鸡卵核提取物中诊断混合性结缔组织病的特异性抗原分析

目的：分析鸡卵核提取物中检测混合性结缔组织病（ＭＣＴＤ）的特异性抗原成份。方法：应用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ及考马斯亮兰染色技术对鸡卵核提取进行蛋白组份分析;应用Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ技术对鸡卵核蛋白抗原进行免疫识别分别。结果：鸡卵核提取物中可见１３个蛋白成份,分子量分别为７８,７６,７２,６４,５７,５５,５０,４８,４６,４２,３,３２和２４ＫＤ。皮肌炎和多发性肌炎（ＤＭ／ＰＭ）及硬皮病（ＰＳＳ）病     

鸡卵核中42000蛋白的纯化及其对系统性红斑狼疮的诊断价值

目的 纯化鸡卵核中42000蛋白，并探讨该抗原对系统性红斑狼疮（SLE）的诊断价值。方法 将常规SDS－PAGE和电洗脱技术相结合，分离纯化鸡卵核中42000蛋白，并用于Dot-ELISA诊断SLE。结果 用该技术分离纯化了鸡卵核中42000蛋白，获得约300μg具有明显免疫反应性的高纯度抗原。用于检测SLE病人血清126份，阳性86份，阳性反应率为68．25％；正常人血清100份未发现假阳性；对皮肌炎和多发性肌炎（DM／PM）72份、硬皮病（PSS）48份和混合性结缔组织病（MCTD）78份血清亦无交叉反应出现。结论 以纯化的鸡卵核中42000蛋白为抗原，建立的Dot-ELISA方法，用于诊断SLE，具有良好的特异性和敏感性。     

鸡卵核中72000蛋白的纯化及其对混合性结缔组织病的诊断价值

目的：纯化鸡卵核中72000蛋白，并探讨该抗原对混合性结缔组织病(MCTD)的诊断价值。方法：以常规SDS—PAGE和电洗脱技术相结合，分离纯化鸡卵核中72000蛋白，并用于Dot—BLISA诊断MCTD。结果：用该技术分离纯化了鸡卵核中72000蛋白，获得约2000μg具有明显免疫反应性的高纯度抗原。用于检测MCTD病人血清78份，阳性63份，阳性反应率为80．77％；正常人血清100份未发现假阳性；对皮肌炎和多发性肌炎(DM／PM)72份，硬皮病(PSS)48份和系统性红斑狼疮(SLE)126份血清亦无交叉反应出现。结论：以纯化的鸡卵核中72000蛋白为抗原，建立的Dot—ELISA方法，用于诊断MCTD具有良好的特异性和敏感性。     

系统性红斑狼疮患者血清抗鸡卵核中42000 蛋白抗体的测定及其临床意义

目的:通过检测系统性红斑狼疮(SLE)患者血清抗鸡卵核42000蛋白抗体,研究其与SLE有关指标的关系,以探讨该抗体在SLE发病中的作用.方法:收集SLE患者、非SLE结缔组织病患者和正常人群血清.用Dot-ELISA方法测定抗鸡卵核42000蛋白抗体及其滴度.结果:116例SLE患者血清有78例检出该抗体,其阳性率为68.2%(78/116);正常对照人群100例未见假阳性;皮肌炎和多发性肌炎(DM/PM)76份、硬皮病(PSS)48份和混合性结缔组织病(MCTD)88份血清均无交叉反应出现.该抗体的几何平均倒数滴度(GMRT)在活动期高于缓解期,与疾病活动指数和ANA滴度呈显著正相关,与C3呈负相关,与抗ds-DNA抗体滴度无明显相关.结论:血清抗鸡卵核42000蛋白抗体的检测,对SLE诊断和随访可起到一定的临床提示作用.     

混合性结缔组织病患者血清抗鸡卵核中72000蛋白抗体测定及其临床意义

目的:通过检测混合性结缔组织病(MCTD)患者血清抗鸡卵核中72000蛋白抗体,研究其与MCTD有关指标的关系,以探讨该抗体在MCTD发病中的作用.方法:收集MCTD患者、非MCTD结缔组织病患者和正常人群血清.用Dot-ELISA法测定抗鸡卵核中72000蛋白抗体及其滴度.结果:88例MCTD患者血清中有71例检出该抗体,阳性率为80.7%(71/88);正常对照人群100例均为阴性;皮肌炎和多发性肌炎(DM/PM)76份,硬皮病(PSS)48份和系统性红斑狼疮(SLE)116份血清无交叉反应出现.在MCTD患者血清中,该抗体的几何平均倒数滴度(GMRT)治疗前高于治疗后,与疾病活动指数、ANA滴度及抗nRNP抗体滴度呈显著正相关.结论:MCTD患者血清抗鸡卵核中72000蛋白抗体检测,对MCTD诊断有较高的价值,在治疗随访中也可起到一定的临床提示作用.     

双向电泳及免疫印记法对囊尾蚴囊液抗原的分析、纯化及鉴定

目的 通过分析、纯化囊液抗原，筛选高免疫反应性和高特异性抗原组分，用于囊虫病免疫诊断。方法 用分辨率极高的双向电泳法对囊液抗原进行分离、纯化，并通过免疫印记，用囊虫病人血清、包虫病人血清和其它异源血清筛选特异性抗原组分，为建立新一代免疫学诊断方法奠定基础。结果 得到了等电点为9．4，分子量为14KD和16．6KD两组抗原组分，特异性达100％，并且仅被急性感染的囊虫病人血清识别，而不被囊虫完全钙化病人血清识别。结论 得到了高免疫反应性和高特异性的蛋白纯品，为囊虫病的免疫诊断奠定了基础。     

细粒棘球绦虫原头蚴抗原对犬的免疫效果和抗原组份分析

分别用细粒棘球绦虫活原头蚴勾浆抗原和分泌抗原2ml(蛋白含量2mg/ml),加完全佐剂和不完全佐剂,免疫犬2次,每次间隔21d,可使犬获得不完全抗攻击感染的能力.匀浆抗原的免疫效果优于分泌抗原,感染率为25%,与对照组90%比有显著差异,并对体内虫体的发育有明显抑制作用,孕卵率为0;分泌抗原组的感染率、孕卵率与对照组相比差异不大.经抗原蛋白组份分析,原头蚴匀浆抗原显示14条蛋白组份,分别为22.5、31.0、36.0、40.0、42.1、46.5、5l.0、57.6、66.2、74.4、83.1 KD,94.0 KD以上有3条蛋白组份.其中83.1KD和 94.0 KD以上3条蛋白组份可被免疫犬和对照阳性犬血清识别.     

抗U_1RNP抗体在混合性结缔组织病检测中的应用

利用免疫印迹法分别对混合性结缔组织病(MCTD)、SLE及其他自身免疫性疾病血清中的抗U_1RNP抗体进行了检测,结果MCTD阳率为93.3％(14/15),SLE阳性率为38.5％(15/39),其他自身免疫性疾病阳性率9.1％(4/44)。血清滴度稀释显示MCTD患者抗U_1RNP抗体呈高滴度阳性。     

斯氏肺吸虫成虫10—30KD抗原蛋白的分离及在免疫诊断中的应用

在酶免疫转移印渍技术（EITB）分析斯氏肺吸虫虫体成份，显示10～30KD抗原蛋白（主带22、24和26KD）对该病具免疫诊断价值的基础上，将SDS－PAGE和电洗脱技术相结合，分离并纯化出斯氏肺吸虫成虫的10～30KD蛋白组份，采用Dot－ELISA方法免疫诊断肺吸虫。10～30kD的斯氏肺吸虫成虫抗原与斯氏、卫氏肺吸虫病人血清均呈阳性反应，与其它吸虫病和健康人血清末产生反应。该结果进一步表明10～30KD斯氏肺吸虫成虫抗原的Dot－ELISA为肺吸虫病高度特异、敏感的免疫诊断方法。并为两种肺吸虫的共同抗原，可用于免疫诊断斯氏、卫氏肺吸虫病。     

流行性出血热病毒抗原组份的分析

用免疫转印技术对流行性出血热(EHF)病毒的抗原组份进行了初步分析。发现两种不同来源的兔抗EHF兔疫血清和20份4～21病日的EHF病人血清,均可与分子量在68,000和66,000道尔顿左右的两种病毒多肽成份发生反应,正常人和非EHF病人血清以及正常兔血清则否,表明这两种多肽可能是EHF病毒引起机体抗体应答反应的主要抗原成份。     

日本血吸虫循环免疫复合物中抗原的鉴定

用低浓度ＰＥＧ（ＭＷ６０００）提取的日本血吸虫感染兔血清中循环免疫复合物（ＣＩＣ）直接免疫家兔，制备ＣＩＣ兔血清。采用酶联免疫印迹技术（ＥＩＴＢ）分析鉴定日本血吸虫ＣＩＣ中抗原成份。结果表明，ＣＩＣ中成虫及其排泄分泌物源性抗原成份有１７种，虫卵源性抗原成份有５种。且ＩＦＡＴ方法分析ＣＩＣ中抗原成份定位于成虫表膜及肠腔上皮。     

日本血吸虫循环免疫复合物中抗原的鉴定

用低浓度ＰＥＧ（ＭＷ６０００）提取的日本血吸虫感染兔血清中循环免疫复合物（ＣＩＣ）直接免疫家兔，制备抗ＣＩＣ兔血清。采用酶联免疫印迹技术（ＥＩＴＢ）分析鉴定日本血吸虫ＣＩＣ中抗原成份。结果表明，ＣＩＣ中成虫及其排泄分泌物源性抗原成份有１７种，虫卵源性抗原成份有５种。用ＩＦＡＴ方法分析ＣＩＣ中抗原成份定位于成虫表膜及肠腔上皮。     

旋毛虫肌幼虫表面抗原的酶联免疫印迹分析

用酶联免疫印迹分析旋毛虫肌幼虫表面抗原,结果表明其表面抗原有4个多肽、分子量为102、55/50、48、44KD。与同源感染兔血清反应显示上述多肽均具有抗原活性。与异源感染兔血清反应显示48、44KD多肽具有较高的特异性。动态观察发现,家兔感染后7天。其血清抗体即可识别上述4个抗原多肽。并持续至154天。与表面抗原兔免疫血清反应显示。小鼠血清中循环抗原(72KD)出现于感染后3—21天。     

二棘血蜱唾液腺抗原成分的分析

二棘血啤唾液提取物（SGE）经十二烷基硫酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS－PAGE）显示出22条蛋白带，其中主带有5条，分子量分别为215KD，114KD，105KD，66KD和52KD。用二棘血蜱叮刺家兔后兔血清做免疫印渍，特异性抗原带168KD，152KD，105KD和98KD。推测二棘血蜱168KD，152KD，105KD和98KD的蜱唾液腺蛋白抗原能够有效地诱导宿主产生获得性免疫力。     

酶免疫转移印渍试验(EITB)分析斯氏狸殖吸虫成虫抗原

本文应用十二烷基硫酸钠—聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS—PAGE)分离斯氏狸殖吸虫成虫抗原,并通过转移电泳至硝酸纤维薄膜(NC)上,然后用酶联免疫试验观察成虫抗原蛋白与感染斯氏狸殖吸虫的病人、犬及大鼠血清的反应,检测和识别特异性虫体抗原蛋白。实验结果呈示;虫体抗原经SDS-PAGE分离、染色后可显示20余条蛋白区带;分子量分别为22、24、26KD的抗原蛋白对人体和动物的斯氏狸殖吸虫感染具有诊断价值。