基质金属蛋白酶2抑制物在鼻咽癌中的表达及与其生物学行为的关系

目的:研究基质金属蛋白酶2抑制物(TIMP2)在鼻咽癌中的表达及其与鼻咽癌生物学行为的关系.方法:采用免疫组织化学 Elivision Plus二步法对50例鼻咽癌组织、15例炎性鼻咽黏膜组织TIMP2进行检测,并进行χ2检验.结果:免疫组织化学结果显示TIMP2在鼻咽癌组织中表达显著高于炎性鼻咽黏膜组织(P<0.05).TIMP2在有淋巴结转移者极显著高于无淋巴结转移者(P<0.01).TIMP2随临床浸润分期升高其表达上调,但差异无统计学意义(P>0.05).结论:表明TIMP2在鼻咽癌细胞突破基底膜向外扩散及转移中起着重要作用,MMP2/TIMP2比率失衡在判断鼻咽癌侵袭性、估计其预后中有一定意义.     

鼻咽癌组织中nm23-H1蛋白的表达及其临床意义

目的了解抑癌基因nm23-H1蛋白在鼻咽癌组织中的表达,探讨其与鼻咽癌发生发展及转移的关系。方法采用免疫组化法检测43例鼻咽癌患者鼻咽部组织中nm23-H1蛋白的表达,分析鼻咽癌患者不同临床分期及鼻咽癌是否伴有淋巴转移组织中nm23-H1蛋白表达的差异;同期选取17例慢性鼻咽炎患者鼻咽部组织作为对照。结果鼻咽癌组织中nm23-H1蛋白阳性表达率为53.4%,慢性鼻咽炎组织中nm-23H1阳性率为88.2%,两者比较有统计学意义（P〈0.05）;鼻咽癌Ⅰ-Ⅱ期组织中阳性率为88.2%,Ⅲ-Ⅳ期组织中阳性率为30.8%,两者比较有统计学意义（P〈0.05）;鼻咽癌伴有淋巴结转移组和不伴有淋巴转移组阳性率分别为38.5%、76.5%,两者比较有统计学意义（P〈0.05）。结论抑癌基因nm23-H1蛋白表达下调,可能与鼻咽癌发生发展、侵袭转移有关。     

环氧化酶-2蛋白在鼻咽癌组织中的表达

目的 探讨环氧化酶-2（COX-2）蛋白在鼻咽癌组织中的表达及其临床意义。方法 应用免疫组织化学方法检测45例鼻咽癌组织及20例鼻咽黏膜不典型增生组织中COX-2的表达。结果 鼻咽癌组织中COX-2蛋白阳性表达率为71．1%（32／45），鼻咽黏膜不典型增生中COX-2蛋白阳性表达率为10．0%（2／20），两者比较差异具有统计学意义（P〈0．001）。结论 COX-2蛋白在鼻咽癌组织中表达增高，表明COX-2可能在鼻咽癌的发生发展中起重要的作用。     

丙酮酸脱氢酶激酶1与鼻咽癌患者临床病理特征及预后关系

目的研究丙酮酸脱氢酶激酶1（pyruvate dehydrogenase kinase 1,PDK1）在鼻咽癌组织中的表达与临床病理因素的关系及其对预后的影响。方法应用免疫组化法检测52例鼻咽癌组织和20例鼻咽黏膜慢性炎症组织中PDK1蛋白的表达情况,统计分析PDK1表达与各临床病理特征以及其对鼻咽癌患者预后关系。结果PDK1在鼻咽癌组织中阳性表达率为61.5%（32/52）,而鼻咽黏膜慢性炎症组织为阳性表达率为35.0%（7/20）,不同组织PDK1蛋白表达差异有统计学意义（χ2=4.098,P〈0.05）。PDK1蛋白的表达与颈部淋巴结转移及颅神经侵犯以及T分级相关,与患者性别、年龄、临床分期等无显著相关性。生存分析显示,PDK1蛋白阳性表达组患者的中位生存时间为51个月,阴性表达组为58个月。结论 PDK1基因可能在鼻咽癌的发生、发展、淋巴结转移和预后中起着重要作用,PDK1阳性表达可作为鼻咽癌不良预后因素。     

基质金属蛋白酶2及其组织抑制物在鼻咽癌中的表达

目的 研究基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2,MMP-2)及其组织抑制物(tissue inhibitor of metalloproteinases 2,TIMP-2)在鼻咽癌中的表达及其与鼻咽癌生物学行为的关系.方法 采用免疫组化Elivision Plus二步法对50例鼻咽癌组织、15例炎性鼻咽黏膜组织MMP-2、TIMP-2进行检测,并进行x2检验.结果 免疫组化结果显示MMP-2、TIMP-2在鼻咽癌组织中表达显著高于炎性鼻咽黏膜组织(P＜0.05).MMP-2表达随鼻咽癌临床浸润程度的升高,淋巴结转移的发生而上调,有显著性差异(P＜0.01).TIMP-2在有淋巴结转移者极显著高于无淋巴结转移者(P＜0.01).TIMP-2随临床浸润程度升高其表达上调,但无显著性差异(P＞0.05).结论 表明MM P2和TIMP-2在鼻咽癌细胞突破基底膜向外扩散及转移中起着重要作用,MMP-2/TIMP-2比率失衡在判断鼻咽癌侵袭性、估计其预后中有一定意义.     

酪氨酸激酶受体B与脑源性神经营养因子mRNA在鼻咽癌中的定量表达

目的研究酪氨酸激酶受体B（tyrosine kinase receptors B,TrkB）及其配体脑源性神经营养因子（brain derived neurotrophin factor,BDNF）在鼻咽癌中的表达及其与鼻咽癌生物学行为的关系。方法采用实时荧光PCR的方法对57例鼻咽癌组织、20例鼻咽炎性黏膜组织中的TrkB、BDNF进行检测。结果实时荧光PCR结果为TrkB、BDNF在鼻咽癌组织中表达显著高于鼻咽炎性黏膜组织（P〈0．05）。TrkB表达随鼻咽癌临床浸润程度的升高,淋巴结转移的发生而上调（P〈0．05）。BDNF在有淋巴结转移者显著高于无淋巴结转移者（P〈0．05）。TrkB的表达强度与BDNF有正相关的关系（rs=0．281,P〈0．05）。结论表明TrkB和BDNF在鼻咽癌的浸润和转移机制中起着重要作用,特异性阻断TrkB／BDNF信号传导通路,将为临床治疗鼻咽癌找到新的突破点。     

鼻咽癌组织中PI3Kp85的异常表达

目的 通过检测PI3Kp85在鼻咽癌组织及鼻咽部慢性炎症组织中的表达情况,探讨它们在鼻咽癌发生、发展过程中的作用。方法 采用免疫组织化学SP法检测PI3Kp85在57例鼻咽癌和20例鼻咽部黏膜慢性炎症组织中的表达情况,应用Image-ProPlus图像分析软件测定免疫组化图像的平均光密度（mean optical density, MOD）,运用SPSS13.0软件进行统计学分析,观察其与鼻咽癌临床病理特征之间的关系。结果 PI3Kp85在鼻咽癌组织的阳性表达率为78.95％,而在鼻咽部慢性炎症组织中的阳性表达率为45.00％,两者差异有统计学意义（P＜0.05）。PI3Kp85表达与临床分期、淋巴结转移、原发病灶大小及患者年龄、性别均无相关性（P＞0.05）。结论 PI3Kp85蛋白表达可能与鼻咽癌的发生有关。     

miR-485-5p在鼻咽癌组织中的表达及临床意义

目的探讨miR-485-5p在鼻咽癌组织中的表达及临床意义。方法采用qRT-PCR检测76例鼻咽癌和28例鼻咽部黏膜组织中miR-485-5p的表达,并结合临床信息,统计分析其表达水平与鼻咽癌患者临床病理参数的相关性。结果miR-485-5p在鼻咽癌组织中的表达较鼻咽部黏膜组织显著下降（P<0.05）;同时miR-485-5p低表达与鼻咽癌患者的淋巴结转移密切相关（P=0.001）,而与鼻咽癌患者的年龄、性别、T分级和TNM分期无明显相关（P> 0.05）。结论本研究表明miR-485-5p为转移相关基因,可能在鼻咽癌转移中发挥了重要作用。     

鼻咽癌组织内四种肿瘤相关蛋白表达及其与微血管密度和颈淋巴转移的关系

目的 研究人类前列腺癌转移抑制基因（kang ai 1，KAI1）、肿瘤转移抑制基因（nonmetastasis23，nm23）、E26转录因子（E26 transformation-specific-1，ETS-1）、血管内皮生长因子（vascular endothdial growth factor，VEGF）在鼻咽癌组织中的表达，并用CD34标记微血管测定密度，探讨它们之间的相关性及其与鼻咽癌淋巴转移和预后的关系。方法 应用免疫组织化学Envision二步法检测首诊时有颈淋巴转移的鼻咽非角化性癌（non-keratinizing carcinoma，NKC）50例、无淋巴转移的NKC30例和30例鼻咽黏膜慢性炎症组织内KAI1、nm23、ETS-1、VEGF蛋白的表达水平，并分析与NKC组织内微血管密度的关系。结果 KAI1、nm23蛋白在颈淋巴转移组、无颈淋巴转移组和鼻咽黏膜慢性炎症组织中的阳性表达率依次递增（χ^2=6．2，P〈0．05；χ^2=7．4，P〈0．01）；ETS-1、VEGF蛋白在3组间的阳性表达率依次递减（χ^2=12．8，P〈0．01；χ^2=9．1，P〈0．01）。80例NKC病例中KAI1、nm23蛋白阳性表达者的微血管密度（microvascular density，MVD）分别低于其阴性表达者（t=2．4，P〈0．05；t=2．0，P〈0．05）；ETS-1、VEGF蛋白阳性表达者MVD分别高于其阴性表达者（t=2．6，P〈0．05；t=3．6，P〈0．01）。KAI1和nm23蛋白共同阳性表达较两者各自单独阳性表达时MVD降低（t=2．5，P〈0．05，t=2．3，P〈0．05）；淋巴转移率降低（χ^2=5．2，P〈0．01；χ^2=4．3，P〈0．05）；ETS-1和VEGF蛋白共同表达较两者单独表达时MVD增高（t=2．1，P〈0．05；t=2．2，P〈0．05），淋巴转移率增加（χ^2=4．1，P〈0．01；χ^2=4．1，P〈0．01），提示KAI1与nm23蛋白及ETS-1与VEGF蛋白的表达有相互协同的作用。KAI1与nm23蛋白及ETS-1与VEGF蛋白阳性表达成正相关关系（r=0．5，P〈0．05；r=0．4，P〈0．01）。NKC患者有或无颈淋巴转移与治疗后5年生存期的高低差异有统计学意义（χ^2=4．4，P〈0．05）。结论 KAI1、nm23、ETS-1和VEGF蛋白的表达与鼻咽癌组织的微血管密度有明显相关性，与鼻咽癌的淋巴转移和预后密切相关，提示它们可以作为预测鼻咽癌颈淋巴转移及评估预后的参考指标。     

上皮钙黏蛋白和连环蛋白120在鼻咽癌组织中的表达及相关性研究

目的：研究鼻咽癌组织中上皮钙黏蛋白（E-caol）和连环蛋白120（P^120ctn）的表达情况,探讨它们的相关性及与临床病理特征的关系。方法：应用免疫组织化学二步法,检测经4％甲醛固定,石蜡包埋的56例鼻咽癌标本和15例正常鼻咽黏膜上皮标本中Ecad、P^120ctn的表达情况。结果：56例鼻咽癌组织中Ecad、P^120ctn异常表达率分别为64．29％、67．86％,主要表现为细胞膜表达减弱,细胞膜表达减弱伴细胞胞质表达;15例对照组正常鼻咽黏膜上皮Ecad、P^120ctn异常表达率均为6．67％,均差异有统计学意义（P〈0．01）。鼻咽癌组织中E-cad、P^120ctn在低分化癌组的异常表达率（71．43％、85．71％）明显高于高中分化癌组（42．86％,36．29％）;在有颈部淋巴结转移组的异常表达率（80．00％、85．00％）明显高于无颈部淋巴结转移组（52．78V0、58．33％）;在Ⅲ～Ⅳ期鼻咽癌组的异常表达率（76．92％、84．62％）明显高于I～Ⅱ期鼻咽癌组（46．66％、53．33％）;均差异有统计学意义（P〈20．05）。E—cad与P^120ctn在56例鼻咽癌组织中共同表达和共同异常表达分别为12例和30例,有显著一致性,呈正相关（r=0．5217,P〈0．01）。结论：Ecad与P^120ctn的异常表达与鼻咽癌的分化程度、临床分期、颈部淋巴结转移密切相关。它们共同参与鼻咽癌发生、发展、浸润及转移过程。     

鼻咽癌干细胞miRNA表达特征研究

目的 探讨鼻咽癌干细胞的miRNA表达特征.方法 分离扩增CNE2细胞株鼻咽癌干细胞,流式细胞术检测其干细胞标志物CD133和CD44表达活性,并与鼻咽癌细胞6 10B、5-8F、CNE1、CNE2、HONE1及鼻咽上皮细胞NP69进行对比分析,继行肿瘤相关miRNAs的qRT-PCR检测.同时,在以免疫组化法检测不同临床分期鼻咽癌原发灶组织CD133和CD44表达活性基础上,qRT-PCR法分析其特异性miR 200b表达特征及其与临床分期的相关性.结果 CNE2鼻咽癌干细胞以CD133标志物为突出特征,联合检测CD44具有更高敏感性和特异性;在所检测的肿瘤相关miRNAs中,鼻咽癌干细胞以miR 200b活性低下甚至缺失为基本特征,甚至低于高转移潜能鼻咽癌细胞5 8F.鼻咽癌原发灶组织标本干细胞标志物也以CD133为突出特征,并平行表现与临床分期相关的鼻咽癌干细胞特异性miR 200b活性显著低表达趋势.结论 鼻咽癌干细胞以CD133为特征性标志物,miR-200b活性特异性低表达甚至不表达,可能是其特征性分子靶点。     

p57^KiP2和Cyclin A在喉癌中的表达及其临床意义

目的研究细胞周期素依赖性激酶抑制因子p57^KiP2和细胞周期素A（CyclinA）在喉癌组织中的表达及其临床意义。方法40例喉癌、20例声带不典型增生、20例正常喉组织切缘标本,免疫组化S-P法检测p57^KiP2和CyclinA的表达活性,比较分析其临床意义。结果在喉癌组织中,p57^KiP2阳性表达率42.5%,显著低于癌旁正常喉黏膜与不典型增生喉黏膜（P〈0.05）,并与喉癌组织的分化程度和淋巴结转移特性相关（P〈0.05）;CyclinA阳性表达率55.0%,明显高于癌旁正常喉黏膜与不典型增生喉黏膜（P〈0.05）,并与喉癌组织的分化程度和淋巴结转移特性相关（P〈0.05）。p57^KiP2与CyclinA的表达活性呈负相关（P〈0.01）。结论p57^KiP2的低表达及CyclinA高表达在喉癌的发生、发展过程中可能发挥重要作用,其表达水平与喉癌的分化程度、淋巴结转移与否及预后密切相关,是判断喉癌恶性程度与淋巴结转移特性的重要参考指标。     

抑癌基因P16在喉癌中的表达及临床意义

目的 为了解P16与喉癌发生、发展及预后的关系。方法 采用免疫组化LSAB法，检测了83例喉癌和20例喉粘膜慢性炎症组织中P16蛋白的表达情况。结果 P16蛋白在喉粘膜慢性炎症标本中表达率（100％），明显高于喉癌中的阳性表达率（65％），P＜0．01。同时P16蛋白阳性率与喉癌的临床分期、肿瘤的局部浸润程度、颈淋巴结转移率负相关程度较高，P＜0．05。但与癌组织分化程度相关不明显。结论 P16表达程度与喉癌的发生、发展过程有关，可作为了解喉癌生物学特性及判断其预后的有价值的指标。     

基质金属蛋白酶-1（-1607）1G/2G基因多态性与鼻咽癌相关性研究

目的研究基质金属蛋白酶-1（matri xmetalloproteinases-1,MMP-1）（-1607）1G/2G基因单核苷酸多态性与云南汉族鼻咽癌发病风险、各临床参数及预后相关性。方法按病例对照研究,利用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（restriction fragment lengthpolymorphism-PCR,RFLP-PCR）,对241例云南籍汉族鼻咽癌患者和272例云南籍汉族健康对照进行基因分型,分析基因型与云南汉族鼻咽癌发病风险及预后关系。结果分别携带1G2G、2G2G基因型个体罹患鼻咽癌风险性是携带1G1G基因型者3.10倍和9.93倍;2G等位基因与T分期、颈淋巴结转移、临床分期明显相关（P〈0.05）。吸烟与MMP-1（-1607）2G等位基因存在相加交互作用;MMP-12G等位基因与患者预后不良相关,且2G2G基因型为独立预后影响因素。结论MMP-1（-1607）1G/2G多态性是云南汉族鼻咽癌遗传易感因素,与吸烟暴露呈现交互作用,同时与鼻咽癌预后相关。     

端粒酶HTRT在鼻咽癌及癌前病变中的表达

目的观察端粒酶HTRT在鼻咽癌及癌前病变中的表达,探讨其在鼻咽上皮癌变中的可能作用.方法运用免疫组化(LSAB)法检测端粒酶HTRT在正常鼻咽黏膜、鼻咽黏膜异型增生和鼻咽癌组织中的表达.结果鼻咽正常黏膜全部为阴性,异型增生鼻咽组织阳性表达率较低,而鼻咽癌组织HTRT阳性表达率明显升高,但其表达与肿瘤分化程度、临床分型及淋巴结转移不相关.结论HTRT表达在鼻咽癌发生中起一定作用.     

POT1蛋白在人鼻咽癌细胞系及鼻咽癌组织中的表达及临床意义

目的探讨端粒保护蛋白1(protection of telomeres 1,POT1)在人鼻咽癌细胞系及鼻咽癌组织中的表达、细胞定位及临床意义。方法应用Western blot法检测POT1蛋白在人鼻咽癌系、人鼻咽上皮细胞系、鼻咽癌组织、癌旁组织中的表达;应用细胞免疫荧光检测POT1蛋白在鼻咽癌细胞中的定位。结果 POT1蛋白在人鼻咽癌细胞系CNE-1、5-8 F、CNE-2、6-10 B中的表达强度高于在人鼻咽上皮细胞系NP69中的表达强度,分别为2.8、2.3、1.9、1.5倍;POT1蛋白主要定位于细胞质;鼻咽癌组织中POT1蛋白表达量(0.6414±0.0979)明显高于癌旁组织中的表达量(0.4386±0.0912),两组比较有统计学意义(P<0.05);鼻咽癌组织中POT1蛋白表达强度与鼻咽癌的临床分期、T分期有关(P<0.05),但与患者年龄、性别、颈部淋巴结转移无关(P>0.05)。结论 POT1蛋白表达可能与鼻咽癌的发生与发展有关。     

鼻腔-鼻窦内翻性乳头状瘤组织PCNA、bcl-2和p53的表达活性观察

目的分别检测鼻腔/鼻窦内翻性乳头状瘤（nasal invered papilloma,IP）、内翻性乳头状瘤伴不典型增生（IP with dysplasia,ID）和内翻性乳头状瘤伴恶变组织（IP with squamous cell carcinoma,SCC）中的增殖细胞核抗原、bcl-2和p53表达活性,探讨内翻性乳头状瘤恶变的可能机制。方法内翻性乳头状瘤31例、内翻性乳头状瘤伴不典型增生10例、内翻性乳头状瘤恶变5例,取活检组织,应用免疫组织化学方法分别检测增殖细胞核抗原、bcl-2和p53的表达活性,分析其病理意义。结果内翻性乳头状瘤、内翻性乳头状瘤伴不典型增生组织p53表达分别为0%、40.0%,PCNA的表达分别为25.81%、60.0%,bcl-2的表达分别为29.03%、70.0%。二者差异的组间比较以及内翻性乳头状瘤与SCC的组间比较差异有统计学意义,而内翻性乳头状瘤伴不典型增生与SCC的组间比较差异无统计学意义。结论鼻腔/鼻窦内翻性乳头状瘤的恶变,可能是其细胞增殖活性升高与凋亡活性抑制共同作用的结果。     

鼻咽癌组织中环氧合酶-2和基质金属蛋白酶-2的表达及与淋巴结转移的关系

目的:研究环氧合酶-2(COX-2)和基质金属蛋白酶-2(MMP-2)在鼻咽癌(NPC)组织中的表达及其与淋巴结转移的关系.方法:应用免疫组织化学SP法检测86例NPC组织中COX-2和MMP-2蛋白的表达,并与淋巴结转移的临床资料进行对比分析.结果:COX-2和MMP-2在NPC组织中的阳性率分别为75.58%和66.28%,显著高于正常鼻咽黏膜组织(均P<0.01);它们的表达与淋巴结转移呈正相关(均P<0.01),2种蛋白的表达之间呈正相关(P<0.01).结论:NPC组织中COX-2和MMP-2的表达均增高;二者在肿瘤淋巴结转移的过程中可能起协调作用.     

鼻咽癌组织中血管内皮因子VEGF、转移抑制基因nm23和肿瘤抑制基因p16的表达及意义

目的分析鼻咽癌组织中血管内皮因子(VEGF)、转移抑制基因nm23、肿瘤抑制基因p16的表达与鼻咽癌预后的关系.方法采用SP法检测VEGF、nm23及p16在40例鼻咽癌组织中的表达,分析它们与鼻咽癌复发、转移、患者生存期的相关性.结果鼻咽癌组织VEGF、nm23、p16的阳性表达率分别为55.0%(22/40)、57.5%(23/40)和27.5%(11/40),阳性表达与鼻咽癌患者有无转移及生存期长短有相关性.结论鼻咽癌组织中VEGF、nm23、p16的表达可作为评估鼻咽癌患者预后的参考因素.