DJ-1 mRNA在主动脉夹层患者中的表达及其临床意义

目的检测DJ-1在主动脉夹层患者主动脉壁中的表达,并探讨其与主动脉夹层发生的关系。方法选取13例主动脉夹层患者和11例无主动脉夹层患者的主动脉壁,通过苏木精-伊红(HE)染色和弹性纤维(EVG)染色检测主动脉夹层与正常主动脉壁的形态学差异,进一步通过实时荧光定量PCR检测在主动脉壁中DJ-1 mRNA的表达水平,并通过Pearson相关分析研究DJ-1表达量与主动脉夹层患者主动脉直径的相关性。结果 HE和EVG染色显示,主动脉夹层患者的主动脉壁结构紊乱,炎症细胞广泛浸润,弹性纤维大量断裂且减少;与无主动脉夹层患者比较,主动脉夹层患者主动脉壁中的DJ-1 mRNA水平显著下调(0.31倍,t=2.64,P=0.02),但DJ-1表达量与主动脉直径并无显著相关性(P0.05)。结论 DJ-1 mRNA在主动脉夹层患者中表达水平显著降低,可能促进主动脉夹层的发生发展,其有望成为新型治疗靶点。     

原肌球蛋白2表达变化对主动脉夹层影响的实验研究

目的探究原肌球蛋白2(TPM2)在主动脉夹层患者中的表达情况及其临床意义。方法入选自2015年起于华中科技大学同济医学院附属同济医院住院治疗、经胸腹主动脉CT血管成像明确诊断为Stanford A型主动脉夹层的患者13例,即夹层组,在手术中剪取患者的主动脉壁组织。选取心脏移植患者10例作为对照组,取其正常主动脉壁组织。采用苏木素-伊红(HE)染色和弹性纤维EVG染色观察两组的主动脉壁结构和弹力纤维及胶原纤维情况,实时荧光定量PCR检测两组标本中TPM2基因的mRNA相对表达量;采用Western blot及免疫组织化学染色法检测两组样本中TPM2蛋白表达水平和亚细胞定位,采用image J软件采集图片上深染的各个点的积分光密度值(IOD),计算平均密度(%,IOD/目标分布区域的面积)。结果 HE染色及EVG染色显示,与对照组比较,夹层组患者的主动脉壁中层退变,弹力纤维断裂、胶原纤维沉积。PCR结果显示夹层组患者主动脉壁组织中TPM2基因的mRNA相对表达量高于对照组(P<0.05)。Western blot及免疫组织化学染色结果均显示夹层组患者主动脉壁组织中TPM2的蛋白表达水...     

SMG6蛋白产物在主动脉夹层中表达变化及其临床意义

【摘要】目的 探究SMG6 蛋白产物在主动脉夹层患者主动脉壁和正常主动脉壁中的表达情况及其表 达变化的临床意义。方法 选取2016 年1 月至2021 年12 月华中科技大学同济医学院附属同济医院心脏大 血管外科连续收集的96 份主动脉壁样本，通过Western Blot 定量检测SMG6 蛋白产物在主动脉壁中的表达 水平，并分析其表达水平与主动脉夹层患者主动脉直径之间的相关性。结果 Western Blot 结果显示，在主 动脉壁中存在SMG6 的两种蛋白异构体，分别是SMG6（57kDa）和SMG6（160kDa）；在主动脉夹层患者的主 动脉壁中，SMG6（57kDa）异构体的蛋白水平与正常对照组相比显著下降[（0.714±0.324）比（0.992±0.380），t= -3.1663，P=0.0029]，而主动脉夹层动脉壁中SMG6（160kDa）异构体的蛋白水平与正常对照组相比则显著升 高[（1.901±1.487）比（0.965±0.639），t=3.6173，P=0.00052]，但是二者与主动脉直径的变化均无显著相关性。 结论主动脉夹层发生过程中，SMG6 的蛋白异构体表达发生显著变化，SMG6 蛋白的不同异构体活性以及 功能可能不同，通过干预SMG6 的选择性剪切有望成为干预主动脉夹层的新靶点和新策略。     

机械牵张力改变诱导YAP蛋白下调参与升主动脉瘤的发生

目的:研究YAP蛋白在升主动脉瘤(AAA)的发病中是否发挥作用。方法:研究对象由2部分组成:①AAA患者:收集2014年9月至2015年9月,于首都医科大学附属北京安贞医院接受单纯升主动脉替换或者合并升主动脉替换手术的AAA患者以及接受心脏移植手术患者的标本;②使用cyclic stretch拉伸仪拉伸细胞以构建细胞凋亡模型。应用弹力板染色、免疫组化、免疫荧光和Tunel染色观察主动脉壁组织的形态学,Western blotting检测主动脉壁组织及主动脉平滑肌细胞株中YAP在蛋白水平的表达。结果:①弹力板染色、免疫组化和Tunel染色结果显示:AAA患者主动脉壁组织细胞外基质异常,且主动脉壁血管平滑肌细胞(VSMCs)凋亡增多。②免疫组化染色和免疫荧光染色结果显示:AAA患者主动脉壁组织中VSMCs凋亡增多,免疫荧光染色的统计分析结果显示:AAA患者的主动脉壁组织中VSMCs的凋亡较正常主动脉壁组织显著增多(P0.05)。③Western blotting检测、免疫组化染色和免疫组化染色结果显示,与正常主动脉壁组织相比,AAA患者主动脉壁组织中血管平滑肌中的YAP蛋白表达量显著降低;计算机软件分析Western blotting结果的蛋白灰度显示YAP蛋白的表达量降低近90%,统计结果显示差异有统计学意义(P0.05);免疫荧光染色结果显示:AAA患者的主动脉壁组织中VSMCs的凋亡较正常主动脉壁组织显著增多(P0.05)。④Western blotting检测结果显示:相对于正常对照组,CRL-1999人主动脉平滑肌细胞株接受Cyclic Stretch机械牵拉36h后,细胞中的YAP蛋白的表达量显著减少,提示人主动脉平滑肌细胞受到机械牵张后会使细胞内的YAP表达量降低,进而发生凋亡。结论:YAP在AAA的发病中发挥重要作用。当升主动脉细胞外基质发生变化时,机械牵张力的改变可以使YAP的表达下调,进而通过促进主动脉血管平滑肌的凋亡参与AAA的发病过程。     

急性主动脉夹层患者补体活化及补体C3a受体表达的临床意义

目的:揭示急性主动脉夹层发生中,是否存在补体系统活化及补体活化产物C3a受体的表达变化。方法:收集2015年1月至2015年7月,在北京安贞医院接受体检的正常人、腹主动脉瘤手术以及急性主动脉夹层手术患者血液各5例,进行微量样本多指标流式蛋白定量试验,测定其补体系统活化产物过敏毒素C3a、C4a和C5a的水平;收集2015年1月至2015年7月,在北京安贞医院接受主动脉弓部替换术患者的升主动脉组织5例及心脏移植供受体正常的升主动脉组织5例,进行免疫组化组织染色,并提取蛋白,检测C3a受体的表达。结果:微量样本多指标流式蛋白定量试验结果显示,腹主动脉瘤和急性主动脉夹层患者血浆中补体活化产物C3a、C4a和C5a含量显著高于正常对照组(P0.01),这说明补体活化不仅在腹主动脉瘤,急性主动夹层患者循环系统也存在。免疫印迹结果显示急性主动脉夹层患者标本中C3a受体蛋白表达量显著高于正常对照组(P0.05)。免疫组化染色发现,与正常升主动脉壁相比较,急性主动脉夹层标本的C3a受体表达显著增高(P0.01)。结论:急性主动脉夹层患者体内存在补体系统活化C3a-C3a受体信号通路,可能参与主动脉夹层的发生发展。     

急性主动脉夹层与正常对照主动脉组织基因的差异表达

目的通过组织芯片技术分析急性主动脉夹层患者主动脉组织差异表达基因探讨主动脉夹层发病的分子机制。方法取急性主动脉夹层患者及健康对照（各4例）的主动脉组织,通过组织芯片筛选急性主动脉夹层患者和健康对照差异表达的基因。利用生物信息学技术分析差异表达的基因参与的信号通路。结果实主动脉组织芯片分析结果显示,急性主动脉夹层患者与正常对照差异表达大于2倍的基因有129个,其中83个基因表达下调,46个基因表达上调。差异表达的基因主要编码与细胞、细胞外基质粘附相关的蛋白。信号通路分析显示,主动脉夹层中受影响最大的两条通路是粘附斑和肌动蛋白骨架调节相关通路。结论通过组织芯片分析筛选到的急性主动脉夹层差异表达基因可能参与了主动脉夹层的病理过程,为研究其致病机制奠定了荩础。     

南蛇藤素对载脂蛋白E基因敲除小鼠主动脉壁C反应蛋白及组织因子表达的影响

目的探讨南蛇藤素对高脂饲养载脂蛋白E基因敲除小鼠在动脉粥样硬化病变形成的早期动脉壁内C反应蛋白和组织因子表达的影响。方法8周龄雄性载脂蛋白E基因敲除小鼠12只,随机分为南蛇藤素干预组或二甲基亚砜溶剂对照组,每组各6只。均给予高脂饲养8周,在高脂饲养的后4周,分别给予南蛇藤素2mg/(kg·d)或相当剂量的二甲基亚砜腹腔注射。麻醉处死小鼠后,取小鼠主动脉,以石蜡包埋,行主动脉根部连续切片;以HE染色观察形态学变化,免疫组织化学法检测主动脉壁内C反应蛋白和组织因子的表达水平,以Image Pro Plus6.0软件进行图像分析。结果南蛇藤素干预组主动脉粥样硬化斑块面积明显小于对照组,分别为4947±1277μm2和8403±2535μm2(P<0.05);南蛇藤素组主动脉粥样斑块面积/血管壁面积比值明显小于对照组(P<0.05);南蛇藤素组动脉壁C反应蛋白表达水平较对照组明显减少,平均光密度值分别为0.0152±0.0052与0.0256±0.0026(P<0.05);动脉粥样硬化斑块内组织因子表达水平较对照组明显减少,平均光密度值分别为0.0326±0.0132与0.0763±0.0347(P<0.05)。结论南蛇藤素可能通过抑制载脂蛋白E基因敲除小鼠炎症反应和动脉壁中C反应蛋白的表达而发挥抗动脉粥样的作用;还可能通过减少粥样斑块中组织因子的产生,而进一步起到稳定动脉粥样硬化斑块的作用。     

转录因子SP1调控血管平滑肌细胞表型转化在主动脉夹层发病中的作用

目的:探讨转录因子SP1在主动脉夹层组织中的表达情况及与主动脉夹层血管平滑肌细胞(VSMC)表型转化的关系。方法:收集人主动脉夹层血管壁组织(n=10)及正常主动脉壁组织(n=4),分别采用RT-PCR和Western blot检测主动脉壁组织中SP1和收缩型VSMC表型标志物SM22α的mRNA和蛋白表达水平;体外培养正常人主动脉平滑肌细胞(HA-VSMC),以转染SP1过表达腺病毒(Ad-SP1)的HA-VSMC为Ad-SP1组,以转染仅表达荧光蛋白腺病毒(Ad-GFP)的HA-VSMC为对照组,分别采用RT-PCR和Western blot检测转染后HA-VSMC中SM22αmRNA和蛋白表达水平。结果:与正常主动脉壁组织相比,人主动脉夹层血管壁组织中SP1 mRNA(3.81±2.84对0.91±0.67,P0.05)和蛋白(2.09±0.32对0.90±0.09,P0.05)表达水平均明显升高,SM22αmRNA(0.39±0.20对1.01±0.51,P0.05)和蛋白(0.75±0.10对1.01±0.09,P0.05)表达水平均明显下降;腺病毒转染HA-VSMC后,与对照组相比,Ad-SP1组中SM22αmRNA(0.36±0.03对0.95±0.11,P0.05)和蛋白(0.84±0.11对1.06±0.06,P0.05)表达水平均明显下降。结论:转录因子SP1在主动脉夹层组织中表达水平升高,与VSMC表型转化密切相关,参与主动脉夹层的发病过程。     

内质网应激通路相关蛋白ATF4及CHOP在主动脉夹层中的表达以及意义

目的探讨主动脉夹层(AD)患者环磷酸腺苷反应元件结合转录因子同源蛋白(CHOP和活性转录因子4(ATF4)的表达及其意义。方法选取2017年3月至2018年4月于武汉大学人民医院确诊为StanfordⅠ型夹层并行胸主动脉夹层全弓置换患者为AD组(n=13),另选取5例于武汉大学人民医院接受心脏移植的患者作为Donor组(此5例患者均无大血管疾病,其在心脏移植术中取下的主动脉血管可作为相对正常主动脉血管组织)。通过Masson染色、间苯二酚染色研究两组患者主动脉血管结构变化,通过TUNEL染色明确主动脉夹层发病后平滑肌细胞凋亡情况;通过RT-PCR及Western-blot分别在mRNA水平及蛋白水平检测ATF4及CHOP的变化情况。在动物实验方面,20只SD大鼠随机分为两组:Control组(n=10)及AD组(n=10)。Control组给予大鼠维持饲料,AD组给予含0.3%的β-异氨基丙腈酯(BAPN)的大鼠维持饲料进行主动脉夹层动物模型构建。动物模型构建成功后,取两组大鼠主动脉组织做石蜡包埋,标本切片后处理步骤及检测指标同人体标本。结果在人体标本中,Masson染色及间苯二酚染色发现,AD组患者主动脉血管标本胶原沉积较Donor组明显增多,弹力纤维断裂程度也更加严重;TUNEL凋亡染色发现,AD组患者主动脉血管组织较Donor组正常血管组织细胞凋亡明显增多,差异有统计学意义(P0.01);RT-PCR及Western-blot实验发现,AD组患者主动脉血管ATF4、CHOP的表达在RNA水平及蛋白水平均较Donor组正常主动脉血管明显增高,差异均有统计学意义(P0.05)。在动物实验中,Masson染色发现,AD组大鼠主动脉血管较Control组胶原沉积明显增多;间苯二酚染色发现,AD组大鼠主动脉血管较Control组弹力纤维断裂程度明显加重,Control组基本无弹力纤维断裂;TUNEL凋亡染色发现,AD组大鼠主动脉血管较Control组细胞凋亡明显增多,差异有统计学意义(P0.05)。RT-PCR及Western-blot实验亦发现,AD组大鼠主动脉血管ATF4、CHOP的表达在RNA水平及蛋白水平均较Control组明显增高,差异均有统计学意义(P0.05)。结论 CHOP和ATF4与内质网应激关系密切,CHOP及ATF4在人主动脉夹层标本及主动脉夹层动物模型标本中均显著升高,说明在主动脉夹层中内质网应激水平较高,这或许是主动脉血管平滑肌细胞发生凋亡的重要原因之一,进而在一定程度上参与主动脉夹层的发生发展。     

动脉粥样硬化大鼠动脉组织中组织蛋白酶D的表达

目的用基因芯片技术研究动脉粥样硬化大鼠动脉组织中差异表达的基因,以分析组织蛋白酶D基因表达变化。方法以高脂饲料喂养加维生素D3腹腔注射建立大鼠动脉粥样硬化模型,测定血清总胆固醇及甘油三酯;病理学观察HE及油红O染色的冠状动脉及主动脉;提取主动脉RNA作基因芯片检查,用免疫荧光及免疫印迹法检测组织蛋白酶D在动脉中表达的分布情况及表达水平。结果14周时模型组总胆固醇和甘油三酯较对照组明显升高(P均<0.01);病理学观察发现模型组形成纤维增生性动脉粥样硬化病变;基因芯片结果显示与对照组比较,模型组组织蛋白酶基因表达上调,组织蛋白酶D表达上调,R值(Cy3/Cy5)为2.14(P<0.01);免疫荧光检测发现模型组中组织蛋白酶D表达主要分布在动脉内膜、中膜;免疫印迹法检测动脉中组织蛋白酶D蛋白显示模型组表达较对照组增加(P<0.05)。结论组织蛋白酶及其内源性抑制剂的失衡可能是导致动脉粥样硬化的因素之一,组织蛋白酶D可能参与了血管重塑及细胞凋亡从而促进动脉粥样硬化的发展。     

普伐他汀和辛伐他汀对载脂蛋白E缺陷小鼠主动脉粥样硬化形成及主动脉壁血管细胞粘附分子-1表达的影响

为观察普伐他汀和辛伐他汀对载脂蛋白E缺陷小鼠主动脉粥样斑块形成的影响及主动脉壁血管细胞粘附分子 1表达的影响 ,将载脂蛋白E缺陷小鼠分为普伐他汀组 (每天 10mg/kg)、辛伐他汀组 (每天 5mg/kg)和阳性对照组 (等量生理盐水 ) ,从主动脉血管根部连续切片 ,常规HE染色 ,计算机图像扫描 ,分析主动脉粥样硬化斑块的面积和斑块占管腔面积等 ;采用免疫组织化学及Western杂交方法测定主动脉壁血管细胞粘附分子 1表达。结果发现 ,除降胆固醇作用外 ,普伐他汀和辛伐他汀皆延缓斑块形成 ,与对照载脂蛋白E缺陷小鼠比 ,用药组小鼠的主动脉粥样斑块明显缩小 ;普伐他汀和辛伐他汀还明显抑制载脂蛋白E缺陷小鼠主动脉壁血管细胞粘附分子 1的表达 ;其中 2药对 14和 2 4周龄小鼠主动脉壁血管细胞粘附分子 1表达的抑制作用强于 34周龄小鼠。结果提示 ,普伐他汀和辛伐他汀可延缓或缩小载脂蛋白E缺陷小鼠主动脉粥样斑块的形成 ,抑制或下调主动脉壁血管细胞粘附分子 1表达 ,其效果与降胆固醇作用不成比例 ,可能是独立于调脂作用以外的抗动脉粥样硬化机制     

诱导型环氧合酶高表达增加兔主动脉粥样硬化斑块易损性

目的:探讨诱导型环氧合酶（COX-2）在兔主动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)组织中的表达及其与斑块易损性之间的关系。方法: 以高脂饲料喂养建立兔主AS模型,并与正常饲料组对照。喂养12周后,取兔主动脉标本,行HE及免疫组化染色,观察COX-2、基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、Ⅰ型和Ⅲ型胶原在AS斑块组织中的表达。结果: COX-2仅见于AS斑块,正常动脉壁无表达。AS组COX-2免疫组化染色强度均显著高于正常对照组（P<0.05）。AS组Ⅰ、Ⅲ型胶原和MMP-2免疫组化染色强度均显著高于正常对照组（P<0.05）,Ⅰ/Ⅲ型胶原的比例增加。结论: COX-2在兔主动脉AS斑块中的高表达可能增加斑块的易损性。     

血浆D-二聚体检测在急性主动脉壁夹层形成辅助诊断中的应用

目的评估血浆D-二聚体检测对急性主动脉壁夹层形成的辅助诊断价值。方法检测126例急诊胸痛患者（急性主动脉壁夹层形成14例,肺栓塞32例,急性心肌梗死40例,非心源性胸痛40例）的血浆D-二聚体,同时检测其C-反应蛋白及纤维蛋白原,并行WBC计数,并以20例慢性主动脉壁夹层形成者作对照组。结果急性主动脉壁夹层形成及肺栓塞患者的血浆D-二聚体水平明显高于其他患者及对照组（P均〈0．01）,急性主动脉壁夹层形成患者白细胞计数明显高于其他患者及对照组（P均〈0．01）。结论血浆D-二聚体的检测有助于对怀疑急性主动脉壁夹层形成患者的排除性诊断。     

芝麻素对动脉粥样硬化斑块及主动脉壁VCAM-1表达的影响

目的观察比较芝麻素和阿托伐他汀对兔实验性动脉粥样硬化（AS）斑块形成及主动脉壁细胞黏附分子1（VCAM-1）表达的影响,探讨芝麻素在预防和治疗AS中的作用。方法将日本大耳白兔18只随机分为芝麻素组、阿托伐他汀组和阳性对照组,基础饲料喂养。给药8周后测定各组0、5和8周末LDL-C水平;实验结束时取主动脉,常规HE染色及免疫组织化学染色,观察主动脉形态学变化和血管壁斑块组织的变化,定量分析血管VCAM-1表达强度变化。结果与阳性对照组相比,芝麻素组和阿托伐他汀组LDL-C水平显著降低（P〈0.01）,主动脉病理改变和血管壁斑块组织免疫着色明显减轻（P〈0.01）,主动脉壁VCAM-1表达水平分别下调27.59%和45.97%。与阿托伐他汀比较,芝麻素明显减轻主动脉中膜的厚度（P〈0.01）。结论芝麻素具有降低血脂、防治AS的作用。     

慢性肾衰竭大鼠主动脉弹性功能与血管基质金属蛋白酶2表达及钙化间的关系

目的　探讨主动脉基质金属蛋白酶2（MMP-2）在慢性肾衰竭大鼠主动脉弹性功能变化中的作用及机制。方法　将20只大鼠随机分为正常对照组、慢性肾衰竭组、慢性肾衰竭血管钙化组。8周造模成功后测量大鼠主动脉脉搏波传导速度（PWV）,分别用逆转录-聚合酶链反应和免疫组织化学方法检测大鼠主动脉核心结合因子α1（Cbfα1）及MMP-2　mRNA和蛋白的表达。EVG染色方法检测主动脉弹性纤维的改变。结果　慢性肾衰竭血管钙化组PWV值和主动脉Cbfα1、MMP-2的mRNA及蛋白表达均高于慢性肾衰竭组及正常对照组（P<0.05）,PWV与主动脉MMP-2表达呈正相关（r＝0.754,P＝0.02）。结论　慢性肾衰竭大鼠血管弹性功能下降的可能机制之一是血管壁MMP-2表达升高导致弹性蛋白降解,同时后期的血管钙化也参与其中。     

NARC-1蛋白在新西兰兔动脉粥样硬化病变中的表达

目的 探讨NARC-1在新西兰兔动脉粥样硬化病变血管壁中的表达.方法 健康纯种雄性新西兰白兔16只,适应性喂养1周后,随机分为对照组和高胆固醇组,每组8只;对照组给予普通颗粒饲料喂养,高胆固醇组给予高胆固醇饲料(2%胆固醇)喂养;两组动物于8周末安乐处死.全自动生化分析仪测定兔血浆中甘油三酯、总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇含量,计算动脉粥样硬化指数、高密度脂蛋白胆固醇/低密度脂蛋白胆固醇比值.苏丹Ⅳ染色测量兔主动脉粥样硬化病变面积.油红O染色及HE染色观察兔主动脉病理组织学改变,并进行病理形态学定量分析.免疫组织化学法与免疫印迹法检测兔主动脉组织NARC-1蛋白的分布及表达水平.结果 8周末,高胆固醇组兔血浆总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇和、动脉粥样硬化指数水平明显升高,而高密度脂蛋白胆固醇/低密度脂蛋白胆固醇比值明显降低.高胆固醇组出现了明显的动脉粥样硬化病变,主动脉内膜面粥样硬化病变面积为27.41%±2.12%,与对照组(0.51%±0.20%)相比差异显著(P<0.05).病理组织学显示高胆固醇组兔主动脉内膜明显增厚,内膜/中膜厚度比明显增大;油红O染色光镜下显示,高胆固醇组兔主动脉内皮下斑块内泡沫细胞呈橘红色,对照组主动脉内膜未见明显着色;HE染色光镜下显示,高胆固醇组主动脉内膜显著增生,形成明显斑块,斑块中纤维组织增生,可见大量泡沫细胞,胞核较小,胞浆内含有大量脂质空泡,对照组内膜薄且结构完整.免疫组织化学检测发现高胆固醇组兔主动脉NARC-1蛋白表达明显,染色呈强阳性,且群集于内膜斑块处;在高倍镜下,NARC-1蛋白主要分布在泡沫细胞的胞浆和胞膜,而在对照组兔血管壁组织中未见表达.免疫印迹检测发现高胆固醇组兔主动脉NARC-1蛋白呈高表达,而对照组兔血管壁组织未见表达.结论 新西兰兔的主动脉粥样硬化病变处NARC-1蛋白表达明显,其主要分布在泡沫细胞的胞浆和胞膜中,正常对照组兔主动脉血管壁组织未检测到NARC-1蛋白.提示NARC-1/PCSK9是影响动脉粥样硬化病变形成与发展的重要因素.     

阿托伐他汀抑制腹主动脉瘤基质金属酶9及核因子κB表达的实验研究

目的研究阿托伐他汀对腹主动脉瘤基质金属酶9及核因子κB影响,探讨其临床应用价值。方法成年雄性WISTER大鼠24只,随机分为实验组和对照组,每组12只;分别皮下注射阿托伐他汀4 mg/(kg.d)和等容积的生理盐水。用弹力酶灌注法建立大鼠腹主动脉模型。观察两组动脉瘤形成率和动脉壁病理学改变。HE染色、弹力纤维EVG染色观察腹主动脉瘤组织学变化,逆转录聚合酶链反应检测动脉基质金属酶9及核因子κB mR-NA的表达水平,免疫组织化学分析基质金属酶9及核因子κB的蛋白表达水平。结果弹力酶灌注2周后实验组大鼠腹主动脉瘤形成率为20%,对照组动脉瘤形成率为90%,实验组动脉组织弹力纤维未见明显断裂消失等受损表现,仅有少量炎症细胞浸润及基质金属酶9及核因子κB的表达。对照组动脉壁组织弹力纤维严重受损,可见明显炎症细胞浸润,基质金属酶9及核因子κB的表达显著增高。结论阿托伐他汀能够降低动脉壁组织基质金属酶9及核因子κB的表达及炎症细胞的浸润,减少弹力纤维的降解,从而抑制实验性大鼠腹主动脉瘤的形成。     

非马方主动脉夹层转化生长因子β对血管平滑肌细胞表型转化中的作用研究

目的:本研究旨在研究非马方的主动脉夹层(AD)中转化生长因子β(TGF-β)是否异常并导致主动脉血管平滑肌的变化。方法:收集在首都医科大学附属北京安贞医院,接受手术治疗的主动脉夹层患者(AD组)和心脏移植供体(正常对照组)的主动脉组织各10例,正常对照组和AD组术中切除位置相同的升主动脉壁(排除标准:排除Marfan综合征、Ehler-Danlos综合征、Noonan综合征和Turner综合征等有明确遗传病因的主动脉疾病、外伤等因素导致的AD),使用Western-blotting和荧光PCR检测TGF-β的表达以及主动脉血管平滑肌的变化;(2)使用不同浓度的TGF-β处理人源的主动脉血管平滑肌细胞株48 h后检测血管平滑肌的变化。结果:主动脉夹层患者的主动脉组织中TGF-β蛋白水平高于正常对照组30.60%,差异有统计学意义(P=0.000),且主动脉血管平滑肌向增殖型转化;(2)体外实验中收缩表型标志基因Myh11在TGF-β浓度为5μg/L组和10μg/L组中的mRNA表达水平比零对照组分别低57.1%(P=0.013)、50.2%(P=0.004),差异均统计学意义;Tagln在TGF-β浓度为5μg/L组和10μg/L组中的mRNA表达水平比0μg/L对照组分别低43.6%(P=0.002)、22.7%(P=0.046),差异均统计学意义。增殖表型标志基因Opn在TGF-β浓度为5μg/L组和10μg/L组中的mRNA表达水平比0μg/L对照组分别高92.5%(P=0.021)、131.3%(P=0.016),差异均统计学意义,表明主动脉夹层中主动脉血管平滑肌细胞由收缩型向增殖型转化。结论:非马方主动脉夹层患者主动脉壁中TGF-β的表达升高,并导致主动脉血管平滑肌向增殖型转化,这一机制可能参与主动脉夹层的发生。     

miRNA-195、贝那普利与自发性高血压大鼠主动脉重构

目的　观察自发性高血压大鼠（SHR）的主动脉形态结构及其表达miRNA-195水平的变化,以及贝那普利干预对其影响。方法　8周龄雄性SHR及Wistar大鼠,随机分为SHR对照组、SHR贝那普利组（SHR干预组）、Wistar对照组、Wistar贝那普利组（Wistar干预组）,SHR干预组和Wistar干预组大鼠予贝那普利10　mg/（kg·d）干预,8周后,测定各组大鼠尾动脉血压,HE染色检测大鼠主动脉结构形态,实时荧光定量PCR检测大鼠主动脉miRNA-195表达,Western　blot检测大鼠主动脉转化生长因子β1（TGF-β1）、Smad3蛋白、Ⅰ型胶原（COL-Ⅰ）和Ⅲ型胶原（COL-　Ⅲ）蛋白表达水平。结果　贝那普利干预8周后,SHR干预组大鼠尾动脉收缩压及舒张压均显著低于SHR对照组（P<0.01）,高于Wistar对照组（P<0.01）。SHR干预组大鼠主动脉miRNA-195表达高于SHR对照组、Wistar干预组及Wistar对照组（P<0.05或P<0.01）;SHR干预组大鼠主动脉TGF-β1和Smad3蛋白表达低于SHR对照组（P<0.05）,但高于Wistar干预组（P<0.01）;SHR干预组大鼠主动脉COL-Ⅰ和COL-Ⅲ表达低于SHR对照组（P<0.05或P<0.01）,但高于Wistar干预组（P<0.01）;SHR干预组大鼠主动脉内中膜结构较SHR对照组改善,但未能恢复到Wistar对照组水平。结论　贝那普利干预可改善SHR主动脉重构,这一作用可能与miRNA-195抑制TGF-β1/Smad3信号通路有关。     

辛伐他汀对高脂血症大鼠胸主动脉壁白介素-2、RANTES和趋化因子受体1表达的影响

目的探讨辛伐他汀对高脂血症大鼠胸主动脉壁白介素-2(IL)-2、RANTES和趋化化因子受体(CCR)-1 mRNA和蛋白表达的影响。方法将30只健康8周龄SD雄性大鼠随机分为对照组、高脂饮食组和辛伐他汀组,每组10只。对照组用普通饲料喂养,高脂饮食组用高脂饲料喂养,辛伐他汀组以高脂饮食饲料喂养4 w后,每天以5 mg/kg的辛伐他汀灌胃,并继续给予高脂饮食饲料。两个月后心脏采血处死大鼠,取胸主动脉。采用酶法检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)含量。用HE染色方法观察胸主动脉病理形态学改变,采用免疫织化和RT-PCR方法检测各组动脉壁细胞IL-2、RANTES和CCR-1蛋白及mRNA的表达情况。结果高脂饮食组大鼠血清TC、TG含量明显高于对照组(均P0.01)和辛伐他汀组(均P0.01)。对照组胸主动脉内膜光滑,内皮细胞排列整齐。高脂饮食组动脉内膜脂质浸润,粗糙,隆起,有泡沫细胞形成,细胞排列紊乱,辛伐他汀组介于二者之间。高脂饮食组大鼠动脉壁IL-2、RANTES和CCR-1蛋白及mRNA表达水平均显著高于对照组(均P0.01)和辛伐他汀(均P0.05)。结论高脂饮食能使SD大鼠发生高脂血症和动脉粥样硬化(AS)。高脂血症可能通过诱导大鼠胸主动脉血管壁细胞中IL-2、RANTES和CCR-1的表达引起AS的发生,辛伐他汀可以抑制这一过程。