江西山药种质资源遗传多样性及其组培苗遗传稳定性的RAPD检测

目的 对来自江西的11份山药种质资源进行遗传多样性分析,并对其组培苗的遗传稳定性进行检测。方法 采用RAPD-PCR技术。结果 试验筛选出20条引物,共扩增出238个条带,其中234个为多态性带,平均每个引物扩增出多态性带11.7条,多态性条带比率为98.32%,材料间遗传相似系数为0.575 6~0.970 6,平均相似系数为0.723 1。根据UPGMA聚类分析结果,可在0.634 8的遗传相似系数上,将11份山药种质资源聚成5大类群(类群I~V)。其中第I类群只包含黄独;第II类群只包含瑞昌山药;第III类群包括南城淮山药1、千金薯、信州山药、永丰淮山药和铁棍山药,说明南城淮山药1、千金薯、信州山药、永丰淮山药与来源于河南焦作市温县的铁棍山药亲缘关系较近;第IV类包括南城山药、南城淮山药2、广丰药薯;第V类只包括泰和竹篙薯。这个结果表明江西山药种质资源遗传多样性还是比较丰富的。同时,江西山药带芽茎段连续继代6次后的组培苗(处理组)及其微型块茎实生苗(对照组)的RAPD分析结果也表明,11份山药品种均扩出126~179条可辨认的条带,每个品种的处理组和对照组均出现了5~18条变异条带数,表明江西山药各个品种带芽茎段连续继代6次后的组培苗存在着一定的体细胞无性系变异,但它们与微型块茎萌发实生苗的遗传相似系数还是比较高,说明它们的遗传性状还是比较稳定的,并未影响到其基因型。结论 本实验结果可为江西山药引种育种、资源改良、品种鉴定、种质保存及其种苗培育提供可靠依据。     

山药不同炮制品对小鼠碳粒廓清速率的影响

以碳粒廓清实验为指标,研究了山药生品、麸炒品及土炒品对小白鼠非特异性免疫功能的影响,结果表明各给药组与对照组比较均有非常显著性差异,生品又强于麸炒品和土炒品。而麸炒品和土炒品之间比较则没有显著性差异。     

有益微生物驱动的铁棍山药有机防控体系初探

目的 利用微生物多菌合剂“宁盾”防治南方根结线虫引起的铁棍山药根结线虫病，开展微生物菌剂与多种铁棍山药全程有机种植过程中所用生物农药的相容性试验，初步建立铁棍山药有益微生物驱动的有机防控体系（以下简称BeMMO体系）。方法 于2019年在河南温县开展了1 hm²铁棍山药BeMMO体系示范试验，通过灌根、叶部喷施将“宁盾”应用于根结线虫发病田块，以当地有机种植体系为对照，统计BeMMO体系防病和促生效果。结果 BeMMO体系中根结线虫病发病率和病害严重度均显著低于当地有机体系，对根结线虫病的防效为80.1%；单位产量提高26.0%，每公顷收入增加171 450元。比较铁棍山药根茎的营养成分和药理活性成分含量，BeMMO体系山药折干率及还原糖、淀粉、总多糖、可溶性浸出物含量分别提高9.07%、10.00%、16.76%、11.69%、17.87%。BeMMO体系采收后的土壤有机质含量相较于种植前提高14.1%；而当地有机体系则降低7.2%。BeMMO体系种植后的土壤铵态氮、速效磷、有效钾含量与种植前相比，平均分别提高18.6%、14.8%、6.7%，土壤电导率（EC）降低6.5%，而当地有机体系土壤铵态氮、EC分别提高了14.0%、10.5%，速效磷、有效钾含量降低2.0%、4.8%。结论 BeMMO体系明显降低了根结线虫病害严重度，有效改良了土壤化学性质，提高了铁棍山药营养成分和活性成分含量，长期在有机铁棍山药上使用可产生更好的经济效益和生态效益。     

炮制对山药磷脂成分的影响

对生山药及其7种炮制品作了磷脂成分的薄层定性比较和总磷脂含量测定。结果以蜜麸制山药中含磷脂量为最高(180.31mg/100g)。     

Neuroprotective effects of Dioscorea opposita on scopolamine-induced memory impairment in in vivo behavioral tests and in vitro assays

Ethnopharmacological relevance

Plants belong to the genus Dioscorea have long been used as edible tuber crops in many tropical and subtropical areas and as a traditional herbal medicine in oriental countries including China, Japan and Korea.

Aim of the study

In this study, in vivo and in vitro tests were carried out to evaluate the cognitive enhancing effects of CHCl₃-soluble extract from Dioscorea opposita against scopolamine-induced amnesic mice and glutamate- and H₂O₂-treated cortical neurons of rats.

Materials, methods and results

Acute treatment (200 mg/kg body weight, p.o.) and 10 days’ daily administration (50 mg/kg body weight, p.o.) of CHCl₃-soluble extract showed significant spatial learning and memory improvement on mice. Furthermore, the neuroprotective effects on glutamate- and H₂O₂-induced neurotoxicity in primary cultured cortical neurons of rats were assessed. Pretreatment with the extract was found to impart significant protection against neurotoxicity.

Conclusions

These in vivo and in vitro results suggest that the Dioscorea opposita has neuroprotective effects on memory impairment related neurodegenerative diseases.     

山药和麦冬的配伍机制及其临床运用

目的:探索山药和麦冬配伍机制及临床意义,了解配伍在临床应用中的重要性.方法:山药和麦冬均为临床常用中药,基于药对配伍的原则、药对配伍组合特点及现代研究认识等,笔者通过研究历代及近现代文献,对山药和麦冬配伍组成的现代科学内涵及其临床运用进行了分析与探讨.结果:山药和麦冬配伍主要运用于润肺滋阴、补肺美肤、延年益寿3个方面.结论:山药和麦冬的配伍机制灵活,临床运用广泛,为临床用药提供一些新的思路.     

怀山药及非药用部位总黄酮含量测定

目的:为充分利用怀山药资源,避免资源的浪费,研究怀山药各部位总黄酮的供试品制备方法,探讨怀山药各部位的总黄酮含量的变化.方法:采用乙醇超声提取法,正交设计实验优选怀山药中总黄酮的供试品制备方法,分光光度法测定含量.结果:怀山药总黄酮的供试品制备方法为95％乙醇15 mL超声提取3次,每次提取45 min.分光光度法其测定怀山药叶中黄酮含量最高,其次是生山药皮粉、藤茎、山药零余子.结论:怀山药各部位总黄酮含量有显著差异.     

Immunomodulatory Activity of the Glycoprotein Isolated from the Chinese Yam (Dioscorea opposita Thunb)

The yam (Dioscorea opposita Thunb) is a well‐known edible food and widely used as the traditional Chinese medicine. The present investigation was designed to evaluate the immunomodulatory activity of glycoprotein (DOT) from yam and explore its possible molecular mechanisms. Results showed that the DOT could improve the cell immunity, humoral immunity and phagocytic system function of the normal mice. The DOT could also increase the production of TNF‐α, interleukin‐6 and nitric oxide and enhance the pinocytosis function of macrophages. Furthermore, the DOT increased phosphor‐p38, JNK, ERK1/2 and nuclear factor kappa B (NF‐κB) p65 protein expression in peritoneal macrophages. Taken together, our data suggest that DOT could be used as a potential immunostimulant and exert its immunomodulatory activity via mitogen‐activated protein kinases and NF‐κB signal pathways. Copyright © 2017 John Wiley & Sons, Ltd.     

不同鼠龄昆明种小鼠流感病毒肺炎动物模型的比较研究

[目的]通过幼龄鼠与成龄鼠建立流感病毒感染动物模型对照实验研究,探讨幼龄鼠与成龄鼠对流感病毒的易感性。[方法]采用鼻腔接种甲型流感病毒小鼠,将实验小鼠分为幼龄正常组、幼龄模型组、成龄正常组和成龄模型组4组,观察各组小鼠在一般状态、存活只数、肺组织病变程度等方面的差异,计算肺指数,应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测各组小鼠肺组织的病毒载量。[结果]1)接种流感病毒后,成龄模型组基本保持较好状态,幼龄模型组一般状态最差,各正常组小鼠状态最好。2)肺组织外观病变程度:各正常组小鼠在肺组织外观全肺野无病变;幼龄模型组肺组织病变最重,与幼龄正常组及成龄模型组比较均有统计学差异(P0.05);成龄模型组与成龄正常组比较无统计学差异(P0.05),与幼龄模型组有统计学差异(P0.05)。3)肺指数:幼龄模型组肺指数最高,与幼龄正常组及成龄模型组比较均有统计学差异(P0.05)。4)肺组织IV-RNA的半定量:各正常组小鼠未检测到病毒核酸,幼龄模型组在各时点均检测到大量的病毒核酸,幼龄模型组各时间点与成龄模型组比较有统计学差异(P0.05)。[结论]幼龄鼠可以成功塑造小鼠IV感染模型,成龄鼠不能成功造模。     

An ethnopharmacological survey and in vitro confirmation of ethnopharmacological use of medicinal plants used for wound healing in Bosomtwi-Atwima-Kwanwoma area,Ghana

Aims of the study

Wounds represent a major health burden and drain on healthcare resources in the world including Ghana and Africa. The majority of the people of Ghana and Africa still patronize traditional medicine for their health needs including various forms of wounds. The aim of this study is the identification of medicinal plants, type of wounds, dosage forms and collection methods used traditionally in treating wounds in the Bosomtwi-Atwima-Kwanwoma district, Ghana. In vitro screening of selected extracts from these plants on cell physiology of human dermal fibroblasts and keratinocytes was to be performed.

Materials and methods

Validated questionnaires were administered to 78 traditional healers in 54 communities of the district. Interviews and structured conversations were used to administer the questionnaires. Selected herbal material dominantly used by the healers was collected, identified and aqueous and ethanolic extracts were investigated in vitro on influence on cell physiology of keratinocytes and dermal fibroblasts (MTT-, BrdU-, LDH-assay). Antioxidant activities of ethanolic extracts were determined by free radical scavenging activity. Antiadhesive activity against Helicobacter pylori on human stomach cells was investigated for extracts reported to be used for stomach ulcer treatment.

Results

The ethnopharmacological survey revealed 104 plants species belonging to 47 families. The detailed use of these plants is documented. Aqueous extracts of Phyllanthus muellerianus, Pycnanthus angolensis and Combretum smeathmanni influenced the mitochondrial activity and proliferation of dermal fibroblasts and keratinocytes significantly. Ethanolic extracts of selected plants exhibited strong antioxidant activities comparable to α-tocopherol. For Spathodea campanulata, Hoslundia opposita and Pycnanthus angolensis, which were reported by the healers to be used also for wound healing in case of stomach ulcers, strong antiadhesive activity against Helicobacter pylori was demonstrated, while the extracts did not exhibit any direct cytotoxicity against the bacterium.

Conclusions

Traditional use of many wound-healing plants from Ghana can be well rationalized by the in vitro investigation of aqueous extracts. E.g. extracts of Phyllanthus muellerianus, Pycnanthus angolensis and Combretum smeathmanni exhibited significant influence on the cell viability and proliferation of keratinocytes and dermal fibroblasts.     

山药化学成分研究

目的研究山药Dioscorea opposita化学成分。方法采用硅胶、Sephadex LH-20、反相ODS等柱色谱方法对化合物进行分离纯化,运用核磁共振波谱等方法鉴定化合物的结构。结果从山药根茎95%乙醇提取物中分离纯化得到14个化合物,包括8个二苯基庚烷类化合物(1～8)和6个含氮化合物(9～14),分别鉴定为5-ethoxy-1,7-diphenylheptan-3-one(1)、5-hydroxy-1,7-bis(4-hydroxyphenyl)-heptan-3-one(2)、1,7-diphenyl-4-hepten-3-one(3)、1,7-bis(4-hydroxyphenyl)-4-hepten-3-one(4)、hannokinol(5)、1-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-7-(4-hydroxyphen-yl)-3,5-heptanediol(6)、1,7-bis(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-3,5-heptanediol(7)、1,7-bis(4-hydroxyphenyl)-1,5-epoxy-3-hydroxyheptane(8)、trans-N-coumaroyltyramine(9)、trans-N-feruloyltyramine(10)、cis-N-coumaroyltyramine(11)、trans-N-cinnamoyltyramine(12)、pyrrolezanthine-6-ethyl ether(13)、divaricataester A(14)。结论化合物1是新的天然产物,命名为山药庚酮A,化合物3、4、10、12～14为首次从薯蓣科植物中分离得到,化合物2、6、8为首次从山药中分离得到。     

梯度磁场对山药珠芽的苗期生长效应

目的 :探讨磁生物效应对药用植物生长和发育的影响。方法 :采用带有传送装置的梯度磁场对山药珠芽进行播前处理 ,并对珠芽的苗期生长进行评价。结果 :经磁场处理两遍的 ,苗期生长最好 ,与对照相比 ,出苗率提高 38.60 % ;平均根长增加2.62cm ,单株发根数提高8%。经统计学F测验 ,平均根长F=19.98,F_0.05=6.94,F_0.01=18.00。结论 :适宜的磁场强度可促进药用植物生长。     

阳春砂杂交新种“春选1号”药理活性研究

目的探讨阳春砂杂交新种"春选1号"挥发油的药理活性,并与其母本"长果2号"进行比较。方法采用10%番泻叶致小鼠腹泻模型、二甲苯致小鼠耳廓肿胀模型、0.6%醋酸溶液致小鼠扭体模型,观察"春选1号"挥发油的止泻、抗炎、镇痛作用,以及对小鼠胃肠动力的影响;并与其母本阳春砂"长果2号"进行对比分析。结果 "春选1号"与"长果2号"的挥发油均具有显著的止泻作用,其效果与阳性药蒙脱石散相当;抗炎作用与醋酸地塞米松片差异不明显;镇痛效果均显著;对胃排空均有双向调节作用,高剂量对小肠推进有促进作用,低剂量无明显影响。结论阳春砂杂交新种"春选1号"与其母本"长果2号"挥发油药理活性无明显差异,可媲美传统品种阳春砂。     

Central nervous system depressant effect of Hoslundia opposita vahl.

The chloroform extract of the dried root of Hoslundia opposita has been evaluated for effects on the central nervous system (CNS). The extract significantly potentiated the phenobarbitone sleeping time in mice and produced a 60% protection against leptazol-induced convulsion. Neuropharmacological screening revealed CNS depression.     

高山红景天多糖降血糖作用——不同给药途径的比较

分别给小鼠腹腔注射RSPA和B各100,50mg/kg,结果表明RSPB为高山红景天降血糖作用的有效部分,经多种途径给药证明RSPB不能经胃肠吸收而发挥降血糖作用,但经sc,im,ip,iv均可产生明显的降血糖作用。     

相关系列扩增多态性分子标记分析部分山药品种遗传多样性

 目的评价山药资源的多样性,为山药品种鉴定及亲缘关系的研究提供科学依据。方法以8个山药栽培居群中的21个山药品种为试材,进行相关系列扩增多态性（SRAP）分析,Popgene1.32软件计算遗传参数,UPGMA方法构建亲缘关系聚类图。结果相关系列扩增多态性引物共检测到309条清晰条带,其中多态性条带289条;Nei基因多样性指数（H）为0.2881、Shannon信息指数为（I）0.4416、居群间基因多样性（Ht）为0.2891,阐明了山药居群间具有很高的多样性;居群内以河南温县薯蓣居群多样性最高,PPB为35.92％,而福建三明（FJSM）和浙江高楼（ZJRG）山薯居群多样性最低（PPB＝0％）;居群间基因分化系数Gst为0.8658、基因流（Nm）为0.0775,揭示山药居群间遗传变异大于居群内遗传变异;8个居群间的遗传距离在0.0498～0.4879,因栽培物种的不同被聚为4类;相关系列扩增多态性标记可将21个山药品种分别归属到薯蓣、参薯、褐苞薯蓣、山薯种内。结论山药品种呈现较高遗传多样性,4种基原山药种间遗传差异较大,相关系列扩增多态性是鉴别我国山药品种的有效方法。     

参芎葡萄糖注射液对小鼠肝细胞色素P450酶活性及表达的影响

目的:研究参芎葡萄糖注射液(Shenxiong glucose injection,SGI)对小鼠肝脏细胞色素P450 2_(E1)(CYP2_(E1)),2_(A11)(CYP2_(A11)),1_(A2)(CYP1_(A2))和2_(D22)(CYP2_(D22))酶活性以及mRNA表达水平的影响。方法:将昆明小鼠随机分为正常组,苯巴比妥组(0.70 g·kg~(-1)),以及SGI低、中、高剂量组(13.0,19.5,26.0 g·kg~(-1))。各组小鼠每天尾静脉注射药物1次,连续注射7 d后处死。取其肝脏制备肝微粒体进行体外代谢实验,测定CYP2_(E1),CYP2_(D22),CYP1_(A2)和CYP3A的酶活性。并用实时荧光定量聚合酶链式反应q PCR技术定量分析小鼠肝组织中CYP2_(E1),CYP2_(D22),CYP1_(A2)和CYP2_(A11)的mRNA表达水平。结果:与正常组比较,各给药组小鼠肝指数没有显著差异。体外代谢实验表明,相较正常组,高剂量SGI能下调CYP2_(E1)酶活性0.45倍(P0.05);中剂量和高剂量的SGI可上调CYP1_(A2)酶活性1.2~1.23倍(P0.05);而SGI对CYP3A和CYP2_(D22)的活性无显著影响。q PCR分析发现,相较正常组,高剂量SGI组CYP2_(E1)mRNA的表达下调了0.6倍(P0.01);SGI中剂量和高剂量组的CYP1_(A2)mRNA的表达分别上调了1.7倍和2.6倍(P0.05)。SGI组和正常组之间的CYP2_(A11)和CYP2_(D22)mRNA表达量无显著性差异。结论:中高剂量的SGI能上调小鼠肝CYP1_(A2)的表达,并诱导小鼠肝CYP1_(A2)的酶活性。而高剂量的SGI能下调小鼠肝CYP2_(E1)的表达,并抑制小鼠肝CYP2_(E1)的酶活性。     

中医药健脾的保健作用机制及药食资源

中医理论认为脾胃是维护人体生命健康最重要的脏腑系统,脾胃健康能濡养人体元气,从而维持人体精气神,故健脾对于人体疾病预防和恢复具有重要作用。将中医健脾理论与现代保健功能进行相关性探讨,系统总结和分析中医健脾与消化道保护、免疫调节、抗氧化、缓解疲劳、辅助调脂减肥及改善睡眠等现代保健功能之间的联系及其功效机制,并简单综述了黄芪、茯苓、山药、芡实、白术及黄精等重要健脾类中药材和归脾汤、四君子汤、补中益气汤及理中汤等健脾经方在相关保健功能方面的作用机制及物质基础,拟为中医健脾类药食资源的开发利用及中药类保健食品的研究与开发提供一些新的思路和方法。     

基于双烫伤模型的不同蛋黄油治疗效果的比较

目的:采用自制点状烫伤器建立小鼠双烫伤模型,比较干馏鸭蛋黄油和干馏鸡蛋黄油对烫伤的治疗效果。方法:取健康昆明种小鼠,雌雄各半,分为高体重鼠(33.44±3.97)g和低体重鼠(27.42±1.66)g。小鼠胶条固定,使用点状烫伤器在以腰椎为对称中心的两侧臀浅肌处体表烫出直径1.5 cm的圆形烫伤区,以小鼠初结痂时间和对结痂完全的皮肤组织学检查为指标,考察点状烫伤器接触时间、鼠重对造模情况的影响。小鼠深Ⅱ°烫伤造模后随机分为14个组,即模型对照组,磺胺嘧啶银治疗组为阳性对照组,鸡蛋黄油治疗组、鸭蛋黄油治疗组、鸡蛋黄油和鸭蛋黄油组合治疗组、鸡蛋黄油与磺胺嘧啶银组合治疗组、鸭蛋黄油与磺胺嘧啶银组合治疗组,每组均按雄雌分别编号。记录各组的烫伤创面愈合时间,考察不同药物的治疗效果。结果:5 s高体重鼠和低体重鼠烫伤组、10 s高体重鼠烫伤组可以完全成功造模,10 s低体重鼠烫伤组、25 s高体重鼠和低体重鼠烫伤组均死亡。鼠体重对初结痂时间和烫伤损伤程度有一定的影响;其中5 s烫伤组,高体重鼠与低体重鼠的初结痂时间有显著差异(P<0.01)。在雄鼠实验组,与模型对照组相比,阳性对照组可以显著缩短愈合时间(P<0.01),阳性对照组与蛋黄油组合治疗组就愈合时间无显著差异(P>0.05),鸭蛋黄油(P<0.05)促进愈合效果不及鸡蛋黄油(P<0.01)。对比雌雄两个实验组,雌鼠表现出更强的自愈能力(P<0.01),鸭蛋黄油促进创面愈合存在显著雌雄差异(P<0.01),而鸡蛋黄油无此类情况(P>0.05)。结论:所采用的点状烫伤器易于控制烫伤程度,易于复制较为稳定的皮肤烫伤模型;鸭蛋黄油有促进雄鼠创面愈合作用,但效果不及鸡蛋黄油治疗组。     

藏药二十五味珊瑚丸对阿尔茨海默症小鼠肠道菌群的调节＊

目的 验证藏药验方二十五味珊瑚丸（25 Coral Pills， CP25）是否可通过肠道菌群的调节治疗阿尔兹海默症（Alzheimer''s Disease， AD）。方法 APP/PS1双转基因AD小鼠（transgenic Mice， Mt）和A?_1-42（amyloid-β， Aβ）蛋白诱导的AD小鼠（A?_1-42 induced Mice， Mi）各60只，按CP25给药剂量分为3组：CP25-100，CP25-200，CP25-400，剂量分别为100、200、400 mg·kg^-1体重，灌胃给药8周（每周连续给药5天，间歇2天）。水迷宫法检测小鼠的认知能力，免疫荧光染色检测A?蛋白，16S RNA检测小鼠粪便肠道菌群丰度。结果 CP25给药后Mt和Mi小鼠的学习能力得到明显改善，A?斑块无明显减少。口服CP25明显纠正了Mt小鼠紊乱的肠道菌群，其中下调脱乳杆菌属、瘤胃梭菌属和不可培养拟杆菌属，上调硫弧菌属和普雷沃氏菌科。诱导模型Mi小鼠肠道菌群无明显失调现象，CP25给药对部分菌群有上调或下调作用。中高剂量CP25（CP25-200，CP25-400）对肠道菌群的调节强度高于低剂量（CP25-100）。结论 CP25口服给药显著改善了AD小鼠的认知能力，肠道菌群的调节是其可能的作用机制。