的雄性SD大鼠24只为观察对象,体质量(200±20)g,用抽签法随机分为对照组、损伤组和治疗组,每组8只.干预伤前24 h以20 g/L戊巴比妥钠(40 mg/kg)腹腔麻醉,损伤组和治疗组模型制备参照美国Dixon建立的大鼠脑液压损伤模型,打击能量为151.95～172.21 kPa,相当于中度颅脑损伤,对照组只埋管不打击.治疗组伤后5 min以1 mg/kg腹腔注射他克莫司,1次/d,连续7 d.损伤组和对照组腹腔注射生理盐水.伤前、伤后3 d和伤后1周分别进行行走试验、平衡试验和记忆试验.于伤后1周全部大鼠断头取脑,分别取海马、伤灶周围额叶皮质、基底核部位进行免疫组织化学检测,图像定量分析技术检测突触素在海马各区以及伤灶周围的额叶皮质与基底节的分布,用流式细胞仪检测凋亡细胞计数.主要观察指标①各组动物于伤前、伤后3 d和伤后1周时行走试验、平衡试验和记忆试验成绩.②各组动物皮质、海马、基底核区突触素表达定量分析结果.③各组动物皮质、海马、基底核区细胞凋亡百分率.结果24只大鼠全部进入结果分析.①治疗组伤后3 d和伤后1周时行走试验成绩和平衡试验成绩低于损伤组[行走试验成绩(7.5±2.5)s,(5.5±2.1)s,(10.5±2.5)s,(8.2±2.5)s.平衡试验成绩(3.4±0.5)分,(2.5±0.2)分,(5.7±0.2)分,(5.0±0.5)分,P＜0.05～0.01],治疗组伤后3 d和伤后1周时记忆实验成绩高于损伤组[(4.9±1.7)s,(6.2±2.3)s,(4.0±1.5)s,(4.4±2.6)s,P＜0.05～0.01].②治疗组皮质、海马、基底核区突触素表达量显著高于损伤组(140.36±3.87,45.52±2.16,31.67±2.35,96.25±2.85,24.35±2.47,20.49±2.08,P＜0.01);对照组显著高于治疗组(162.24±3.52,50.58±2.31,42.69±2.53,P＜0.01).③治疗组海马、皮质、基底节的细胞凋亡率显著低于损伤组[(10.37±2.12)%,(18.39±2.87)%,(12.78±2.45)%,(21.14±4.85)%,(38.57±3.78)%,(21.18±4.59)%,P＜0.01].损伤组海马、皮质、基底核的细胞凋亡率显著高于对照组[(3.85±2.56)%,(4.96±2.15)%,(3.52±2.17)%,P＜0.01].结论他克莫司治疗后能促进大鼠海马、皮质及基底核区突触素表达,减少海马和皮质及基底核区神经细胞凋亡,对实验动物脑损伤后神经行为和记忆的恢复有促进作用.     

穹隆海马伞切断与卵巢切除对大鼠脑内胆碱乙酰化转移酶表达的影响

目的：观察穹隆-海马伞切断与卵巢切除对大鼠脑内皮质区、海马CA1区、杏仁复合体区、基底前脑Meynert核区胆碱乙酰化转移酶表达的影响，探讨胆碱能损伤和雌激素缺乏对胆碱能神经系统的影响。方法：实验于2003-03／12在青岛大学医学院附属医院脑病防治重点实验室完成。①分组：成年健康雌性Wistar大鼠28只，随机分为双侧穹隆-海马伞切断组、双侧卵巢切除组、双侧穹隆-海马伞切断加双侧卵巢切除组、对照组，每组7只。②模型制备：穹隆海马伞切断动物麻醉固定于脑立体定位仅后，于前囟后2．2-2．5mm，中线外1．0mm处凿开颅骨，切开硬脑膜，自制双刃刀．完全切断海马伞外侧缘。双侧卵巢切除动物麻醉后，打开腹腔，在肾脏下方的脂肪内取出卵巢，结扎并切除。对照组除不切断穹隆-海马伞和不切除卵巢外，其余步骤同模型组。③免疫细胞化学染色观察皮质区、海马CA1区、杏仁复合体区、基底前脑Meynert核区等部位胆碱乙酰化转移酶阳性细胞表达的变化。光学显微镜下（10&;#215;40倍）计数平均单个视野胆碱乙酰化转移酶阳性细胞的数量。结果：28只大鼠均进入结果分析。①在皮质区，海马C点1区，杏仁核复合体区，Meynert核区胆碱乙酰化转移酶表达阳性细胞数：双侧穹隆-海马伞切断组、双侧卵巢切除组、双侧穹隆-海马伞切断加双侧卵巢切除组均明显低于对照组[皮质区：（2．97&;#177;1．45），（3．89&;#177;0．65），（4．71&;#177;2．81），（32．60&;#177;7．33）个／视野；海马CA1区：（6．83&;#177;2．41），（4．59&;#177;4．50），（3．67&;#177;3．53），（50．57&;#177;5．85）个／视野；杏仁核复合体区：（14．43&;#177;6．75），（13.80&;#177;3．63），（15．74&;#177;5．72），（35．43&;#177;10．49）个／视野；Meynert核区：（5．77&;#177;6．62），（7．03&;#177;6．77），（0．22&;#177;0．37），（48．77&;#177;7．10）个／视野，（P〈0．01）]。②在Meynert核区，双侧穹隆-海马伞切断加双侧卵巢切除组胆碱乙酰化转移酶表达阳性细胞数明显低于双侧穹隆-海马伞切断组和双侧卵巢切除组（P〈0．05）。结论：穹隆-海马伞切断和卵巢切除可导致大鼠脑内多部位胆碱乙酰化转移酶表达减少，两种方法合用对胆碱能神经损伤更加显著。     

半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3对缺血再灌注大鼠脑海马神经元凋亡的影响

背景：半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3在正常细胞中以酶原形式存在，受凋亡刺激因素作用后能够被激活从而引起细胞凋亡。 目的：通过检测脑海马组织胞质S-100中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3的活性及海马区神经元凋亡情况，探讨全脑缺血再灌注后脑海马神经元凋亡与半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3的关系。 设计：随机对照实验。 单位：解放军第三军医大学西南医院急救部。 材料：实验于1999-01／04在解放军第三军医大学西南医院完成。选取雄性Wistar大鼠182只，随机分为3组：假手术组14只，脑缺血再灌注组84只，乙酰天冬氨酰谷氨酰缬氨酰天冬氨酸乙醛（acetyl-asp-glu-valasp．aldehyde，AC-DEVD-CHO）治疗组84只，后两组均设立缺血再灌注8，24。48，72，120，168h 6个时相点，每个时相点14只大鼠。 方法：脑缺血再灌注组、AC-DEVD-CHO治疗组建立大鼠全脑缺血20min再灌注模型，分别于再灌注后8，24，48，72，120，168h处死取海马组织；假手术组施行麻醉及手术，但不夹闭颈总动脉和烧灼椎动脉，术后观察72h后处死取海马组织备检。以单位质量标本于单位时间内裂解产生的氨甲基香豆素量表示标本中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3的活性。各组不同时相点脑组织切片封固后在荧光显微镜下于330～350nm处观察脑海马细胞凋亡情况。 主要观察指标：①各组脑缺血再灌注后不同时相点海马组织S-100中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3活性变化。②各组脑缺血再灌注后不同时相点海马细胞凋亡的情况。③半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3活性与海马区神经元凋亡的关系。 结果：实验纳入182只大鼠，脱落14只，共168只大鼠进入结果分析。①各组脑缺血再灌注后不同时相点海马组织S-100中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3活性变化：假手术组术后观察72时为0。与脑缺血再灌注组比较，AC-DEVD-CHO治疗组于再灌注24，48，72，120，168h均明显降低[（1．71&;#177;0．03），（1．22&;#177;0．03）；（2．77&;#177;0．09），（1．59&;#177;0．7）；（5．54&;#177;0．51），（2．3&;#177;0．19）；（6．28&;#177;1．71），（3.43&;#177;0．46）；（3．11&;#177;1．21），（1．73&;#177;0．14）nkat／kg；P〈0．05或0．01]。②各组脑缺血再灌注后不同时相点海马细胞凋亡的情况：每400倍视野下，假手术组术后观察72h为（1．2&;#177;0．4）个。与脑缺血再灌注组比较，AC-DEVD-CHO治疗组于再灌注24，48，72，120，168h均明显降低[（6．4&;#177;1．7），（2．8&;#177;0．8）；（11．8&;#177;1．3），（5．8&;#177;1．9）；（19．8&;#177;3．1），（10．0&;#177;1．9）；（31．2&;#177;5．9），（16．4&;#177;2．4）；（19．8&;#177;2．3），（9．0&;#177;2．3）个／400倍视野；P〈均0．011。③半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3活性与海马区神经元凋亡的关系：脑缺血再稽注组、AC-DEVD-CHO治疗组均行直线相关分析，二者的变化呈显著正相关（r分别为0．9356及0．9800，P均〈0．01）。 结论：半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3的激活是引起海马神经元调亡的主要因素之一，在缺血再灌注大鼠脑海马神经元凋亡中起着重要作用。     

骨髓基质细胞静脉移植对脑创伤大鼠神经功能恢复和细胞凋亡的影响

目的：观察骨髓基质细胞移植于创伤性脑损伤大鼠模型后不同时问。对神经功能恢复和神经细胞凋亡的影响，分析骨髓基质细胞静脉移植治疗脑损伤的可行性。方法：实验于2004-10／2005—05在哈尔滨医科大学第一临床医学院中心实验室完成。选取清洁级3月龄Wistar大鼠72只，随机分为4组：细胞移植组30只，损伤对照组30只，正常对照组6只。假伤组6只。细胞移植组和损伤对照组根据处死时问不同分为术后3，7，14，21，28d5个时间点，每个时间点6只／组。①通过密度梯度离心和贴壁筛选法分离纯化骨髓基质细胞，细胞传至第3代用于实验。②细胞移植组和损伤对照组采用改进Feeney’s自由落体装置建立大鼠刨伤性脑损伤模型，正常对照组不做处理，假伤组仅开骨窗不至伤。③大鼠骨髓基质细胞体外纯化、扩增并经Brdu标记后，细胞移植组无菌条件下将总体积1mL的3&;#215;10^6个骨髓基质细胞经大鼠尾静脉注入，其余3组注入等量生理盐水。通过神经运动功能评分观察移植后大鼠神经行为学改善情况，通过组织学方法观察移植骨髓基质细胞脑内存活迁移情况和对损伤皮质细胞凋亡影响情况。结果：实验选用大鼠72只，全部进入结果分析。①神经运动功能评分情况：细胞移植组于术后7，14，21，28d分别为（15．3&;#177;2．7），（16．4&;#177;2．5），（16．9&;#177;2．1），（18．3&;#177;1．7）分，明显高于损伤对照组（t=3．15，2．96，2．25，2．92，P均〈0．05）。②细胞移植组Brdu免疫组化染色观察：除移植后28d外，其他各时问点损伤皮质周边区均发现阳性细胞，阳性细胞为呈棕色，圆形或椭圆形的单核细胞。③术后不同时问各组原位末端标记检测法染色观察结果：正常对照组和假伤组镜下观察未见典型凋亡细胞，偶可见非特异性淡染细胞散在分布；细胞移植和损伤对照各时间点除移植后28d外，在伤侧皮质区均可见有较多的凋亡细胞。④骨髓基质细胞移植后不同时问点伤侧皮质神经细胞凋亡的变化：与损伤对照组比较，细胞移植组伤侧大脑皮质神经细胞凋亡率在移植后7，14，21d明显降低[（17．26&;#177;2．71），（11.78&;#177;2．52）；（12．76&;#177;1．52），（7．66&;#177;1.54）；（7．40&;#177;1．22），（3．32&;#177;1．51）％；t=3．62，5．78，5．14，P均〈0．01]。结论：静脉移植骨髓基质细胞能够减少脑损伤后细胞的凋亡，从而明显促进脑损伤大鼠神经功能的恢复。提示骨髓基质细胞静脉移植治疗脑损伤具有一定的可行性。     

解毒通络方对脑缺血损伤大鼠海马与皮质神经递质变化的影响

目的：观察解毒通络方对脑缺血大鼠恢复期海马与皮质中单胺类递质和乙酰胆碱含量的影响。方法：实验于2005-05／2006—02在北京中医药大学病理实验室与中国中医科学院西苑中医院药理实验室完成。选择健康SD大鼠150只，采用双侧颈总动脉夹闭结合低血压状态制作脑缺血模型，将造模成功的150只大鼠随机数字表法分为5组，正常组、模型组及解毒通络方低剂量组、中剂量组、高剂量组，各30只。每组又分为造模后4，8周2个时相点，每个时相点15只。各剂量治疗组每天按不同剂量灌服解毒通络口服液（由栀子、丹参、黄芪、天麻等组成），低、中、高剂量分别相当于生药1．85，3．7，7．4g／kg，配置成给药体积为5mL／kg的溶液；模型组、正常组同时灌胃相应体积的洁净水。以改进的柱前、柱后双酶柱结合高效液相电化学方法检测大鼠海马与皮质的乙酰胆碱含量；以高效液相电化学方法检测大鼠海马与皮质的单胺类神经递质及其代谢产物的含量。结果：纳入动物150只，均进入结果分析。①脑缺血后4周模型组大鼠海马去甲。肾上腺素水平与正常组比较显著升高[分别为（797．29&;#177;60．04），（528．90&;#177;149．13）μg/L，P〈0．01]、乙酰胆碱水平显著降低[分别为（19．72&;#177;10．09），（39．73&;#177;22131）μg/L，P〈0．011，皮质去甲肾上腺素、高香草酸水平与正常组比较显著降低[分别为（52.81&;#177;21．71），（258．65&;#177;125．82）μg/L，P〈0．01；（5．22&;#177;3．19），（9.02&;#177;2．27）μg/L，P〈0．05]，海马与皮质多巴胺、5-羟色胺及其他代谢物及皮质乙酰胆碱水平均无明显变化。②脑缺血后8周模型组大鼠海马去甲。肾上腺素、多巴胺水平与正常组比较显著升高[分别为（346．88&;#177;125．98），（110．76&;#177;18．56）μg/L，P〈0．05；（7．16&;#177;3．52），（3．78&;#177;0．44）μg/L，P〈0．01]，5-羟色胺、乙酰胆碱水平显著降低[分别为（79．38&;#177;26．47），（127．64&;#177;23．03）μg/L，P〈0．01；（14．75&;#177;5．21），（22．59&;#177;6．58）μg/L，P〈0．05]，皮质去甲。肾上腺素水平也显著降低[分别为（57．67&;#177;18．30），（133．43&;#177;39．15）μg/L，P〈0．01]，皮质单胺类递质代谢产物及乙酰胆碱水平则无明显变化。解毒通络方可使上述各项指标的绝大部分恢复到接近正常大鼠水平。结论：解毒通络方能够有效促进脑缺血大鼠海马与皮质中单胺类递质和乙酰胆碱代谢紊乱状态的恢复。     

黄芪多糖干预实验性脑出血后血肿周围细胞凋亡及核因子κB表达的变化

目的：观察黄芪多糖对大鼠脑出血后神经细胞凋亡及核因子κB表达的影响。方法：实验于2006-01／06在南京医科大学中心实验室完成。①选用健康雄性SD大鼠69只，按随机数字表法分为3组：假手术组、模型组与治疗组，每组23只，每组分别于术后6h，1，3，5d取5只用于病理切片制作，于术后3d每组各取3只用于电镜检查。②模型组与治疗组均采用Ⅶ型胶原酶诱导脑出血模型，假手术组以等量生理盐水代替Ⅶ型胶原酶；治疗组于造模术后2h给予黄芪多糖（美国泛华医药公司Pharmagenesis提供，批号8k01101）25mg／kg腹腔注射，1次／d；其余两组在同样时间点给予2mL生理盐水腹腔注射。③用原位末端标记技术和免疫组化方法检测血肿周围神经凋亡和核因子κB表达的动态变化。④透射电镜观察术后3d血肿周围神经元超微结构的变化。结果：大鼠69只均进入结果分析。①血肿周围神经元凋亡细胞：模型组于术后6h开始增多，为（31．24&;#177;4．55）个／高倍视野。术后1d明显增多，为（72．58&;#177;7．23）个／高倍视野，术后3d达高峰[（159．42&;#177;12．26）个／高倍视野]，术后5d减少[（90．98&;#177;7．65）个／视野]；模型组术后各时间点明显多于假手术组[（1．73&;#177;0．37），（1．45&;#177;0．30），（1．43&;#177;0．32），（1．41&;#177;0．13）个／高倍视野，P〈0．01]。黄芪多糖组术后1，3，5d神经元凋亡细胞为（57．64&;#177;8．45），（132．65&;#177;8．48），（61．23&;#177;7．12）个／高倍视野，少于模型组（P〈0．05-0．01）。②血肿周围核因子κB阳性细胞数：模型组与治疗组术后6h在血肿周围及皮质部位见大量核因子κBp65阳性细胞，术后3d达高峰，术后6h&;#177;5d各时间点均明显高于假手术组（P〈0．01）；治疗组术后6h，1，3，5d为（19．21&;#177;3．87），（44．28&;#177;5．76），（53．29&;#177;5．67），（27．82&;#177;2．74）个／高倍视野，均少于模型组[（26．75&;#177;4．08），（58．33&;#177;8．13），（68．15&;#177;6．89），（37．98&;#177;4．57）个／高倍视野，P〈0．05～0．011。③神经元超微结构：假手术组基本正常；治疗组神经元细胞损伤程度轻于模型组：结论：黄芪多糖可能是通过抑制核因子κB表达来减轻脑出血后的细胞凋亡．对脑出血损伤有神经保护作用。     

电磁脉冲对海马神经元的损伤及其对[Ca^2＋]i的影响

背景：电磁脉冲照射可影响实验大鼠的学习记忆功能，并造成大鼠海马组织损伤和超微结构改变。 目的：观察电磁脉冲对离体培养的海马神经元的损伤效应及其对[Ca^2＋]i的影响，以深入分析电磁脉冲致脑损伤的可能机制。 设计：随机对照动物实验。 单位：承德医学院病理教研室。 材料：Wistar乳鼠若干只，雌雄各半。电磁脉冲辐射源：高场强电磁脉冲模拟源。 方法：实验于2004—03／12分别在军事医学科学院和承德医学院完成。Wistar乳鼠若干只，麻醉下断头取脑，分离海马组织，调整细胞悬液浓度至5&;#215;10^8L^-1接种。分组：①培养细胞分为对照组和照射组，于照射后即刻（0h）收集细胞进行形态学观察和胞内游离钙离子浓度测定；②另培养细胞分为对照组和照射后0h组和12h组，进行细胞凋亡和坏死率的测定。（培养细胞用量：每项检查每组1个培养瓶，重复3次。）电磁脉冲辐射条件为6&;#215;10^4V／m，脉冲上升时间为20ns，脉宽为30μs，频率为2．5脉冲／min，作用2min。原代培养的海马神经元经电磁脉冲辐射后，倒置相差显微镜下观察照射前后神经元形态学变化；FACS法检测细胞凋亡和坏死；Fluo-3-AM荧光探针负载、激光共聚焦显微镜扫描测定神经元胞内游离钙离子浓度[Ca^2＋]i。 主要观察指标：神经元形态学变化；细胞凋亡率和坏死率；胞内游离钙离子浓度[Ca^2＋]。 结果：①电磁脉冲辐射后即刻，神经细胞逐渐发生液化，神经元突起回缩、变性。②电磁脉冲辐射后12h凋亡率较辐射后即刻有所恢复，但与对照组相比均显著增加[（59．27&;#177;1．27）％，（72．17&;#177;6．21）％，（17．45&;#177;5．63）％，P〈0．051。③在辐射后即刻和12h坏死率比对照组升高，但差异无统计学意义[（13．71&;#177;2．31）％，（11．96&;#177;1．04）％，（8．45&;#177;0．67）％，P〉0．05]。④电磁脉冲辐射后即刻[Ca^2＋]i荧光强度显著高于对照组（107．34&;#177;26．14，54．93&;#177;16．08，P〈0．05）。 结论：电磁脉冲致海马神经元形态学损伤、坏死与凋亡率增加，神经元内的Ca^2＋荧光强度明显增加。     

热休克蛋白27对人晶状体上皮细胞氧化损伤的保护作用及其机制

目的：观察热休克预处理诱导的热休克蛋白27对晶状体上皮细胞的保护作用。 方法：实验于2004—01／12在中国医科大学卫生部小儿先天畸形重点实验室完成。体外培养人晶状体上皮细胞系HLB—C3细胞，随机分为4组：①正常对照组。②氧化损伤组：细胞中加入200μmol／LH2O2作用6h。③热休克处理组：42℃预热30min后，37℃恢复2h，处理同氧化损伤组。④放线菌酮组：预热前30min加入放线菌酮（25mg／L），其余处理同热休克处理组。观察各组细胞存活率、超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活性；DNA ladder和Annexin V—FITC流式细胞仪检测晶状体上皮细胞凋亡率；免疫印迹法检测各组中热休克蛋白27和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3的表达。 结果：①细胞活力：氧化损伤组低于正常对照组（0．24&;#177;0．02，0．28&;#177;0.04，P〈0．01），热休克处理组高于氧化损伤组（0．27&;#177;0．04，P〈0．05），放线菌酮组低于热休克处理组（0．23&;#177;0．01，P〈0．01）。②细胞凋亡率：氧化损伤组高于正常对照组[（15．69&;#177;1．54）％，（4．17&;#177;0．83）％，P〈0．01]；热休克处理组低于氧化损伤组[（8．34&;#177;1．19）％，P〈0．01]；放线菌酮组高于热休克处理组[（13．58&;#177;1．21）％，P〈0．01]。③超氧化物岐酶和过氧化氢酶活性：氧化损伤组低于正常对照组（P〈0．01），热休克处理组高于氧化损伤组（P〈0．05），放线菌酮组低于热休克处理组（P〈0．01）。④热休克蛋白27表达：正常对照组细胞中略有表达，氧化损伤组表达稍有增加，热休克处理组表达明显增多，放线菌酮组未见表达。⑤半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3的表达：正常对照组细胞表达较弱，氧化损伤组表达增多，热休克处理组的表达少于氧化损伤组。 结论：热休克预处理诱导的热休克蛋白27对氧化损伤的晶状体上皮细胞起着保护作用。其保护机制可能是：①对与晶状体抗氧化有关的酶防御系统的影响：②小分子热休克蛋白对抗细胞凋亡。     

颈部挥鞭伤仿真发生装置及其模拟实验

目的：验证自行设计的颈部挥鞭伤仿真发生装置的可操作性及稳定性，一通过模拟实验分析颈部挥鞭伤的伤情特点以及损伤程度和牵引加速度之间的关系。方法：实验于2003—09／2004—05在第三军医大学新建的实车碰撞实验室完成。选取健康成年杂种犬21只，随机分为4组：重度伤组、中度伤组、轻度伤组各6只，分别施加（40&;#177;1．5）g，（25&;#177;1．5）g，（15&;#177;1．5）g的牵引加速度；对照组3只，用于检查正常颈段脊髓的病理切片。采用自行设计的颈部挥鞭伤仿真发生装置，建立犬颈部挥鞭伤的实验模型，通过联合行为评分（分为五级：0级：弛缓性瘫痪；1级：肌紧张和膀胱控制失调；2级：受伤后肢的负重作用；3级：表现为1或2个后肢跛行；4级：能短时间行走、跑，不能走直行路线；5级：正常，完全恢复）对实验犬的运动、感觉、反射以及肢体动作协调等脊髓功能进行综合评定。检测伤前和伤后皮质体感诱发电位和运动诱发电位的变化以及损伤程度。结果：实验纳入21只犬全部进入结果分析，中途无脱落。①颈部挥鞭伤仿真发生装置的建立：此装置可以根据落锤重量和下落高度差的调节产生比较稳定、不同大小的牵引力和牵引加速度，能较好的模拟汽车追尾碰撞中乘员的头颈部运动特点，可用于仿真汽车追尾碰撞过程中颈部挥鞭伤的发生过程。②行为学观测（联合行为评分）：不同的加速度组其损伤的程度不同。重度伤组、中度伤组和轻度伤组在致伤后各时相点的评分均小于正常值（5分），且3组评分依次递增。③皮质体感诱发电位的变化：伤后即刻重度伤组出现了波形基本消失，没有明显的NPN波形。与各自伤前比较，中度伤组和轻度伤组伤后即刻的N1，P1波均明显升高[（37．2&;#177;2．7），（12.4&;#177;1．3）μV；（58．9&;#177;3．1），（48．6&;#177;2．0）μV；（18．2&;#177;2．1），（12．4&;#177;2．0）μV；（55．5&;#177;2．0），（48．7&;#177;2．3）μV，P均〈0．01]。与重度伤组伤后24h比较，中度伤组和轻度伤组的N1，P1波均明显降低[（21．4&;#177;1．4），（17．9&;#177;1．9），（17．0&;#177;2．5）μV，P均〈0．01；（53．9&;#177;4．8），（51．7&;#177;4、4），（51．5&;#177;8．4）μV，P均〉0．05]。④运动诱发电位的变化：伤后即刻重度伤组出现了波形基本消失，没有明显的NPN波形。与各自伤前比较，中度伤组和轻度伤组伤后即刻的N1，P1波均明显升高[（20.5&;#177;2．5），（7．7&;#177;0．8）μV：（25．85&;#177;1．4），（17．8&;#177;2．6）μV：（12．1&;#177;1．9）。（7．85&;#177;1．3）μV；（22．6&;#177;1．7），（17．6＋2．0）μV，P均〈0．01]。与重度伤组伤后24h比较，中度伤组和轻度伤组的N1，P1波均明显降低[（18．5&;#177;2．5），（13．1&;#177;3．9），（8．75&;#177;0．7）μV，P均〈0．01；（21．7&;#177;2．4），（19．7&;#177;1．8），（19．8&;#177;2．3）μV，P均〈0．05]。⑤脊髓C4-7段病变情况：大体观察除了重度伤组出现颈部皮下出血，肺部出血水肿外，其余组皆无异常。光镜检测下重度伤组可见神经元数量较少，绝大多数发生变性、坏死，中度伤组可见大部分的神经元变性，轻度伤组形态基本正常。结论：自制的颈部挥鞭伤致伤装置能较好地模拟汽车追尾碰撞中乘员的头颈部运动特点，可用于仿真汽车追尾碰撞过程中颈部挥鞭伤的发生过程。对犬施加的致伤牵引加速度越大，则引起犬的颈段脊髓损伤程度也越严重。     

穹隆海马伞切断与卵巢切除大鼠皮质区及Meynert核区雌激素受体α的表达

目的：观察穹隆海马伞切断与卵巢切除大鼠脑内皮质区、基底前脑Meynert核区雌激素受体α表达的变化，探讨胆碱能和雌激素系统与认知障碍相关的发病过程。 方法：实验于2003—03／12在青岛大学医学院附属医院脑病防治重点实验室（省级重点实验室）完成。①分组：成年健康雌性Wistar大鼠28只，分为穹隆-海马伞切断组、卵巢切除组、穹隆-海马伞切断加卵巢切除组、对照组，每组7只。②模型制备：穹隆-海马伞切断组动物麻醉固定于脑立体定位仪后，于前囟后2．2～2．5mm，中线外1mm处凿开颅骨，切开硬脑膜。自制双刃刀完全切断海马伞外侧缘。双侧卵巢切除组动物麻醉后，打开腹腔，在肾脏下方的脂肪内取出卵巢，结扎并切除。对照组除不切断卵巢和穹隆-海马伞外，其余步骤同模型组。③免疫细胞化学染色法观察皮质区和基底前脑Meynert核区雌激素受体α阳性细胞表达变化。Olympus光学显微镜下（10&;#215;40倍）计数平均单个视野雌激素受体α阳性细胞的数量。 结果：28只大鼠均进入结果分析。在皮质区，Meynert核区雌激素受体α表达阳性细胞数：双侧穹隆-海马伞切断组，双侧卵巢切除组，双侧穹隆-海马伞切断加双侧卵巢切除组均明显低于对照组[皮质区：（25．71&;#177;1．11），（18．29&;#177;7．99），（20．31&;#177;8．96）。（58．69&;#177;30．26）个／视野；Meynert核区：（3．31&;#177;1．11），（3．83&;#177;1．34），（2．26&;#177;2．45），（52．31&;#177;22．52）个／视野，（P〈0．01）]。 结论：穹隆-海马伞切断和／或卵巢切除可以影响大鼠皮质区和Meynert核区雌激素受体α的表达，认为胆碱能系统与雌激案系统可能存在内在的相互作用的病理过程。     

韶关市农村留守儿童孤独感状况调查

目的了解广东省韶关市农村地区留守儿童孤独感现状及其影响因素。方法对韶关市某地区两所农村小学3～6年级学生中的489名留守儿童采用儿童孤独量表和自编调查表进行问卷调查。结果17．6％留守儿童存在孤独感，不同性别孤独感发生率无差异性，不同年龄及不同年级间孤独感发生率差异均有极显著性（P〈0.01）；随年级增加，孤独感发生率呈下降趋势（X^2趋势=5．970，P〈0.05）。留守儿童孤独感与健康状况、学习成绩、学习困难程度、父母教育方式、父母间关系和老师教育方式等因素显著相关（P〈0.01～0．05）。结论农村地区留守儿童中存在一定程度的孤独感问题，老师和家长应以正确的态度和方法对待留守儿童，以减少其孤独感的发生。     

产科新生儿不同部位经皮测黄报警预值的可靠性观察

目的对比观察产科新生儿不同部位经皮胆红素（TCB）报警预值的可靠性。方法132例产科新生儿采取随机数字分组法分为正常产组和剖宫产组各66例,新生儿均于产后第4天同一时间点应用KJ8000经皮测黄仪分别测量额、胸、腹、额胸、额胸腹TCB值,TCB〉12．9mg／dl者,取得亲属同意抽取静脉血检测血清胆红素（SB）,对比分析不同部位TCB及其与sB值的差异。结果两组分别有17例或21例达到TCB报警预值。两组TCB或sB相同方法及相同部位比较,差异无统计学意义（P〉0．05）;两组TCB不同部位对比,额部值最低、胸部值最高,且与其他部位同组对比差异均有统计学意义（P〈0．01）;两组sB值对比差异无统计学意义（t=1．53,P〉0．05）,与不同部位TCB对比均以胸部数值差异无统计学意义（P〉0．05）,而与其他部位TCB两组差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论正常产与剖宫产新生儿术后sB对比差异无意义;TCB动态监测以胸部结果更接近SB。     

Determination of loss of quality of life

Physiatrists are a valuable resource in legal settings, where assessment of functional capacity to perform work and of future medical needs must be determined. Physiatrists help determine what future medical care is needed to restore and maintain an individual at the maximum level of life function. This article focuses on the use of a quality of life (QOL) rehabilitation model, rather than a medical model, for enhancing functional performance, modifying environments, and facilitating patient coping. We discuss use of the QOL model to describe and influence a patient's physical, psychological, cognitive, vocational/economic, and social/leisure domains.     

护士选择性应用静脉留置针现状分析

[目的]了解护士选择性应用留置针的现状以及主要影响因素,为指导临床留置针合理应用提供理论依据。[方法]采用自设问卷对138名护士留置针选择性使用情况及其影响因素进行调查。[结果]约1／4的护士并不知道应选择性使用留置针,近60％的护士在实际工作中选择留置针的意识较差;护士选择性应用留置针的决策受多因素影响;不同科室、职称及是否具有带教资格选择性应用留置针的影响因素不尽相同;绝大部分护士希望参加选择性应用留置针相关内容的培训。[结论]临床护士操作前考虑留置针选择的意识有待加强。建议实施有针对性的培训以提高护士选择性应用留置针的能力。     

血液透析患者家庭护理提供者的生活质量调查

目的:了解江汉油田血液透析(血液透析)患者家庭护理提供者(护理者)的生活质量。方法:对60例血液透析患者的家庭护理提供者进行一般情况和生活质量综合评定问卷(QOLI-74)调查,并进行相关性和多因素回归分析。结果:家庭护理提供者各维度的主观生活满意度与其客观指标相关,但也与其需求、年龄、文化程度、与患者的关系有关。结论:客观状态是影响主观生活满意度的重要因素,同时应考虑护理者的需求、年龄、文化程度、与患者的关系对护理者主观生活满意度的影响。