CD45RO在喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的：探讨喉鳞状细胞癌中cD45RO的表达及其临床意义,为喉鳞状细胞癌的预后评估提供新的思路,及为其生物治疗提供理论依据。方法：2010—01—2012—12期间我院确诊并手术治疗的初发喉鳞状细胞癌标本50例。另取10例喉部正常黏膜作对照分析。所有标本均经10％甲醛固定,石蜡包埋、切片。采用免疫组织化学、苏木精伊红染色方法检测CD45RO的阳性表达,分析其与喉鳞状细胞癌临床病理特征之间的关系。结果：CD45RO在正常组织及喉鳞状细胞癌中的阳性表达率分别为30％、86％。在50例喉癌病例中,CD45RO与局部淋巴结转移呈负相关（r=-0．713,P〈0．05）,与肿瘤分区呈负相关（r=-0．750,P〈0．05）,与年龄、T分类、病理分化程度、临床分期无明显相关性。结论：①CD45RO在喉鳞状细胞癌组织中的表达高于正常喉黏膜组织中的表达;②CD45RO过表达可能减少区域淋巴结转移;③CD45RO过表达可能有利于喉鳞状细胞癌患者的预后;④传统UICC—TNM分期、组织学分级评估预后不同,通过对CD45RO的检测可以从另外一个角度评估喉鳞状细胞癌的预后情况。     

复发性鼻息肉中T淋巴细胞亚群的表达

目的 :检测复发性鼻息肉组织中T淋巴细胞亚群的表达 ,探讨T淋巴细胞介导的免疫反应在鼻息肉复发中所起的作用。方法 :应用荧光免疫流式细胞术检测 17例复发性鼻息肉患者鼻息肉组织、外周血T淋巴细胞亚群CD4 、CD8 、CD4 5RO 的表达 ,并与正常人下鼻甲黏膜及外周血的相应指标进行比较。 结果 :复发性鼻息肉组织中有大量T淋巴细胞浸润 [(39.6 5±2 .0 8) % ],而在健康下鼻甲黏膜中几乎未见CD3 细胞。在复发性鼻息肉中 ,CD3 CD4 细胞[(6 4.4 46± 5 .2 97) % ]多于CD3 CD8 细胞 [(35 .5 5 4± 5 .2 97) % ](P <0 .0 5 ) ,CD3 CD4 5RO 细胞 [(2 2 .6 49± 2 .789) % ]也显著多于正常人外周血CD3 CD4 5RO 细胞 [(3.896± 0 .384 ) % ](P<0 .0 5 ) ,CD3 CD4 /CD3 CD8 比值为 1.95 6± 0 .0 93,复发性鼻息肉患者外周血比值为 2 .36 7±0 .12 8,正常人外周血比值为 1.6 0 6± 0 .0 96 ,其差异均有统计学意义 (均P <0 .0 5 )。结论 :复发性鼻息肉组织中有大量T淋巴细胞表达 ,且T细胞亚群比例失调 ,显示细胞免疫功能的紊乱在鼻息肉的形成与复发中起重要作用     

CD45RO CD20及总IgE在声带息肉组织中表达的研究

目的 :从免疫病理学角度探讨细胞免疫、体液免疫和局部变态反应在声带息肉发病中的作用。方法 :对 30例声带息肉组织 (息肉组 )和 10例正常声带组织 (对照组 )采用免疫组织化学方法观察两组CD4 5RO、CD2 0及IgE的表达情况并检测其阳性细胞数。 结果 :息肉组CD4 5RO、CD2 0和IgE阳性细胞数显著高于对照组 (P <0 .0 1) ;声带息肉组织中CD4 5RO、CD2 0和IgE的表达之间无相关性 ;男、女患者间的表达差异亦无统计学意义 (P >0 .0 5 )。 结论 :由T淋巴细胞介导的细胞免疫和B淋巴细胞介导的体液免疫在声带息肉中免疫应答活跃 ;声带黏膜局部变态反应参与了声带息肉的发病 ;在声带息肉的发病机制中免疫病理改变起着重要的作用。     

齐墩果酸通过抑制自噬调节变应性鼻炎中的Treg/Th17细胞失衡CSCD

目的探讨齐墩果酸对变应性鼻炎(AR)中调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)/辅助性T细胞17(helper T cells 17,Th17)的调节作用及潜在机制。方法收集AR患者鼻黏膜组织及外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)。饲养BALB/c小鼠。PBMC用于建立AR细胞模型,BALB/c小鼠用于建立AR动物模型。对于AR细胞使用150μg/ml的齐墩果酸进行治疗。对于AR小鼠使用低剂量(L)-齐墩果酸(50 mg/kg)、高剂量(H)-齐墩果酸(200 mg/kg)、自噬抑制剂3-MA(10 mg/kg)、H-齐墩果酸+自噬激活剂雷帕霉素(Rapa,1 mg/kg)分别进行治疗。qRT-PCR测人鼻黏膜组织IL-17A和Foxp3的表达以及小鼠各组鼻黏膜组织中RORγt和Foxp3的表达。流式细胞术从PBMC中分选Th17和Treg细胞,并检测PBMC中白细胞介素17A(IL-17A)细胞和叉头样转录因子3(Foxp3)细胞的比例。Western blot法检测Th17和Treg细胞中自噬相关蛋白Beclin1、LC3-II、LC3-I、p62的表达。酶联免疫吸附试验检测各组小鼠鼻腔灌洗液中IL-17A和IL-10的表达。结果AR组患者鼻黏膜组织中IL-17A表达显著增加,但Foxp3的表达显著降低(P均<0.05)。齐墩果酸下调PBMC中IL-17A的表达,并上调Foxp3的表达。齐墩果酸抑制Th17细胞和Treg细胞中Beclin1、LC3-II以及LC3-I的表达(P均<0.05),促进p62的表达水平。齐墩果酸降低AR小鼠体内IL-17A和RORγt水平,并上调IL-10和Foxp3的水平(P均<0.05)。结论齐墩果酸通过抑制自噬信号改善AR中Th17/Treg细胞的平衡。     

特异性免疫治疗对变应性鼻炎患者外周血中Th9细胞分化及转录因子表达的影响

目的观察变应性鼻炎(AR)患者变应原特异性免疫治疗(specific immunotherapy,SIT)前、后外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)中Th9细胞分化因子及相关转录因子GATA-3、PU.1、IRF4 mRNA表达的变化。方法采用视觉模拟量表(visual analogue scale,VAS)评估71例AR患者(实验组)症状严重程度。流式细胞术检测36例AR患者PBMC中Th9细胞百分率,ELISA法检测血清特异性IgE(specific IgE,sIgE)、特异性IgG4(specific IgG4,sIgG4)、白细胞介素9(interleukin-9,IL-9)和IL-10水平在治疗前及治疗1、2年后变化,对鼻部症状计分。并取32例健康者血清作为对照组。用实时荧光定量PCR法检测实验组与对照组PBMC中Th9细胞相关转录因子GATA-3、PU.1和IRF4mRNA表达水平。结果①AR患者治疗前,PBMC中Th9细胞百分率明显高于对照组(P<0.01),而治疗1、2年后Th9细胞百分率均明显低于治疗前(P<0.01)。②AR患者治疗前,血清sIgE及Th9细胞中IL-9水平高于对照组(P均<0.01),而sIgG4及IL-10水平低于对照组(P均<0.01);治疗1、2年后sIgE和IL-9均低于治疗前(P均<0.01),而治疗2年后,sIgG4和IL-10水平均低于治疗1年后,但高于治疗前(P均<0.01),治疗2年后sIgE水平高于治疗1年后(P<0.01)。③治疗前、后各组GATA-3mRNA表达量与对照组相比均无显著差异(P>0.05),治疗前PU.1、IRF4 mRNA表达量均高于对照组(P均<0.01),而治疗1、2年后PU.1、IRF4 mRNA表达量均低于治疗前(P均<0.01)。结论 SIT可能通过抑制Th9细胞分化,调节相关转录因子的表达而调节机体免疫状态,诱导免疫耐受。     

变应性鼻炎血清sPD-L1表达与T淋巴细胞亚群的关系

目的 探讨变应性鼻炎(AR)血清sPD-L1表达与T淋巴细胞亚群的关系.方法 选取2018年6月—2020年2月收治的AR患者120例,并纳入同期体检健康者50例作为对照组.采用Elisa法测定两组患者血清sPD-L1水平,采用流式细胞技术检查CD3+、CD8+、CD4+和CD4+/CD8+水平;采用Spearman分...     

γδT细胞、调节性T细胞、白细胞介素17及转化生长因子β1在变应性鼻炎患者外周血中的表达

目的 探讨变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)患者外周血中γδ T细胞、调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)、白细胞介素(interleukin,IL) 17及转化生长因子β1(transforming growth factor β1,TGF-β1)的表达及临床意义.方法 2012年3-7月,收集32例AR患者(AR组)和20例健康志愿者(对照组)的外周血,采用流式细胞术检测外周血中γδ T细胞和Treg细胞比例;酶联免疫吸附试验检测血清中IL-17、TGF-β1的水平,并分析它们之间的相关性.采用SPSS 16.0软件进行数据分析.结果 γδ T细胞百分比在AR组和对照组分别为(13.30±8.62)％、(5.18±1.86)％,差异有统计学意义(t =5.18,P＜0.01);Treg细胞百分比分别为(1.75±0.56)％、(4.76±1.74)％,差异有统计学意义(t =7.46,P＜0.01).AR组血清中IL-17的表达水平为(668.55 ±45.15) pg/ml,高于对照组的(573.53±17.42) pg/ml,差异有统计学意义(t=8.97,P＜0.01);AR组TGF-β1的表达水平为(0.34±0.04) pg/ml,低于对照组的(0.49 ±0.06) pg/ml,差异有统计学意义(t=9.51,P＜0.01).AR组患者外周血中γδ T细胞百分比与Treg细胞百分比呈负相关趋势(r=-0.561,P＜0.01),γδ T细胞百分比与IL-17呈正相关趋势(r=0.469,P＜0.01),γδ T细胞百分比与TGF-β1呈负相关趋势(r=-0.622,P＜0.01),Treg细胞百分比与TGF-β1呈正相关(r=0.738,P＜0.01),IL-17表达水平与Treg细胞百分比、TGF-β1无相关性(r值分别为-0.111、-0.196,P＞0.05).结论 AR患者外周血中γδ T细胞和Treg细胞之间存在免疫平衡失调,γδ T细胞可能参与了IL-17的分泌,这可能在AR的发病和发展过程中发挥重要作用.     

调节性T细胞与IgE、IL-4、IL-5在变应性鼻炎小鼠和鼻用激素抗炎中的实验研究

目的 探讨CD4+CD25+FOXP3+调节性T细胞(regulatory T cells, Tregs)与IgE、IL-4、IL-5在变应性鼻炎(allergic rhinitis, AR)小鼠及鼻用激素抗炎中的表达及作用。方法 5～6周龄雌性Balb/c小鼠30只,随机分为正常组、AR组和鼻用激素组。正常组无干预;AR组采用卵清蛋白(ovalbumin,OVA)全身致敏并雾化和滴鼻激发;鼻用激素组在成功致敏后,每次激发完30min后雾化吸入丙酸氟替卡松10min。小鼠于末次激发24h后处死,鼻黏膜行苏木素-伊红染色;流式检测气管旁引流淋巴结和脾脏中CD4+CD25+FOXP3+Tregs表达; ELISA检测血清中OVA 特异性IgE及鼻腔灌洗液中IL-4、IL-5含量。结果 与正常组小鼠相比,AR组小鼠鼻黏膜出现大量的嗜酸性粒细胞(EOS),CD4+CD25+FOXP3+Tregs表达在气管旁引流淋巴结中上调,脾脏中无差别;IgE、IL-4、IL-5含量明显升高,而鼻用激素组小鼠CD4+CD25+FOXP3+Tregs在气管旁引流淋巴结和脾脏中表达继续明显上调;EOS数目与IgE、 IL-4、IL-5含量均被明显抑制。结论 CD4+CD25+FOXP3+Tregs不仅在AR中,而且在鼻用激素对AR的干预中都发挥着重要的免疫调节作用,同时IgE、IL-4、IL-5介导变应性炎症反应,在AR的发生发展中发挥重要作用。     

外周血CD8^(+)T淋巴细胞亚群检测对过敏性鼻炎临床疗效的评估价值CSCD

目的探讨外周血CD8^(+)T淋巴细胞亚群检测对过敏性鼻炎(AR)临床疗效的评估价值。方法前瞻性选取2021年3月~2022年2月温州市中西医结合医院耳鼻咽喉科门诊治疗的120例AR患者和40例健康志愿者,分别设为研究组和对照组,比较两组外周血CD8^(+)T细胞、CD8^(+)CD28^(+)T细胞、CD8^(+)CD28-T细胞比率;研究组接受鼻用激素联合口服抗组胺药物治疗方案,根据治疗效果分为有效组(n=107)和无效组(n=13),比较有效组和无效组治疗前CD8^(+)T细胞、CD8^(+)CD28^(+)T细胞、CD8^(+)CD28-T细胞比率;Pearson相关性分析法分析外周血CD8^(+)T淋巴细胞亚群水平与鼻部症状总评分(totalnose symptomscore,TNSS)的相关性;以受试者工作特征(ROC)曲线分析治疗前CD8^(+)T淋巴细胞亚群对AR临床疗效的预测价值。结果研究组治疗前外周血CD8^(+)CD28^(+)T细胞比率高于对照组,CD8^(+)CD28-T细胞比率低于对照组(P<0.05)。研究组总有效率为89.17%;有效组治疗前CD8^(+)CD28^(+)T细胞比率低于无效组,CD8^(+)CD28-T细胞比率高于无效组(P<0.05);Pearson相关性分析显示,CD8^(+)CD28^(+)T细胞比率与TNSS评分呈正相关(r=0.324,P=0.006),CD8^(+)CD28-T细胞比率与TNSS评分呈负相关(r=-0.541,P=0.000)。ROC曲线结果显示,CD8^(+)T细胞、CD8^(+)CD28^(+)T细胞、CD8^(+)CD28-T细胞比率评估AR治疗无效的曲线下面积(AUC)(95%CI)分别为0.647(0.555~0.732)、0.683(0.592~0.765)、0.911(0.845~0.955),其中CD8^(+)CD28-T细胞的评估效能优于CD8^(+)T细胞、CD8^(+)CD28^(+)T细胞比率(P<0.05)。结论AR患者外周血CD8^(+)CD28^(+)T细胞比率升高,CD8^(+)CD28-T细胞比率降低,CD8^(+)T细胞比率相对稳定,治疗前CD8^(+)CD28-T细胞比率可作为预测AR患者的临床疗效的参考指标。     

阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患儿手术前后淋巴细胞亚群分析

目的 检测阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)患儿手术前、后外周血淋巴细胞亚群的比例,研究手术前及手术后3～6个月患儿淋巴细胞亚群比例的改变情况.方法 随机选择30例OSAHS患儿,采集外周静脉血进行淋巴细胞亚群检测,所有患儿均住院在全麻下接受扁桃体联合腺样体等离子切除手术,术后3～6个月进行复查.选取30例年...     

鼻一鼻窦恶性肿瘤患者T细胞亚群的检测

目的：检测鼻-鼻窦恶性肿瘤Th1/Th2水平的变化,探讨T淋巴细胞亚群功能紊乱与鼻-鼻窦恶性肿瘤的关系。方法取鼻-鼻窦恶性肿瘤80例,以80例鼻中隔偏曲患者作为对照组,用流式细胞仪测定恶性组与对照组的外周血单个核细胞（PBMC）,经佛波酯PMA诱导培养后测定Th1细胞内IFN-γ和Th2细胞内IL-4的水平。结果恶性肿瘤组的CD3＋CD8-IL-4＋细胞高于对照组（P〈0.05）,而CD3＋CD8-IFN-γ＋细胞水平低于对照组（P〈0.05）,且Th1/Th2比值降低（P〈0.05）。结论外周血处于Th2优势分化状态,细胞免疫功能不能有效地激活,从而不利于机体组织以细胞免疫为主的抗肿瘤免疫反应,使鼻-鼻窦恶性肿瘤细胞得以生存发展。     

螨变应原特异性免疫治疗1年后免疫学变化

目的探讨标准化尘螨变应原疫苗进行集群免疫治疗过程中的免疫学机制。方法将60例螨过敏变应性鼻炎（AR）患者分为集群免疫治疗组（n=30）和药物治疗组（n=30）。检测基线和治疗1年后受试者血清中总IgE、螨特异性IgE、特异性IgG4水平,通过流式细胞术检测外周血单核细胞中Th1、Th2、天然调节性T细胞（CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋ T细胞）和I型调节性T细胞（Tr1细胞,CD4^＋IL-10^＋IL-4^-T细胞）在CD4^＋T细胞中百分比。结果经过1年治疗后,总IgE和螨特异性IgE水平未见明显改变,但免疫治疗组患者血清中螨特异性IgG4水平明显升高（P〈0．0001）。Th1、Th2型细胞和天然调节性T细胞（CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋T细胞）占CD4^＋T细胞的百分比在治疗前后均无明显变化（P=ns）,而Tr1细胞在免疫治疗1年后明显增高（P〈0．001）。结论特异性IgG4和Tr1细胞增高可作为产生免疫耐受的免疫学指标。     

变应性鼻炎免疫治疗前后外周血不同T细胞亚群基因表达的研究

目的探讨变应性鼻炎（AR）屋尘螨特异性免疫治疗前后外周血调节性T细胞（T regulatory cells,Treg）Foxp3基因和γδT细胞抗原识别受体（T cell receptor,TCR）Vγ亚家族基因表达的变化情况。方法选择22例屋尘螨皮下注射免疫治疗1年有效的AR患者,采用RT-PCR检测治疗前后外周血Foxp3与TCR VγⅠ～Ⅲ基因表达水平。10例健康志愿者为对照。结果 22例AR患者免疫治疗前Foxp3、TCR VγⅠ～Ⅲ水平明显低于对照组（Z=-2.155,Z=-2.114,t=4.101、t=3.108,P均〈0.05）,治疗后Foxp3、VγⅢ明显升高（t=-4.577,Z=-3.416,P均〈0.05）;治疗前Foxp3与VγⅠ、Ⅱ、Ⅲ呈正相关,治疗后Foxp3与VγⅢ呈正相关。结论免疫治疗1年有效的AR患者中,治疗前后外周血Treg细胞和γδT细胞亚群之间存在动态平衡关系,患者免疫治疗早期症状的改善可能与T细胞的免疫重塑相关。     

变应性鼻炎患者外周血IL-35及EBI3 mRNA和IL-12A mRNA表达的研究

目的：探讨变应性鼻炎（AR）患者外周血IL-35及其亚基病毒诱导基因3（EBI3）mRNA、IL-12A mRNA的表达及意义。方法：分别采集AR组（46例）及对照组（30例）外周血,采用ELISA法检测血清IL-35的表达水平,同时用SYBR Green实时定量PCR检测外周血单个核细胞中EBI3mRNA及IL-12AmRNA的表达水平。结果：AR组和对照组II,35水平分别为（251．22±46．27）、（382．17±25．41）ng／L,2组比较差异有统计学意义（P〈0．01）。外周血单个核细胞EBI3 mRNA的表达水平AR组明显低于对照组,约为对照组的50％,2组差异有统计学意义（P〈0．01）;IL-12AmRNA的表达水平AR组与对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：IL-35、EBI3 mRNA水平降低可能与AR的发生密切相关。     

巨噬细胞和淋巴细胞及增殖细胞核抗原在鼻息肉组织中的表达及病理学意义

目的　研究巨噬细胞 (CD68)、T细胞 (CD45RO)、B细胞 (CD2 0 )和增殖核细胞核抗原(proliferatingcellnuclearantigen ,PCNA)在鼻息肉组织中的表达。方法　应用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白过氧化酶 (strept avidinoxidase,SP)法对 50例鼻息肉分别做CD2 0、CD45RO、CD68、PCNA的免疫组化染色 ,结合常规HE染色切片进行分析。结果　①CD68+ 细胞在嗜酸性粒细胞性鼻息肉较嗜中性粒细胞性鼻息肉表达率高 ,差异具有显著性意义 (P <0 0 5) ;②CD45RO、CD2 0在鼻息肉均有阳性表达 ,CD45RO与CD2 0呈负相关 (P =0 0 5) ;③CD68阳性细胞与嗜酸性粒细胞浸润及鼻息肉上皮PCNA阳性表达有相关性 (P <0 0 5)。鼻息肉上皮的PCNA阳性表达和成纤维细胞PCNA阳性表达有相关性 ,(P <0 0 5)。结论　鼻息肉的形成与炎性细胞浸润密切相关。鼻黏膜局部的细胞免疫与体液免疫异常导致上皮细胞、成纤维细胞增殖、腺体增生是鼻息肉发生的基础 ,CD68+ 细胞可能是鼻息肉中的炎性干细胞     

Expression of CD68 CD45RO CD20 and proliferating cell nuclear antigen in nasal polyps]

OBJECTIVE: To study the cellular expression of CD45RO, CD20, CD68 and proliferating cell nuclear antigen (PCNA) in nasal polyps. METHODS: Nasal polyp tissues from 50 patients were evaluated for cellular expression of CD45RO, CD20, CD68 and PCNA using immunohistochemistry SP by counting the average number in 5 chosen high-power fields, Histopathological observations were combined with HE. Analyses were performed on SPSS10.0. RESULTS: CD68+ cells were expressed more in nasal polyps dominated by eosinophils than by neutrophils(P < 0.05). There was no difference between CD45RO and CD20, but both of them had negative correlation(P = 0.05). Significant correlation was found between CD68+ cells and eosinophils or PCNA positive cells on epithelium. PCNA positive cells on epithelium had significant correlation on fibroblast (P < 0.05). CONCLUSION: Inflammatory cell infiltration (eosinophilia CD45RO, CD20, CD68) and cell proliferating in epithelium cells, glandular cell and fibroblast are strongly correlated with formation of nasal polyps. The nasal polyps are not only characteristic of eosinophilia but also by lymphocytes dominated by CD45RO and CD68 positive cells. CD68 may be stem cell of nasal polyp.