瘢痕疙瘩组织中内皮素－1及碱性成纤维细胞生长因子mRNA的表达

目的 了解内皮素-1和碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)在瘢痕疙瘩组织的表达情况。 方法 组织活检标本分为 3组,瘢痕疙瘩、萎缩性瘢痕和正常皮肤。用地高辛标记的 cDNA探针,采取冰冻切片原位杂交的方法检测内皮素-1和 bFGF mRNA的表达。结果 瘢痕疙瘩真皮组织内内皮素-1 mRNA的表达明显强于萎缩性瘢痕和对照组。阳性染色主要位于真皮浅层血管和部分真皮成纤维细胞。瘢痕疙瘩组 6/8例真皮成纤维细胞内皮素-1 mRNA阳性,且呈弥漫性分布;萎缩性瘢痕和正常皮肤真皮成纤维细胞内皮素-1 mRNA无阳性着色。结论 内皮素-1和 bFGF mRNA在瘢痕疙瘩组织中的过度表达提示内皮素-1和 bFGF可能在瘢痕疙瘩的形成中起一定作用。     

碱性成纤维细胞生长因子对皮肤萎缩性瘢痕中成纤维细胞的作用

目的探讨人碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对豚鼠皮肤萎缩性瘢痕中成纤维细胞的作用。方法取实验用成年豚鼠20只,于脊柱旁两侧A,B,C三处皮肤分别人工造成萎缩性瘢痕后,实验组在A处真皮层注射50μg/L的bFGF0.1mL,隔日1次,共4次;在C处真皮层注射同剂量生理盐水作阴性对照,B处不作任何处理做空白对照。术后第21天切取瘢痕组织行病理切片,应用鼠抗人ki-67单克隆抗体行免疫组化,显微镜下计算增殖成纤维细胞所占百分率。结果实验组、阴性对照组和空白对照组切口瘢痕增殖成纤维细胞百分率分别为(7.63±1.42)%,(0.98±0.33)%和(1.22±0.34)%。实验组增殖成纤维细胞百分率与阴性对照组及空白对照组比较显著增高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 bFGF可以促进豚鼠皮肤萎缩性瘢痕中的成纤维细胞增殖。     

碱性成纤维细胞生长因子和内皮素-1体外协同培养正常人黑素细胞

目的探讨在不含霍乱毒素的MCDB153培养基中添加碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和内皮素-1(ET-1)能否体外培养正常人黑素细胞。方法取健康青少年包皮环切术后的新鲜包皮标本,经修剪、分离、消化和离心获得表皮细胞,用含bFGF和ET-1的MCDB153培养基重悬细胞,于常规条件下培养;倒置显微镜下观察细胞形态;L-Dopa染色及S-100免疫细胞化学法鉴定黑素细胞;生长曲线法记录黑素细胞生长状况;MTT法测定黑素细胞活性。结果黑素细胞生长良好,1周后即进入指数生长期;细胞形态正常,具有2～6个树突以及2～3级树突,细胞纯度较高,无角质形成细胞和/或成纤维细胞污染。多巴染色使黑素细胞胞浆和树突呈棕褐色,胞核呈棕红色,S-100免疫组化DAB显色使黑素细胞胞浆呈棕褐色,证实为正常人黑素细胞;细胞活性良好,随时间延长活性逐渐升高。结论采用bFGF和ET-1协同培养人黑素细胞是一种较好的方法,可用于实验研究。     

瘢痕疙瘩成纤维细胞胶原合成的实验研究

目的 探讨瘢痕疙瘩中胶原过度聚集的原因.方法 从正常皮肤与活跃增生瘢痕疙瘩标本分别培养真皮成纤维细胞,采用³H-脯氨酸掺入法分别检测单层培养及胶原凝胶三维培养体系中成纤维细胞的胶原合成量.用斑点杂交法检测单层培养细胞的人前.α1(Ⅰ)型胶原mRNA水平.结果 瘢痕疙瘩成纤维细胞Ⅰ型胶原mRNA水平升高,其胶原合成量也显著高于正常真皮成纤维细胞(P<0.01).结论 在增生活跃瘢痕疙瘩中,成纤维细胞胶原合成功能处于活化状态,胶原合成增加是导致胶原过度积聚的重要原因.     

成纤维细胞活化蛋白在瘢痕疙瘩组织中的表达及意义

 目的:了解成纤维细胞活化蛋白（FAP）在瘢痕疙瘩组织中的表达情况,探讨FAP在瘢痕疙瘩发病机制中的作用。方法:采用免疫组化染色技术检测30例瘢痕疙瘩组织（病例组）和20例正常皮肤组织（对照组）中FAP的表达强度,并比较两组间及瘢痕疙瘩不同临床分级之间FAP表达阳性率的差异。结果:病例组瘢痕疙瘩组织中FAP在成纤维细胞和血管内皮细胞内表达,阳性率为73.33％;对照组正常皮肤组织中未见FAP表达,两组间FAP表达阳性率比较,差异有统计学意义（  X²=26.19,P=0.001）;瘢痕疙瘩临床分级中,轻度与重度之间及中度与重度之间比较,FAP表达阳性率差异均有统计学意义（P值分别为0.002、0.006）。结论:瘢痕疙瘩组织中FAP表达阳性率明显高于正常皮肤组织;瘢痕疙瘩临床分级越严重,FAP表达阳性率越高;FAP可能参与瘢痕疙瘩的发病机制,针对FAP的干预可能有助于瘢痕疙瘩的治疗。     

曲尼司特对人正常皮肤和瘢痕疙瘩成纤维细胞部分细胞因子表达的影响

目的 ：研究曲尼司特对正常皮肤和瘢痕疙瘩成纤维细胞转化生长因子-β1（TGF-β1）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）和白介素-6（IL-6）表达的影响。方法：在体外无血清培养的人正常皮肤成纤维细胞和瘢痕疙瘩成纤维细胞中,分别加入0、10、25、50和250μg／mL曲尼司特孵育24、72、96h,用双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ABC—ELISA）法测定其上清液中TGF-β1、bFGF和IL-6的表达水平。结果：与对照组相比。25、50和250μg／mL曲尼司特能抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞TGF-β1的表达;50μg／mL和250μg／mL曲尼司特能增加瘢痕疙瘩成纤维细胞bFGF的表达;10～250μg／mL曲尼司特可降低IL-6的表达,上述改变在一定时段差异有统计学意义（P〈0．05）。不同浓度曲尼司特对正常皮肤成纤维细胞的影响相似。结论：曲尼司特能降低瘢痕疙瘩成纤维细胞TGF-β1的产生。增加bFGF的合成,减少IL-6的表达,这或许可解释其在抑制异常瘢痕形成中的作用。     

雷公藤甲素对瘢痕疙瘩成纤维细胞结缔组织生长因子和血小板衍化生长因子表达的影响

瘢痕疙瘩最显著的特征是成纤维细胞持续活化所产生的细胞外基质,尤其是胶原的过度堆积,导致真皮纤维化.目前其发病机制尚不清楚,但由血小板以及各种炎性细胞释放的细胞因子在瘢痕疙瘩的发生、发展以及转归中起着关键作用[1].     

几丁糖对瘢痕疙瘩成纤维细胞形态及增殖的作用

目的：探讨几丁糖对瘢痕疙瘩成纤维细胞形态及生长增殖的作用，为临床应用几丁糖治疗瘢痕疙瘩提供理论基础：方法：用组织块法进行瘢痕疙瘩、正常皮肤成纤维细胞的体外培养；用光学显微镜和电子显做镜观察细胞的形态结构；用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法和流式细胞仪检测不同浓度几丁糖对不同来源的成纤维细胞生长增殖和细胞周期的影响．结果：随着几丁糖浓度的增高，瘢痕疙瘩来源的成纤维细胞细胞器萎缩，4值减小，C0 G1期的细胞百分比增多，S期G2 M期的细胞百分比减少．结论：几丁糖对正常皮肤和瘢痕疙瘩来源的成纤维细胞的生长增殖均有抑制作用，几丁糖可能在瘢痕疙瘩的防治中有一定的作用．     

病理性瘢痕成纤维细胞的研究进展

成纤维细胞是瘢痕形成的效应细胞,瘢痕疙瘩和肥厚性瘢痕成纤维细胞存在着广泛的异质性。成纤维细胞原合成增加,降解减少导致病理性瘢痕中胶原过度积聚。成纤维细胞的增殖异常是病理性瘢痕过度增生和持续存在的主要原因。成纤维细胞对细胞因子等因素反应性有明显异常。肥厚性瘢痕的收缩性和成纤维细胞的异质性有直接关系。     

内皮素家族及其受体与恶性黑素瘤

内皮素受体B作为一种重要的内皮素家族受体,在恶性黑素瘤中与其配体内皮素-1和内皮素-3结合而被激活。目前研究表明,在绝大多数的恶性黑素瘤中内皮素受体B的表达上调并且其激活介导的一系列生物学效应在恶性黑素瘤的发生、发展和转移等过程中起重要的作用,内皮素受体B已被公认为是一种重要的恶性黑素瘤进展标志物。对内皮素受体B介导的信号转导路径下游具体分子机制的深入理解,将为进一步研究恶性黑素瘤的发病机制、治疗带来新的契机和希望。     

Endothelin 3 induces skin pigmentation in a keratin-driven inducible mouse model

Endothelin 3 (Edn3) encodes a ligand important to developing neural crest cells and is allelic to the spontaneous mouse mutation occurring at the lethal spotting (ls) locus. Edn3(ls/ls) mutants exhibit a spotted phenotype due to reduced numbers of neural crest-derived melanocyte precursors in the skin. In this study, we show that when Edn3 is driven by the keratin 5 promoter and thereby placed proximal to melanocyte lineage cells, adult mice manifest pigmented skin harboring dermal melanocytes. Using a tetracycline inducible system, we show that the postnatal expression of Edn3 is required to maintain these dermal melanocytes, and that early expression of the Edn3 transgene is important to the onset of the hyperpigmentation phenotype. Crosses into Edn3(ls/ls) mutants demonstrate that the Edn3 transgene expression does not fully compensate for the endogenous expression pattern. Crosses into tyrosine kinase receptor Kit(Wv) mutants indicate that Edn3 can partially compensate for Kit's role in early development. Crosses into A(y) mutant mice considerably darkened their yellow coat color suggesting a previously unreported role for endothelin signaling in pigment switching. These results demonstrate that exogenous Edn3 affects both precursors and differentiated melanocytes, leading to a phenotype with characteristics similar to the human skin condition dermal melanocytosis.     

银屑病患者血浆内皮素含量检测

为了探讨内皮素与银屑病的关系及其在发病机理中的作用，采用放射免疫分析法检测了３２例正常人及５４例银屑病患者血浆内皮素的变化，其中寻常型银屑病４５例（进行期３２例，静止期１３例），红皮病型银屑病９例。结果显示：正常人血浆内皮素水平为４３．５±１５．７１ｐｇ／ｍｌ，银屑病患者血浆内皮素含量为６２．０１±２１．１５ｐｇ／ｍｌ，较正常对照组显著增高（Ｐ＜０．０１），红皮病型又较寻常型患者的血浆内皮素水平为高（Ｐ＜０．０５）。寻常型银屑病患者中，进行期与静止期相比其内皮素水平虽有增高，但无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。本研究提示内皮素可能与银屑病的发病有关，进一步了解其作用机理，可能对银屑病的防治具有重要意义     

银屑病患者血浆内皮素水平测定及其临床意义

目的　探讨银屑病患者血浆内皮素 (endothelin ,ET)表达与银屑病疾病活动性的关系。方法　采用放射免疫分析法检测了 2 8例银屑病患者的血浆ET含量 ,对照组为 15例健康体检者。结果　寻常性银屑病及非寻常性银屑病患者血浆ET水平显著高于正常对照组 (P <0 .0 1) ,而寻常性与非寻常性银屑病间无显著性差异 (P >0 .0 5 )。经直线相关分析寻常性银屑病患者血浆ET含量与病情严重程度无明显相关性 (P >0 .0 5 )。结论　内皮素参与银屑病的发病机制 ;血浆内皮素水平不能作为反映寻常性银屑病疾病活动的敏感指标。     

内皮素3上调黑素瘤细胞株A375表达骨桥蛋白的研究

目的 探讨内皮素受体(ETR)-B拮抗剂BQ788和磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)抑制剂LY294002对黑素瘤细胞株A375骨桥蛋白基因的表达。方法 对照组在人A375细胞培养体系中加入100 nmol/L内皮素3,试验组除加入100nmol/L内皮素3外,分别加入1μmol/L BQ788和20μmol/L、50μmol/L LY294002,采用RT-PCR和蛋白质印迹方法检测骨桥蛋白的mRNA和蛋白表达。结果 ETR-B拮抗剂BQ788和PI3K抑制剂LY294002均能显著减少人恶性黑素瘤细胞株A375中骨桥蛋白mRNA和蛋白的表达,与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。高浓度较低浓度LY294002对骨桥蛋白表达的抑制作用更明显(P<0.05)。结论 内皮素3/ETR-B能通过激活PI3K信号通路上调骨桥蛋白的表达。     

Endothelin receptor antagonist bosentan improves the dermal sclerosis in a patient with systemic sclerosis

We report a case of systemic sclerosis with interstitial pneumonia and severe pulmonary hypertension treated with bosentan, an endothelin receptor antagonist. Within a short period of administration of the bosentan the skin sclerosis improved.     

白癜风角朊细胞内皮素1mRNA表达的研究

目的 了解白癜风黑素细胞的消失与角朊细胞产生的内皮素-1(ET-1)水平的关系.方法 采用原位杂交的方法检测了14例进展期寻常型白癜风患者表皮角朊细胞ET-1 mRNA表达.结果 白癜风患者白斑区及白斑边缘角朊细胞ET-1 mRNA表达明显降低.结论 白癜风的发生可能与角朊细胞所分泌的ET-1等生长因子缺乏有关,角朊细胞ET-1表达水平降低的原因以及在白癜风发病中作用尚需进一步研究.     

斑秃患者血浆内皮素及血清一氧化氮水平测定及其意义

目的 :探讨血浆内皮素 (ET)和血清一氧化氮 (NO)在斑秃发病中的作用。方法 :应用放射免疫法和Greiss法测定 2 3例斑秃活动期患者、1 1例斑秃稳定期患者以及 2 5例正常人血浆ET和血清NO值。结果 :斑秃活动期患者ET水平和ET/NO比值显著高于正常人 (P <0 0 5 ) ,但其NO水平与正常人无显著性差异 (P >0 0 5 ) ;斑秃稳定期ET和NO水平以及ET/NO比值与正常人无显著性差异(P >0 0 5 )。结论 :斑秃活动期患者ET水平和ET/NO比值可能与斑秃的活动性有关