益精杞菊地黄颗粒对慢性高眼压大鼠视网膜神经节细胞凋亡的影响

目的观察益精杞菊地黄颗粒对慢性高眼压大鼠视网膜神经节细胞(RGCs)凋亡的影响。方法选用健康雄性的SD大鼠60只,随机分为5组,空白组、模型组、高剂量中药组、中剂量中药组、低剂量中药组,每组各12只。除空白组,其余4组均采用烧灼巩膜上静脉法,建立慢性高眼压模型。干预1个月后,分别采用眼压测量观察眼压变化,HE染色观察视网膜病理学改变,Tunel法检测RGCs凋亡情况。结果 (1)眼压测量:造模后大鼠眼压明显高于造模前和空白组眼压水平,差异有统计学意义(P0.01),模型组与各中药组比较无统计学意义(P0.05)。用药后1个月,模型组及各中药组与造模前、空白组比较有统计学意义(P0.01),而与造模后用药前比较,无统计学意义(P0.05),但各中药组眼压有所下降。各用药组间比较均无统计学意义(P0.05),与模型组比较均无统计学意义(P0.05)。(2)HE染色显示,与空白组不同,模型组损伤明显;中剂量中药组较模型组损伤改善。模型组RGCs层细胞数量较正常组显著减少(P0.01);高、中剂量中药组细胞数量高于模型组(P0.01);低剂量中药组与模型组比较无统计学意义(P﹥0.05)。(3)Tunel检测显示,各治疗组RGCs层细胞凋亡较模型组减少,中剂量中药组细胞凋亡最少。空白组与模型组比较,差异有统计学意义(P0.01),中剂量中药组凋亡率较模型组有统计学意义(P0.01),高、低剂量中药组凋亡率与模型组比较,无统计学意义(P0.05)。结论益精杞菊地黄颗粒剂对慢性高眼压大鼠RGCs的凋亡有明显的保护作用。     

基于Bax、Bcl-2、与Caspase-3探讨凉血固元汤对大鼠急性胃辐射伤的作用机制

目的通过动物实验,探讨中药复方凉血固元汤对急性辐射伤大鼠胃黏膜细胞凋亡的作用及机制。方法选用雌性SD大鼠30只,取5只作为空白组,其余大鼠用~(60)Co-γ射线照射制造大鼠急性胃辐射伤模型,取造模成功20只,随机分为4组:单纯照射组、地塞米松组及中药低、高剂量组,每日观察大鼠生存状况,在照射后第3天麻醉、处死大鼠,行胃组织HE染色并评分,采用TUNEL荧光染色法检测细胞凋亡,Western Blot法检测B细胞淋巴瘤-2(B-cell lymphoma-2, Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2-associated X protein,Bax)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cysteinyl aspartate specific proteinase 3, Caspase-3)的蛋白表达,PCR法检测Bax、Bcl-2与Caspase-3 mRNA表达量。结果照射后各组大鼠均出现不同程度的稀便,以单纯照射组明显,中药高剂量组呈不成型的软便。病理观察见单纯照射组细胞间隙扩大,腺体排列不整齐,黏膜充血、水肿明显,各治疗组损伤程度有所减轻,损伤评分均高于空白组(P0.01),中药高剂量组胃黏膜轻度充血、水肿,损伤评分低于单纯照射组(P0.05)。TUNEL表达结果显示,中药高剂量组TUNEL阳性细胞表达数低于单纯照射组(P0.05)。在蛋白表达方面,单纯照射组Bax表达量明显高于空白组(P0.01),中药高剂量组较单纯照射组降低(P0.05);单纯照射组、地塞米松组及中药低剂量组Caspase-3及Bax/Bcl-2较空白组均升高(P0.05或P0.01),中药高剂量组低于单纯照射组(P0.05或P0.01)。各组mRNA表达比较,单纯照射组、地塞米松组和中药低剂量组中Bax mRNA相对表达量及单纯照射组和地塞米松组Caspase-3 mRNA相对表达量较空白组均升高(P0.05或P0.01),而中药低、高剂量组能降低Bax mRNA和Caspase-3 mRNA表达,以中药高剂量组最为显著(P0.01)。结论凉血固元汤能减轻由~(60)Co-γ射线引发的大鼠急性胃辐射伤,其作用机制可能与其抑制Bax与Caspase-3表达,降低Bax/Bcl-2,从而抑制细胞凋亡有关。     

育肾助孕方对卵巢储备功能降低大鼠卵巢Bcl-2、Bax、Caspase-3表达的影响

目的观察育肾助孕方对卵巢储备功能降低模型大鼠卵巢Bcl-2、Bax、Caspase-3 mRNA及蛋白表达的影响。方法 48只雌性SD大鼠随机分为对照组、模型组、补佳乐组及育肾助孕方低、中、高剂量组,每组8只。除对照组外,其余各组均采用雷公藤多苷药液灌胃建立卵巢储备功能降低大鼠模型。各组予相应药物干预2周。采用免疫组化及Western blot检测卵巢组织细胞中Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达情况,采用Real-time PCR检测卵巢细胞中Bcl-2、Bax、Caspase-3 mRNA表达情况。结果与对照组比较,模型组Bcl-2 mRNA及蛋白表达显著降低,Bax、Caspase-3 mRNA及蛋白表达显著升高(P0.05)。与模型组比较,补佳乐组和育肾助孕方各剂量组Bcl-2蛋白表达显著升高,Bax、Caspase-3 mRNA及蛋白表达显著降低(P0.05);补佳乐组和育肾助孕方高剂量组Bcl-2 mRNA表达显著高于模型组(P0.05)。与育肾助孕方低剂量组比较,育肾助孕方高剂量组Bcl-2 mRNA表达显著升高,育肾助孕方高中剂量组Bax蛋白表达明显降低(P0.05)。结论育肾助孕方可通过上调卵巢组织细胞中Bcl-2 mRNA及蛋白表达,下调Bax、Caspase-3 mRNA及蛋白表达,促进卵巢颗粒细胞增殖,抑制其过度凋亡,从而改善卵巢储备功能。     

燧心胶囊对慢性心力衰竭大鼠凋亡相关基因Bcl-2和Bax表达的影响

目的:以慢性心力衰竭大鼠为研究对象,测定心肌组织Bcl-2、Bax mRNA水平及其蛋白表达,以探究燧心胶囊干预心室重塑的作用机制。方法:将60只大鼠随机分为假手术组、模型对照组、地高辛组、卡托普利组、燧心胶囊低剂量组、燧心胶囊高剂量组。采用腹主动脉缩窄术建立大鼠慢性心力衰竭模型,连续给药12周。Real time PCR检测心肌细胞凋亡基因Bcl-2 mRNA、Bax mRNA水平;免疫组化法观察大鼠心肌细胞凋亡蛋白Bcl-2、Bax的表达。结果:与模型对照组比较,卡托普利组、燧心胶囊低、高剂量组大鼠Bcl-2 mRNA水平及其蛋白表达增高,Bax mRNA水平及其蛋白表达降低,Bcl-2/Bax则显著性增高,差异具有统计学意义(P0.05或P0.01)。其中燧心胶囊高剂量组对Bcl-2和Bax mRNA及其蛋白的调控程度较低剂量组显著(P0.05)。结论:高剂量燧心胶囊能够调控凋亡基因Bcl-2和Bax mRNA水平及其蛋白表达,抑制心肌细胞程序性死亡,延缓心力衰竭的进程。     

芪术抗癌方及其联合5-氟尿嘧啶对CT26.WT结肠癌原位移植瘤模型小鼠肿瘤组织中凋亡相关蛋白表达的影响

目的探讨芪术抗癌方抗结肠癌的可能作用机制。方法将90只BALB/c雄性小鼠随机分为空白组,模型组,5-氟尿嘧啶(5-Fu)组,芪术抗癌方高、中、低剂量组,联合高、中、低剂量组,每组10只。除空白组外其余各组小鼠建立CT26.WT结肠癌原位移植瘤模型。术后24h空白组与模型组予生理盐水10ml/(kg·d)灌胃;5-Fu组予注射用5-Fu 25mg/(kg·d)腹腔注射给药,隔日1次;芪术抗癌方高、中、低剂量组分别灌胃芪术抗癌方药液24、12、6g/(kg·d),每日1次;联合高、中、低剂量组分别灌胃芪术抗癌方相应剂量和5-Fu腹腔注射给药,用药剂量和方法同上。各组均干预3周后处死小鼠取肿瘤组织,称重并计算抑瘤率;检测各组小鼠肿瘤组织中半胱天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)、B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)及B淋巴细胞瘤2相关X蛋白(Bax)蛋白及mRNA表达。结果与模型组比较,其余各组小鼠瘤体质量均降低(P0.01);联合高剂量组抑瘤率最高,达82.700%。各给药组对肿瘤组织中Caspase-3、Bax蛋白及mRNA表达均不同程度上调,而Bcl-2蛋白及mRNA表达下调,并且芪术抗癌方及其联合5-Fu对Caspase-3、Bax、Bcl-2蛋白及mRNA表达调节呈一定剂量依赖性(P0.05或P0.01)。结论芪术抗癌方可以抑制CT26.WT原位移植瘤的增殖,且与5-Fu同用具有增效作用,其机制可能与上调肿瘤组织中Caspase-3、Bax表达及下调Bcl-2表达有关。     

蛴螬对兔光损伤视网膜变性Caspase-8、 Bax、Bid、Caspase-3 mRNA表达的影响

目的:探讨蛴螬提取物对兔光损伤视网膜变性Caspase-8、 Bax、Bid、Caspase-3 mRNA表达的影响。方法:将30只雄性实验性兔随机平均分为空白组、模型组、蛴螬低剂量组、蛴螬中剂量组和蛴螬高剂量组。除空白组外,其余4组均建立光损伤视网膜变性模型,在给药14 d处死后取材采用RT-qPCR法测定Caspase-8 mRNA、 Bax mRNA、Bid mRNA、Caspase-3 mRNA的表达水平。结果:与模型组比较,蛴螬低、中、高剂量组的Caspase-8 mRNA、 Bax mRNA、Bid mRNA、Caspase-3 mRNA相对表达量降低,差异具有统计学意义(P0.05);与蛴螬低剂量组比较,中、高剂量组的Bax mRNA和Caspase-3 mRNA改善更为明显(P0.05),但中、高剂量组之间没有统计学意义(P0.05)。结论:蛴螬通过抑制Caspase-8 mRNA、 Bax mRNA、Bid mRNA、Caspase-3 mRNA的表达,抑制细胞凋亡受体信号通路来发挥保护视网膜作用,中、高剂量组效果较好。     

益气养阴通络法对急性心肌梗死大鼠心肌细胞凋亡Bax、Bcl-2、Caspase3表达的影响

目的:观察益气养阴通络法对大鼠心肌细胞凋亡Bax、Bcl-2和Caspase3表达的影响,并探讨其作用机制。方法:健康SD大鼠60只,随机分为6组,正常组、模型组、西药组(盐酸地尔硫卓片)、中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组。对模型组、中药组、西药组实验动物进行造模,复制急性心肌缺血的模型。西药组及中药组分别给予盐酸地尔硫卓片、中药双参通脉颗粒灌胃2周。采用Western Blotting法检测各组心肌组织中Bax、Bcl-2、Caspase3的表达水平。结果:与正常组比较,模型组Bcl-2表达均显著降低,Bax、Caspase3表达升高(P0.01或P0.05)。与模型组比较,各组Bcl-2表达均显著升高,Bax、Caspase3表达均降低(P0.01或P0.05)。与模型组比较,中药治疗组中,高剂量组Bcl-2表达明显升高,Bax、Caspase3表达明显降低(P0.05);西药组与模型组相比,Bcl-2表达明显升高(P0.01),Caspase3表达明显降低(P0.05),Bax表达有降低趋势(P0.05)。中药组高剂量组与西药组相比,Bcl-2表达无明显差异(P0.05)。结论:益气养阴通络法能够上调急性心肌梗死大鼠心肌细胞Bcl-2表达,下调Bax、Caspase3表达。     

针刀干预对颈椎病兔颈后伸肌B淋巴细胞瘤-2及其相关的x基因、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3 mRNA表达的影响

目的:观察针刀干预对颈椎病兔颈后伸肌B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关的x基因(Bax)、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)mRNA表达的影响,探讨针刀松解法对劳损颈肌细胞凋亡影响的可能作用机制。方法:新西兰兔随机分为空白组、模型组、电针组及针刀组,每组6只,采用长期低头位方法建立颈椎病动物模型。造模成功后针刀组选取斜方肌起点及胸锁乳突肌附着点等部位进行针刀治疗,每周治疗1次,共治疗3次;电针组电针"天柱""颈百劳""大杼"穴,每次20min,每周治疗3次,共治疗3周。实时荧光定量PCR法检测颈后伸肌Bcl-2、Bax、Caspase-3mRNA表达水平。结果:各组间颈后伸肌Bcl-2mRNA表达水平比较差异无统计学意义(P0.05)。模型组颈后伸肌Bax mRNA表达较空白组明显升高(P0.01),针刀组较模型组明显降低(P0.01)。模型组颈后伸肌Bcl-2/Bax mRNA比值较空白组明显降低(P0.01),针刀组较模型组明显升高(P0.01),针刀组较电针组明显升高(P0.05)。模型组颈后伸肌Caspase-3mRNA较空白组升高(P0.05),针刀组较模型组及电针组均明显降低(P0.05)。结论:针刀干预可调节Bax、Bcl-2/Bax Caspase-3mRNA表达,减缓颈后伸肌细胞凋亡进程,从而修复劳损颈肌,可能是针刀治疗颈椎病作用机制之一。     

金蛭方对缺血性中风大鼠caspase-3、Bax、Bcl-2蛋白表达的影响

目的:通过观察金蛭方对缺血性中风大鼠缺血侧大脑皮质区细胞调亡相关因子Bax、Bcl-2、caspase-3蛋白含量的影响,探讨金蛭方治疗缺血性中风的作用机制。方法:采用线栓法复制缺血性中风大鼠模型,随机分为假手术组、模型对照组、金蛭方高剂量组、金蛭方低剂量组、阳性药尼莫地平片对照组。应用western-blot技术检测caspase-3、Bax、Bcl-2蛋白含量变化。结果:模型组大鼠缺血侧皮质区Bcl-2蛋白表达较假手术组明显降低(P0.01);caspase-3、Bax蛋白表达较假手术组明显升高(P0.01)。用药后各治疗组大鼠缺血侧皮质区Bcl-2蛋白表达明显升高(P0.05,P0.01);caspase-3、Bax蛋白表达明显降低(P0.05,P0.01)。高、低剂量组在增强Bcl-2蛋白表达和降低caspase-3、Bax蛋白表达方面的作用优于对照组。结论:金蛭方通过调节缺血性中风大鼠caspase-3、Bax、Bcl-2蛋白表达达到拮抗缺血性中风作用。     

益经汤对卵巢功能减退模型大鼠卵巢Bcl-2、Bax蛋白的影响

目的研究加减益经汤对卵巢功能减退(decreasing ovarian reserve,DOR)模型大鼠卵巢组织Bcl-2、Bax蛋白表达的影响。方法以环磷酰胺腹腔注射造模DOR模型大鼠,设置模型组、空白组、中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组、补佳乐组。采用免疫组化法检测每组大鼠卵巢组织上AMH、Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果与空白组比较,模型组大鼠卵巢组织Bcl-2蛋白表达明显降低,Bax蛋白表达明显升高;与模型组比较,中药低、中、高剂量组卵巢组织Bcl-2蛋白表达明显增高,Bax蛋白的表达明显降低,差异有统计学意义(P0.01或P0.05)。结论卵巢卵泡细胞的过快凋亡导致卵巢功能减退,加减益经汤能够增加卵巢组织Bcl-2蛋白的表达,减少Bax蛋白的表达,从而抑制卵泡细胞的凋亡,改善卵巢功能。     

稳斑汤对ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化不稳定斑块凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2和Caspase-3表达的影响

目的:观察稳斑汤对ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化不稳定斑块凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2和Caspase-3表达的影响。方法:选取6～8周ApoE基因敲除小鼠建立动脉粥样硬化(AS)不稳定斑块模型,随机分为空白对照组,模型组,他汀组,稳斑汤低、中、高剂量组。空白对照组和模型组分别予以生理盐水灌胃,西药组及稳斑汤低、中、高剂量组分别予以阿托伐他汀及不同剂量稳斑汤干预。取小鼠主动脉组织HE染色进行病理学观察,并采用蛋白质印迹法(免疫印迹试验)检测Bax、Bcl-2和Caspase-3的蛋白表达水平。结果:与空白对照组比较,模型组的Bcl-2蛋白表达水平均降低(P0.05),Bax、Caspase-3蛋白表达水平均升高(P0.05);与模型组比较,稳斑汤不同剂量组Bcl-2的蛋白表达水平均升高(P0.05),Caspase-3、Bax的蛋白表达水平均降低(P0.05);与他汀组比较,稳斑汤高剂量组Bcl-2、Bax、Caspase-3的蛋白表达水平无明显差异(P0.05)。光镜下观察稳斑汤各剂量组和他汀组斑块面积均小于模型组。结论:稳斑汤可能通过下调ApoE基因敲除小鼠AS不稳定斑块凋亡相关蛋白Caspase-3和Bax的表达,上调其Bcl-2的表达来干预AS不稳定斑块的形成及破裂。     

数据挖掘BLQ复方中药对肝癌荷瘤小鼠的抑瘤作用及初步机制研究

目的:观察数据挖掘BLQ复方中药对肝癌荷瘤小鼠的抑瘤作用,并探讨其初步机制。方法:ICR小鼠适应性饲养后,建立H22荷瘤小鼠模型,并随机分为模型组、5-FU组、BLQ复方中药高、中、低剂量组,造模后第2日开始给药,模型组给予生理盐水灌胃,BLQ复方中药高、中、低剂量组给予同体积中药水煎剂灌胃,灌胃体积为0.1 mL/10 g,连续灌胃14 d后处死小鼠,完整剥离肿瘤组织,称重,计算抑瘤率;取脾脏和胸腺,计算脾脏和胸腺指数;取血离心后用酶联免疫吸附法检测血清中白细胞介素-1(IL-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、γ-干扰素(IFN-γ)含量变化。免疫印迹法(Western blot)检测瘤组织Bax、Bcl-2、Caspase-3、Caspase-9蛋白表达。结果:与模型组比较,BLQ复方中药高、中、低剂量组抑瘤率分别为45.61%、47.72%及27.31%(P 0.01,P 0.05)。与模型组比较,BLQ复方中药高、中剂量组均能显著上调Bax、Caspase-3、Caspase-9蛋白表达(P 0.01),高剂量组则显著下调Bcl-2蛋白表达(P 0.01);低剂量组能显著上调Bax蛋白表达(P 0.01)。结论:BLQ复方中药能抑制肝癌小鼠肿瘤生长,可能是通过对细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax及Capase-3、Capase-9的调节实现的,是BLQ复方中药抑制肿瘤细胞生长的机制之一。     

PBNA-413对心肌缺血/再灌注损伤大鼠凋亡相关蛋白及基因表达的影响

目的:探讨拳参正丁醇提取物-413(Bistortae Rhizoma n-butyl alcohol extract,PBNA-413)对大鼠心肌缺血/再灌注损伤(myocardial ischemia/reperfusion,MI/R)细胞凋亡的影响。方法:将30只SD雄性大鼠随机分为5组,假手术组,MI/R模型组,PBNA-413低剂量组(0.1 mg·kg~(-1)),PBNA-413中剂量组(0.3 mg·kg~(-1)),PBNA-413高剂量组(1.0 mg·kg~(-1))。采用结扎左冠状动脉前降支40 min,恢复血流60 min,复制MI/R模型,记录肢体Ⅱ导联心电图。采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组大鼠心肌组织凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax),半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3),Caspase-9 mRNA及蛋白表达。结果:大鼠心肌缺血后,模型组大鼠心电图ST段及T波较假手术组明显升高(P0.05,P0.01),PBNA-413处理后ST段及T波降低(P0.01),以中剂量和高剂量的效果好。与假手术组比较,模型组大鼠心肌组织Bax,Caspase-3及Caspase-9蛋白表达升高(P0.05,P0.01),Bcl-2蛋白表达降低(P0.01);与模型组比较,PBNA-413中剂量组Bax及Caspase-3和Caspase-9蛋白表达降低(P0.05,P0.01),Bcl-2蛋白表达升高(P0.01)。除Caspase-9外,Bax,Bcl-2和Caspase-3的基因水平出现与蛋白类似变化。结论:PBNA-413可能通过抑制细胞凋亡从而有效保护MI/R心肌。     

益精方对不育症大鼠睾丸生精细胞凋亡及Bcl-2、Bax蛋白表达的影响

目的观察益精方对腺嘌呤法不育症大鼠睾丸生精细胞凋亡及Bcl-2/Bax蛋白表达的影响。方法Wistar大鼠75只随机分为空白组,模型组,益精方高、中、低剂量组,每组15只。除空白组外,其余各组均以腺嘌呤连续灌胃10天;从第11天开始,空白组及模型组用等量生理盐水灌胃,益精方高（3.38 g/100 g）、中（1.69 g/100 g）、低剂量（0.85 g/100 g）组分别以益精方各剂量灌胃,每天1次,连续20天。实验结束后将大鼠全部处死,摘取睾丸,采用原位缺口末端标记法（TUNEL）和免疫组化SABC法分别检测各组动物生精细胞的凋亡情况及Bcl-2/Bax蛋白的表达。结果与空白组比较,模型组Bcl-2蛋白表达降低,Bax蛋白表达升高,细胞凋亡数升高,差异均有统计学意义（P〈0.01）。与模型组比较,三个剂量组Bcl-2蛋白表达均升高（P〈0.01,P〈0.05）,高、中剂量组Bax蛋白表达均降低（P〈0.01,P〈0.05）,中剂量组细胞凋亡数降低（P〈0.01）。结论益精方能够通过调控睾丸组织Bcl-2及Bax蛋白的表达,抑制生精细胞的凋亡。     

安寐丹通过线粒体介导的海马神经细胞凋亡改善睡眠剥夺模型大鼠的学习记忆水平

目的:探讨安寐丹通过线粒体介导海马神经细胞凋亡对睡眠剥夺大鼠学习记忆的影响。方法:48只SD大鼠随机分为正常组、模型组、安寐丹低、中、高剂量(4.86,9.72,19.44 g·kg~(-1)·d~(-1))组和艾司唑仑组(0.1 mg·kg~(-1)·d~(-1)),每组8只。通过自制睡眠剥夺箱进行持续性睡眠剥夺14 d。以Morris水迷宫检测大鼠的学习记忆水平,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测海马组织B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax)的含量。透射电镜观察海马区神经元线粒体形态结构,免疫荧光和实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)分别检测海马区细胞色素C(Cyt-C),半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白及Bcl-2,Bax mRNA表达。结果:与正常组比较,模型组上平台潜伏期、游泳总路程延长,初次到达平台时间延长,跨越平台次数减少,目标象限时间显著降低(P0.01),Bcl-2蛋白及mRNA水平下降,Bax蛋白及mRNA水平显著升高(P0.01),线粒体结构破坏,嵴断裂,肿胀变形;Cyt-C,Caspase-3蛋白及mRNA表达显著升高(P0.01);与模型组比较,安寐丹低、中、高剂量组明显改善SD大鼠空间探索和定位航行水平(P0.05,P0.01),Bcl-2蛋白及mRNA水平升高,Bax蛋白及mRNA水平明显降低(P0.05,P0.01);线粒体损伤改善,水肿减轻;Cyt-C,Caspase-3蛋白及mRNA表达显著下降(P0.01)。结论:安寐丹能够改善睡眠剥夺大鼠学习记忆水平,其作用与线粒体介导的海马神经细胞凋亡,降低Cyt-C,Caspase-3等蛋白表达相关。     

加味香砂六君子汤对大鼠胃癌前病变胃黏膜Bax、Bcl-2、P53mRNA表达的影响

目的:加味香砂六君子汤在胃癌前病变(PLGC)模型大鼠胃黏膜的Bax、Bcl-2、P53mRNA表达方面的影响及作用机理研究。方法:120只健康Wistar大鼠按照随机数字表法分为空白对照组和模型组、维霉素组、加味香砂六君子汤高、中及低剂量组,造模后给予药物干预治疗,通过免疫组化法,检测Bcl-2、Bax及P53mRNA表达水平。结果:加味香砂六君子汤各剂量组Bcl-2蛋白阳性表达率较模型组及维霉素组显著降低(P0.05),各剂量组Bax蛋白阳性表达率较模型组及维霉素组明显增高(P0.05)。各干预组p53mRNA蛋白表达不同程度降低,且明显低于模型组(P0.05);其中加味香砂六君子汤中剂量组的作用效果最显著,与其他各组相比,差异显著(P0.05)。结论:加味香砂六君子汤可调控胃癌前期病变大鼠胃黏膜Bcl-2、Bax表达水平,降低p53mRNA的表达,具有治疗PLGC的作用。     

基于AMPK-mTOR信号通路探讨甲亢宁胶囊干预Graves病的影响

目的?观察甲亢宁胶囊对人甲状腺正常细胞Nthy-ori-3-1凋亡的影响，基于磷酸腺甙活化蛋白激酶（AMPK）-雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信号通路探讨甲亢宁胶囊干预Graves病（GD）的影响。方法?M22诱导人甲状腺滤泡上皮细胞株（Nthy-ori-3-1）建立GD细胞模型，设对照组、模型组、空白血清组、甲亢宁含药血清低剂量组、甲亢宁含药血清中剂量组和甲亢宁含药血清高剂量组。CCK8检测甲亢宁含药血清高、中、低浓度干预Nthy-ori-3-1增殖的抑制率；ELISA检测各组细胞上清液中cAMP释放量；流式细胞术检测各组Nthy-ori-3-1细胞凋亡情况；qRT-PCR检测各组B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）、Bcl-2-相关X 蛋白（Bax）、半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶3（Caspase-3）mRNA表达；Western Blot检测Bcl-2、Bax、Caspase-3、AMPK、mTOR、p-AMPK、p-mTOR蛋白表达。结果?甲亢宁含药血清各剂量组Nthy-ori-3-1细胞凋亡率较模型组增高（P<0.05），且随着药物浓度升高，细胞凋亡率越高（P<0.05）。与对照组比较，模型组的cAMP释放量升高，Bax、Bcl-2、Caspase-3 mRNA表达量及蛋白表达升高，p-AMPK、p-mTOR蛋白表达升高（P<0.05，P<0.01）。与模型组比较，甲亢宁含药血清低、中、高剂量组cAMP 释放量减低，Bax、Caspase-3 mRNA及蛋白表达升高， Bcl-2 mRNA及蛋白表达、p-mTOR蛋白表达降低（P<0.01）；同时，甲亢宁含药血清中、高剂量组p-AMPK蛋白表达升高（P<0.01）。结论?甲亢宁含药血清促进细胞凋亡，对GD细胞凋亡的调控作用可能与通过激活AMPK-mTOR信号通路有关。     

加味温胆方对心肌缺血(痰浊血瘀证)大鼠细胞凋亡及Bcl-2、Bax、Survivin、Caspase-3表达的影响

目的探讨加味温胆方对心肌缺血(痰浊血瘀证)大鼠细胞凋亡及B淋巴细胞瘤(Bcl-2)、Bcl-2同源二聚体X蛋白(Bax)、Survivin、Caspase-3表达的影响。方法清洁级SD大鼠雄性100只,根据体质量随机分成5组:空白组、模型组、加味温胆方低剂量组(5.0 mg/kg)、加味温胆方中剂量组(10.0 mg/kg)、加味温胆方高剂量组(20.0 mg/kg)。模型组、加味温胆方各剂量组喂以高脂饲料,同时分别以0.9%氯化钠注射液及各剂量加味温胆方灌胃,连续灌胃7周,在第49天施冠状动脉结扎术;空白组喂以普通饲料,以0.9%氯化钠注射液灌胃,实验结束后,测定凋亡光密度及面积、Bcl-2、Bax、Survivin、Caspase-3蛋白及m RNA水平。结果与空白组比较,模型组及加味温胆方组各剂量Bcl-2、Survivin mRNA、蛋白表达水平降低,Bax、Caspase-3mRNA、蛋白表达水平、心肌细胞凋亡光密度及面积升高(P 0.05);与模型组比较,加味温胆方组各剂量组Bcl-2、Survivin mRNA、蛋白表达水平降低升高,Bax、Caspase-3 m RNA、蛋白表达水平、心肌细胞凋亡光密度及面积降低,且随着加味温胆方组给药剂量的增加,Bcl-2、Survivin mRNA、蛋白表达水平逐渐升高,Bax、Caspase-3 mRNA、蛋白表达水平、心肌细胞凋亡光密度及面积逐渐降低,剂量-效应关系明显(P 0.05)。结论加味温胆方能减轻冠心病大鼠的病理损伤,抑制心肌缺血(痰浊血瘀证)大鼠细胞凋亡,其机制与加味温胆方能促进Bcl-2、Survivin mRNA、蛋白的表达,抑制Bax、Caspase-3 m RNA、蛋白的表达有关。     

中药异位宁对子宫内膜异位症大鼠Bcl-2、Fas、Caspase-3信号传导通路的影响

目的:通过对比异位宁治疗前后子宫内膜异位症(EM)模型大鼠异位病灶中Bcl-2、Fas、Caspase-3蛋白表达变化,探讨中药异位宁疗效及作用机制。方法:建立EM大鼠模型,采用免疫组化、蛋白印记法,检测大鼠异位病灶内膜中Bcl-2、Fas、Caspase-3含量。结果:异位宁高剂量组及低剂量组Bcl-2阳性表达率较模型组显著降低(P0.01);Fas、Caspese-3阳性表达率较模型组显著增高(P0.01);西药组(达那唑组)与模型组相比(P0.01),亦可降低Bcl-2表达,增加Fas、Caspase-3表达,但疗效低于异位宁高、低剂量组(P0.01)。结论:异位宁可通过降低抗凋亡基因Bcl-2的表达,同时增加促凋亡基因Fas、Caspase-3的表达,增强异位内膜细胞的凋亡能力,使病灶萎缩,从而达到治疗目的。     

左归饮对D-半乳糖致衰大鼠肝肾组织形态及其细胞凋亡相关蛋白表达的影响

目的研究左归饮对D-半乳糖致亚急性衰老模型大鼠肝、肾组织形态及其细胞凋亡相关蛋白表达的影响,初步探讨其延缓衰老作用机制。方法取健康SD大鼠72只,雌雄各半,随机分为6组,即对照组、模型组、给药组(维生素E组,左归饮高、低剂量组和六味地黄丸组)。除对照组颈背部皮下注射0.9%Na Cl溶液外,其余各组颈背部皮下分别连续注射D-半乳糖建立亚急性衰老模型。建模同时,各给药组大鼠分别灌胃给予维生素E、高剂量左归饮、低剂量左归饮及六味地黄丸药液进行干预,对照组与模型组分别给予等体积的蒸馏水。连续给药8周后,取大鼠肝、肾组织固定,利用HE染色法制作病理切片,进行显微观察;同时,采用免疫组化方法检测肝、肾组织中细胞凋亡相关蛋白(Bax、Bcl-2、Caspase-3)阳性表达水平,统计比较IOD值。结果 (1)与对照组比较,模型组大鼠肝、肾组织病理性损伤明显;与模型组比较,左归饮能够减轻D-半乳糖致大鼠衰老过程中出现的肝、肾组织病理性损伤。(2)与对照组比较,模型组大鼠肝组织中Bax和Caspase-3的IOD值均显著升高(P0.01),Bcl-2的IOD值显著降低(P0.01);与模型组比较,左归饮高剂量组大鼠肝组织中Bax、Caspase-3的IOD值均显著降低(P0.01),Bcl-2的IOD值显著升高(P0.01)。左归饮低剂量组大鼠肝组织中Bax和Caspase-3的IOD值明显降低(P0.05),Bcl-2的IOD值略有升高,但差异无统计学意义(P0.05)。(3)与对照组比较,模型组的肾组织中Bax和Caspase-3的IOD值均显著升高(P0.01),Bcl-2的IOD值显著降低(P0.01);与模型组比较,左归饮高剂量组大鼠肾组织中Bax、Caspase-3的IOD值均明显降低(P0.01),Bcl-2的IOD值明显升高(P0.01)。左归饮低剂量组大鼠肾组织中Bax的IOD值明显降低(P0.05),但Bcl-2及Caspase-3的IOD值差异无统计学意义(P0.05)。结论左归饮对肝、肾组织具有一定的保护作用,其作用机制可能是通过与影响肝、肾组织中细胞凋亡相关蛋白表达有关。