大豆提取物染料大黄酮对前列腺癌的影响

大豆提取物染料木黄酮可能是前列腺癌发病的重要影响因素之一，对前列腺癌的多个细胞系具有明确的抑制作用，其抑制机制可能是阻滞细胞周期Ｇ２－Ｍ期，亦可能是影响了雄激素作用，或抑制了５α－还原酶，现研究集中于动物模型实验进一步证实其对前列腺癌的作用。     

染料木黄酮对去势抵抗性前列腺癌VCaP细胞增殖的影响

目的:研究染料木黄酮(GDN)对去势抵抗性前列腺癌细胞VCa P增殖的抑制作用及可能机制。方法:以不同浓度(0、12.5、25、50、100、200μmol/L)的GEN处理去势抵抗性前列腺癌细胞VCaP,分别在24、48、72 h以CCK-8法测定细胞增殖;以流式细胞术检测细胞周期;以免疫荧光法检测Ki-67表达水平;以Western印迹法检测Cyclin D1、PCNA、P53及PSA表达水平。结果:12.5、25、50、100、200μmol/L GEN作用于VCaP细胞72 h后,对VCaP细胞的抑制率分别为(25.38±0.02)%、(31.14±0.29)%、(45.27±0.03)%、(52.19±0.05)%与(68.21±0.19)%,与对照组[(10.08±0.02)%]相比差异有统计学意义(P0.05)。流式细胞术显示GEN可导致VCa P细胞G2/M期阻滞(P0.05)。免疫细胞化学法检测显示GEN能够抑制细胞中Ki-67的表达。Western印迹显示去势抵抗性前列腺癌细胞内PSA、Cyclin D1、PCNA随着GEN浓度的增加逐渐下调,P53随着GEN浓度的增加逐渐上调(P0.05)。结论:GEN能够抑制体外培养的去势抵抗性前列腺癌细胞VCaP增殖,其作用机制可能与阻滞细胞周期并伴随相关周期蛋白表达的改变有关。     

染料木黄酮诱导前列腺癌DU-145细胞凋亡的研究

【摘要】〓目的〓探讨染料木黄酮诱导前列腺癌细胞系DU-145细胞凋亡的作用。方法〓在Caspase抑制剂Z-VAD存在或不存在的情况下,以染料木黄酮作用于前列腺癌DU-145细胞,采用MTT法检测细胞存活率、Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞术检测细胞凋亡、PI染色法流式细胞术检测细胞周期、JC-1染色法流式细胞术测定细胞线粒体膜电位(△ψm),比色检测试剂盒测定caspase-8活性。结果〓染料木黄酮能明显降低前列腺癌DU-145细胞的存活率、诱导癌细胞凋亡、降低△ψm及提高caspase-8活性(全部P<0.05)。Z-VAD能够逆转Gen抗前列腺癌的效应。结论〓染料木黄酮使细胞阻滞于G0和G1,分别通过凋亡信号通路的外源性和内源性途径,诱导前列腺癌细胞凋亡。     

CD-TK双自杀基因联合染料木黄酮治疗前列腺癌的实验研究

目的：研究CD-TK双自杀基因联合染料木黄酮对鼠前列腺癌的体内治疗作用.方法：取鼠前列腺癌细胞RM-1接种于鼠（G57BL/6背郎皮下建立移植瘤模型.将荷瘤鼠随机分为对照组、木黄酮组、TK/CD治疗组及TK/CD＋染料小黄酮联合治疗组进行相应处理.实验结束后比较各组肿瘤体积.全部肿瘤标本行常规病理检验及bcl-2免疫组化检测.结果：对照组肿瘤体积为（1 008.73±126.73）mm3.染料木黄酮组肿瘤体积为（359.06±53.17）mm3,双自杀基因组肿瘤体积为（222.60±26.79）mm3,两者联合时肿瘤体积为（25.31±9.24）mm3.双自杀基因组鼠肿瘤体积比染料木黄酮组小（P〈0.01）,两者联合时肿瘤体积最小（P=0.00）.病理切片中显示埘照组几乎未见细胞坏死,而联合用药组肿瘤大片坏死;免疫组化检测肿瘤标本中bcl-2含量显示对照组显强阳性,而联合治疗组仅见微弱阳性.结论：联用染料木黄酮能明显增强CD-TK双自杀基因系统对前列腺癌的治疗作用.     

染料木黄酮对成骨细胞C-fos、ALP及骨钙蛋白基因表达的影响

目的研究不同浓度的染料木黄酮（genistein，GEN）对体外培养大鼠成骨细胞C-fos、碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）及骨钙蛋白（osteocalcin）基因表达的影响。方法采用新生大鼠颅骨分离培养成骨细胞，加入不同浓度的染料木黄酮（10^-8mol·L^-1、10^-7mol·L^-1、10^-6mol·L^-1、10^-5mol·L^-1），以妊马雌酮（商品名：倍美力）（10^-8mol·L^-1、10^-7mol·L^-1、10^-6mol·L^-1、10^-5mol·L^-1）作为阳性对照组，提取总RNA，RT-PCR半定量分析其表达。结果染料木黄酮对成骨细胞C-fos、ALP及骨钙蛋白基因水平的影响呈正相关性，并与其剂量成正相关性，但这些作用均低于雌激素水平（P〈0．05）。结论染料木黄酮能诱导成骨细胞C-fos、ALP及骨钙蛋白基因的表达，并与其浓度有关，作用与雌激素相似。     

染料木黄酮对前列腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及机制

本研究拟探讨染料木黄酮对前列腺癌细胞LNCaP和CWR22RV1的增殖、迁移和侵袭能力的影响。一、材料与方法1.材料:前列腺癌细胞株LNCaP和CWR22RV1(中国科学院上海生命科学研究院);Genistein(天津科瑞泰科技有限公司);RPMI 1640、胎牛血清(FBS)、胰蛋白酶(美国Gibco公司);E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin,Abcam公司);聚氰基丙烯酸正丁酯(BCA)试剂盒、十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)上样缓冲液(×5)及蛋白质印迹法(Western blot)试剂盒(上海市碧云天生物公司);2.实验方法:采用噻唑蓝(MTT)实验、划痕实验和Transwell实验检测Genistein对细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。采用Western blot检测E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、CD44和Oct-4的表达水平。     

染料木黄酮在减轻肾间质纤维化中的作用

目的 探讨染料木黄酮(Genistein)在减轻单侧输尿管结扎模型(UUO)诱导肾间质纤维化中的作用及可能机制.方法 将30只SD大鼠随机分为5组,A组:假手术+DMSO 1 ml/d×14 d;B组:假手术+Genistein每日20 mg/ks体重×14 d;C组:UUO+DMSO 1 ml/d×14 d;D组:UUO+Genistein 5mg/kg体重每日×14d;E组:UUO+Genistein 20mg/kg体重每日×14d.术后14d比较各组大鼠左/右肾重量和长度的比值;酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测血清INF-y和TGFa1表达;病理观察肾小管扩张和肾间质增生的程度,免疫组织化学观察肾脏á-SMA和ED-1表达.结果 C、D、E组左/右肾重量及长度比值均明显高于A、B组,但E组左/右肾重量及长度比值、血清TGF-a1及INF-y浓度、肾小管扩张分数和肾小管容量分数、á-SMA和ED-1的表达均低于C组.结论 染料木黄酮可明显降低由单侧输尿管结扎模型所导致的肾间质纤维化的病理改变,其可能机制是染料木黄酮抑制TGF-a1及INF-y的表达,从而抑制肾小管上皮细胞向成纤维细胞转化.     

染料木黄酮对骨肉瘤细胞增殖及侵袭的影响及作用机制

目的 探讨染料木黄酮对人骨肉瘤MG-63细胞增殖、侵袭的影响及其作用机制.方法 用染料木黄酮处理MG-63细胞,CCK-8法检测细胞增殖;Transwell小室体外侵袭实验法检测MG-63细胞侵袭能力;实时定量聚合酶链反应(PCR)和蛋白印迹法(Western blot)分别检测MG-63细胞基质金属蛋白酶(MMP)-2／MMP-9的mRNA及蛋白水平.结果CCK-8法表明染料木黄酮处理组MG-63细胞增殖被明显抑制,抑制率最高(85.3±5.1)％(P＜0.05);染料木黄酮在0、12.5、25.0、50.0 μmol/L时穿膜细胞数分别为(96.5±5.5)、(88.4±3.2)、(53.8±4.4)、(36.6±3.8)个,可明显降低MG-63细胞的侵袭能力(P＜0.05);染料木黄酮处理后MMP-2及MMP-9的mRNA表达水平明显下降(P＜0.05);MMP-2/MMP-9蛋白表达水平也明显下降,且具有时间依赖性.结论染料木黄酮抑制骨肉瘤MG-63细胞增殖及侵袭转移能力,这种作用与MMP-2及MMP-9表达变化有关.     

染料木黄酮对大鼠移植动脉血管平滑肌细胞的影响

目的研究染料木黄酮(Gen)对大鼠移植动脉血管平滑肌细胞的影响。方法以BN大鼠为供者,Lewis大鼠为受者,建立腹主动脉移植模型,将受者随机分为3组。实验组(n=8):受者术后腹腔注射Gen 20 mg·kg~(-1)·d~(-1)×60 d;对照1组(n=8):受者术后腹腔注射溶剂二甲基亚砜0.5 ml×60 d;对照2组(n=6):受者术后不给予任何处理。腹主动脉移植后60 d取移植血管进行组织学观察,测量血管内膜厚度;免疫组织化学染色检测血管平滑肌细胞的增殖和迁移情况;酶联免疫(ELISA)法检测血清中血管内皮生长因子(VEGF)、γ-干扰素(INF-γ)的变化。结果实验组与两个对照组比较,内膜增厚不明显且巨噬细胞浸润减少;血管平滑肌细胞增殖和迁移减少(P均<0.01);两个对照组血清中VEGF、INF-γ表达显著高于实验组(P<0.01)。结论染料木黄酮在预防和治疗移植动脉硬化的过程中,对移植动脉血管平滑肌细胞的增殖和迁移有抑制作用,其机理可能与影响VEGF等的表达有关。     

染料木黄酮对去势小鼠脾细胞凋亡及雌激素受体表达的影响

目的探讨染料木黄酮(GEN)对去势(OVX)小鼠脾细胞凋亡、凋亡基因Fas、FasL及雌激素受体(ER)亚型表达的影响。方法流式细胞仪检测不同浓度GEN对OVX小鼠脾细胞的凋亡率,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测细胞内Fas、FasL及ERα、ERβ mRNA的表达。结果OVX+GEN组与青年组相比,脾细胞凋亡率在GEN两个高浓度(37.0、92.5μmol/L)时都显著增高(P均<0.05);而Fas基因表达在GEN 92.5μmol/L时显著增高(P<0.05),FasL基因表达在GEN两个高浓度均显著高于青年组(P均<0.05);与OVX空白组相比,GEN最高浓度(92.5μmol/L)时凋亡率显著增高(P<0.01),Fas、FasL基因的表达均显著增高(P均<0.05)。ERα、ERβ基因的表达随GEN浓度增加而呈增加趋势,在GEN最高浓度(92.5μmol/L)时显著高于OVX空白组(ERα:P<0.05;ERβ:P<0.01)。结论高浓度GEN致脾细胞凋亡,与上调凋亡促进基因Fas、FasL基因表达有关。低浓度GEN可能逆转OVX小鼠脾细胞凋亡。高浓度GEN增加ERα、ERβ基因表达。GEN对脾细胞凋亡、ERs表达的调节可能不完全通过ER途径。     

染料木黄酮对成骨细胞内游离钙、钙调素水平及ALP、ATP酶的影响

目的研究不同浓度的染料木黄酮（genistein，GEN）对体外培养大鼠成骨细胞游离钙、钙调素、碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）、ATP酶的影响。方法采用新生大鼠颅骨分离培养成骨细胞，加入不同浓度的染料木黄酮（10^-8mol／L，10^-7mol／L，10^-6mol／L，10^-5mol／L），以妊马雌酮（商品名：倍美力）（10^-8mol／L，10^-7mol／L，10^-6mol／L，10^-5mol／L）作为阳性对照组，用PNPP（对硝基苯磷酸盐）法测定ALP活性、放射生物法测定钙调素水平、激光扫描共聚焦显微镜测定细胞游离钙、比色法测定ATP酶活性。结果染料木黄酮对成骨细胞钙调素、ALP、Ca^2＋-ATP、细胞内游离钙水平的影响呈正相关性，并与其剂量成正相关性，但这些作用均低于雌激素水平（P〈0．01）。结论染料木黄酮能增加成骨细胞ALP、Ca^2＋-ATP活性和钙调素水平、钙离子震荡波，并与其浓度有关，作用与雌激素相似。     

染料木黄酮对去势大鼠骨组织形态计量学参数的影响

目的　研究染料木黄酮对去势大鼠股骨远端形态计量学参数的影响 ,为染料木黄酮防治骨质疏松提供理论依据。方法　雌性Wistar大鼠 4 7只 ,按体重随机分为 6组 :假手术组、去势对照组、去势 雌激素组 (2 0 μg/kg体重 )、去势 染料木黄酮组 (染料木黄桐剂量分别为 2 5、5 0、10 0mg/kg体重 )。饲养 3个月后处死 ,测定股骨形态计量学参数。结果　去势组与假手术组比较 ,骨小梁体积、平均骨小梁板密度和厚度减少 ,平均骨小梁板间隙和类骨质宽度增加 ,矿化延迟时间和类骨质成熟时间延长 ,且差异均具有显著性 (P <0. 0 5 )。染料木黄酮各组与去势组比较 ,骨小梁体积和平均骨小梁板厚度增加 ,平均骨小梁板间隙变窄 ,矿化延迟时间和类骨质成熟时间缩短 ,且差异均有显著性 (P <0 . 0 5 )。结论　染料木黄酮有促进骨形成 ,减少切除卵巢后骨量丢失的作用。     

染料木黄酮对糖尿病股骨头生长板早闭及骨质疏松的影响

目的探讨染料木黄酮(genistein,Gen)对糖尿病大鼠股骨头生长板退化及骨质疏松的保护作用。方法建立速发型链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)糖尿病大鼠模型,随机分为正常组(CON)、糖尿病组(DM)、Gen干预组(Gen)。每天1次,灌胃给药(4.0 mg/kg),每组20只。15 w后光镜下作组织病理学分析及组织计量学测定;利用Van Gieson胶原纤维染色法观察胶原纤维沉积变化;ELISA测定血清蛋白聚糖和生化检测各组股骨头组织匀浆的醛糖还原酶(AR)活性。结果 CON组骨小梁粗厚、有完整的成骨细胞区。DM组骨小梁稀疏细薄、细胞核固缩;生长板厚度、生长板细胞柱密度均明显小于对照组(P0.01);生长板钙化区胶原纤维明显增多;AR活性增大(P0.01);蛋白聚糖含量明显增加(P0.01)。Gen组骨小梁排列较紧密;生长板较DM组厚、生长板细胞柱密度大(P0.01)。AR活性降低(P0.01),蛋白聚糖下调(P0.01)。结论染料木黄酮可减轻糖尿病生长板的萎缩退化和骨质疏松变化,防止生长板过早闭合。     

染料木黄酮通过促进VEGF 表达改善去势大鼠骨质疏松的作用机制

目的观察染料木黄酮(Genistein Gen)通过促进VEGF表达改善去势大鼠骨质疏松的作用机制。方法建立绝经大鼠模型,6月龄雌性大鼠40只,随机分为对照组,假手术组、去势组、Gen干预6周组、Gen干预12周组。光镜下观察各组股骨头结构,分析大鼠股骨头空缺骨陷窝数的变化。ELISA检测血管内皮生长因子(VEGF),观察VEGFmRNA原位杂交表达强度并分析。结果与对照组相比,去势组骨密度值下降,Tb.Th明显下降(P0.05)。干预10周组骨密度值明显升高,Tb.Th明显升高,差异均有统计学意义(P0.05)。糖尿病大鼠股骨头随病程发展骨小梁变稀薄。Gen对去卵巢大鼠血清中VEGF的表达无影响。VEGF mRNA在骨髓腔血管内皮细胞表达上升(P0.05)。结论 Gen可促进血管内皮细胞增殖,促进血管形成,改善去势大鼠骨质疏松抗骨质疏松倾向。     

去除雄激素对前列腺癌细胞周期调节蛋白表达的影响

目的研究去除雄激素对前列腺癌细胞周期调节蛋白表达的影响。方法在人前列腺癌细胞株LNCaP和PC-3中，先加1×10     

表皮生长因子受体阻断对前列腺癌细胞增殖的影响

目的：探讨阻断表皮生长因子受体（EGFR）对前列腺癌（PCa）细胞增殖的影响。方法：人PCa细胞株DU－145，分别加或不加抗EGFR单抗C225（20nmol/L)阻断EGFR体外细胞培养7d，收集细胞、计数以观察对PCa雄激素非依赖增殖的影响，并采用免疫沉淀和Western blot方法，探讨阻断EGFR后不同时相点磷酸化有丝分裂原激活下蛋白激酶MAPK，及p27^kipl的表达变化。结果：阻断EGFR与对照相比较可使DU－145细胞增殖被抑制达35％，8h后磷酸化MAPK的表达水平开始降低，p27^kip1表达开始升高，至24h最明显。结论：阻断EGFR可抑制PCa细胞增殖，可能的机制是MAPK的活性降低，使p27^kip1的表达升高而细胞周期被阻。     

染料木素对骨代谢和脂代谢的研究新进展

染料木素是豆科植物提取的活性成分,它能明显降低恶性肿瘤发生,能够通过不同的传导途径促进成骨细胞生成,增加骨的碱性磷酸酶活性以及骨DNA和钙的含量,并抑制破骨细胞分化,达到防止骨质减少,抗骨质疏松的作用。染料木素同时可以促进血脂代谢,防止内脂质的氧化作用,软化血管,达到保护心脑血管,防止心脑血管意外的作用。随着对其作用机制研究的不断深入,必将开发出一系列相关药品,最终为人类健康造福。     

苏拉明对前列腺癌PC-3M细胞生长的影响

目的 :观察苏拉明对激素非依赖性前列腺癌 (HRPC)PC 3M细胞生长、细胞周期和凋亡的影响 ,初步探讨其作用机制。　方法 :锥虫蓝活细胞拒染法和四甲基偶氮唑盐 (MTT)比色法检测不同浓度小牛血清 (2 %、5 %、1 0 % )、不同浓度的苏拉明 (1 0、50、1 0 0、2 0 0 μmol/L)对PC 3M细胞增殖的影响 ;流式细胞术 (FCM )测定苏拉明对PC 3M细胞增殖周期分布和凋亡的影响。　结果 :高浓度 (2 0 0 μmol/L)苏拉明可杀伤PC 3M细胞 ,低浓度 (1 0、50、1 0 0μmol/L)条件下则主要发挥生长抑制作用。高浓度 (1 0 % )小牛血清存在时苏拉明仍可发挥抑制和杀伤作用 ,但较低浓度 (5 %、2 % )小牛血清时弱。苏拉明可使PC 3M细胞发生细胞周期G0 /G1 期阻滞 ,并在 2 0 0 μmol/L浓度时诱导细胞凋亡。　结论 :苏拉明较为明显地抑制PC 3M细胞生长 ,并在高浓度时杀伤癌细胞 ;除抑制或阻断细胞因子和生长因子调控的增殖作用外 ,可能参与阻滞细胞周期分布和诱导细胞凋亡     

染料木素对硫代乙酰胺诱导的肝纤维化大鼠PDGF-BB表达的影响

目的 研究染料木素(genistein,G)对硫代乙酰胺(tIIioacetamide,TAA)诱导的肝纤维化大鼠血小板源性生长因子.BB(platelet derived growth factor,PDGF.BB)表达的影响,初步探讨其抗肝纤维化的可能机制.方法 SD雄性大鼠50只,随机分为生理盐水(normal saline,NS)对照组、模型组、治疗组和G对照组.模型组和治疗组采用TAA腹腔注射3个月制造肝纤维化模型.造模结束后采用ELISA法检测各组血清Ⅳ型胶原(collagen Ⅳ,CⅣ)、层粘连蛋白(laminin,LN)含量,各组肝组织行Van Gieson染色观察纤维化程度,免疫组织化学染色、图像分析方法对PDGF-BB的组织分布进行半定量分析.结果 染料木素能降低肝纤维化大鼠血清CⅣ和LN水平(P<0.05).减少纤维组织沉积和PDGF-BB免疫组化表达(P<0.05).结论 染料木素对大鼠肝纤维化形成具有一定的预防作用.其机制可能是通过抑制PDGF-BB的表达而发挥作用.     

大豆黄酮对雄性大鼠生殖器官生长发育的影响

目的:探讨植物雌激素大豆黄酮对大鼠睾丸和附睾生长、发育的影响。方法:10周龄(成年早期)和4周龄(青春期)SD雄性大鼠各30只,分别分为5组:正常对照组,阳性对照组、低、中、高剂量大豆黄酮组,6只/组,分别给予生理盐水、0.1mg/kg己烯雌酚,2、20、100mg/kg大豆黄酮灌胃,连续90d,观察睾丸、附睾指数及体重的变化;HE染色观察睾丸、附睾等组织结构的改变。结果:在成年早期大鼠中,各剂量大豆黄酮组大鼠的体重、睾丸和附睾指数与正常对照组均无显著差异(P均>0.05);在青春期大鼠中,各剂量大豆黄酮组大鼠的附睾指数与正常对照组亦无显著差异(P均>0.05);而高剂量组大鼠的睾丸指数(3.21±0.07)显著低于正常对照组(3.71±0.32,P<0.05),中、低剂量组与正常对照组差异无显著性(P均>0.05);中、低剂量组大鼠的体重与正常对照组无显著性差异(P均>0.05),而高剂量组的体重则显著低于正常对照组(P<0.05)。HE染色结果显示青春期及成年早期大鼠摄入各剂量大豆黄酮对附睾组织结构无明显影响,而摄入高剂量大豆黄酮可使青春期大鼠睾丸发育迟缓,出现不同程度生精障碍。结论:青春期摄入高剂量的大豆黄酮对SD大鼠睾丸生长发育及组织结构有一定影响。