慢性乙型肝炎肝组织内HBsAg、HBcAg定位形态及其临床意义

本本用ABC法对36例各型慢性肝炎患者肝活检标本进行了HBsAg、HBcAg的检测。检出HBsAg和/或HBcAg12例,总阳性率32.4％。发现慢活肝不仅HBV复制标志检出率高达44.0％(11/25),且HBV复制活跃。还发现HBV复制程度与脏活动性病变程度基本呈平行关系,呈强阳性显色者,慢活肝都属中、重型。本文还见HBV复制活跃,病变活跃,肝内HBsAg主要呈弥漫型,HBcAg主要呈胞核,细浆型。上述结果提示:HBV复制和肝炎的病变活动有关。     

HBsAg、HBcAg的免疫荧光检测在HBV—GN诊断中的应用

目的观察乙型肝炎病毒相关性肾炎（HBV—GN）患者肾脏组织中HBsAg、HBcAg的表达情况。方法以50例HBV—GN患者为研究对象,另随机选择20例非乙型肝炎病毒相关性肾炎（NHBV—GN）患者作为对照组,用间接免疫荧光法检测肾穿刺活检组织HBsAg、HBcAg的表达。结果HBV—GN患者肾组织中可检测HBsAg、HBcAg阳性颗粒,阳性率分别70％（35／50）,24％（12／50）;20例（NHBV—GN）患者肾脏组织HBsAg、HBcAg均未检出。与HBV—GN差异有统计学意义（P〈0．05）。结论HBsA趴HBcAg免疫荧光标记是诊断HBV—GN的重要指标,HBV在肾组织内存在感染及复制,其在乙型肝炎病毒相关性肾炎的发病机制中具有重要作用。     

肝细胞内HBV抗原表达与肝损伤关系的研究

采用PAP免疫组化方法,对96例肝活检标本进行肝细胞内HBsAg和HBcAg免疫反应性定位,探讨肝细胞损伤程度与肝细胞内HBsAg和HBcAg表达的关系。结果显示:慢性活动型肝炎和肝硬变患者,肝细胞内HBsAg表达以膜型为主,HBcAg以浆膜型为主。慢性迁延型肝炎和HBV携带者,肝细胞内HBsAg以包涵体型为主,HBcAg则以核型为主。提示:肝细胞膜上表达的HBsAg和HBcAg可作为靶抗原,导致肝损伤。     

血清和肝组织内HBV复制状态与肝脏病变活动性关系的研究

经病理确诊的47例乙型肝炎患者血清中HBV DNA、HBeAg的检出率在各型肝炎之间无显著性差异(P>0.05)。肝组织HBsAg检出率为76.6％,其形态呈包涵体型、弥漫型和膜型为主分布者分别是36.1％、55.6％和8.3％。HBsAg呈弥漫型分布者各类型肝炎之间无显著性差异(P>0.05),提示肝细胞内HBsAg的表达仅反映HBV复制,而与肝组织病变无关。肝组织HBcAg检出率为27.7％,其形态呈核型和浆型分布者分别占38.5％和61.5％,浆型主要见于炎症明显的肝细胞内,而核型刚见于病变较轻的肝细胞中,反映了HBcAg的表达与肝组织活动性病变有关。     

慢性肝炎患者肝组织内HBeAg的检测及其意义

本文采用间接免疫酶标法检测了33例慢性肝病患者肝组织内HBeAg,其中26例慢性肝炎患者肝组织标本中,7例(26.9％)检出HBeAg;7例肝硬化标本中,2例(28.5％)检出HBeAg。HBeAg仅存在于HBsAg和(或)HBcAg阳性的肝组织的病侧中,主要定位于肝细胞浆内与HBcAg关系密切。由此提示HBeAg与HBcAg在肝细胞内同时存在,因为e抗原与HBcAg为同一开读框架,e抗原的本质是HBcAg的降解成分所致。     

慢性乙型肝炎肝组织HBsAg和HBcAg的免疫组化检测及其意义

应用PAP和ABC法分别对54例慢性乙肝肝组织中HBaAg和HBcAg进行检测,分析了两种抗原在肝组织中的存在状态与肝脏病理变化及血清HBV复制指标间的关系。发现肝组织中HBV抗原检出率与肝炎病变程度呈负相关(P<0.05)。三种病理类型肝组织中,HBsAg均以胞浆型为主;膜型HBsAg主要见于CAH.ASH和CPH时,HBcAg以核型表达为主,面CAH时以浆膜型为主。膜型HBsAg和浆膜型HBcAg表达区易见到肝细胞坏死及炎性细胞浸润。还发现肝组织中HBcAg的检出与血清HBcAg和HBV-DNA密切相关(P<0.005)。上述结果提示:①肝细胞损伤可能并非HBV直接作用,而是机体针对HBV的免疫反应所致;膜型HBsAg和浆膜型HBcAg可能是肝细胞免疫损伤的靶抗原。②肝组织内HBcAg的存在是HBV复制标志。     

39例乙型肝炎病毒相关性肾炎患者的临床病理分析

目的分析乙型肝炎病毒相关性肾炎（HBV—GN）的临床和病理特点。方法对39例HBV—GN患者,采用间接免疫荧光法检测冰冻切片上肾脏组织的HBsAg、HBcAg;用直接免疫荧光法测IgG、ISn、IgM、C3、Ciq、FRA;全自动化生化仪检测肝功能、肾功能等项指标。结果在39例HBV—GN患者中,大三阳患者23例（58．97％）,小三阳患者12例（30．77％）,HBsAg和HBcAg阳性4例（10．26％）。临床表现为肾病综合症的27例（69．23％）,肾炎综合症10例（25．64％）,单纯性血尿1例（2．56％）,单纯蛋白尿1例（2．56％）。病理检查显示,膜性肾病（MN）33例（84．62％）,膜性增生性肾炎（MPGN）3例（7．69％）,系膜增生性肾炎（MSPGN）2例（5．13％）,IgA肾病1例（2．56％）。在39例患者的肾脏组织中均检测到HBV相关抗原。结论成年人HBV—GN患者男性比例较高,临床表现以肾病综合征为主,主要病理类型为MN,肾组织中HBcAg的检出率较高。     

不同染色方法检测HBsAg阳性患者肾组织中乙肝抗原的效果比较

目的：探讨不同染色方法检测HBsAg阳性患者肾组织中乙肝抗原的效果。方法收集血清HBsAg阳性的肾穿刺患者77例,分别采用免疫荧光法和改良免疫组化法检测肾组织HBsAg及HBcAg阳性表达情况。结果继发于乙肝病毒感染相关的肾小球肾炎（HBV- GN）中,HBsAg免疫荧光法及改良免疫组化法敏感性为48.1%及100%;HBcAg免疫荧光法及改良免疫组化法敏感性为22.2%及70.4%,差异均有统计学意义（均P＜0.01）。非乙肝相关性肾小球肾炎（NHBV- GN）中,HBsAg免疫荧光法及改良免疫组化法特异性为98%及96%;HBcAg免疫荧光法及改良免疫组化法特异性为100%及96%,两种方法特异性均较高,差异均无统计学意义（均P＞0.05）。乙肝抗原血症者肾组织HBsAg及HBcAg改良免疫组化法平均阳性强度明显高于免疫荧光法（P＜0.01）。血清乙肝“大三阳”、DNA复制者HBsAg改良免疫组化法检测阳性强度均明显高于“小三阳”及DNA不复制者（P＜0.05或0.01）。结论改良免疫组化染色法提高了乙肝抗原血症者肾组织乙肝抗原的检出率及肾小球疾病尤其是HBV- GN诊断的准确性,同时HBsAg阳性强度还可预测乙肝感染严重程度。     

原发性肝癌内HBV DNA及HBAg的分布与意义

采用原位分子杂交和免疫组化及双标记技术,对44例原发性肝细胞肝癌及痛旁肝组织进行了乙型肝炎病毒DNA及其表达产物x抗原、核心抗原检测。癌组织中HBV DNA、HBxAg、HBcAg检出率分别为70.5％、65.9％及20.5％;癌旁肝组织依次为76.5％、76.5％及29.4％。HBV DNA及HBxAg主要位于肝细胞浆中,在HBcAg阳性组中的检出率高于HBcAg阴性组(P<0.05)。9例枯否氏细胞浆有HBxAg检出。HBVDNA在癌及癌旁组织中的检出有“伴随现象”。HBcAg多位于核内,部分为核浆型,且总是伴随HBV DNA和(或)HBxAe检出,无一例单独检出HBcAg者。此外,HBxAg可由肝内游离型HBV DNA所表达;肝内核型或浆型HBcAg均可反映HBV的复制。因此,肝内HBxAg的检测可作为HBV感染的灵敏指标之一,进一步证实HBV感染与HCC的发生有密切关系。     

肾组织中HBV的检出及其意义

目的：探讨HBsAg,HBcAg及HBV DNA在乙型肝炎病毒感染者肾脏组织中的表达情况及其意义。方法：对63例乙型肝炎病毒相关性肾炎（HBV-GN）患者、20例非乙型肝炎病毒相关性肾炎（NHBV-GN）患者、12例血清HBV标志阳性的其它肾病（肾结核、肾结石、肾细胞癌、肾萎缩等）患者用免疫组织化学方法检测肾穿刺活检组织HBsAg和HBcAg的表达;继而应用聚合酶链反应（PCR）技术对其阳性病例进一步检测肾组织HBV DNA。 结果： HBV-GN患者肾脏组织中均可检出HBsAg和HBcAg阳性颗粒,阳性率分别为76.2%(48/63),42.9%(27/63);20例NHBV-GN患者肾组织均未检出HBsAg和HBcAg,与HBV-GN患者相比有统计学意义(P<0.05);12例肾病患者肾组织HBsAg和HBcAg阳性率均为66.7%,与HBV-GN患者相比无统计学意义(P>0.05)。血清HBeAg 阳性与血清HBeAg阴性的HBV-GN患者相比,肾脏组织中HBsAg和HBcAg表达情况差异无显著性 (P>0.05)。17例免疫组织化学阳性的HBV-GN患者肾组织检出HBV DNA 13例,阳性率为76.5%,8例免疫组织化学阳性的其它肾病患者肾组织检出HBV DNA 2例,阳性率为25%,两者比较有统计学意义(P<0.05)。结论：HBV定位肾脏,不仅可引起肾脏损害,并对病毒的复制、保存及乙型肝炎的传播有一定作用。     

丁型肝炎病人肝组织HDAg与HBsAg/HBcAg和HBV DNA表达及关系

目的：探讨丁型肝炎病人肝组织中ＨＤＡｇ与ＨＢｓＡｇ／ＨＢｃＡｇ和ＨＢＶＤＮＡ表达及关系。方法：应用免疫组化双重染色和原位杂交,检测７９例丁型肝炎病人肝组织ＨＤＡｇ、ＨＢｓＡｇ、ＨＢｃＡｇ和ＨＢＶＤＮＡ表达,以５２例乙型肝炎作对照。结果：丁型肝炎ＨＢｓＡｇ、ＨＢｃＡｇ检出率（８１％、７１％）较乙型肝炎（９４％、９２％）低（Ｐ〈０．０５或０．０１）。ＨＤＡｇ以肝细胞核表达为主,ＨＢｓＡｇ以肝细胞浆表达     

肝细胞内HBV DNA、基因产物表达及其与肝细胞坏死灶的关系

应用原位分子杂交方法分析慢性乙肝患者肝细胞内乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(HBVDNA)。发现肝内HBV DNA复制部位往往与HBsAg或HBcAg表达部位相同;HBsAg与HBcAg同时在肝内表达时,数量多不均衡,提示编码HBsAg与HBcAg基因数量或复制活性不同;且观察到含HBV DNA的肝细胞数明显超过表达HBsAg、HBcAg的肝细胞数,提示胞浆HBV DNA一部分可能处于复制期,另一部分为非复制期:肝内HBV DNA复制与HBsAg、HBcAg表达对应的部位常紧紧毗邻肝细胞坏死灶,两者频率相似。     

A PRELIMINARY STUDY ON LOCALIZATION OF HBxAGIN LIVER TISSUE OF PATIENTS WITH CHRONIC LIVER DISEASE AND ITS SIGNIFICANCE

Rabbit antiserum to HBxAg and PAP techniquewere used to detect HBxAg in liver tissue of 150 patients with chronic liver disease. HBsAg and HBcAg were also localized at the same time. Posi tive granules for HBxAg were localized in some liver cell nuclei and no cytoplasmic HBxAg was seen. The incidence of HBxAg was 12.5To in 80 patients with viral hepatitis and 570 in 20 patients with cirrhosis. HBxAg could not be detected in 50 patients with HCC. HBxAg was only expressed in the liver tissue of cases positive for HBsAg and/or HBcAg. There was no relationship between expres. sion of HBxAg and histopathological changes.     

阿糖腺苷治疗前后慢性乙型肝炎患者肝组织中HBsAg、HBcAg表达

目的:探讨慢性乙型肝炎患者阿糖腺苷治疗后肝组织中HBsAg、HBcAg的表达。方法:选择20例慢性乙型肝炎患者(男性14例,女性6例,年龄33±4岁),静脉滴注阿糖腺苷400mg/d(1次/d)×2M。治疗前、后分别行肝穿刺活检,用免疫组织化学法(SP)检测其肝组织中HBsAg、HBcAg。结果:阿糖腺苷治疗前患者肝组织中HBsAg、HBcAg分别检出20例、18例,治疗后分别减至12例、10例。阿糖腺苷治疗前后肝组织中HBcAg比较,差异有显著意义(P<0.05):阿糖腺苷治疗前后肝组织中HBsAg比较,差异无显著意义(P>0.05)。结论:阿糖腺苷可以有效促使慢性乙型肝炎患者肝组织中HBcAg阴转。     

Detection of core antibody in hepatitis B infection.

Hepatitis B core antigen (HBcAg) is found on the decoated Dane particle and on a morphologically similar particle detected mainly in the nucleus of hepatocytes of patients with hepatitis B. HBcAg prepared from the liver of a chimpanzee infected with hepatitis B virus was used to test human serum for core antibody (anti-HBc) by complement fixation. Anti-HBc was found in serum collected from patients with hepatitis B in both the acute and convalescent stages, from carriers of hepatitis B surface antigen (HBsAg) and from patients with chronic liver or renal disease who were carriers of HBsAg. It was not found in patients with hepatitis A or infectious mononucleosis, or in healthy persons who were not carriers of HBsAg.     

乙肝病毒标志阴性慢性病毒性肝炎患者HBV-DNA及肝组织中HBsAg、HBcAg检测的临床意义

目的:探讨HDVM阴性慢性肝炎患者血清HBV-DNA及组织中HBsAg、HBcAg检测的临床意义。方法:对24例原因不明的慢性肝炎患者应用酶联免疫,吸附试验(ELISA法)检测血清HBV-M(HBsAG、抗HBS、HBcAg、抗HBc、抗HBc),抗HAV-IGM,抗HCV-IgMI、gG,抗HDV-IgMI、GG,抗HEV-IGMI、GG,抗EBV-IGM,抗CMV-IgM,抗TTV-IgM:应用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)技术对患者进行血清中乙型肝炎病毒基因(HBVDNA)定量检测;应用免疫组化法,通过肝组织活检测定患者肝组织中HBsAg、HBcAg的表达情况。结果:24例HBVM阴性肝病患者中,6例可检测到HBV-DNA,其中5例肝组织中HBsAG、HBcAg同时阳性,1例HBsAg(+)、HBcAg(-);18例血清HBV-DNA阴性患者中用肝组织活检者3例,其中1例肝组织中HBsAg、HBcAg同时阳性。结论:HBVM阴性不能排除乙型肝炎病毒感染,应结合血清HBV-DNA测定及肝组织中HBcAg、HBcAg的检测,以防漏诊、误诊。