耐万古霉素肠球菌的流行现状、治疗及预防对策

肠球菌因其致病力较弱，感染率较低而作为肠道正常菌群。近年来，由于抗生素，特别是万古霉素的滥用，使耐药肠球菌不断增加，耐万古霉素肠球菌（VRE）菌其耐药谱广，易造成感染和流行且能将耐万古霉素基因转移给其它革兰氏阳性性菌，如金黄色葡萄球菌，而受到全世界的广泛重视。目前，作为医院感染的主要病原菌，VRE感染的诊断，治疗以及预防VRE菌株在医院扩散的对策与措施是广大临床和医院感染监控工作者所面临的首要问题，文章对此进行了综合概括，以供参考。     

抗耐药革兰阳性球菌感染的新抗菌药及其对细菌性心内膜炎的治疗

20世纪90年代以来,多重耐药革兰阳性球菌感染的发生率明显上升,这些细菌包括耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）、耐万古霉素肠球菌（VRE）、耐青霉素肺炎链球菌（PRSP）以及耐糖肽类金黄色葡萄球菌（GISA）等。由于这类感染用药选择较少,治疗难度大,病死率高,因而备受瞩目。     

肠球菌耐药性与耐万古霉素基因初步检测

目的了解肠球菌对六种常用抗生素的耐药情况,同时检测耐万古霉素肠球菌（VRE）的耐万古霉素基因型。方法用K-B纸片琼脂扩散法检测肠球菌对万古霉素、替考拉宁、氨苄西林、氨苄西林/舒巴坦、环丙沙星以及庆大霉素等六种常用抗生素的敏感性。采用含6μg/mL万古霉素的琼脂稀释筛选平板法（ADSP）筛选VRE菌株,并用多重聚合酶链反应（multiplex-PCR）检测VRE的耐万古霉素基因型。结果 100株临床分离肠球菌中以粪肠球菌（86%）和屎肠球菌（11%）为主。除万古霉素和替考拉宁外,屎肠球菌对其它几种抗生素的耐药率明显高于粪肠球菌（P〈0.05）;庆大霉素高耐株检出率为54%,其对常用抗生素的耐药率明显高于低耐株（P〈0.05）。用ADSP法筛选出3株（3%）耐万古霉素肠球菌,其中只有一株铅黄肠球菌为耐万古霉素基因型阳性（VanC2）,其余两株均为Van基因阴性。结论 ADSP法用于筛选VRE较K-B法检出率高;本次研究只分离出一株VanC2型VRE,没有发现具有重要临床意义的VanA和VanB型VRE;肠球菌对庆大霉素（120μg/片）的耐药率为54%,建议临床慎用;万古霉素、替考拉宁、氨苄西林及氨苄西林/舒巴坦均可作为治疗粪肠球菌感染的药物,但需密切注意肠球菌耐药情况。     

发现耐万古霉素的金黄色葡萄球菌株

美国疾病控制中心报告,出现了一种耐万古霉素的金黄色葡萄球菌株。在日本今年初首先发现了一例耐万古霉素的金黄色葡萄球菌(金葡球菌)病例之后,美国到目前为止记录了2例病人的资料。这种菌株是从接受多疗程万古霉素和其他抗生素治疗复发性腹膜炎和顽固性败血症的病人体内分离的。抗药菌株的迅速出现令人担忧,因为自80年代起万古霉素是唯一剩下的能有效治疗严重金葡球菌感染的抗生素。金葡球菌是一种常见的细菌,也是一种难以对付的致病菌,可引起各种感染,范围从疖到危及生命的肺炎、心内膜炎、脑膜炎、脓肿和败血     

耐万古霉素肠球菌株产生和传播机制的探讨

目的 探讨耐万古霉素肠球菌株的产生和传播机制,为预防耐万古霉素肠球菌的产生和控制VRE播散提供理论依据和实验基础,为临床治疗提供依据.方法 应用万古霉素对敏感肠球菌菌株进行诱导耐药,作药敏试验、检测其基因表型、万古霉素和替考拉宁的耐药性、体外质粒结合试验、耐药基因的检测.结果 应用万古霉素对敏感肠球菌菌株进行诱导耐药,产生52株万古霉素肠球菌.对万古霉素和替考拉宁高度耐药,对万古霉素和替考拉宁的耐药水平及耐药基因簇的差异,糖肽耐药性肠球菌分为VanA～G等6种基因型.质粒结合试验7株有菌落生长,即接合子.结论 万古霉素肠球菌对万古霉素的耐药性多数是由位于染色体或质粒上的耐药基因簇引起的.万古霉素肠球菌的耐药基因有向金黄色葡萄球菌转移现象,这就是种间的传播机制.     

儿童肠球菌耐万古霉素表型和耐药基因检测分型的研究

【摘要】 目的 研究儿科住院患者耐万古霉素肠球菌（VRE）定植菌耐药基因型与表型,了解菌种构成、耐药基因型与表型特点,为儿科临床感染诊断、合理用药提供依据。方法 采集2016年1月~12月期间于淄博市中心医院儿科住院患儿的170个肛门拭子,接种培养,筛选出耐万古霉素肠球菌株,采用琼脂稀释法测定万古霉素、替考拉宁、利奈唑胺、青霉素、庆大霉素、环丙沙星、米诺环素、氨苄西林8个药物对耐万古霉素肠球菌的最低抑菌浓度。提取肠球菌的DNA,PCR法检测耐万古霉素肠球菌耐药基因型及菌种,产物经2%琼脂糖凝胶电泳、成像分析及基因测序。结果 170个拭子培养中共筛选出21株耐万古霉素肠球菌（124%）,对大部分测定的抗菌药物耐药率超过50%,包括环丙沙星（905%）、 青霉素（810%）、 氨苄西林（762%）、庆大霉素（HLAR 619%）,但仍对利奈唑胺 (100%)与米诺环素(952%)敏感。21株VRE菌种包括屎肠球菌最常见为667%。经PCR检测vanA基因型是本研究中VRE最常见的耐药基因型。追踪VRE定植阳性者,未发现VRE感染。结论 耐万古霉素肠球菌以屎肠球菌最常见。VRE耐大部分抗菌药物,但对利奈唑胺、米诺环素较敏感,可作为治疗VRE感染的选择药物。 本研究中vanA基因型最常见,临床分离菌存在基因型与表型不一致菌株,临床在使用抗菌药物治疗中应予重视。     

MRSA菌感染的用药选择

有重要临床意义的多重耐药阳性球菌包括甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌(MRSA)，甲氧西林耐药表皮葡萄球菌(MRSE)和甲氧西林耐药溶血性葡萄球菌，[后二种葡萄球菌因凝固酶阴性，又称为凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)]，青霉素耐药肺炎链球菌(PRSP)，万古霉素耐药肠球菌(VRE)。近年来由于出现了万古霉素中介金葡菌，人们十分关注对耐万古霉素MRSA的监测。近年来还开始注意红霉素耐药β-溶血性链球菌化脓性链球菌的发展，特别是耐大环内酯类-林可霉素类-链阳霉素B的化脓性链球菌(MLSB耐药)，β-溶血性链球菌的耐药性发展。下面就MRSA感染的用药选择作一简要介绍。     

2010—2011年多重耐药菌的调查分析

多重耐药菌(Multidrug—Resistant Organism,MDRO),主要是指对临床使用三类或三类以上抗菌药物同时呈现耐药的细菌。常见多重耐药菌包括耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicilin-resist-ant staphylococcus,MRSA)、耐万古霉素肠球菌(vancomycin resistant enterococcus,VRE)、产超广     

耐万古霉素肠球菌的筛选及药敏结果的分析

目的：为了了解本院肠球菌的耐药特性，加强对万古霉素肠球菌的监测。方法：我们从临床标本中分离到肠球菌132株，用K-B纸片琼脂扩散法测定其对万古霉素，替考拉宁等7种抗生素的敏感性并同时用含6μg/ml万古霉素的脑心浸液琼脂稀释筛选平板法（ADSP）来筛选耐万古霉素肠球菌（VRE）的菌株。结果：K-B纸片琼脂扩散法测得的132株肠球菌对替考拉宁、万古霉素、氨苄西林、青霉素G的耐药率分别为0，3.8％，11.3％，15.9％，对庆大霉素、红霉素、环丙沙星的耐药率达68.2％，72.0％，64.4％。用ADSP法从132株肠球菌中筛选出7株耐万古霉素的肠球菌，阳性率为5.3％。结论：本次实验检测出临床标本分离的肠球菌的耐药性比较严重，应引起临床重视，合理使用抗生素。ADSP法可检出所有的VRE,不会发生漏检，且廉价、方便、快速，易于操作适应于临床标本VRE的筛查。     

耐万古霉素肠球菌表型及基因型分析

目的：对耐万古霉素的肠球菌进行表型及基因型分析，了解临床耐万古霉素肠球菌(VRE)的流行状况。指导临床合理使用抗生素。方法：48株肠球菌，按常规方法进行鉴定，并采用琼脂筛选法对耐万古霉素肠球菌进一步筛选。将筛选出的3株耐万古霉素肠球菌，以多重PCR法进行基因分型。结果：共检出3株对万古霉素耐药肠球菌，其中1株为天然耐万古霉素株。基因型分析结果为1株VanA型，1株VanCl型，另1株基因型不明。结论：已发现3株VRE。临床应合理使用抗生素，以防止VRE的爆发流行。     

万古霉素耐药肠球菌的分子特征及同源性分析

目的 研究北京朝阳医院临床分离的万古霉素耐药肠球菌(VRE)的基因型及同源性.方法 采用WHONET软件调查北京朝阳医院2003年6月至2007年3月VRE的发生率,收集这段时间分离的、来自不重复患者的38株VRE,采用含6 ms/L万古霉素筛选平皿确定VRE.多重PCR及序列分析确定糖肽类耐药基因的基因型,脉冲场凝胶电泳(PFGE)确定耐药株的亲缘关系.结果 VRE较多出现在重症监护病房(34.2%,13/38).2003至2007年,VRE的分离率如下:2003年2.6%(5/190),2004年1.8%(6/340),2005年0.7%(2/271),2006年6.8%(20/294),2007年1至3月3.3%(5/153).38株VRE中,PCR和序列分析证明15株为vanB基因型,均为粪肠球菌,万古霉素最低抑菌浓度(MIC)在16～48 ms/L,替考拉宁MIC在0.4～0.5 ms/L;23株为vanA基因型,均为屎肠球菌,万古霉素MIC≥256 ms/L(除E31为32 ms/L),替考拉宁MIC在2～32 mg/L.23株vanA基因型屎肠球菌中有12株表现为vanA基因型、vanB表型.PFGE共分为10型,15株粪肠球菌中有14株均来自同一克隆(B型),1株分型未明;23株屎肠球菌中21株分为9型,主要是A、D、E、F型,2株分型未明.结论 北京朝阳医院流行的VRE主要有vanA、vanB两种基因型.vanA基因型屎肠球为多克隆传播,vanB基因型粪肠球为单克隆传播.部分vanA基因型屎肠球存在基因型与表型不一致现象.     

基质辅助激光解析电离飞行时间质谱技术早期筛查耐万古霉素屎肠球菌

目的探讨基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)快速筛查耐万古霉素屎肠球菌(vancomycin resistant enterococcus faecium,VRE)。方法收集2009至2012年临床分离的150株屎肠球菌为研究对象。其中实验组为60株万古霉素耐药屎肠球菌,对照组为90株万古霉素敏感屎肠球菌(vancomycin susceptible enterococcusfaecium,VSE)。通过PCR方法对所有菌株进行万古霉素耐药基因检测。应用MALDITOF MS检测2组菌株,随机选取实验组30株VRE和对照组30株VSE的质谱峰,应用ClinPro Tools软件统计分析两组之间差异质谱峰的受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线。用筛选的差异质谱峰来鉴别余下的实验组30株VRE及对照组60株VSE。结果 MALDI-TOF MS鉴定所有菌株均为屎肠球菌,60株VRE均携带vanA基因,90株VSE不携带任何万古霉素耐药基因,两组菌株之间存在2个差异蛋白质谱峰,相对分子质量分别为3 516.14和3 644.12,其曲线下面积(area under curve,AUC)分别为0.782、0.767。同时采用这2个质谱峰时,MALDI-TOF MS检测VRE的敏感度为80%,特异度为90%,假阳性率为10%,假阴性率为10%,阳性预测值为80%,阴性预测值为90%。结论 MALDI-TOF MS能够在药敏结果报告前,菌株鉴定同时快速筛查VRE,据此建立新型报告流程即时指导临床合理使用抗生素。     

万古霉素耐药肠球菌的筛选及基因型检测

目的 了解我院耐万古霉素肠球菌的耐药表型、基因型及流行情况.方法 药敏试验采用K-B纸片扩散法,Etest法检测万古霉素耐药肠球菌对万古霉素的最低抑菌浓度（MIC）.聚合酶链反应（PCR）检测vanA、vanB、vanC1和vanC2-3基因型,PFGE分析万古霉素耐药肠球菌同源性.结果 219株肠球菌中检出3株万古霉素耐药屎肠球菌,检出率为1.3％;该菌株对万古霉素和替考拉宁均耐药,但对利奈唑胺敏感;基因型检测显示3株屎肠球菌均为vanA型,PFGE结果显示该3株万古霉素耐药肠球菌不属于同一型别.结论 我院住院患者中已出现万古霉素耐药菌株,医院应加强感染控制措施,以阻止这些VRE菌株在院内的传播和流行.     

转座子Tn1546介导肠球菌耐万古霉素的研究

目的研究万古霉素耐药肠球菌转座子Tn1546的携带情况、基因结构及分型,为临床预防、治疗选药和流行病学调查提供依据。方法采用10对引物重叠PCR法检测转座子Tn1546的结构基因。结果 59株VRE转座子Tn1546中所有的菌株均含有HAX基因、RS基因、SH基因;35株VRE携带有XY基因,通过测序,可知XY基因中有插入序列IS1216V插入,24株VRE缺失XY基因;12株VRE含有YZ基因,其余菌株缺失;46株VRE在ORF15’与ORF2之间反向插入IS1542基因;35株ORF3’端有IS1216V反向插入。结论肠球菌VanA基因是位于转座子Tn1546上;转座子Tn1546均检测出RSHAX基因,并且检测出插入序列IS1216、IS1542。     

Hospital-acquired vancomycin-resistant enterococci: now appearing in Kuala Lumpur Hospital

Hospital-acquired vancomycin-resistant enterococci (VRE) were first reported in the late 1980s and have since been an increasing problem worldwide. Kuala Lumpur Hospital thus far, to the best of our knowledge has been spared from this pathogen. We describe the first confirmed case of Enterococcus faecium exhibiting the van A phenotype in our hospital, in a patient with chronic renal failure who was successfully treated with linezolid. The microbiology laboratory plays an important role in the identification and detection of VRE.     

Antimicrobial activity of linezolid combined with minocycline against vancomycin-resistant Enterococci

Background Vancomycin-resistant Enterococci (VRE) cause serious infections that are difficult to treat.We carried out this study to determine the mutant prevention concentration (MPC) of linezolid when...     

万古霉素耐药肠球菌及Ⅰ类整合子基因的检测与分析

目的:统计中日友好医院肠球菌耐药情况,对万古霉素耐药肠球菌(VRE)进行筛查,检测Ⅰ类整合子基因,为肠球菌感染的药物治疗和控制提供参考。方法:药敏采用微量肉汤稀释法检测最低抑菌浓度(MIC),WHONET 5.3统计耐药率;万古霉素确证试验筛查VRE,多重聚合酶链反应(PCR)法检测其van基因,Etest法测定万古霉素、替考拉宁对VRE的MIC;PCR检测Ⅰ类整合子基因。结果:肠球菌对多种抗菌药物耐药程度很高;449株肠球菌中有6株检出vanC1基因,表型和基因型一致;未检出Ⅰ类整合子基因。结论:肠球菌耐药严重,需采取有效措施预防和控制VRE感染与传播,VRE筛查未见Ⅰ类整合子基因介导的耐药机制。     

万古霉素耐药肠球菌及I类整合子基因的检测与分析

目的：统计中日友好医院肠球菌耐药情况，对万古霉素耐药肠球菌（VRE）进行筛查，检测I类整合子基因，为肠球菌感染的药物治疗和控制提供参考。方法：药敏采用微量肉汤稀释法检测最低抑菌浓度（MIC）。WHONET 5．3统计耐药率；万古霉素确证试验筛查VRE，多重聚合酶链反应（PCR）法检测其van基因，Etest法测定万古霉素、替考拉宁对VRE的MIC；PCR检测I类整合子基因。结果：肠球菌对多种抗菌药物耐药程度很高；449株肠球菌中有6株检出vanC1基因，表型和基因型一致；未检出I类整合子基因。结论：肠球菌耐药严重，需采取有效措施预防和控制VRE感染与传播，VRE筛查未见I类整合子基因介导的耐药机制。