大肠腺瘤与腺癌P21,P53,P185蛋白表达及ras,p53基因突变的检测

应用免疫组化及ＰＣＲ－ＲＦＬＰ法检测３０例大肠腺瘤、７４例大肠腺癌及癌旁粘膜Ｐ２１、Ｐ５３、Ｐ１８５蛋白表达及ｒａｓ、ｐ５３基因突变。结果表明，大肠腺瘤Ｐ２１、Ｐ５３蛋白阳性率（５３．３％，２７．６％）高于癌旁粘膜（Ｐ＜０．０１），二者过度表达与腺瘤恶性倾向有关。大肠腺癌Ｐ２１、Ｐ５３及Ｐ１８５蛋白阳性率（７２．９％，３７．８％，４７．２％）皆高于腺瘤Ｉ级不典型增生（Ｐ＜０．０１，Ｐ＜０．０５及Ｐ＜０．０５）。９例腺瘤，４０例腺癌存在两种以上蛋白表达，共同表达与腺瘤恶性倾向及腺癌预后有关。大肠腺瘤及腺癌ｒａｓ基因突变率分别为２６．７％及４１．９％，ｒａｓ基因突变与腺瘤恶性倾向有关。大肠腺瘤及腺癌ｐ５３基因２４８位点突变率分别为３．３％及１４．９％。６例腺癌存在两种基因突变，两种基因协同突变与大肠癌预后有关。提示ｒａｓ、ｐ５３及ｃ－ｅｒｂＢ－２基因改变均参与了大肠癌的发生、发展过程。     

凋亡相关基因产物Fas抗原及bcl-2蛋白在甲状腺肿瘤组织中的表达

目的：了解Ｆａｓ 抗原及ｂｃｌ２ 蛋白在甲状腺肿瘤组织中表达的意义。方法：用流式细胞技术对１４ 例乳头状甲状腺癌,１６例甲状腺腺瘤及３２ 例结节性甲状腺肿组织中Ｆａｓ 抗原和ｂｃｌ２ 蛋白的表达进行检测。结果：上述３ 组织中均测到Ｆａｓ 抗原和ｂｃｌ２ 蛋白。３ 种组织中Ｆａｓ 抗原和ｂｃｌ２ 蛋白表达没有统计学差异（Ｆ＝２．７８,Ｐ＞０．０５;Ｆ＝２．５６,Ｐ＞０．０５）。乳头状甲状腺癌组织Ｆａｓ 抗原表达与ｂｃｌ２ 蛋白表达有明显相关性（ｒ＝０．６４６,Ｐ＜０．０５）,其他两种组织中Ｆａｓ 抗原与ｂｃｌ２ 表达均无相关性（ Ｐ＞０－０５）。结论：上述３ 种组织中均有Ｆａｓ 抗原和ｂｃｌ２ 蛋白的表达,均参与了甲状腺肿瘤组织中细胞凋亡的调节。细胞凋亡异常与乳头状甲状腺癌的发生有密切关系。     

凋亡相关基因产物Fas抗原及bcl—2蛋白在甲状腺肿瘤组织中？…

目的：了解Ｆａｓ抗原及ｂｃｌ－２蛋白在甲状腺肿瘤组织中表达的意义。方法：用流式细胞技术对１４例乳头状甲状腺癌,１６例甲状腺瘤及３２例结节性甲腺肿组织中Ｆａｓ抗原和ｂｃｌ－２蛋白的表达进行检测。结果：上述３组织中均测到Ｆａｓ抗原和ｂｃｌ－２蛋白表达没有统计学差异（Ｆ＝２．７８,Ｐ〉０．０５;Ｆ＝２．５６,Ｐ〉０．０５）。乳头状甲状腺癌组织Ｆａｓ抗原表达与ｂｃｌ－２蛋白表达有明显相关性（ｒ＝０．６４６     

转化生长因子α，β在人结、直肠癌、癌旁及正常肠粘膜组织中mRNA表达及其基因变化的分析

转化生长因子α，β（ＴＧＦ－α，β）分别作为正负自分泌生长调控因子，其在结、直肠癌的发生和发展过程中具有重要作用。本研究采用Ｄｏｔ，Ｎｏｒｔｈｅｒｎ及Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交等分子生物学方法，探讨了１２例人结、直肠癌组织、癌旁及正常肠粘膜组织中ＴＧＦ－α，βｍＲＮＡ表达程度及其基因变化。研究发现，ＴＧＦ－αｍＲＮＡ的表达由高到低依次为癌、癌旁及正常肠粘膜组织，但癌组织及癌旁肠粘膜组织间无显著差异（Ｐ＞０．０５）。另外，发现１例病人的癌旁组织ＴＧＦ－αｍＲＮＡ的表达明显升高，且高于其相应的癌组织。ＴＧＦ－βｍＲＮＡ表达由高到低的顺序与ＴＧＦ－αｍＲＮＡ相反，为正常肠粘膜组织、癌旁肠粘膜组织和癌组织，前两者间无显著差异（Ｐ＞０．０５），而其与癌组织间均有显著性差异（Ｐ＜０．０５）。其中有２例病人的癌旁组织中，ＴＧＦ－βｍＲＮＡ表达高于其相应的正常组织。研究还发现，ＴＧＦ－αｍＲＮＡ表达可能与其基因扩增有关，而引起ＴＧＦ－βｍＲＮＡ表达变化的机制尚不清楚。上述研究结果初步表明：人结、直肠癌组织中ＴＧＦ－αｍＲＮＡ表达的增加和ＴＧＦ－βｍＲＮＡ表达的降低，可能通过自分泌和旁分泌生长调控作用同结、直肠癌的发生和进展有密切     

膀胱移行细胞癌P21,P185,p53蛋白表达及ras,p53基因突变的检测

为探讨基因的改变在膀胱移行细胞癌发生过程中的意义，应用免疫组织化学及聚合酶链反应－限制性片段长度多肽性法，检测１５０例膀胱移行细胞癌Ｐ２１、Ｐ１８５、ｐ５３蛋白表达以及５０例ｒａｓ、ｐ５３基因突变。结果表明：膀胱移行细胞癌Ｐ２１、Ｐ１８５、ｐ５３蛋白表达阳性率分别为５９．３％（８９例）、５５．３％（８３例）、２９．３％（４４例）。Ｐ２１、ｐ１８５蛋白表达阳性率与膀胱移行细胞癌分级呈负相关（Ｐ＜０．０５），ｐ５３蛋白表达与膀胱移行细胞癌分级呈正相关（Ｐ＜０．０１）。Ｐ２１、ｐ５３蛋白表达阳性率与预后呈显著相关，Ｐ２１与预后呈负相关。７３例膀胱移行细胞癌存在两种以上蛋白共同表达。膀胱移行细胞癌Ｈａ－ｒａｓ癌基因第１２位密码子突变１６例（３２％），ｐ５３基因突变９例（１８％），均为２４８位点突变。Ｈａ－ｒａｓ第１２位点突变随病理分级增高而增高，与膀胱移行细胞癌分级显著相关（Ｐ＜０．０５）。ｒａｓ基因、ｐ５３基因突变与预后显著相关（Ｐ＜０．０５）。ｒａｓ基因、ｐ５３基因突变患者死亡率高于无突变患者。４例膀胱移行细胞癌存在ｒａｓ基因及ｐ５３基因共同突变。     

大鼠实验性腺胃癌过程中脑垂体远侧部FSH细胞的免疫组织化学观察

目的：观察腺垂体ＦＳＨ细胞在大鼠实验性腺胃癌的免疫组织化学变化。材料和方法：ＭＮＮＧ诱发断乳雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠的实验性脾胃癌模型,免疫组织化学、形态计量及图像分析技术。结果：实验性腺胃癌组大鼠脑垂体ＦＳＨ细胞与正常组相比较,免疫反应减弱,面数密度减少（Ｐ〈０．０５）,平均光密度（ＭＯＤ）减弱（Ｐ〈０．０５）。结论：在大鼠实验性胃癌过程中,腺垂体ＦＳＨ阳性细胞数量减少的同时,可能伴有合成和分泌功能     

青年人大肠癌细胞p53蛋白表达和DNA的定量研究

目的：研究青年人大肠癌抑癌基因ｐ５３蛋白的表达和细胞ＤＮＡ含量。方法：采用流式细胞光度术（ＦＣＭ）。结果：青年组大肠癌细胞ＤＩ值（１．３０±０．１７）显著大于老年癌组（１．１０±０．０９）（Ｐ＜０．０１），且细胞增殖指数（ＰＩ）亦明显大于后者（２４．９％±６．５％ｖｓ２０．２％±４．７％）（Ｐ＜０．０５）。青年组大肠癌中ＤＮＡ异倍体癌发生率为８７．１％（２７／３１），而老年癌组仅为２８．６％（４／１４），两者之间差别有高度显著性（Ｐ＜０．００１）。ｐ５３蛋白表达量青年患者（ＦＩ＝１．３４±０．２６）显著大于老年患者（ＦＩ＝１．１５±０．２５）（Ｐ＜０．０１）。在青年大肠癌中，粘液癌和侵犯周围软组织者，其ｐ５３蛋白的阳性表达率（１００％，９５％）分别高于腺癌和浸润较浅者（６７％，５８％）（Ｐ＜０．０５），而且低分化癌和有局部淋巴转移者ｐ５３蛋白的表达阳性率（９３％，１００％）也较高、中分化癌和无局部淋巴结转移者（６９％，６８％）为高。结论：在ＤＮＡ水平上，青年大肠癌的恶性程度高于老年大肠癌；ｐ５３蛋白的高表达可能是造成青年大肠癌恶性度高的原因之一。     

凋亡相关基因产物Fas和bcl-2蛋白在胃癌组织中的表达

用流式细胞免疫技术检测胃癌组织中Ｆａｓ及ｂｃｌ－２蛋白表达,报告如下。１　材料与方法１．１　一般资料　２７例进展期胃癌病人中男１５人,女１２人,年龄２７～６６岁。术前未化疗、放疗。即取新鲜癌组织和切缘正常粘膜组织各１．０ｇ左右,ＰＢＳ冲洗两遍,滤纸吸干后放入１０％福尔马林中待检。１．２　方法　制备单细胞悬液,调整细胞为１０９／ｍｌ。取两试管,每管加细胞悬液１００μｌ,其中一管加Ｆａｓ－ＦＩＴＣ（或ｂｃｌ－２－ＦＩＴＣ）（法国国际免疫公司提供）２０μｌ,一管加ＩｇＧ１－ＦＩＴ－Ｃ２０μｌ,室温避光…     

大肠癌表皮生长因子受体和p53蛋白表达与临床病理特？…

为了研究大肠癌表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）和ｐ５３蛋白表达与病理特征和预后的关系，应用免疫组化检测ＥＧＦＲ和ｐ５３在６１例大肠癌中的表达，结果提示：正常大肠粘膜未发现ＥＧＦＲ和ｐ５３阳性表达，而两者在大肠癌均有较高表达（７７．０４％和５５．７５％）。ＥＧＦＲ表达与大肠癌Ｄｕｋｅｓ分期有关（Ｐ〈０．０５）。ｐ５３表达与大肠癌分化程度及Ｄｕｋｅｓ分期有关（Ｐ〈０．０５）。大肠癌生存率随ＥＧＦＲ和ｐ５３     

4种癌基因mRNA在胃癌组织中的表达及意义

应用原位分子杂交（ＩＳＨ）技术，检测８８例胃癌组织中Ｋ－ｒａｓ、Ｈ－ｒａｓ、Ｃ－ｍｙｃ和肿瘤转移抑制基因ｎｍ２３（Ｈ１）ｍＲＮＡ．其阳性结果分别为７８．４％、７０％、５８％和３８．６％，胃癌癌旁移行区正常粘膜和正常胃粘膜上皮的阳性率分别为１８．２％、１７％、１９．３％、２１．６％和０、０、０、３／５，与肿瘤区相比较，除ｎｍ２３外差异均非常显著（Ｐ＜０．０１）。Ｋ－ｒａｓ、Ｈ－ｒａｓｍＲＮＡ表达在在细胞膜内侧，Ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ主要表达在细胞核内，ｎｍ２３－Ｈ１ｍＲＮＡ表达在胞浆内。４种癌基因表达与组织学类型无关，ｎｍ２３－Ｈ１的表达与胃癌病人有无淋巴结转移有关（Ｐ＜０．０１）。     

Low expression of FHIT and PTEN correlates with malignancy of gastric carcinomas: tissue-array findings.

To clarify the roles of FHIT (fragile histidine triad) and PTEN (phosphatase and tensin homology deleted from human chromosome 10) expression in the genesis and progression of gastric cancers, we examined expression of FHIT and PTEN on tissue microarray containing gastric normal mucosa (n=49), adenoma (n=49), noncancerous mucosa adjacent to carcinoma (n=84) and carcinoma (n=249) by immunohistochemistry. Their expression was compared with clinicopathologic parameters of tumors, including expression of p53 and cysteine protease protein 32 as well as survival time of patients with carcinoma. The results showed expression of FHIT and PTEN were lower in gastric carcinoma than those in normal mucosa, noncancerous mucosa adjacent to carcinoma and adenoma of the stomach (P<0.05). FHIT and PTEN expression showed a significantly negative association with depth of invasion, lymphatic invasion, and lymph node metastasis, liver metastasis, and Union Internationale Contre le Cancer staging of gastric carcinoma (P<0.05). Intestinal-type gastric carcinomas highly expressed FHIT and PTEN protein, compared with diffuse-type ones (P<0.05). Expression of FHIT and PTEN were positively related with expression of p53 and cysteine protease protein 32 in gastric carcinoma (P<0.05), as well as favorable prognosis of the patients with the tumors (P<0.05). There was positive relationship between FHIT and PTEN expression in gastric carcinoma (P<0.05). It was suggested that down-regulated expression of FHIT and PTEN contributed to gastric carcinogenesis possibly by involving in the imbalance between apoptosis and proliferation of cells. Their altered expression underlay the molecular basis of invasion, metastasis, differentiation of gastric carcinoma.     

Fas antigen expression and its relationship with apoptosis in human hepatocellular carcinoma and noncancerous tissues.

Apoptosis, a programmed cell death, can be observed in the tissues of viral or autoimmune hepatitis and of hepatocellular carcinoma. Fas antigen (Fas) was proposed as a protein that triggers apoptosis. To elucidate the relationship between Fas expression and its location in hepatocellular carcinoma cells, we histochemically examined Fas expression by using 25 hepatocellular carcinoma tissues and their corresponding noncancerous tissues, which were surgically obtained from the same patients. In addition, the relationship between Fas expression and apoptotic cell numbers was examined in the hematoxylin-and-eosin-stained specimens obtained from 23 of the 25 patients. Hepatocellular carcinoma tissues expressed Fas less frequently and more weakly than noncancerous tissues. The majority of noncancerous specimens expressed Fas both on the surface and in the cytoplasm, whereas the majority of hepatocellular carcinoma expressed Fas only in the cytoplasm. Apoptotic cell counts were significantly higher in Fas-expressing tissues than in Fas-negative tissues. Among Fas-expressing tissues, the counts were higher in surface Fas-expressing tissues than in tissues that expressed only cytoplasmic Fas (P < 0.01 to 0.05). Our findings indicate that the development of apoptosis in hepatocellular carcinoma tissues relates to not only Fas expression but also its location.     

抗凋亡基因bcl—2在胃癌和癌旁组织中的表达及其临床意义

通过抗凋亡蛋白bcl-2在胃癌、癌旁组织中的表达与分布，探讨bcl-2基因在胃癌恶性转化过程中的作用机制和临床意义。应用S－P免疫组化法检测33例胃癌、17例癌旁和13例正常胃粘膜中bcl-2蛋白的表达。正常胃粘膜中bcl-2仅一例弱表达。在胃癌和癌旁bcl-2表达均高于正常胃粘膜（P＜0．05－0．01），但胃癌与癌旁间无差异。bcl-2表达与胃癌的分化程度，病理分期，淋巴结转移等病理特征无统计学差异。结果表明bcl-2基因参与了胃癌的发生。bcl-2蛋白在胃良性病变过度表达，一旦癌变，细胞的阳性表达不再升高，这可能与bcl-2抑制细胞凋亡的强度不再增加有关。     

胃癌组织中肝细胞抗原的表达及其临床意义

目的 探讨肝细胞抗原（hepatoeyte antigen,Hep）在胃癌组织中的表达及其临床意义。方法 应用免疫组织化学方法EnVision法检测88例胃癌组织中Hep的表达。结果 胃癌组织中Hep的阳性表达率为54．5％（48／88）。Hep的阳性表达在肠型胃癌中明显高于弥漫型胃癌（P〈0．05）;随着临床分期的增高,Hep的阳性表达率呈下降趋势,差异有显著性（P〈0．05）;胃癌组织中Hep的表达与患者的年龄有关（P〈0．05）,与性别、肿瘤大小、部位、浸润深度、淋巴结转移和血管侵犯均无相关性（P〉0．05）。结论 检测胃癌组织中Hep的表达可一定程度地反映胃癌的组织学分型和患者的预后。     

胃癌组织中Snai2 mRNA的表达及意义

目的 检测Snai2 mRNA在正常胃黏膜及胃癌组织中的差异表达并探讨其意义.方法 新鲜胃癌组织30例, TRIzol法抽提总RNA,逆转录后Real-time荧光定量PCR检测Snai2 mRNA的表达;制备mRNA探针,在包含有100例胃癌和20例正常胃黏膜组织的芯片上进行Snai2 mRNA原位杂交,并对结果进行统计分析.结果 Real-time PCR显示在不同分化的胃癌组织中表达量不同,随分化程度降低,Snai2 mRNA表达量增加(P<0.05);组织芯片原位杂交结果表明Snai2 mRNA在癌组织中的阳性率(54.2%)高于正常胃组织(27.8%),其差异有统计学意义(P<0.05),在不同分化的胃癌组织中Snai2 mRNA的表达也随分化程度的降低,Snai2 mRNA的阳性率逐渐增加,但差异无统计学意义(P>0.05) .结论 Snai2可作为一个在分子水平上确定胃癌恶性程度和疾病进展及预后的生物学标志.     

Wntless在胃腺癌组织中表达及其意义

目的观察Wnt蛋白分泌相关的基因Wntless在胃癌腺癌细胞和癌旁正常黏膜细胞的表达,分析Wntless表达与胃腺癌病理指标之间相关性和临床意义。方法用免疫组化法检测胃腺癌组织和胃癌旁正常黏膜中Wntless的蛋白表达。结果在104例胃癌标本中,Wntless在胃腺癌组织中表达为:7.7%(8/104)例为0或1+、36.5%(38/104)例为2+、55.8%(58/104)例为3+;在癌旁正常黏膜表达为:71.2%(74/104)例为0或1+,19.2%(20/104)例为2+,9.6%(10/104)例为3+。Wntless在胃腺癌组织中的表达显著高于胃癌旁正常黏膜表达(P0.001)。Wntless蛋白表达与肿瘤分化呈正相关(P0.05),与淋巴结转移呈正相关(P0.05)。结论 Wntless蛋白在胃腺癌中高表达,可能对肿瘤发生和进展等发挥了促进作用,并可能为新的靶向治疗提供分子靶标。     

胃癌组织中RUNX3与mP53表达的关系及意义

目的观察RUNX3蛋白在正常胃黏膜、癌前病变及胃癌组织中的表达,分析RUNX3与mP53在胃癌中表达的关系,探讨Runx3与胃癌临床病理因素的关系以及二者在胃癌发生发展中的作用和意义。方法采用免疫组化PV9000法检测91例胃癌及配对正常胃黏膜,19例肠上皮化生,5例异型增生中RUNX3和mP53的表达。结果RUNX3在胃癌组织中的阳性表达率(48/91,52.75%,P<0.05)显著低于正常胃黏膜(86/91,94.51%)和肠上皮化生(19/19,100%)。RUNX3与胃癌临床病理因素未见显著相关性。胃癌组织中mP53的阳性表达率随分化程度降低而升高,但无统计学意义。胃癌组织中RUNX3与mP53表达呈负相关(=-0.225,P<0.05)。结论胃癌组织中RUNX3表达缺失与mP53过表达可能参与胃黏膜的癌变和胃癌的发病机制和演进。     

转录因子Snail及黏附分子E-cadherin在胃癌中的表达及意义

目的探讨转录因子Snail及黏附分子E—cadherin在胃癌中的表达及意义。方法采用免疫组化sP法检测96例胃癌组织和80例癌旁组织中Snail、E—cadherin的表达,分析两者在不同组织类型与分化程度胃癌中的表达,以及与临床病理因素之间的关系。结果胃癌组织E—cadherin的阳性率（37．5％）显著低于癌旁组织（100％）（P〈0．05）,E—cadherin的表达与胃癌不同分化程度、组织学类型、浸润深度、淋巴结转移、临床分期及远处转移有关（P〈0．05）。胃癌组织Snail阳性率（83．3％）显著高于癌旁组织（41．25％）（P〈0．05）,Snail的表达与胃癌不同分化程度、组织学类型、浸润深度、淋巴结转移及远处转移有关（P〈0．05）。胃癌组织中E—cadherin与Snail的表达呈负相关（P〈0．05）。结论E—cadherin蛋白低表达与Snail蛋白高表达可能是胃黏膜恶性转变以及胃癌发生浸润转移的重要生物学标志。联合检测E—cadherin及Snail对预测胃癌浸润转移有重要意义。     

Significance of Fas and FasL protein expression in cardiac carcinoma and local lymph node tissues

Objective: To investigate the relation of Fas and Fas ligand (FasL) protein expression with carcinogenesis and metastasis of cardiac carcinoma. Methods: Immunohistochemistry was used to detect Fas and FasL protein expression in 64 cardiac carcinoma tissue samples and 20 normal gastric tissue samples. Relation between FasL and Fas expression, age and gender of gastric cancer patients, and pathological subtype and lymph node metastasis of gastric cancer was analyzed. Results: The Fas expression level was significantly higher in normal gastric tissue samples than in cardiac carcinoma tissue samples (85.0% vs. 25.0%, P<0.001), while the FasL expression level was significantly lower in normal gastric tissue samples than in cardiac carcinoma tissue samples (30.0% vs. 81.3%, P<0.001). The Fas expression level was significantly higher in invasive lymph nodes than in non-invasive lymph nodes (82.9% vs. 56.5%, P<0.003) and in well-differentiated gastric carcinoma tissue samples than in poorly-differentiated cardiac carcinoma tissue samples (50.0% vs. 18.0%, P=0.015). The FasL expression level was significantly lower in well-differentiated cardiac carcinoma tissue samples than in poorly- differentiated cardiac carcinoma tissue samples (42.9% vs. 84.0%, P=0.021). The Fas and FasL expression levels (25.0% and 81.3%) were significantly different in cardiac carcinoma tissue samples (P<0.001), but had a non-linear correlation (P=0.575). Conclusion: Abnormal Fas and FasL expressions in cardiac carcinoma and lymph node tissues are involved in carcinogenesis and metastasis of gastric cancer.