基于PD-1介导NF-κB通路探讨莪术-三棱抗肝癌的机制

目的:基于程序性死亡受体1(programmed death-1,PD-1)介导NF-κB通路探究莪术-三棱对肝癌细胞的影响及作用机制。方法:在体检测各组药物对H22肝癌荷瘤小鼠抑瘤率、脏器指数的影响;对白细胞介素1(interleukin-1,IL-1)、白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)及肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平的影响。运用免疫组化观察瘤组织NF-κBp65、Bcl-2以及Bax蛋白阳性表达。MTT法检测莪术醇、三棱内酯B二者单用及联用对HepG2肝癌细胞的抑制率;蛋白质免疫印迹法检测联合应用对PD-1、NF-κB、Bcl-2、κB抑制因子激酶α/β(inhibitor ofκB kinase α/β,IKK-α/β)以及核因子κB抑制蛋白α(inhibitor of NF-κB,IκB-α)的影响。结果:体内实验表明,与模型组相比,联合用药能够显著降低瘤质量,能够抑制TNF-α、IL-1和IL-6的表达(其中联合用药高剂量组TNF-α、IL-1和IL-6下降显著),能够抑制瘤组织中NF-κBp65、Bcl-2...     

NF-κB信号通路在食管鳞癌细胞系中的激活

目的核转录因子NF-kappaB(NF-κB)是一种重要的转录因子,参与调控多种与炎症、抗凋亡、肿瘤形成和转化有关的基因表达。本研究拟通过检测NF-κB信号通路在食管鳞癌细胞系中是否存在,分析NF-κB在食管鳞癌细胞中的激活状态及其对食管鳞癌细胞的生存及转化作用。方法采用免疫细胞化学法和Western blotting法检测两株食管鳞癌细胞系中NF-κB亚单位p50和p65,阻遏物IκBα及其上游激酶IKKβ的蛋白表达。并采用EMSA法检测两株食管鳞癌细胞核中NF-κB与DNA的结合活性。结果食管鳞癌细胞中存在激活的NF-κB信号通路,p50、p65、IκBα及其上游激酶IKKβ的蛋白在细胞质中均表达,并且p50/p65在细胞核中具有较高的DNA结合活性。结论本研究发现NF-κB信号通路在两种食管鳞癌细胞系被激活,提示激活的NF-κB信号通路可能在食管鳞癌发生中起重要作用。     

NK-104在人肝癌细胞系对TNF-α诱导的NF-кB基因活性的影响

背景与目的炎症与癌症的发生已经引起学者们的关注.Nuclear factor KappaB因子(NF-κB)是炎症过程中关键的基因之一,在细胞的生存及恶化的演变过程中起着重要的调节作用,能够被各种外界刺激因素激活.本研究探讨第三代3-羟基-3-甲基戊二酰辅A(3-hydroxy-3-methyl-glutaryl-CoA,HMG-CoA)还原酶抑制剂NK-104在人肝癌细胞系对肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的NF-κB基因活性的影响.方法以肝癌细胞系Huh 7为靶细胞,WST-8法测定NK-104对细胞增殖的影响;以Western blot法检测NK-104对TNF-α诱导的细胞核NF-κB基因活性的表达及IκBα的表达;ELISA法检测NK-104对IL-8产物的影响.结果NK-104(0.1 μmol/L)单独治疗组对NF-κB基因的表达无明显影响,TNF-α(1 ng/ml)能够明显提高NF-KB基因的表达呈1.8倍左右,与NK-104共同作用后,能够显著抑制它的表达(P＜0.01).而细胞内IκBσ的表达差异无显著性(P＞0.05);NK-104可显著降低NF-KB激活后炎性细胞因子IL-8产物的分泌.结论NK-104在人肝癌细胞系对TNF-α诱导的NF-KB基因活性及其IL-8产物的分泌具有明显的抑制作用,为临床治疗肝癌提供一定的实验依据.     

阻断巨噬细胞NFκB-p65通路对香烟促进非小细胞肺癌NCI-H520细胞株增殖的影响

目的 研究香烟对非小细胞肺癌(NSCLC) NCI-H520细胞株增殖的影响以及巨噬细胞在此过程中的作用.方法 采用Transwell Inserts细胞培养室共培养人类原代巨噬细胞或分化为巨噬细胞的人类单核巨噬细胞株U937细胞和NCI-H520细胞.应用免疫印迹法和凝胶电泳迁移实验检测NFκ B通路的激活;应用NF κ B-p65 shRNA干扰质粒抑制U937细胞p65表达;利用BrdU ELISA分析香烟抽提物(CSE)对NCI-H520细胞的促增殖效应;ELISA法分析肿瘤坏死因子α(TNFα)和IL-6的释放.结果 共培养及香烟刺激增强了人类巨噬细胞的NFκ B-p65的入核以及同靶基因结合的活力.与对照组相比,NCI-H520细胞经不同浓度CSE单独处理,并没有发现肺癌细胞增殖明显加快(P＞0.05);而经过与人类原代巨噬细胞或分化为巨噬细胞的U937细胞共培养4d,巨噬细胞明显促进NCI-H520细胞的增殖(P＜0.01),且CSE的刺激显著增强这一效应(P＜0.01).NF κ B-p65 shRNA干扰质粒明显抑制了U937细胞的NFκ B-p65表达,抑制了NFκB通路的激活,减弱了CSE对NCI-H520细胞增殖的影响(P＜0.01),同时也抑制了炎性因子IL-6和TNF释放(P＜0.01).结论 香烟通过巨噬细胞的中介促进了NCI-H520细胞的增殖.采用RNA干扰技术阻断巨噬细胞的NFκB通路显著地抑制了香烟促进肺癌细胞的增殖,削弱香烟引起的巨噬细胞的炎症因子释放可能是其作用机制.     

温阳散结汤含药血清通过NF-κB通路调控肿瘤相关巨噬细胞极化对Lewis肺癌的影响

目的:观察温阳散结汤对 Lewis 肺癌小鼠肿瘤生长及瘤组织中巨噬细胞M2型极化的影响,并探索其调控NF-κB信号通路抑制肿瘤相关巨噬细胞M2型极化,对Lewis肺癌细胞侵袭、迁移能力的影响。方法:建立C57BL/6小鼠 Lewis 肺癌移植瘤模型,温阳散结汤干预14 d 后观察小鼠瘤重和肺转移灶,计算肺转移抑瘤率,免疫组化染色检测小鼠瘤组织中巨噬细胞M2型表面标志物 CD206 的表达;温阳散结汤灌胃SD大鼠制备含药血清,采用IL-13干预RAW264.7小鼠巨噬细胞建立巨噬细胞M2型极化模型,CCK-8法检测温阳散结汤含药血清对巨噬细胞增殖的影响,流式细胞术和Western-blot检测 CD206的表达,RT-PCR检测巨噬细胞M2型标志基因的mRNA表达,ELISA法检测细胞上清中IL-1β、IL-10、TGF-β 和TNF-α 的水平变化,Western-blot检测氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）、核因子-κB p65(NF-κB p65)和磷酸化核因子-κB p65（pNF-κB p65）的蛋白表达;收集温阳散结汤含药血清处理的M2型巨噬细胞条件培养基,将其作用于Lewis肺癌细胞,通过Transwell侵袭迁移实验检测Lewis 肺癌细胞的侵袭和运动迁移能力。结果:温阳散结汤干预后,明显减少了小鼠瘤重和肺转移灶数,并抑制了瘤组织CD206的阳性表达（P<0.05）;温阳散结汤含药血清干预后,IL-13诱导的M2型巨噬细胞中F4/80+CD206+的细胞比例和CD206蛋白表达明显减少,MRC1、Arg1、Ym1的mRNA表达水平显著降低,细胞中TNF-α、IL-1β的含量明显升高,IL-10、TGF-β的含量明显降低,同时明显下调了细胞PPARγ、NF-κB p65、pNF-κB p65的蛋白表达及pNF-κB p65/NF-κB p65比值（均P<0.05）;温阳散结汤含药血清处理的M2型巨噬细胞条件培养基干预后,Lewis肺癌细胞迁移和侵袭细胞数明显减少（P<0.05）。结论:温阳散结汤具有抑制肺癌肿瘤生长和转移的作用,其作用机制可能与调节NF-κB通路,抑制IL-13诱导的RAW264.7细胞M2型极化,从而抑制Lewis肺癌细胞侵袭和迁移能力相关。     

胃癌细胞外泌体调控M2型巨噬细胞极化及对胃癌细胞增殖和迁移的影响

目的:探究胃癌细胞外泌体调控M2型巨噬细胞极化及对胃癌细胞增殖和迁移能力的影响。方法:差速离心法提取胃黏膜上皮细胞GES-1和胃癌细胞株MGC-803、SGC-7901外泌体,透射电镜和Western blot鉴定外泌体,将U937细胞与PMA共孵育诱导U937细胞分化为巨噬细胞的同时分别与PBS、GES-1 exo、MGC-803 exo、SGC-7901 exo、IL-4孵育48 h,流式细胞术检测孵育后各组细胞CD206和HLA-DR表达,qRT-PCR检测CCL17、CXCL8、IL-10、TGF-β、TNF-α、IL-6、IL-1β表达,Western blot检测p-NF-κB、NF-κB、IκBα表达水平,将各组诱导后的U937细胞与MGC-803、SGC-7901共培养后,收集MGC-803、SGC-7901细胞,MTT检测各组细胞的增殖能力,Transwell小室法检测各组细胞的迁移能力。结果:差速离心法提取的外泌体符合外泌体的形态特征,并且在激光共聚焦显微镜下观察到外泌体可被U937细胞摄取,与MGC-803 exo、SGC-7901 exo共孵育后的U937细胞CD206显著高表达,HLA-DR低表达（P＜0.05）,CCL17、CXCL8、IL-10、TGF-β表达显著上调（P＜0.05）,TNF-α、IL-6、IL-1β表达显著下调（P＜0.05）,NF-κB磷酸化水平显著增加（P＜0.05）,IκBα表达显著增加（P＜0.05）,并且与MGC-803 exo、SGC-7901 exo诱导极化后的巨噬细胞共培养组MGC-803、SGC-7901细胞增殖和迁移能力显著增强（P＜0.05）。结论:胃癌细胞能够通过激活NF-κB信号通路促进M2型巨噬细胞极化进而诱导MGC-803、SGC-7901细胞增殖和迁移能力的增强。     

食管鳞癌及癌旁粘膜中核转录因子κB p65及IκBα基因和蛋白表达及意义

目的:探讨核转录因子κB(NF-κB)p65基因及其抑制基因IκBα的表达与食管鳞癌发生的关系。方法:用RT-PCR及免疫组化SP法检测了61例食管鳞癌及其正常粘膜上皮、癌旁粘膜上皮中NF-κBp65基因、IκBα基因mRNA及蛋白的表达。结果:食管鳞癌中p65mRNA、IκBαmRNA的表达量明显高于正常上皮(P<0.01),p65蛋白、IκBα蛋白胞浆表达或胞核表达率均明显高于正常上皮(P<0.01)。癌旁粘膜中,NF-κBp65蛋白、IκBα蛋白在癌旁正常上皮中的胞浆或胞核阳性率均明显低于不典型增生上皮、原位癌和浸润癌(P均<0.05)。结论:NF-κBp65、IκBαmRNA表达和蛋白表达均与食管鳞癌的发生有关。     

三氧化二砷诱导K562细胞凋亡过程中IκB-α,NF-κB蛋白表达的研究

目的探讨三氧化二砷(As2O3)诱导慢性粒细胞性白血病K562细胞凋亡过程中IκB-α以及NF-κB的表达变化.方法应用不同剂量As2O3诱导K562细胞凋亡,以Western-Blot免疫印迹电泳检测NF-κB,IκB-α的表达,流式细胞术检测K562细胞凋亡及分析IκB-α的阳性表达率变化.结果 As2O3可诱导K562细胞凋亡,随着As2O3浓度从1 μmol/L到4 μmol/L的增高细胞凋亡率由16.0%增加到60.6%,胞浆中IκB-α阳性表达率则由88.1%减少到49.2%,胞核中p65量逐渐增加.结论 As2O3可诱导K562细胞凋亡,在此过程中伴有NF-κB的激活,在一定剂量范围内激活的程度随着砷剂浓度的增加而增强.砷剂激活NF-κB通过其抑制蛋白IκB-α的降解.     

EGCG对因子Ⅶa促进SW620细胞增殖与迁移的干预作用及机制

目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对因子Ⅶa促进SW620细胞增殖与迁移的干预作用及机制。方法用EGCG、因子Ⅶa等处理SW620细胞,应用流式细胞术、Transwell法分别检测细胞增殖周期及迁移能力;Western blotting检测细胞NF-κB抑制蛋白(IκB-α)、核NF-κB(p65/RelA)的蛋白水平变化。结果 EGCG(100 mg/L)能干预因子Ⅶa对SW620细胞增殖与迁移的促进作用;EGCG能抑制因子Ⅶa对IκB-α表达的下调作用及对核NF-κB(p65/RelA)表达的促进作用。结论 EGCG可能通过干预信号分子IκB-α和NF-κB(p65/RelA)的表达和调节作用,抑制因子Ⅶa对SW620细胞增殖与迁移的促进作用。     

HCV C 蛋白调控肝门部胆管癌细胞中NF-κB活性的研究

目的探讨HCV C蛋白在肝门部胆管癌细胞中对核转录因子κB(NF-κB)调控作用.方法利用稳定表达HCV C蛋白的QBC939细胞株(QBC939 HCV C ),通过NF-κB报道基因分析法、凝胶迁移率分析(EMSA)检测HCV C蛋白增强肝门部胆管癌细胞NF-κB的DNA结合活性和反式激活活性.RT-PCR、Western blot检测HCV C蛋白对核转录因子κB抑制蛋白α(IκBα)mRNA及p50、p65、IκBα蛋白表达及IκBα蛋白磷酸化的影响.结果①EMSA结果显示QBC939HCV C 细胞系中NF-κB相对信号密度明显比QBC939细胞高.②将pNF-κB-lun表达质粒转染稳定表达HCV C蛋白胆管癌细胞系中,通过单光子检测仪检测荧光素酶活性,结果显示QBC939HCV C 细胞中活化NF-κB为12.8倍,而QBC939细胞中NF-κB为2.6倍.③RT-PCR显示IκBα mRNA在QBC939 HCV C 细胞和QBC939细胞中的表达无明显差异;Western blot结果显示稳定表达HCV C蛋白的QBC939 HCV C 细胞株的胞核中的p50、p65蛋白高水平表达,而未转染HCV C蛋白的QBC939细胞仅检测出极低水平的p50、p65蛋白.在QBC939HCV C 细胞胞浆中IκBα蛋白低水平表达,QBC939细胞高水平表达,但IκBα蛋白磷酸化水平则相反.结论HCV C蛋白通过增加IκBα降解激活的NF-κB在肝门部胆管癌的发生中起重要作用.     

靶向 siRNA 沉默 NF -κB/p65对肺腺癌细胞株 A549增殖与凋亡的影响

目的：研究运用 RNA 干扰（RNA interference,RNAi）技术抑制 NF -κB/ p65基因的表达对人肺腺癌细胞株 A5492细胞增殖、周期及凋亡的影响,探讨 NF -κB/ p65基因在肺腺癌发生发展中的作用。方法：利用阳离子脂质体 LipofectamineTM2000将人 NF -κB/ p65的小干扰 RNA 转染入肺腺癌细胞株 A549中。运用 real time - PCR 和 Western blot 技术检测 A549细胞内 NF -κB/ p65、增殖相关基因 Cyclin D1和凋亡相关基因 Bcl-2、Bax 的 mRNA 的转录水平和蛋白的表达情况,MTT 法检测细胞的增殖活力,显微镜下观察细胞的生长情况。结果：NF -κB/ p65 siRNA 能有效地抑制 A549细胞中 NF -κB / p65基因在 mRNA 水平上的表达（P﹤0.001）,同时下调 Cyclin D1和 Bcl -2的表达（均 P ﹤0.01）。上调 Bax 表达（P ﹤0.001）;蛋白表达也具同样趋势。MTT 实验证明 p65 siRNA 转染组中细胞增殖减慢;显微镜镜下观察显示,细胞生长减慢,凋亡形态改变明显。结论：体外实验初步证明 NF -κB/ p65基因在肺腺癌细胞株 A549增殖分化与凋亡方面扮演重要角色,通过沉默其表达可抑制肺腺癌细胞株 A549增殖并诱导其凋亡。进一步证实 NF -κB/ p65对 Cyclin D1、Bcl -2、Bax 具有调控作用,他们共同参与了肺腺癌的发生发展过程。     

NF - κB 在光动力治疗肿瘤中的研究进展简

传统的抗癌治疗模式给癌症患者带来众多副作用,而光动力疗法作为一种新型的癌症治疗方法,以其独特的靶向性、无耐药性等,引起越来越多学者的关注。以往研究表明,光动力杀伤肿瘤细胞是由多种机制介导的,除了已知的坏死和凋亡机制外,光动力诱导产生的炎性反应也能够间接有利于肿瘤细胞的清除。NF—κB转录因子是调控炎性因子（如细胞因子、趋化因子和细胞粘性因子）的主要因素。此外,NF—κB还调节抗凋亡基因、环氧化酶（COXs）和金属蛋白酶（MMPs）的表达。本文就近年来NF—κB在光动力治疗肿瘤细胞中的研究进展做～综述。     

食管鳞癌中NF—κB、p53的表达及其与新辅助化疗敏感性的关系

目的：研究食管鳞癌NF—κB和p53的表达情况与术前化疗敏感性的关系。方法：应用免疫组织化学技术EnVision法,检测60例新辅助化疗前胃镜活检食管鳞癌组织中NF—κB和p53蛋白的表达情况,并分析其与肿瘤对化疗反应的关系。结果：在60例食管癌中NF—κB和p53阳性表达率分别为61．6％（37／60）,56．6％（34／60）。NF—κB和p53表达与鳞癌分级及肿瘤侵犯深度无相关性（P〉0．05）,与淋巴结转移密切相关（P〈0．05）。60例食管鳞癌组织中NF—κB与p53的表达呈正相关（Rs=0．279,P〈005）;共阳性25例中22例对化疗反应无效,NF—κB与p53共阳性与化疗敏感性有相关性（P〈0．01）。结论：NF—κB和p53在食管癌的发生发展中可能起协同作用,测定其表达情况可作为预测肿瘤对化疗敏感性的指标。     

Gambogic Acid通过影响NF-κB信号通路诱导A549细胞凋亡

目的:研究Gambogic Acid（GA）对人非小细胞肺癌A549细胞系中NF-κB信号通路的影响及其对细胞凋亡的促进作用。方法:Western blot法和共聚焦显微镜成像技术检测GA对NF-κB的信号通路的影响,MTT及流式细胞（FCM）术检测GA对A549细胞的促凋亡作用。结果:Western blot发现GA能显著抵抗TNF-α诱导导致的IκB磷酸化水平上升及IκB的降解;共聚焦显微镜成像进一步发现GA有效阻止了NF-κB入核;MTT结果显示GA能显著抑制A549细胞的增殖,当药物浓度为5.0μmol/L时抑制率可达到（93.5±6.5）％（P<0.05),IC50值为1.2±0.4 μmol/L;凋亡检测结果显示A549细胞在0.0、0.5、1.0、2.0、3.0及5.0 μmol/L药物处理下细胞凋亡率分别是（6.0±0.7）%、（15.5±2.3）%、（35.0±3.6）%、（43.5±2.7）%、（43.0±3.8）%及（53.7±2.6）%（P<0.05);结论:实验表明,GA能有效地抑制A549细胞增殖和诱导其凋亡,其机制可能是通过影响NF-κB信号通路而发生作用。     

TRAIL、Caspase-8和NF-κB蛋白在人骨肉瘤中的表达及其与细胞凋亡的相关性研究

目的探讨TRAIL、Caspase-8和NF—κB在人骨肉瘤组织及骨软骨瘤组织中的表达规律及其与骨肉瘤细胞凋亡的相互关系。方法应用免疫组化方法,检测TRAIL、Caspase-8和NF—κB蛋白在43例骨肉瘤及15例骨软骨瘤中的表达,并经图像分析系统测量TRAIL、Caspase-8和NF—κB蛋白的平均光密度（0D）值;用TUNEL方法检测骨肉瘤及骨软骨瘤中细胞凋亡。结果TRAIL、Caspase-8蛋白在骨肉瘤中的阳性表达均低于骨软骨瘤组织（P〈0．05）;而NF—κB蛋白在骨肉瘤中的表达高于骨软骨瘤（P〈0．05）。TRATL与Caspase-8蛋白在骨肉瘤中表达呈正相关（P〈0．01）;而TRATL与NF-κB蛋白在骨肉瘤中表达呈负相关（P〈0．01）。骨肉瘤组细胞凋亡指数（AI）显著低于骨软骨瘤组（P〈0．05）;TRAIL、Caspase-8蛋白表达与细胞凋亡均呈正相关（P〈0．01）;而NF—κB蛋白表达与骨肉瘤细胞凋亡呈负相关（P〈0．01）。结论TRAIL基因可能是诱导骨肉瘤细胞凋亡的分子基础,参与了其发生发展过程中细胞凋亡的调控。Caspase-8作为影响细胞凋亡过程的因子,在骨肉瘤发生、发展中发挥作用。NF-κB在骨肉瘤细胞增殖与凋亡中具有重要作用。TRAIL、Caspase-8蛋白呈低表达,可能受NF—κB高表达的调控而不能诱导细胞凋亡。提示三者在骨肉瘤的发生、发展中起协同作用。     

乳腺癌组织内NF—κBp65的表达与淋巴转移的关系

目的：研究乳腺癌组织内细胞核因子（NF—κBp65）与血管内皮生长因子-c（VEGF—C）的表达及意义。方法：采用SABC免疫组化染色法检测乳腺癌组织及癌旁对照组织内NF—κBp65与VEGF—C蛋白的表达,并分析二者的相关性及与临床病理因素的关系。结果：乳腺癌组织内NF—κBp65蛋白表达的阳性率为76．0％,明显高于癌旁对照组织30．0％（P〈0．05）;乳腺癌组织内VEGF—C蛋白表达的阳性率为84．O％,明显高于癌旁对照组织20．0％（P〈0．05）;乳腺癌组织内NF—κBp65蛋白与VEGF—C蛋白的表达呈正相关（1=0．53,P〈0．05）,并且均与肿瘤淋巴转移密切相关。结论：乳腺癌组织内NF—κBp65的高表达可上调VEGF—C表达,进而导致肿瘤周围淋巴管增生、扩张,促进肿瘤细胞向区域淋巴结转移。     

阻断巨噬细胞NFKB-p65通路对香烟促进非小细胞肺癌NCI—H520细胞株增殖的影响

研究香烟对非小细胞性肺癌（NSCLC）NCI-H520细胞株增殖的影响以及巨噬细胞在此过程中的作用。方法 采用“Transwell？ Inserts”细胞培养室培养系统共培养人原代巨噬细胞或分化为巨噬细胞的人单核巨噬细胞株U937细胞和NCI-H520细胞。应用免疫印迹法和凝胶电泳迁移实验检测NF？B通路的激活;应用NF？B -p65 shRNA干扰质粒抑制U937细胞p65 表达;利用BrdU ELISA分析香烟抽提物（CSE）对NCI-H520细胞的促增殖效应;ELISA分析炎症细胞因子TNF？和IL-6的释放。结果 共培养及香烟刺激增强了人巨噬细胞的NF？B -p65的入核,以及同靶基因结合的活力。与对照组相比, NCI-H520细胞经不同浓度CSE单独处理,并没有发现肺癌细胞增殖明显加快（p〉0.05）;而经过与人原代巨噬细胞或分化为巨噬细胞的U937细胞共培养4天,不仅发现巨噬细胞明显促进NCI-H520细胞的增殖（p〈0.01）,而且观察到CSE的刺激显著增强这一效应（p〈0.01）。NF？B -p65shRNA干扰质粒明显抑制了U937细胞的NF？B -p65表达,抑制了NF？B通路的激活,减弱了CSE对NCI-H520细胞增殖的影响（p〈0.01）,同时也抑制了炎性因子IL-6和TNF？释放（p〈0.01）。结论 香烟通过巨噬细胞的中介促进NCI-H520细胞的增殖。采用RNA干扰技术阻断巨噬细胞的NF？B通路显著地抑制香烟促进的肺癌细胞的增殖,削弱香烟引起的巨噬细胞的炎症因子释放可能是其作用机制。     

TRADD和NF-κB在乙肝后肝硬化和肝癌中的表达及意义

目的探讨TNF受体相关死亡区域蛋白(TRADD)、核因子κB(NF-κB)在乙肝后肝硬化(LC)和原发性肝癌(HCC)中的表达及其临床意义。方法 采用Western blot分别检测35例LC和HCC中TRADD和NF-κB蛋白的表达。采用Fisher精确概率法进行统计分析。结果 TRADD在HCC中表达阳性率为68.6%(24/35), LC中为100.0%(P＝0.0002)。NF-κB在HCC中表达阳性率为77.1%(27/35), LC中为100%(P=0.002)。TRADD与HCC患者的甲胎蛋白水平相关(P＜0.01)。结论 乙肝后肝硬化中TRADD和NF-κB介导的肝细胞增殖和凋亡处于活跃水平。这种细胞增殖和凋亡信号转导机制的异常可能在肝硬化癌变过程中起着重要作用。     

去甲斑蝥素对白血病细胞系K562的增殖、凋亡、细胞周期及NF-κB活性的影响

目的 探讨去甲斑蝥素（NCTD）对白血病细胞系K562的增殖、凋亡、细胞周期及核因子（NF）-κB活性的影响。方法 采用CCK-8试剂盒检测不同浓度NCTD（0、10、25、50、100 μmol／L）处理K562细胞24、48、72、96 h后的增殖抑制率,采用流式细胞术检测不同浓度NCTD处理24、48 h后的细胞凋亡率和处理48 h后的细胞周期,采用原位细胞凋亡检测试剂盒（Tunnel）检测不同浓度NCTD处理24、48 h后的细胞凋亡指数,采用Western blotting检测不同浓度NCTD处理48 h后的NF-κB p65及IκB α水平以评价NF-κB活性的变化。结果 在10～100 μmol／L范围内,NCTD可呈时间和浓度依赖的方式升高K562细胞的增殖抑制率,各浓度间的差异有统计学意义（P＜0.05）;与0 μmol／L相比,其余各浓度处理24、48 h后的凋亡率和凋亡指数均升高,处理48 h后的G0／G1期细胞比例升高,S、G2／M期细胞比例均降低,NF-κB p65水平降低,IκB-α水平升高,以上差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论 NCTD对白血病细胞系K562有细胞毒性,可抑制该细胞的增殖、诱导其凋亡及细胞周期阻滞并下调NF-κB表达。     

乳腺癌组织中核转录因子NF—κB和抑癌基因PTEN的表达及其意义

目的：探讨乳腺癌中核转录因子NF—κB和抑癌基因PTEN的表达及意义。方法：用免疫组织化学方法检测58例乳腺癌、20例乳腺增生症组织中NF—κB和抑癌基因PTEN的表达。结果：乳腺癌中NF—κB表达明显高于乳腺增生症组织，NF—κB表达强度与组织学分级和腋淋巴结转移有关（P〈0．05）。与患者年龄、肿瘤大小、组织学分型无关。乳腺癌中PTEN蛋白阳性率低于乳腺增生症组织，乳腺癌PTEN蛋白的表达与乳腺癌组织学分级有关（P〈0．05），与患者年龄、肿瘤大小、组织学分型、腋淋巴结无明显相关性（P〉0．05）。NF—κB p65与PTEN蛋白在乳腺癌组织中表达呈负相关（r=-0．355，P〈0．05）。结论：提示乳腺癌中NF—κB的高表达及PTEN缺失表达与乳腺癌的发生发展有关。