E-cadherin/catenin复合体在膀胱移行细胞癌中的表达及意义

目的：探讨E-cadherin／catenin复合体在膀胱移行细胞癌中的表达及意义。方法：用RT-PCR和S-P免疫组化方法检测54例膀胱移行细胞癌中E-Cadherin、β-catenin基因mRNA及蛋白表达，综合分析其表达与膀胱移行细胞癌病理分级、分期的关系。结果：在膀胱移行细胞癌中，蛋白正常表达率分别为29．6％和25．9％，E-Cadher／n蛋白与mRNA表达没有统计学差异（P〉0．05），β-catenin蛋白表达与mRNA表达有明显差异（P〈0．05）。E-Cadherin、β-catenin蛋白表达与肿瘤分级、分期呈负相关（P〈0．05）。高分化病例两者共同阳性率低于低分化病例（P〈0．05）。结论：膀胱移行细胞癌中E-Cadhefin、β-catenin蛋白异常表达的原因可能不同。E-Cadherin、β-catenin同时测定对膀胱移行细胞癌预后有重要意义。     

组织芯片技术检测肿瘤相关抗原在膀胱癌、癌旁组织中的表达

目的利用组织芯片技术检测人膀胱移行细胞癌（bladder transitional cell carcinoma,BTCC）组织、癌旁组织中肿瘤相关抗原（tumor-associated antigen,TAA）的表达．方法含40块不同病理分级的人膀胱癌和40块癌旁组织组合的组织芯片一张,含64块不同病理分级的人BTCC组织芯片一张．免疫组织化学Elivision法检测膀胱癌组织和癌旁组织中TAA的表达,并对不同病理分级BTCC组织中TAA的阳性表达率进行比较．结果膀胱癌TAA的阳性染色主要位于细胞膜,BTCC组织中的总表达率为72．5％（29／40）,癌旁组织中的总表达率为30％（12／40）,差异有统计学意义（P〈0．05）．96块不同病理分级的BTCC组织中,TAA的阳性表达率分别是：G164．3％（9／14）、G269．8％（30／43）,G374．4％（29／39）．两两比较,TAA在G1、G2和G3中的阳性表达无差异性,P〉0．05,差异无统计学意义．结论膀胱癌组织中TAA的阳性表达率显著高于癌旁组织,TAA的表达和BTCC病理分级无关．组织芯片技术是检测膀胱癌TAA的一种有效方法,具有高效、快捷的优点．     

Survivin和bFGF基因在膀胱移行细胞癌组织中的表达及意义

目的：探讨Survivin和bFGF基因在膀胱移行上皮细胞癌（BTCC）中的表达及临床意义。方法：采用免疫组化S-P法，检测46例BTCC和10例正常膀胱组织中Survivin和bFGF基因的表达。结果：Survivin和bFGF基因在正常膀胱移行上皮细胞中不表达，两种基因在正常膀胱移行上皮细胞和BTCC中的表达之间差异有统计学意义（P〈0．01）；两种基因的阳性表达水平与BTCC中的病理分级、临床分期正相关（P〈0．05）；两种基因在BTCC中的表达水平之间正相关（P〈0．01）；两种蛋白在BTCC中的表达水平与BTCC的复发率正相关（P〈0．01）；两种蛋白在BTCC中的表达水平与BTCC无病生存率正相关（P〈0．05）。结论：Survivin和bFGF异常表达在BTCC发生、发展、转移、复发等过程中起着重要作用。联合检测能更好地判断BTCC的预后和制定合理治疗方案。     

凋亡抑制基因Livin在膀胱癌中的表达及临床意义

目的检测凋亡抑制基因Livin在膀胱移行细胞癌组织中的表达,以探讨其在膀胱癌发生、发展中的作用。方法应用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）法,检测了60例膀胱移行细胞癌中Livin基因的表达情况。结果60例膀胱癌组织中Livin基因阳性表达率为28．3％,10例非肿瘤膀胱组织无一例Livin表达阳性;Livin的表达与膀胱癌的病理分级、临床分期无关（均P〉0．05）;21例复发性膀胱癌组织中Livin阳性表达率为38．1％（8／21）,高于原发性膀胱癌（23．1％,9／39）。结论Livin在膀胱癌的发生发展中具有一定意义,Livin高表达提示患者可能有早期复发的倾向。     

p16、nm23-H1基因蛋白在膀胱癌的表达与临床意义

目的：探讨抑癌基因p16及肿瘤抑制基因nm23-H1在膀胱中的表达及临床意义。方法：应用免疫组织化学s-p法检测18例正常膀胱组织中及38例膀胱移行细胞癌组织中p16及nm23-H1的表达。结果：p16在正常组织、膀胱癌中阳性表达率分别为88．8％（16／18）、47．4％（18／38），两者间有显著差异性（P＜0．01）。nm23-H1在正常膀胱组织、膀胱癌中阳性表达率分别为83．3％（15／18），44．7％（17／38）。两者间有显著差异（P＜0．01）。提示，p16、nm23-H1阳性表达率与膀胱移行细胞癌的临床分期、临床分级、肿瘤大小及是否转移有密切关系。结论：p16、nm23-H1在膀胱癌中的阳性表达对抑制肿瘤生长，浸润和转移起重要作用，可作为膀胱癌患者预测转移和预后及判断膀胱移行细胞癌生物学行为的良好指标。     

膀胱移行细胞癌中FHIT、p21^wafl/cip1基因的表达

目的通过测定脆性组氨酸三联体基因（FHIT）及p21^wafl/cip1基因在膀胱移行细胞癌组织、正常膀胱组织中的表达，探讨FHIT基因以及p21^wafl/cip1基因与膀胱癌的关系及其临床意义。方法采用免疫组织化学SP法对43例膀胱移行细胞癌（BTCC）组织及14例正常膀胱组织中的FHIT基因及p21^wafl/cip1基因的蛋白表达进行检测。结果Fhit蛋白与p21^wafl/cip1蛋白在正常膀胱组织中的表达明显高于膀胱癌组织（P〈0．05）；Fhit蛋白表达与肿瘤的分期、分级无相关性（P〉0．05），而p21^wafl/cip1蛋白的表达与之有相关（P〈0．05）；Fhit蛋白的表达在GI期肿瘤、浅表性肿瘤中明显低于在正常膀胱组织中的表达（P〈0．05），而p21^wafl/cip1蛋白的表达在上述组织比较中差异无显著性；Fhit蛋白的表达在初发肿瘤中与复发肿瘤中差异无显著性，而p21^wafl/cip1蛋白的表达在上述两种组织比较差异有显著性（P〈0，05）。Fhit蛋白与p21^wafl/cip1蛋白的表达没有相关性。结论FHIT基因可能成为早期诊断膀胱移行细胞癌的指标。p21^wafl/cip1基因可能成为估计膀胱移行细胞癌的恶性程度及肿瘤侵袭性、预后的指标。FHIT基因、p21^wafl/cip1基因在膀胱移行细胞癌的发生、进展中可能没有协同性。     

膀胱移行细胞癌的ClC-3和NF-kB的表达及意义

目的：探讨C1C-3和NF-kB在膀胱移行细胞癌中的表达及意义。方法：应用免疫组织化学染色技术检测31例病理诊断为膀胱移行细胞癌和6例正常膀胱组织中ClC-3和NF-kB的表达。结果：膀胱移行细胞癌组织中C1C-3主要在癌细胞的胞膜表达，阳性表达率74％（23／31）。其中膀胱移行细胞癌Ⅰ级阳性表达率40％（4／10），Ⅱ级阳性表达率81％（9／11）、Ⅲ级阳性表达率100%（10／10）。NF-kB在癌细胞的胞浆内表达，阳性表达率83％（26／31）。其中膀胱移行细胞癌Ⅰ级阳性表达率60%（6／10），Ⅱ级阳性表达率90％（10／11），Ⅲ级阳性表达率100％（10／10）。6例正常膀胱组织中仅有1例ClC-3表达弱阳性，NF-kB表达均为阴性。膀胱移行细胞癌组织中ClC-3和NF-kB阳性表达率高于正常膀胱组织（P〈0．01）。结论：ClC-3和NF-kB可能与膀胱移行细胞癌病理分级和增殖有关。     

基质金属蛋白酶-9在膀胱移行细胞癌中的表达及意义

目的探讨MMP-9在正常膀胱组织和膀胱移行细胞癌中的表达和临床意义。方法免疫组化分析146例膀胱移行细胞癌组织中MMP-9的表达,并与30例病理证实为正常膀胱组织进行比较。所有数据采用SPSS12．0统计包处理。结果在膀胱移行细胞癌细胞中MMP-9主要表达在癌细胞胞浆,在膀胱移行细胞癌组织中的表达（72．6％）明显高于正常膀胱组织（23．3％）（P〈0．01）;不同分期的膀胱移行细胞癌中MMP-9在T2-T4期肿瘤中的表达（86．8％）显著高于T1期（70．5％）和Ta期（47．1％）（P〈0．05或P〈0．01）,而且在T1期的表达也高于Ta期（P〈0．05）;不同组织学分级的膀胱移行细胞癌中MMP-9在低分化膀胱移行细胞癌组中的表达（92．3％）明显高于中分化组（74．2％）及高分化组（53．3％）,在中分化组的表达亦高于高分化组（均P〈0．05）;MMP-9表达阴性的患者无瘤生存率明显高于MMP-9表达阳性者（P〈0．05）。结论MMP-9的表达随着膀肮移行细胞癌临床分期的升高、组织分化的降低而明显增加,与预后密切相关。     

组织芯片中膀胱移行细胞癌cyclinD1蛋白表达的临床病理学意义

【目的】探讨组织芯片中膀胱癌cyclinD1蛋白表达的临床病理学意义。【方法】应用组织芯片制作机制作膀胱移行细胞癌组织芯片，并用免疫组织化学方法检测组织芯片中膀胱癌cyclinD1的表达．统计其与临床病理学参数的相关性。【结果】在组织芯片中，成功检测了58例膀胱移行细胞癌cyclinD1蛋白表达，其中27例（46．6％）cyclinD1表达阳性。膀胱癌G3级cyclinD1阳性表达率高于G1、2：级的阳性表达率（68．8％VS．38．1％，P=0．036），浸润性膀胱癌cyclinDl表达阳性率高于表浅性膀胱癌的阳性表达率（73．7％VS．33．3％。P=0．004），膀胱癌肿瘤大小和数目与cyclinD1蛋白表达无统计学意义上的相关性（P〉0．05）。【结论】cyclinD1蛋白表达与膀胱移行细胞癌的分级、分期相关，可作为膀胱癌恶性程度的指标之一。     

P53在初发性、复发性膀胱肿瘤中的表达及其临床意义

目的 探讨凋亡相关蛋白P53在不同人群、临床类型、病理分级的膀胱移行细胞癌（bladder transitional cell cancer，BTCC）中的表达，及其与影响膀胱肿瘤的预后因素（肿瘤数目、TNM分期、淋巴结转移、组织学分级等）的相关性。方法 应用免疫组织化学链霉抗生物素蛋白-过氧化物酶连接法（S—P法），检测P—gP、Bcl-2、p53在100例随访3年的膀胱移行细胞癌中的表达，同时以30例肾移植手术受者或前列腺增生患者的正常膀胱组织作对照。结果 p53在正常组织、初发性膀胱癌、复发性膀胱癌中的表达分别为6．7％、36．9％、71．4％。p53的表达在复发组高于初发组（P〈0．05）。p53的表达率随膀胱移行细胞癌的病理分级的升高而逐渐增高（P〈0．05），p53基因表达与膀胱移行细胞癌的临床分期呈正相关（P〈0．05）。总体复发率为46．2％。p53的表达水平均与无复发生存率及复发间隔时间密切相关（P〈0．05）。结论：（1）检测P53可能对膀胱移行细胞癌的预测复发有意义；（2）P53的高表达可以作为膀胱移行细胞癌分化不良的标志。     

膀胱移行细胞癌组织中MMP-2、MMP-9和CD147表达及相互关系

目的：探讨膀胱移行细胞癌组织基质金属蛋白酶-2、9（MMP-2、MMP-9）和细胞外基质金属蛋白酶诱导因子（CD147）的表达和相互关系。方法：采用免疫组织化学sP法检测48例膀胱移行细胞癌组织及16例正常膀胱黏膜组织MMP-2、MMP-9和CD147的表达情况,比较不同临床、病理特征膀胱移行细胞癌患者CD147和MMP-2、MMP-9的表达及其相关性。结果：膀胱移行细胞癌组织中MMP-2、MMP-9和CD147的阳性表达率分别100％、95．8％、95．8％,均明显高于正常膀胱黏膜组织（P均〈0．05）;其阳性表达与肿瘤的病理分级、临床分期呈正相关（P〈0．05）,与临床预后无显著相关（P〉0．05）;膀胱移行细胞癌组织CD147与MMP-2、MMP-9多同时表达,呈现出显著正相关,相关系数分别为0．784、0．853（P〈0．001）。结论：MMP-2、MMP-9、CD147在膀胱移行细胞癌发展中可能起着重要的作用。MMP-2和MMP-9的分泌增加可能与CD147的诱导促进作用有关系。     

RASSF1A基因在食管癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨RASSF1A mRNA在食管癌组织中的表达及其对食管癌发生发展的作用。方法采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测66例食管癌组织及其相应的近癌旁组织、癌旁正常组织中RASSF1A mRNA的表达。分析食管癌组织中RASSF1A mRNA表达与临床病理特征的关系。结果RASSF1A mRNA在食管癌组织、近癌旁组织、癌旁正常组织中的表达缺失率分别为42．4％（28／66）、15．2％（10／66）、0（0／66）。淋巴结转移者食管癌组织中RASSF1A mRNA表达缺失率（61．1％）明显高于无淋巴结转移者（20．0％）（χ^2=11．323,P〈0．01）;晚期（Ⅲ～Ⅳ期）食管癌组织中RASSF1A mRNA表达缺失率（61．5％）明显高于早期（Ⅰ～Ⅱ期）（30．0％）（χ^2=6．417,P〈0．05）;食管癌组织中RASSF1A mRNA表达缺失与肿瘤分化程度未见明显相关性（P〉0．05）。结论RASSF1A mRNA表达缺失可能在食管癌的发生和发展过程中起重要作用,并影响其预后。     

膀胱移行细胞癌组织MVD和β-连环素蛋白的表达

目的探讨微血管密度（MVD）和β-catenin蛋白在膀胱移行细胞癌中的表达及临床意义。方法采用免疫组化SP法检测10例正常膀胱黏膜和52例膀胱移行细胞癌组织中CD105标记的MVD及β—catenin蛋白表达。结果10例正常膀胱黏膜和52例膀胱移行细胞癌组织中CD105标记的MVD值分别为1．78±1．28和19．22±10．16：β-catenin蛋白在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级膀胱移行细胞癌中的异常表达率分别为50．00％（10／20）、80．9％（17／21）、100．00％（11,11）,膀胱移行细胞癌浸润组中β-catenin蛋白异常表达率（90．6％,29／32）显著高于表浅组（45．0％,9／20）;β-catenin异常表达的癌组织中MVD值显著高于正常表达者。结论MVD是影响膀胱移行细胞癌预后的因素之一,β-catenin可能在膀胱移行细胞癌组织微血管形成中发挥作用。     

Smad4与TGF-β1在膀胱移行细胞癌中的表达及临床意义

目的：检测膀胱移行细胞癌（BTCC）中Smad4及TGF-β1表达，分析其与BTCC临床分期、病理分级、转移及复发的关系。方法：采用免疫组织化学方法检测42例BTCC组织smad4和TGF-β1的表达。结合临床病理资料，分析Smad4，TGF-β1与BTCC的侵袭、血管生成、转移及复发间的关系以及Smad4蛋白表达与TGF-β1表达的相关性。结果：Smad4蛋白阳性表达染色位于细胞浆内，BTCC组中阳性率（33．3％）明显低于对照组（83．3％），且随BTCC临床分期及病理分级的升高而降低，肿瘤复发组低于无复发组，肿瘤转移组低于无转移组（P〈0．05）。TGF-β1蛋白在正常膀胱组织与BTCC组织中均有表达，其阳性表达率分别为100％和64．3％（P〈0．01）。BTCC中smad4蛋白与TGF-β1蛋白的表达均下调，且呈正相关（r=0．829，P=0．000）。结论：随肿瘤临床分期的升高、组织学分级的升高及肿瘤的转移复发，BTCC中Smad4蛋白与TGF-β1蛋白表达均明显下调。     

RASSF1A基因在子宫颈癌组织中的表达及其与人乳头瘤病毒-16感染的关系

目的 探讨RASSF1A mRNA在子宫颈癌组织中的表达与子宫颈癌发生、发展的作用及其与HPV-16感染的关系。方法 采用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）方法检测56例子宫颈癌组织、36例子宫颈上皮内瘤样病变（CIN）组织和20例子宫颈正常组织中RASSF1A mRNA的表达;同时采用聚合酶链反应（PCR）检测子宫颈癌组织中HPV-16感染情况。结果 正常宫颈、CIN和子宫颈癌组织中的RASSF1A mRNA的表达缺失率分别为0％（0／20）、22．2％（8／36）和50．0％（28／56）。晚期（Ⅲ～Ⅳ期）宫颈癌组织中RASSF1A mRNA的表达缺失率（82．4％）明显高于其在早期（Ⅰ-Ⅱ期）宫颈癌组织中的表达缺失率（35．9％）。子宫颈鳞癌组织中RASSF1A mRNA的表达缺失率（63．3％）明显高于其在子宫颈腺癌中的表达缺失率（34．6％）（P〈0．05）。子宫颈癌组织低分化组的RASSF1A mRNA的表达缺失率（70．8％）明显高于其在中、高分化组（37．5％）中的表达缺失率。子宫颈癌组织中RASSF1A mRNA的表达缺失与HPV-16感染呈负相关（P〈0．05）,且这种关系在子宫颈腺癌中表现的更加明显。结论 RASSF1A基因的表达缺失可能在子宫颈癌的发生、发展过程起着重要的作用。     

磷酸酶基因CpG岛甲基化状态及其在膀胱移行细胞癌中的表达

目的探讨磷酸酶基因（PTEN）CpG岛甲基化状态及其在膀胱移行细胞癌（BTCC）中的表达。方法应用甲基化特异性聚合酶链式反应检测32例BTCC和癌旁正常组织标本中PTEN基因启动子区甲基化状态,逆转录聚合酶链式反应和蛋白印迹法检测其mRNA和蛋白表达水平。结果PTEN基因在BTCC组织中甲基化率为65．6％,随着肿瘤分级、分期的增加,甲基化水平逐渐升高,而在正常膀胱组织中未发现甲基化。PTENmRNA和蛋白表达在正常组织和BTCC组织中分别为93．8％、62．5％和15．6％、6．3％,差异有统计学意义（P〈0．01）。在21例启动子异常甲基化的BTCC组织标本中,19例伴有PTEN基因表达缺失或下调,两者之间存在明显负相关（r=--0．564,P〈0．01）。结论PTEN基因启动子区异常甲基化可能导致该基因转录表达失活,使其mRNA和蛋白表达减少甚至缺失,是膀胱癌发生、发展的原因之一。     

膀胱移行细胞癌中粘蛋白MUC1的表达与肿瘤浸润性树突状细胞的分布

目的研究膀胱移行细胞癌中粘蛋白MUC1表达和肿瘤浸润性树突状细胞（TIDC）分布的变化，探讨二者在膀胱癌侵袭、转移及化疗耐药过程中的作用。方法采用免疫组织化学SP法检测MUC1和TIDC在膀胱移行细胞癌的表达和定位及MUC1在T-24细胞、BIU-87和耐药株BIU-87／A中的表达。应用流式细胞仪检测BIU-87、耐药株BIU-87／A及T-24细胞在阿霉素、长春新碱、顺铂3种化疗药物作用48h后的凋亡率：结果MUC1在各期膀胱移行细胞癌中均表达，表达模式各有特点，MUC1的染色分型同肿瘤的病理分级和临床分期密切相关（P〈0．001）。DC的数量同肿瘤病理分级呈负相关．随着病理分级的升高阳性细胞数明显减少（P〈0．005）。MUC1存BIU-87、T-24细胞膜、胞浆中均有浅棕色弱阳性表达，在BIU-87／A的胞膜、胞浆中均有深棕色强阳性表达，两者细胞平均光密度值差异有显著性（P〈0．01）。流式细胞仪检测BIU-87、T-24和BIU-87／A的自发凋亡率分别为1．15％、1．40％、0．90％，在阿霉素、长春新碱、顺铂3种化疗药物作用48h后．BIU-87的凋亡率分别为45．69％、47．70％、44．50％，T-24的凋亡率分别为43．79％、46．17％、44．50％，均有明显升高（P〈0．01），但两种细胞之间及3种化疗药之间差异无显著性（P〉0．05）。耐药株BIU-87／A在阿霉素、长春新碱作用48h后的凋亡率分别为19．88％、21．41％．均明显低于亲本细胞株BIU-87（P〈0．05）。结论MUC1的表达模式和TIDC数量的监测可以作为膀胱移行细胞癌恶性程度和预后的判断指标。TIDC的减少可能是膀胱癌免疫逃逸和耐受的重要环节，肿瘤细胞表面高密度的MUC1可能参与膀胱移行细胞癌侵袭转移和化疗耐药机制。     

膀胱移行细胞癌组织中Survivin的表达及其与患者生物学行为的关系

目的探讨膀胱移行细胞癌组织（BTCC）中Survivin的表达及其与患者生物学行为的关系。方法免疫组化S-P法检测70例BTCC标本中Survivin的表达,并探讨其与患者生物学行为的关系。另选择30例正常的膀胱黏膜组织作对照。结果BTCC标本中Survivin的阳性率明显高于正常膀胱黏膜标本（x^2=39．56,P〈0．01）。BTCC组织中Su~ivin的表达与肿瘤数量、是否转移和临床分期等生物学行为无明显的相关性（P〉0．05）,而与肿瘤是否复发和病理分级密切相关（P〈0．05）。结论Survivin基因与BTCC的发生、发展和恶性等生物学行为转化密切相关,可作为判断术后复发风险和预后的独立指标,有望成为BTCC基因诊疗的新靶点。     

Livin蛋白在膀胱移行细胞癌组织芯片中的表达及临床意义

目的探讨Livin蛋白在膀胱移行细胞癌（BTCC）组织芯片中的表达及临床意义。方法免疫组化S-P法检测70例BTCC组织芯片标本中Livin蛋白的表达,并探讨其与患者的临床病理特征的关系。另选择30例正常的膀胱黏膜组织作对照。结果BTCC组织中Livin蛋白的阳性率明显高于正常膀胱黏膜组织（X2=36．51,P〈0．01）。BTCC组织中Livin蛋白的表达与肿瘤数量、转移与否、病理分级及临床分期无明显关系（P〉0．05）,与肿瘤的初发和复发密切相关（P〈0．05）。结论Livin基因参与BTCC的发生、发展和复发过程,可作为BTCC早期诊断和复发风险评估的一项重要指标,有望成为BTCC基因诊断和治疗的新靶点。     

膀胱移行细胞癌DBCCR1基因启动子甲基化分析

目的探讨膀胱移行细胞癌DBCCR1基因启动子甲基化状态及其临床意义。方法应用甲基化特异性PCR方法检测40例膀胱移行细胞癌和8例正常膀胱粘膜组织中DBCCRI基因甲基化程度,x^2检验分析其甲基化程度与膀胱癌病理分级分期之间的关系。结果正常膀胱组织未检测到DBCCR1基因启动子甲基化,在膀胱移行细胞癌启动子甲基化扩增阳性化率达42．5％,与膀胱癌病理分级分期没有相关性（P〉0．05）。结论DBCCR1基因启动子异常高甲基化是其失活的主要机制之一,也是膀胱移行细胞癌中一早期事件。