大鼠胚胎隔区神经元体外原代培养

目的：探讨大鼠胚胎隔区神经元培养方法。方法：建立稳定的大鼠胚胎隔区神经元体外培养模型，并观察神经元形态变化即生长过程。结果：神经元培养２小时，大部分细胞已贴壁；１２小时大部分细胞有突起伸出；２４小时部分细胞呈双极型；３天细胞开始聚集，突起互相连接成稀疏的网络；１周细胞簇明显，突起随时间延长而增长；２周细胞体积继续增大，突起连接成致密网络；３周细胞突起聚集明显，细胞数开始减少；４周细胞明显减少，仍见     

银杏叶提取物对切割海马伞大鼠隔区胆碱能神经元的保护作用

目的：研究银杏叶提取物对切割海马伞大鼠隔区胆碱能元的保护作用。方法：实验组和对照组动物在切割海马伞前后分别用银杏叶提取物和蒸馏水灌胃，术后第4周灌注固定，取隔区切片进行Nissl染色及胆碱乙酰转移酶（ChAT)免疫组化染色，显微镜下记数切割海马伞侧内侧隔核和斜角带垂直支ChAT阳性神经元数目。用CMM－301图像分析系统对切割海马伞侧隔区ChAT阳性神经元的面积、周长等指标进行分析处理，用t检验作统计学分析。结果：实验组切割海马伞侧隔区的ChAT阳性神经元数明显多于对照组（P＜0．01），其神经元的胞体面积及周长指标实验组均好于对照组（P均＜0．01）。结论：银杏叶提取物对切割海马伞大鼠的隔区胆碱能神经元具有保护作用。     

内侧隔区预毁损对海马CA1区迟发性神经元死亡的影响

目的 :探讨乙酰胆碱 (ACh)对短暂性全脑缺血再灌后海马CA1区迟发性神经元死亡 (DND)的作用。方法 :46只健康雄性Wistar大鼠随机分为 3组 :Ⅰ 手术对照组 ;Ⅱ MS假性损毁脑缺血再灌组 ;Ⅲ MS预损毁缺血再灌组 ,动物先行MS损毁 ,第 15天再行 4 VO ,使脑缺血 2 0min恢复灌注 72h后取材 ,采用NissleHE和TUNEL染色 ,在光镜下观测计数 ,经统计学处理。结果 :①Ⅱ、Ⅲ组缺血再灌后海马CA1出现迟发性神经元死亡 ;②Ⅲ组较Ⅱ组迟发性神经元损伤明显减轻。结论 :乙酰胆碱参与短暂性全脑缺血再灌后海马CA1区迟发性损伤过程 ,MS预毁损能使死亡细胞明显减少     

体外培养胆碱能神经元的乙酰胆碱酯酶组化染色

体外培养神经细胞是神经生物学中研究神经细胞发育再生的一种重要手段。但胆碱乙酰化酶免疫组化法价格昂贵，我们采用乙酰胆碱酯酶组化方法同样能清晰显示胆碱能神经元的生长发育情况。本文对体外培养神经细胞的ＡｃｈＥ组化染色的方法要点，时间控制及其原理进行了讨论，并与鼠脑切片标本ＡｃｈＥ组化法作比较分析。     

介绍一种敏感显示乙酰胆碱酯酶的组织化学方法

介绍一种敏感显示乙酰胆碱酯酶的组织化学方法首都医学院北京神经科学研究所刘玉军，鲁强，佟大山，张国风显示胆碱酯酶阳性神经元的乙酰胆碱酯酶（ａｃｅｔｙｌｃｈｏｌｉｎｅｓｔｅｒａｓｅ，ＡＣｈＥ）组织化学方法在组织学、神经解剖学研究中应用广泛。传统染色方法虽...     

原代培养神经细胞的乙酰胆碱脂酶染色技术

原代培养神经细胞的乙酰胆碱脂酶染色技术包峰，高杰，李永明（脑研究所神经解剖研究室）关键词原代培养，神经元，乙酰胆硷脂酶类，染色体外培养神经细胞是神经学研究的重要手段之一。培养神经细胞的乙酰胆碱脂酶（Ａｃｅｔｙｌ－ｃｈｏｌｉｎｅｓｔｅｒａｓｅ，ＡｃｈＥ...     

Aβ25-35对海马和隔区胆碱能神经元毒性的比较

目的 探讨Aβ25-35对原代培养的海马神经元和隔区神经元毒性作用。方法 采用体外原代培养,用Aβ25-35诱导大鼠海马和隔区神经元损伤,MTT法比较两种神经元的存活率,电镜下的形态学变化、并测定SOD活性的改变。结果 Aβ25-35可使海马和隔区神经元的存活率下降,发生凋亡的形态学改变,对两种神经元的Mn-SOD的活性无明显影响,但可使海马神经元CuZn-SOD活性明显下降。结论 Aβ25-35具有神经毒性,它对两种神经元的损伤程度相似,无细胞差异性,但其毒性损伤作用可能不同。     

电针对阿尔茨海默病模型大鼠海马胆碱能神经元的影响

目的观察电针对阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease,AD）大鼠海马乙酰胆碱酯酶（AchE）和乙酰胆碱转移酶（CHAT）的影响。方法通过Morris水迷宫筛选48只健康Wistar大鼠随机分为4组。除正常组外。其余3组大鼠均注射p一淀粉样肽（1—40）（M31—40）所致AD模型。模型组不治疗。加兰他敏组采用氢溴酸加兰他敏灌胃。电针组造模后选取百会、双肾俞、双足三里、大椎等穴位针刺治疗。治疗4周后各组大鼠处死取海马。用免疫组化法和考马斯亮兰法测定AchE、CHAT的表达和含量。结果模型组Ache每个视野阳性细胞表达明显增强并且含量[（348．2593±13．0672）IU／g]升高,与正常组、加兰他敏组和电针组比较差异有统计学意义（P〈0．05）;但,模型组CHAT阳性表达减弱且含量低[（81．8543±4．6528）IU／g],治疗后加兰他敏组[（205．7539±5．9732）IU／g]和电针组增强[（202．5637±5．3695）IU／g）,与模型组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论电针通过调节胆碱能神经元的表达,以促进受损神经的恢复和再生。     

大鼠内侧隔区预损毁对海马迟发性神经元死亡的影响

目的：探讨乙酰胆碱（ACh)对短暂性全脑缺血再灌后海马迟发性神经元死亡（DND）的作用。方法：80只健康雄性Wistar大鼠随机分为5组。I组：手术对照组；Ⅱ组：单纯内侧隔区（MS）损毁组；Ⅲ组：单纯脑缺血再灌注组；Ⅳ组：MS假性损毁脑缺血再灌注组；Ⅴ组：MS预损毁脑缺血再灌注组，动物先行MS损毁，第15d再行血管阻断，使脑缺血20min，并于恢复灌注72h后处死，将脑采用常规石蜡包埋、切片，Nissle、HE和Tunel免疫组化染色，在光镜下观测计数海马的神经元数。结果：（1）DND细胞主要发生在各缺血再灌注组（Ⅲ，Ⅳ，Ⅴ组）的海马CA1区，其他各区未发现明显变化；（2）V组较Ⅲ，Ⅳ组DNA明显减轻，差异有统计学意义（P＜0．05）。结论：ACh参与短暂性全脑缺血再灌后海马CA1区迟发性神经元损伤过程，MS预损毁能使死亡细胞明显减少。     

慢性酒精中毒大鼠学习记忆及内侧隔核胆碱能神经元的变化

目的 研究酒精致大鼠学习记忆障碍与基底前脑内侧隔核胆碱能神经元变化的关系。方法 将24只雄性Wister大鼠随机均分成对照组和酒精中毒组．酒精中毒组大鼠隔日胃内注入含酒精（2．5g／kg）的蒸馏水2ml共90d，对照组则注入不舍酒精的蒸馏水2ml。然后采用Morris水迷宫扣免疫组织化学技术，分析大鼠基底前脑内侧隔核胆碱能神经元、海马星形胶质细胞数的变化扣学习记忆能力的关系。结果酒精中毒组大鼠Morris水迷宫潜伏期明显延长，基底前脑内侧隔核胆碱能神经元数目明显减少．海马星形胶质细胞数目反应性增生。结论 酒精致大鼠学习记忆能力障碍与基底前脑内侧隔核胆碱能神经元减少有关。     

α—促黑素对致热原作用下的兔隔区热敏神经元放电活动的影响

应用细胞外引导的电生理手段，在家兔隔区记录到两类热敏单位：一类热敏单位的放电频率对脑温反应的阈值是３８℃左右；另一类直到脑温升高至４０℃左右时才表现出温度敏感性。在此基础上，观察了致热原，及α－促黑素（α－ＭＳＨ）对致热原作用下的隔区热敏神经元放电活动的影响。结果，小剂量致热原只能抑制前一类神经元的电活动；较大剂量的致热原则对两类神经元均显示抑频效应；α－促黑素则不同程度地反转致热原对两类神经元的     

α－促黑素对致热原作用下的兔隔区热敏神经元放电活动的影响

应用细胞外引导的电生理手段，在家兔隔区记录到两类热敏单位：一类热敏单位的放电频率对脑温反应的阈但是３８℃左右；另一类直到脑温升高至４０℃左右时才表现出温度敏感性。在此基础上，观察了致热原，及α－促黑素（α－ＭＳＨ）对致热原作用下的隔区热敏神经元放电活动的影响。结果，小剂量致热原只能抑制前一类神经元的电活动，较大剂量的致辞热原则对两类神经元均显示抑频效应；α－促黑素则不同程度地反转致热原对两类神经元的抑制性影响。本文结果支持这样一种设想：隔区神经元的作用不是直接发动体温调节反应，而是为视前区─—下丘脑前部（ＰＯ／ＡＨ），这一重要的体温调节中枢提供参照信息；α－促黑素很可能是通过改变隔区的参照信息而实现其解热效应的。     

大鼠下丘脑AchE阳性神经元的分布

本文用改良乙酰胆碱酯酶(Acetyl-cholinesterase AchE)组化法研完了大鼠下丘脑 AchE 阳性神经元的分布。AchE 强阳性胞体和纤维分布在下丘脑背侧核、下丘脑外侧部、穹窿周核和乳头上核。并见于室周核、室旁核、腹内侧核和后核。AchE 弱阳性细胞和稀疏纤维主要分布于视上核、交叉上核与视前内、外侧核。AchE 阳性纤维呈束状、波纹状和细串珠状。主要见于下丘脑外侧部及穹窿附近。     

糖基化终末产物对大鼠基底前脑胆碱能神经元的损伤作用

目的 研究糖基化终末产物(AGE BSA)对原代培养的基底前脑胆碱能神经元形态、生存率、凋亡率、胆碱乙酰转移酶(ChAT)与乙酰胆碱酯酶(AchE)活性的影响。在体外水平研究AGEs在阿尔茨海默病(Alzheimer′s disease,AD)神经元缺失发生中的作用及其可能机制。方法 原代培养大鼠基底前脑胆碱能神经元,观察细胞生长变化,进行免疫荧光细胞化学鉴定;用300μg/mLAGE BSA以及糖基化终末产物受体(RAGE)中和抗体阻断处理原代培养的基底前脑胆碱能神经元,作用不同时间后置于倒置显微镜下观察细胞形态变化;采用MTT法检测神经元的存活率;采用流式细胞术检测神经元的凋亡率;经比色法检测ChAT和AchE的活性变化。结果 AGE-BSA干预胆碱能神经元72h后,细胞形态发生明显损伤性变化,细胞存活率明显降低,凋亡率增高,ChAT活性明显下降,AchE活性明显升高;RAGE中和抗体阻断组72h较之AGE-BSA组,细胞形态损伤变化较轻,生存率偏高,凋亡率较低,ChAT活性较高,AchE活性偏低,但比空白对照组生存率降低,凋亡率增高,ChAT活性明显下降,AchE活性明显升高。结论 糖基化终末产物作用72h可以引起胆碱能神经元的损伤,并造成ChAT活性下降和AchE活性明显升高,部分阻断其与特异性受体RAGE的结合可以减弱其损伤作用,提示糖基化终末产物通过其受体参与了对胆碱能神经元的损伤作用。     

肠缺血后大鼠回肠乙酰胆碱酯酶阳性神经元的变化

目的 观察缺血回肠肌间神经丛乙酰胆碱酯酶（AchE)活性的变化。方法 建立大白鼠肠系膜上动脉阻断模型,用AchE对大白鼠回肠肌间神经丛进行酶组织化学观察。结果 肠缺血后,大鼠回肠肌间神经丛内AchE阳性神经元明显减少,AchE活性减弱。结论 肠肌间神经丛AchE阳性神经抑对肠缺血耐受性较差。     

隔区和视前区温度敏感神经元对电刺激海马的反应

本实验观察了猫隔区和视前区神经元的放电频率、温度敏感系数和温度—频率相关系数以及电刺激海马对它们的影响。结果表明,海马可能在体温调节过程中起某种调控作用,温度敏感性的概念有待于进一步完善。     

急性脑缺血后脑隔——视前区内性功能调节相关神经元的变化

目的探讨急性脑缺血后出现性功能障碍的机理。方法应用蒙古沙土鼠急性脑缺血再灌注模型，对脑隔—视前区内性功能调节相关神经元光镜和电镜下的病理组织学和超微结构改变进行了观察。结果缺血５分钟再灌注造成的神经元密度和亚细胞水平的结构变化是暂时的，可在２周内恢复，１０分钟脑缺血再灌注后神经元的损害加重，且在２周后尚未恢复，损害主要为膜结构如线粒体、内质网等破坏。结论神经元损伤程度与缺血时间及再灌注时间长短密切相关，脑隔—视前区内神经元的病理损害是引起性功能障碍的重要形态学依据。     

基底前脑胆碱能神经元功能异常在阿尔茨海默病中的作用相关研究进展

细胞外老年斑的沉积和细胞内神经纤维缠结被认为是阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease,AD）典型的病理改变。基底前脑胆碱能神经元（basal forebrain cholinergic neurons,BFCNs）功能异常导致的海马乙酰胆碱（acetylcholine,ACh）功能下降也被认为是AD 发生的主要特征。该文介绍了ACh 突触传递过程、BFCNs 投射系统、BFCNs 在调节认知功能中的作用以及BFCNs 功能异常在AD 中的作用和近期的研究进展。