成人呼吸道病毒及非典型病原体快速检测的临床研究

目的应用快速方法对成人呼吸道病毒及非典型病原体进行检测,评价快速检测方法的临床应用价值。方法收集2012年2月至2013年1月间呼吸内科的296例成人呼吸道感染患者的标本,应用胶体金免疫层析法（GICA）检测鼻、咽部分泌物流感病毒A、B（FluA、B）抗原,快速培养法检测肺炎支原体（MP）抗原,同时应用间接免疫荧光法（IFA）检测血清9种呼吸道常见病原体IgM抗体,并对检测结果进行分析。结果GICA法检测Flu抗原、快速培养法检测MP抗原与IFA法检测同一患者相应的IgM抗体结果的差异均有统计学意义（P〈0．05）;各种呼吸道病原体抗原阳性率为28．7％,混合阳性率为0．7％;呼吸道病原体IgM抗体阳性率为42．2％,混合阳性率为7．5％,其中以MP最为多见;冬季FluAIgM抗体阳性率为22％,显著高于其他季节（P〈0．001）,其它病原体IgM抗体阳性检出率在不同季节问差异无统计学意义;不同病种组、不同年龄组呼吸道病原体IgM抗体检测结果差异无统计学意义。结论呼吸道病毒及非典型病原体是成人呼吸道感染的重要病原,GICA法、快速培养法与IFA法联合检测可作为早期诊断呼吸道病原体感染的优选方法。     

病毒及非典型病原体致社区获得性肺炎住院患者的临床分析

目的使用快速检测方法对呼吸科住院社区获得性肺炎(CAP)患者进行病毒及非典型病原体感染检测,了解其感染状况。方法对2013年2月至2015年2月北京解放军306医院呼吸科收治的301例CAP住院患者应用胶体金免疫层析法(GICA)检测流感病毒A、B(FluA、B),呼吸道合胞病毒(RSV),腺病毒(ADV)及嗜肺军团菌(LP)抗原,并使用快速培养法检测有无肺炎支原体(MP)感染,对住院CAP患者呼吸道病毒抗原和不典型病原体检出率进行分析统计。结果呼吸道病毒及非典型病原体检测总阳性检出率为55.5%,老年患者(≥65岁)FluA/B检出率均显著高于65岁以下患者(P0.05);MP培养的阳性率与LP抗原阳性的检出率,65岁以上组均显著低于65岁以下组(P0.05)。春、冬季FluA抗原的阳性检出率均高于夏、秋季(P0.05);冬季支原体培养阳性检出率明显高于夏、秋季(P0.05)。没有基础病的患者的FluA抗原的检出率明显低于合并基础病患者(P0.05)。结论呼吸道病毒和不典型病原体是住院CAP患者的重要病原,季节、年龄及是否合并基础疾病是感染风险重要影响因素。     

纳米银对流感病毒H3N2的抑制作用

目的探讨纳米银（NaAg）对流感病毒H3N2的抑制作用。方法采用血球凝集试验、MTT分析法、血球吸附试验和鸡胚培养法,探讨NaAg对流感病毒H3N2的抑制作用。结果NaAg／H3N2组和H3N2对照组血球凝集试验效价分别为〈1：4和1：1024（P〈0．001）;NaAg溶液在MD-25细胞上最大无毒浓度为25μg／ml;H3N2在MD-25细胞上的细胞半数感染浓度（TCID50）为10^3.5／0．1ml。等体积的50μg/mlNaAg与40TCID50流感病毒H3N2溶液室温充分混和作用2h后感染MD-25细胞,细胞存活率为（96．77±2．07）％;20TCID。流感病毒H3N2感染MD-25细胞的细胞存活率为（33．09±1．48）％（P〈0．001）。结论NaAg对流感病毒H3N2具有明显的抑制作用。     

兰州地区成人急性呼吸道感染常见病毒IgM抗体检测

目的 了解冬春季节兰州地区成人急性呼吸道感染患者病毒病原学状况。方法2003年11月1日至2004年4月30日，对兰州地区3家三级甲等医院呼吸科年龄16岁以上急性呼吸道感染患者467例，采用间接酶联免疫吸附实验（ELISA，定量法）就流感病毒A（Flu A）、流感病毒B（Flu B）、呼吸道合胞病毒（RSV）、腺病毒（ADV）、副流感病毒（PIV）血清中病毒特异性IgM抗体进行检测。结果 ①174例（174／467，37．3％）检出病毒特异性抗体阳性。其中FluA132例（132／467，28．3％）；Flu B80例（80／467，17．1％）；RSV68例（68／467，14．6％）；ADV22例（22／467，4．7％）；PIV7例（7／467，1．5％）。②少数患者（58／467，12．4％）存在两种或两种以上病毒同时感染情况，其中有27例（15．5％）合并细菌感染，27例中有14例（14／27，51．9％）有基础疾病。结论 ①病毒是成人急性呼吸道感染的重要病原体之一。其中流感病毒（FluA、Flu B）是兰州地区成人冬春季节急性呼吸道感染最重要的病毒病原体，其次为呼吸道合胞病毒（RSV）。腺病毒（ADV）和副流感病毒（PIV）少见。②存在两种或两种以上呼吸道病毒同时感染的现象，少数病例有继发细菌感染。③有基础疾病者感染呼吸道病毒风险增加。     

2012年至2013年度北京郊区新兵呼吸道非典型病原体及病毒抗原检测的对比分析

目的探讨北京郊区部队新兵集训期间呼吸道非典型病原体及病毒的感染情况，为新兵呼吸道疾病的预防工作提供依据。方法收集2012年至2013年出现咳嗽、咳痰、鼻塞、流涕、咽痛等上呼吸道症状的815名新兵咽部分泌物及尿液标本，应用胶体金免疫层析法（GICA）快速检测咽部分泌物流感病毒A／B（FluA、B）、呼吸道合胞病毒（RSV）、腺病毒（ADV）抗原和中段尿嗜肺军团菌（TJP）抗原，采用快速培养法筛查肺炎支原体（MP）抗原。结果2012、2013年北京郊区新兵呼吸道病原体抗原总阳性率分别为28．85％、22．66％，均以MP最为多见，差异无统计学意义（P〉0．05）。2012、2013年北京郊区新兵南刊E方籍和前后两年南方籍间、北方籍间新兵MP、LP阳性率间差异均无统计学意义（P〉0．05）。2012、2013年北京郊区新兵南北郊区间MP阳性率差异均无统计学意义（P〉0．05），2013年北郊MP阳性率显著低于2012年北郊，差异有统计学意义（P〈0．05）；前后两年北郊的LP阳性率均显著低于南郊，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论呼吸道非典型病原体和病毒是北京郊区新兵呼吸道感染的重要病原，以MP、LP为主，应加强预防。     

2009-2012年丽水市流感监测网络实验室结果分析北大核心CSCD

目的掌握丽水市2009-2012年流感流行特征和病原学变化规律,为流感大流行的预测和防控提供科学依据。方法采用Real—timePCR法检测流感病毒核酸,分析辖区内流感流行特征。结果丽水市2009年IL1标本流感核酸检测阳性率为62．37％,以A型H1N1流感为主,占98．31％;2010年阳性率为28．95％,以B型为主要流行株,占61．62％;2011年阳性率为25．39％,以A型H1N1和B型为主要流行株,分别占52．58％和45．36％;2012年阳性率为39．93％,主要流行株为季节性A型H3（占56．88％）和B型（占43．12％）,无A型H1N1和季节性A型H1N1流行。剔除2009年新型A型H1N1病毒的影响,丽水市流感主要流行株为季节性A型H3N2和B型,季节性A型H3N2春夏季流行较多,而B型则主要在秋冬季流行。结论丽水市流感的流行有一定的季节性,2009年以新型A型H1N1流感为主,2010-2012年以季节性A型H3N2和B型流感为主。因此应继续加强对流感的病原学监测,及时发现流感病毒变异,对人群进行规范的流感疫苗棒种及僻康新畜。     

2009-2012年丽水市流感监测网络实验室结果分析

目的掌握丽水市2009-2012年流感流行特征和病原学变化规律,为流感大流行的预测和防控提供科学依据。方法采用Real—timePCR法检测流感病毒核酸,分析辖区内流感流行特征。结果丽水市2009年IL1标本流感核酸检测阳性率为62．37％,以A型H1N1流感为主,占98．31％;2010年阳性率为28．95％,以B型为主要流行株,占61．62％;2011年阳性率为25．39％,以A型H1N1和B型为主要流行株,分别占52．58％和45．36％;2012年阳性率为39．93％,主要流行株为季节性A型H3（占56．88％）和B型（占43．12％）,无A型H1N1和季节性A型H1N1流行。剔除2009年新型A型H1N1病毒的影响,丽水市流感主要流行株为季节性A型H3N2和B型,季节性A型H3N2春夏季流行较多,而B型则主要在秋冬季流行。结论丽水市流感的流行有一定的季节性,2009年以新型A型H1N1流感为主,2010-2012年以季节性A型H3N2和B型流感为主。因此应继续加强对流感的病原学监测,及时发现流感病毒变异,对人群进行规范的流感疫苗棒种及僻康新畜。减粹浠戚的侍害     

唾液幽门螺杆菌抗原检测与慢性胃炎活动性及癌前病变关系的研究

目的 评价唾液幽门螺杆菌（Helicobacterpylori，Hp）抗原与慢性胃炎活动性以及胃黏膜癌前病变肠上皮化生与不典型增生的相关性。方法 应用酶联免疫吸附法（ELISA），对2004年6月至2005年6月浙江大学医学院附属第二医院消化内科246例接受胃镜检查患者的唾液标本进行幽门螺杆菌抗原检测，分别比较不同胃病患者唾液中Hp抗原的阳性检出率。结果 慢性活动性胃炎组唾液中Hp抗原阳性检出率为74．29％（26／35）．明显高于慢性非活动性胃炎组46．92％（99／211）（P〈0．05）。慢性胃炎组患者唾液中Hp抗原的阳性检出率为45.98％（80／174），慢性胃炎伴轻度肠上皮化生（肠化）组唾液中Hp抗原阳性检出率为52.63％（20／38），慢性胃炎伴中重度肠化组唾液中Hp抗原阳性检出率为68．18％（15／22），慢性胃炎伴不典型增生组唾液中Hp抗原阳性检出率为83．33％（10／12），结果显示．慢性胃炎伴中重度肠化或不典型增生组与慢性胃炎组相比，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论 唾液中存在高Hp检出率现象，1：3腔可能为Hp的重要寄居地．1：3腔内Hp感染程度与胃炎活动程度及部分胃黏膜癌前病变有关，慢性活动性胃炎或伴中重度肠化或不典型增生患者口腔内Hp检出率明显增高，口腔内Hp是否需行根除治疗，值得今后进一步研究探讨。     

慢性阻塞性肺疾病急性加重患者呼吸道病毒及非典型病原体的检测分析

目的探讨呼吸道病毒及非典型病原体在慢性阻塞性肺疾病急性加重（AECOPD）患者中的感染情况及相互关系。方法采集2012年6月1日至2013年9月1日入住北京军区总医院呼吸内科的211例AECOPD患者血清标本,应用间接免疫荧光法（IFA）定性检测九种呼吸道病原体IgM抗体,并对检测结果进行分析。结果AECOPD患者呼吸道病原体IgM抗体总阳性率为43．6％（92／211）,2项以上混合阳性率为5．2％（11／211）,其中以流感病毒A（FluA）最为多见;春季IgM抗体总阳性率显著高于夏季和秋季节,差异有统计学意义（P=0．001）;春季FluAIgM抗体阳性率与夏季相比,差异有统计学意义（P=0．02）。不同年龄及年患病次数AECOPD患者IgM抗体阳性率比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。结论AECOPD与呼吸道病毒及非典型病原体感染密切相关,尤其是流感病毒,在呼吸道病毒及非典型病原体流行的季节应做好预防工作。     

福建省首例人感染H7N9禽流感病例实验室诊断和病毒序列分析

摘要 目的 应用real-time RT-PCR和病毒序列测定等方法对福建省首例人感染H7N9禽流感病例开展实验室诊断。方法 采集人感染H7N9禽流感病例呼吸道标本并提取RNA,分别采用甲乙型流感通用引物和探针、季节性流感（包括H3N2、H1N1、H1N1pdm）特异性引物和探针以及H7N9特异性引物和探针进行荧光PCR检测。利用自行设计的引物扩增病毒基因组节段,测定并分析病毒基因组序列。结果 real-time RT-PCR结果表明,应用甲型通用引物扩增结果阳性,乙型及季节性流感（包括H3N2、H1N1以及H1N1pdm）扩增结果均为阴性,特异性H7N9亚型流感病毒扩增结果阳性。序列测定获得的病毒4个节段的序列与已公布的人感染H7N9禽流感病毒序列高度一致。结论 病例呼吸道标本中存在人感染H7N9禽流感病毒,病毒的基因与近期国内流行的人感染H7N9禽流感病毒高度类似。     

快速检测流感病毒抗原方法的建立

目的建立有效、简便的胶体金免疫层析方法（G ICA）快速检测流感病毒感染抗原方法。方法分别对1145例急性呼吸道疾病住院患者应用G ICA法检测患者鼻咽部分泌物的流感病毒A、B（FluA、B）抗原,并同时用IFA法作对照,对G ICA法做出评价。对以上患者分别应用鼻、咽拭子法和鼻咽部细导管负压吸引法两种不同方法采集患者鼻咽部分泌物,均经G ICA法快速检测分泌物标本中的Flu A、B抗原,对两种不同采集方法的结果做出评价。结果以上两种检测方法及采集方法所得结果,均有较好的一致性,之间差异无统计学意义（P〉0.05）。结论鼻、咽拭子采集法配合G ICA法是简便、快捷、敏感的检测流感病毒抗原的好方法。     

疟疾胶体金免疫层析试条在间日疟流行区的诊断评价

目的 在现场评价疟疾胶体金免疫层析试条 （简称试条） 的诊断性能。 方法 2008年9～10月采集安徽省间日疟流行区蒙城县5个乡镇医院门诊部所有就诊的发热病人血样,用双盲法比较镜检法和试条测试的结果。 结果 共采集发热病人血样292份,镜检法检出疟原虫阳性181份,均为间日疟;试条检出疟原虫阳性163份,亦均为间日疟。两法检测结果一致的血样占92.8%（271/292）,其中均为阳性的163份,均为阴性的108份。两法检测结果不一致的21份血样中,镜检阳性的、试条检测阴性的有18份,镜检阴性的、试条检测阳性的有3份。原虫密度在＞1 000 个/μl、100～1 000 个/μl和＜100 个/μl时,试条检测阳性率分别为93.5%（115/123）、86.0%（43/50）和62.5%（5/8）。 结论 该快速诊断疟疾胶体金免疫层析试条在疟疾流行区对间日疟有一定的诊断价值。     

流感快速检测的临床研究

目的 探讨快速诊断试纸条(GICA)法在快速诊断流感病毒感染中的可靠性.方法 应用GICA法和标准免疫荧光法检测呼吸科住院患者鼻咽部分泌物中的流感病毒A、B抗原.结果 GICA法检出流感病毒A、B抗原单一和混合阳性患者21例,26例次,免疫荧光法检出30例次,两种方法检测结果差异无统计学意义.结论 GICA是快速检测流感病毒的简捷的好方法.     

流感快速检测的临床研究

目的 探讨快速诊断试纸条(GICA)法在快速诊断流感病毒感染中的可靠性.方法 应用GICA法和标准免疫荧光法检测呼吸科住院患者鼻咽部分泌物中的流感病毒A、B抗原.结果 GICA法检出流感病毒A、B抗原单一和混合阳性患者21例,26例次,免疫荧光法检出30例次,两种方法检测结果差异无统计学意义.结论 GICA是快速检测流感病毒的简捷的好方法.     

金免疫层析法对两例鼠疫患者血清抗体的跟踪检测分析

目的 评价胶体金免疫层析法(GICA)对鼠疫患者血清F1抗体检测效果.方法 GICA和间接血凝(IHA)两种方法平行跟踪检测.结果 GICA检测两例鼠疫患者在发病后4～450 d血清中鼠疫F1抗体结果与IHA结果一致.结论 GICA与IHA跟踪检测鼠疫患者F1抗体结果相同,GICA也适用于鼠疫现场血清学诊断.     

胶体金免疫层析试纸条对云南鼠疫现场材料的检测

目的评价检测鼠疫抗原及抗体胶体金免疫层析试纸条(G ICA及RG ICA)对现场材料的检测效果。方法采用G ICA分别对采自云南省的607份血清标本(查鼠疫抗体)及572份鼠脏器标本(查鼠疫抗原)进行检测,同时以血凝试验(IHA及R IHA)与酶联试验(ELISA及F1-ELISA)作为对照。结果(1)在对607份血清标本的检测中,G ICA、IHA及ELISA三种方法的符合率中度,而G ICA的敏感性比IHA与ELISA分别高111%和90%;(2)在对572份鼠脏器标本的检测中,RG ICA、R IHA及F1-ELISA三种方法的符合率中度,而RG ICA的敏感性比R IHA与F1-ELISA分别高100%和14.3%。结论检测鼠疫的G ICA及RG ICA特异性强、灵敏度高、简便快速,有较大的推广应用价值。     

胶体金免疫层析法快速诊断血吸虫病的研究

目的研发一种血吸虫病快速诊断试剂。方法应用血吸虫病病人和健康人血清测试胶体金免疫层析法(GI-CA)试剂的敏感性、特异性、交叉反应、重现性和稳定性;并与DIGFA及IHA方法比较。结果血吸虫病胶体金免疫层析法(GICA)试剂敏感性和特异性分别为92.5%和95.8%,Youden指数为0883。检测结果与DIGFA及IHA比较三者无统计学意义(P>0.05)。未发现与乙肝病人血清有交叉反应。并具有很好的重现性和稳定性。结论胶体金免疫层析法(GICA)具有试剂敏感、特异和稳定;方法简便、快速和微量的特点,试剂为固态,携带方便,保存期长,适合于血吸虫病流行病学调查及现场应用。     

检测狂犬病毒的胶体金免疫层析法的建立及应用

目的 建立一种简易快速、适用于野外的胶体金免疫层析法(GICA)用于检测动物脑或唾液中的狂犬病街毒抗原。方法采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒，标记抗狂犬病毒单抗。制成免疫层析测试条。样品中的狂犬病毒抗原与测试条上金标记抗体结合后沿着硝酸纤维素膜移动，与膜上的固相抗体结合形成肉眼可见的红色线条。结果 GICA测试条只与狂犬病毒抗原有特异性反应，与乙型脑炎病毒、正常小鼠脑组织等无交叉反应。GICA与EIA比较检测了48份可疑狂犬病犬唾液样品，两法的符合率为88．2％。结论 GICA检测样品中的狂犬病毒抗原特异性强、灵敏度高、简便快速、无需仪器设备，对基层单位开展初步鉴定狂犬病毒样品工作而言。不失为一种有效的方法。     

恶性疟原虫重组乳酸脱氢酶胶体金免疫层析法检测试纸条的研制

目的 用氯金酸标记抗恶性疟原虫乳酸脱氢酶（LDH）单克隆抗体（McAb），研制用于诊断恶性疟原虫和间日疟原虫感染的胶体金免疫层析（GICA）试纸。方法 采用柠檬酸盐还原法制备胶体金颗粒、标记抗恶性疟原虫重组乳酸脱氢酶单克隆抗体，制成免疫层析检测试纸条。用该试纸条检测已知疟疾病人及健康人血样，鉴定方法的敏感性和特异性。结果 检测重组LDH抗原的最小量为5ng／ml；对30例恶性疟病人血样及40例间日疟病人血样进行检测，敏感性分别为83．33％和57．50％，检测100例健康者血样特异性为98．00％。结论 初步建立了同时诊断恶性疟原虫和间日疟原虫感染的GICA检测法。