健胎液对胚泡着床障碍小鼠雌、孕激素及其受体的影响

目的探讨健胎液促进胚泡着床障碍小鼠子宫内膜发育的机制。方法采用米非司酮诱导的小鼠胚泡着床障碍模型,予健胎液进行干预,于妊娠第8天处死小鼠,留取血清及子宫标本,采用放免法检测血清和子宫局部雌二醇(E₂),孕酮(P)含量,采用免疫组化技术检测子宫雌,孕激素受体(ER,PR)表达。结果各组血清和子宫组织E₂,P含量无显著差异(P>0.05);中药组子宫内膜腺体、间质ER,PR表达范围和强度均较模型组显著增高(P<0.05),与正常组无差异(P>0.05)。结论健胎液通过促进胚泡着床障碍小鼠子宫内膜腺体、间质的ER,PR表达,改善子宫内膜的发育,利于胚泡着床。     

健胎液对胚泡着床障碍小鼠胚泡着床作用的研究

探讨健胎液(药物:桑寄生、丹参、当归、黄芪、川芎)对胚泡着床障碍小鼠胚泡着床及子宫内膜发育的影响.采用米非司酮诱导的小鼠胚泡着床障碍模型,予健胎液治疗,于妊娠第8天处死小鼠,观察胚泡着床率、平均着床胚泡数以及子宫内膜和卵巢的形态结构变化.结果:中药组着床率和平均着床胚泡数较模型组显著提高,与正常组无显著差异;模型组子宫内膜发育不良,中药组子宫内膜的发育与正常组相似;三组小鼠卵巢的形态结构变化无显著差异.提示健胎液能促进胚泡着床障碍小鼠胚泡着床,改善子宫内膜的发育.     

健胎液改善胚泡着床障碍模型小鼠实验研究

目的:观察中药健胎液对胚泡着床障碍模型小鼠胚泡着床以及子宫内膜形态学影响。方法:采用吲哚美辛引起的胚泡着床障碍动物模型,将实验动物分为正常组、中药组、模型组,观察妊娠第5天、第8天子宫内膜形态结构变化和妊娠第8天胚泡着床率、着床位点数。结果:中药组胚泡着床率、着床位点数同模型组比较明显升高。中药组妊娠第5天子宫内膜与模型组比较,内膜血管明显比模型组增加,炎性细胞明显减少,基质出现明显蜕膜样变,子宫内膜空泡、脂滴明显少于模型组。模型组妊娠第5天子宫内膜腔上皮受损,妊娠第8天腺上皮受损,中药组子宫内膜腔上皮、腺上皮均未见结构改变。结论:中药健胎液能改善子宫内膜微环境,促进胚泡着床。     

安坤种子丸对胚泡着床障碍小鼠子宫内膜雌孕激素受体表达的影响

目的:观察安坤种子丸对胚泡着床障碍小鼠雌、孕激素受体表达的影响,探讨其对胚泡着床障碍小鼠子宫内膜容受性的影响及作用机制。方法:筛选有规律动情周期的雌性小鼠,随机分为正常组、模型组和中药组,每组25只。用安坤种子丸先期对中药组小鼠进行灌胃,雌、雄合笼后观察雌鼠阴栓情况,之后各组选取有阴栓者20只并计为妊娠第1天(D1),雄鼠及其余雌鼠刎除。妊娠第4天对中药组和模型组注射米非司酮进行干预,制成胚泡着床障碍模型;于妊娠第5、6天处死小鼠,留取子宫标本。检测子宫雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)的表达;同时统计分析各组间妊娠率、平均着床胚泡数及胚泡着床率等指标的变化。结果:安坤种子丸可以提高胚泡着床障碍小鼠子宫内膜ER、PR的表达,妊娠率、平均着床胚泡数及胚泡着床率等指标虽低于正常组(P0.05),但显著高于模型组(P0.01)。结论:安坤种子丸可以提高雌鼠子宫内膜上ER、PR的水平,一定程度上改善着床障碍小鼠子宫内膜容受性,促进胚泡着床。     

健胎液对围着床期小鼠子宫炎性细胞因子IL-1的影响

目的:探讨健胎液对胚胎着床障碍小鼠着床期子宫炎性细胞因子IL-1β及IL-1RⅠ的影响。方法:建立胚胎着床障碍的动物模型,分为三组,观察各组着床率和着床点数,妊娠第5天分别检测各组小鼠子宫内膜IL-1β的蛋白含量,以及子宫内膜IL-1β、IL-1RⅠ的mRNA水平。结果:模型组胚胎着床数、着床位点数与正常组比较显著降低(P0.01);中药组胚胎着床数、着床位点数与模型组比较明显升高(P0.05),但仍低于正常组(P0.05)。模型组子宫内膜IL-1β蛋白量同正常组、中药组比较明显升高,中药组IL-1β蛋白量同正常组比较无显著性差异。模型组IL-1β、IL-1RⅠ的mRNA表达水平同正常组比较显著升高,中药组IL-1RⅠ的mRNA表达水平同模型组比较明显降低,但仍比正常组水平高。结论:围着床期子宫内膜IL-1β、IL-1RⅠ参与胚胎着床的病理生理过程,健胎液可能通过调节IL-1表达,改善子宫内膜微环境,提高子宫内膜胚胎种植容受性,促进着床。     

中药健胎液对围着床期小鼠IL-6表达的影响

目的:探讨细胞因子IL-6在胚胎着床障碍发生发展中的作用,以及中药健胎液促进胚胎着床对子宫内膜IL-6的影响。方法:用吲哚美辛建立胚胎着床障碍的动物模型,动物分为正常对照组(正常组),胚胎着床障碍组(模型组),中药治疗组(中药组)。观察各组着床率和着床点数,用ELISA方法检测了妊娠第5天各组小鼠子宫内膜IL-6的蛋白含量,用RT-PCR方法检测妊娠第5天小鼠子宫内膜IL-6的mRNA水平。结果:模型组的胚胎着床数、着床位点数同正常组比较显著降低(P<0.01);中药组胚胎着床数、着床位点数同模型组比较明显升高(P<0.05),但仍低于正常组(P<0.05)。模型组子宫内膜IL-6蛋白量同正常组、中药组比较明显升高,中药组IL-6蛋白量同正常组比较没有显著差异(P=0.211)。模型组IL-6 mRNA表达水平同正常组、中药组比较显著升高(P<0.01),中药组IL-6 mRNA表达水平同正常组比较没有显著差异(P>0.05)。结论:中药健胎液通过调节IL-6的表达促进着床。     

健胎液对小鼠子宫内膜LIF表达的影响

目的 :探讨小鼠围着床期子宫内膜LIF的表达规律及健胎液对小鼠子宫内膜LIF表达的影响。方法 :小鼠胚胎着床障碍模型诱导方法及对各组小鼠干预处理同第一部分 ,取正常组、中药组、模型组小鼠妊娠第 5天子宫内膜 ,应用超敏免疫吸附法检测内膜LIF的表达情况。比较 3组小鼠子宫内膜LIF的表达情况 ,结合整合素α4,β3 亚基的表达情况 ,分析 3者在围着床期中表达的联系。结果 :中药组LIF的表达较模型组明显升高 (P <0 .0 5 ) ,模型组水平最低 ,明显低于正常组 (P <0 .0 1)。中药组LIF的表达水平与正常组相近 ,差异无显著性意义 (P >0 .0 5 0 )。结论 :健胎液对小鼠围着床期子宫内膜的LIF的表达有促进作用 ,与健胎液对α4,β3 的表达影响相同。     

补肾安胎方对胚泡着床障碍模型小鼠着床局部PGI2及其核受体的影响

目的 观察补肾安胎方对胚泡着床障碍小鼠着床局部前列环素I2（PGI2）及其核受体过氧化物酶体增殖激活因子受体δ（PPARδ）表达的影响。方法 将妊娠小鼠随机分为正常组、模型组和中药组(每天灌服补肾安胎液12.4 g/kg）,在妊娠第4、5、6、8天取3组小鼠妊娠子宫,采用放射免疫法测定PGI2含量,RT-PCR和免疫组织化学方法检测PPARδ mRNA及蛋白的表达。结果 模型组小鼠子宫内膜着床点PGI2含量明显低于正常组（P＜0.01）,而中药组PGI2含量较模型组显著增高（P＜0.01）。模型组小鼠子宫内膜中PPARδ的表达均滞后于正常组（P＜0.05）;小鼠子宫内膜中PGI2含量和PPARδ的表达正常组和中药组组间比较,差异无统计学意义。结论 补肾安胎方可能通过促进胚泡着床局部的PGI2及其核受体PPARδ的表达来改善胚泡着床障碍小鼠的胚泡着床。     

二补助育改良方对小鼠子宫内膜胞饮突、LIF、ER和PR表达的影响

目的观察二补助育改良方对胚泡着床障碍模型小鼠子宫内膜胞饮突、白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor,LIF)、雌激素受体(estrogen receptor,ER)和孕激素受体(progesterone receptor,PR)表达的影响。方法建立小鼠胚泡着床障碍模型,将50只实验动物分为5组:空白组、模型组、西药组1(补佳乐组)、西药组2(阿司匹林组)、二补助育改良方组,每组10只。造模与给药同时进行,其后处死小鼠,扫描电镜观察胞饮突的表达,并采用免疫组化HBP法检测小鼠子宫内膜LIF、ER、PR的表达量。结果扫描电镜下,二补助育改良方组小鼠子宫内膜表面形态较规整,大量微绒毛及丰富胞饮突表达,细胞之间的间隙明显。免疫组化结果示,二补助育改良方组小鼠子宫内膜LIF、ER、PR表达较模型组明显增加(P0.05);LIF表达低于补佳乐组(P0.05),ER表达优于补佳乐组(P0.05),PR表达与补佳乐组无明显差异(P0.05);各指标与阿司匹林组比较无明显差异(P0.05)。结论二补助育改良方可能通过调节胚泡着床期子宫内膜胞饮突、LIF、ER和PR的表达,从而提高子宫内膜容受性,参与胚泡植入的黏附过程,改善着床障碍,创造良好的受孕环境,促进胚泡着床。     

电针结合克罗米芬对多囊卵巢综合征大鼠子宫内膜胰岛素受体和胰岛素受体底物1蛋白表达及胚泡着床的影响

目的:探讨电针提高克罗米芬促排多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠胚泡着床的作用机制。方法:24日龄雌性SD大鼠皮下注射含脱氢表雄酮的麻油溶液结合高脂饮食造模;PCOS大鼠随机分为模型组、克罗米芬组、电针组、电针+克罗米芬组,每组25只。各组均于80日龄起进行干预,其中电针组及电针+克罗米芬组先电针治疗,选取"中脘""关元""天枢"穴,1周3次,连续5周;治疗结束后第1、2天,克罗米芬组、电针+克罗米芬组灌服克罗米芬(100mg·kg-1·d-1)。全部治疗结束后,各组分别取出大鼠(15只)与雄鼠交配,妊娠第8天处死,观察大鼠妊娠率及胚泡着床情况;各组其余大鼠断头处死,留取子宫内膜标本,Western blot法检测受体胰岛素受体(INSR)及胰岛素受体底物1(IRS 1)蛋白的表达。结果:模型组大鼠妊娠率和胚泡着床数显著低于正常组(P0.05);与模型组相比,克罗米芬组、电针组、电针+克罗米芬组大鼠妊娠率和胚泡着床数均显著增加(P0.05),其中电针+克罗米芬组妊娠率和胚泡着床数显著高于电针组和克罗米芬组(P0.05)。与正常组比较,模型组子宫内膜组织INSR及IRS 1蛋白表达降低(P0.05);与模型组比较,电针、电针+克罗米芬组INSR及IRS 1蛋白表达显著增加(P0.05);与克罗米芬组比较,电针、电针+克罗米芬组INSR及IRS 1蛋白表达显著增加(P0.05)。结论:电针能够提高克罗米芬促排PCOS大鼠的妊娠率和胚泡着床数,其机制可能与提高PCOS大鼠子宫内膜组织中INSR和IRS 1蛋白表达水平有关。     

针刺对Cx43基因敲除小鼠痛经反应的影响

目的:观察针刺对缝隙连接蛋白43(Cx43)基因敲除小鼠痛经反应的影响,探讨Cx43与针刺效应的关系。方法:选取杂合子[Cx43(+/-)]及野生型[Cx43(+/+)]2月龄雌鼠各20只,随机分为正常组、模型组、针刺组及益母草膏组,每组5只。其中模型组、针刺组及益母草膏组用己烯雌酚灌胃(2mg/g,容积0.2ml/10g),每日1次,连续12d,于末次给药1h后,腹腔注射催产素2U/kg;正常组以等量生理盐水灌胃,每日1次,连续12d。针刺组于造模第7天针刺双侧"三阴交"地机"穴,每日1次,连续5d;益母草膏组于第7天予以益母草膏0.6mg/g灌胃,连续5d。于造模第12天注射催产素后观察各组小鼠扭体潜伏期和30min内扭体数,随后剖腹取子宫组织,通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定催产素受体(Oct-R)和血管加压素受体(Vas-R)的mRNA表达水平,免疫组化法检测Oct-R蛋白的表达水平。结果:针刺能够延长Cx43(+/+)痛经模型小鼠的扭体潜伏期,减少其扭体次数,并能降低子宫组织中Oct-R、Vas-RmRNA及Oct-R蛋白的表达水平(均P<0.05),但对Cx43(+/-)痛经模型小鼠上述指标的表达无显著性影响(P>0.05)。结论:针刺对野生型小鼠痛经反应有治疗作用,敲除Cx43基因后,针刺的治疗作用显著降低,表明Cx43可能参与针刺治疗效果的产生。     

补肾助孕方对大鼠胚胎着床期子宫内膜ER、PR及整合素α5、β3蛋白表达的影响

目的 观察补肾助孕方对大鼠胚胎着床期子宫内膜细胞雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）及整合素α5、β3蛋白表达的影响,以阐明该方改善黄体功能不全性不孕症的机制。     

内异康复栓对子宫内膜异位症大鼠异位和在位内膜雌、孕激素受体的影响

目的观察内异康复栓直肠给药对子宫内膜异位症大鼠异位和在位内膜雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)表达的不同影响,探讨其作用机理。方法将子宫内膜异位症大鼠随机分为内异康复栓高、中剂量组及丹那唑组、丹莪妇康煎膏组、模型组、空白组,采用免疫组化SP法检测ER、PR的表达。结果内异康复栓高、中剂量组能显著降低异位内膜ER、PR的表达(P<0.05),并对在位内膜下降的ER、PR水平有上调作用(P>0.05)。结论内异康复栓可能通过抑制异位内膜细胞内ER、PR的合成而发挥治疗作用,且对在位内膜异常的ER、PR表达有一定的调节作用。     

补肾安胎方调节胚泡着床障碍小鼠雌、孕激素的实验研究

目的观察补肾安胎方对着床障碍小鼠妊娠率和着床点数的影响.方法将妊娠小鼠随机分为3组,于妊娠第1天正常组和模型组灌胃自来水,中药组灌胃补肾安胎方;于妊娠第3、4天每天2次正常组皮下注射溶剂,模型组和中药组分别注射吲哚美辛（4.33 mg/kg）造成小鼠胚泡着床障碍的动物模型,妊娠第5、8天留取血清;采用放免法检测3组小鼠雌、孕激素含量;妊娠第8天观察比较3组小鼠妊娠率、妊娠小鼠着床点数;采用免疫组化技术检测子宫雌、孕激素受体表达水平.结果（1）小鼠妊娠率和胚泡着床点数：模型组（27.3%、5.3±0.7）显著低于正常组（90.9%、13.3±2.8,P＜0.01）,中药组（72.7%、10.7±2.2）较模型组显著增高（P＜0.05）.（2）血清雌激素水平：妊娠第5、8天时中药组均高于模型组（P＜0.05或P＜0.01）,第8天时高于正常组（P＜0.01）.（3）血清孕激素水平：妊娠第5、8天时模型组、中药组均低于正常组（P＜0.05或P＜0.01）,但第8天中药组显著高于模型组（P＜0.01）.（4）免疫组织化学结果：中药组雌、孕激素受体表达显著高于模型组.结论补肾安胎方能提高吲哚美辛诱导着床障碍小鼠妊娠率和着床点数,其机制可能与该方能改善甾体激素水平,促进子宫内膜雌、孕激素受体的表达有关.     

当归散对小鼠低容受性子宫内膜孕激素受体和整合素β_3表达的影响

目的:探讨当归散及其拆方对低容受性子宫内膜PR和整合素β3表达的影响。方法:采用曲普瑞林注射制备小鼠模型,预防性给予受试液,于排卵后24h和48h测定子宫内膜中PR、整合素β3水平。结果:(1)PR的表达:48h时当归散组和归-芩组的PR表达明显上调,达到正常组水平(P0.05);(2)整合素β3的表达:而当归散组和当归黄芩组整合素β3在2个时间点表达无显著差异,与正常组比较差异不显著(P0.05)。结论:当归散和当归-黄芩能抑制曲普瑞林引起的PR过早下调,抑制整合素β3的提前表达,改善子宫内膜容受性。     

壮督驱寒合剂对强直性脊柱炎模型小鼠miR-29a及Wnt信号通路的影响

目的:研究壮督驱寒合剂对强直性脊柱炎(AS)模型小鼠miR-29a及Wnt通路的影响,以探讨壮督驱寒合剂防治AS的机制。方法:将50只6～8周Balb/c雌性小鼠随机分为空白组、模型组、西药组、中药低剂量组、中药高剂量组,每组10只。除空白组外,其余各组均采取蛋白聚糖加完全弗式试剂腹腔注射复制AS小鼠模型。造模结束后各组分别进行相应药物灌胃处理,1次/d,连续6周,末次给药后取膝关节滑膜组织。采用实时荧光定量法测定miR-29a、DKK-1及β-catenin的mRNA表达,采用免疫印迹法检测β-catenin、DKK-1蛋白含量。结果:与空白组相比,模型组小鼠滑膜组织中miR-29a表达升高,β-catenin mRNA及蛋白表达升高,DKK-1 mRNA及蛋白表达下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。与模型组相比,西药组及中药低、高剂量组miR-29a表达下降,β-catenin mRNA及蛋白表达下降,DKK-1 mRNA及蛋白表达升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:壮督驱寒合剂可能通过调控miR-29a来影响Wnt/β-catenin经典信号通路的表达,从而起到延缓AS新骨形成的作用。