参附注射液对老年脓毒症大鼠心肌保护作用的研究

目的研究参附注射液对老年脓毒症大鼠心肌的保护作用及其可能机制。方法将20月龄SD老年大鼠随机分为空白对照组、单纯脓毒症组和参附治疗组,其中,空白对照组采用腹腔注射生理盐水5mg／kg,脓毒症组采用腹腔注射LPS5mg／kg,参附治疗组在腹腔注射LPS5mg／kg后立即尾静脉注射参附注射液7．5mL／kg。用ELISA方法榆测0h、2h和4h大鼠血清中炎症细胞因子TNF-α和IL-6的变化,及用RT—PCR检测各个时间点大鼠心脏TLR4-m RNA表达,并用透射电镜观察大鼠心肌细胞超微结构变化。结果脓毒症时TNF-α和IL-6的表达明显增高,各个时间点均显著高丁对照组（P〈0．05）,而参附治疗组与单纯脓毒症组相比,TNF-α和IL-6水平则明湿降低;参附治疗组心肌组织损伤较单纯脓毒症组明显减轻;脓毒症时心肌TLR4-m RNA表达明显上调,而参附则能抑制TLR4-m RNA的表达。结论参附可能通过降低心肌组织TLR—mRNA的表达,对脓毒症诱导的老年大鼠心肌损伤具有保护作用。     

4-辛基衣康酸减轻脂多糖诱导的心肌损伤

目的 探讨4-辛基衣康酸(4-OI)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠心肌损伤的影响。方法 采用6～8周雄性C57BL/6J小鼠，经腹腔注射4-OI(25 mg/kg)或等量生理盐水连续预处理3 d后，腹腔注射LPS(10 mg/kg)或等量生理盐水，12 h后行心脏超声检查。取心脏，行苏木精-伊红(HE)染色观察心肌病理变化；Western blot检测心肌组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、p65、pp65、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPx4)、前列腺素内过氧化物合成酶2(PTGS2)和核转录因子红系2相关因子2(Nrf2)的蛋白表达水平。结果 心脏超声结果显示，LPS腹腔注射后，小鼠左心室明显扩张，收缩功能减低；与LPS组相比，4-OI组小鼠左心室收缩功能改善。HE染色示LPS腹腔注射后，小鼠心脏炎症细胞浸润明显，心肌细胞排列疏松，表现出类似于脓毒症诱导的心肌损伤的病理特点。4-OI组小鼠心脏的炎症细胞浸润程度和病理改变较LPS组低。Western blot示LPS腹腔注射后，小鼠心肌组织中Nrf2和GPx4的表达明显降低，IL-1β、TNF-α、PTGS2以...     

线粒体靶向抗氧化剂SS-31对脓毒症小鼠模型急性肝损伤的影响

目的 探究线粒体靶向抗氧化剂SS-31对脓毒症小鼠模型急性肝损伤的作用。方法 将24只C57BL/6J成年雄性小鼠随机分为control 组、control+SS-31组、脂多糖(LPS)组(脓毒症组)、LPS+SS-31组,每组6只。小鼠腹腔注射LPS(10 mg/kg)制备脓毒症急性肝损伤模型或对照组腹腔注射等体积PBS液,继之腹腔注射SS-31(10 mg/kg)进行治疗或对照组腹腔注射等体积生理盐水, 12 h后ELISA法检测ALT、AST、活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)、TNFα、IL-1β、IL-6水平,HE染色观察肝脏组织病理学。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。结果 与LPS组相比,LPS+SS-31组小鼠血清中ALT[(140.05±12.22) U/L vs (102.64±8.75)U/L]、AST[(80.22±4.71)U/L vs (69.26±5.37)U/L],以及肝组织中ROS[(1 030.21±115.87) pg/mL vs (847.84±63.65) pg/mL]、TNFα[(767.18±...     

麝香酮对脓毒血症小鼠心肌损伤的作用机制研究

目的:探讨麝香酮在脓毒血症小鼠心肌损伤中的作用及可能机制。方法:将36只雄性8～10周龄C57BL/6小鼠,随机分为对照组、脂多糖(LPS)组及LPS+麝香酮组,每组12只。LPS组和LPS+麝香酮组小鼠腹腔注射LPS 5 mg/kg以构建脓毒血症心肌损伤模型,LPS+麝香酮组小鼠于LPS注射前7 d开始,每日09:00给予2 mg/kg的麝香酮灌胃处理。对比分析各组小鼠心脏左室射血分数(LVEF)、左室短轴缩短率(LVFS)及心率;实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应法(qRT-PCR)测定心肌组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和高迁移率族蛋白B1(HMGB1)的mRNA表达;免疫组织化学染色标记心肌组织中CD₄₅阳性细胞浸润水平;同时检测小鼠肌酸激酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)及天门冬氨酸氨基转移酶(AST)的含量以评估心肌损伤状况;采用蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测心肌组织中NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)和白细胞介素-18(IL-18)蛋白表达情况。结果:与...     

脂联素对脓毒症小鼠急性肾损伤的治疗作用及机制

目的 探究脂联素（APN）对脓毒症小鼠急性肾损伤的治疗作用及相关机制。方法 选取雄性C57BL/6小鼠24只,采用随机数字表法将小鼠分为空白对照组（CON组）、模型组（LPS组）、实验组（LPS+APN组）。按10 mg/kg腹腔注射脂多糖（LPS）制备脓毒症模型,CON组腹腔注射等量0.9%氯化钠注射液,实验组在造模前8 h按0.1 mg/kg尾静脉注射APN进行干预。造模后24 h处死小鼠,取静脉血检测肾损伤指标肌酐、尿素氮;HE染色观察和评估小鼠肾组织病理变化;超氧化物阴离子荧光探针（DHE）检测活性氧含量;实时定量PCR法检测肾组织中NLRP3、IL-1β和TNF-α的mRNA表达,Western blotting法检测NLRP3、Caspase-1和IL-1β蛋白表达。结果 与模型组比较,经APN预处理后,小鼠肾功能及组织病理学损伤减轻,肾组织活性氧含量明显减少,NLRP3、IL-1β和TNF-α的mRNA表达降低,NLRP3、Caspase-1和IL-1β蛋白表达下降（P均<0.05）。结论 APN对小鼠脓毒症急性肾损伤具有治疗作用,其机制可能与NLRP3炎症小体及细...     

消退素E1对内毒素血症心肌损伤的保护作用及机制研究

目的:探讨消退素E1对内毒素血症心肌损伤的保护作用及机制研究。方法:选择SPF级C57BL/6雄性小鼠40只,随机分成为四组:正常组、对照组、模型组和药物组,通过腹腔注射25 mg/kg脂多糖(LPS)构建内毒素血症模型。其中,模型组和药物组小鼠腹腔注射25 mg/kg的LPS,正常组和对照组小鼠注射等量0.9%氯化钠液。对照组和药物组小鼠按5 mg/kg灌胃消退素E1,正常组和模型组小鼠灌胃等量0.9氯化钠液。超声心动图评估心脏功能,检测小鼠血清乳酸脱氢酶(LDH)、CK-MB、cTnI、IL-1、IL-6、IL-18和TNF-α水平。免疫荧光染色检测心脏组织Ly6G+和F4/80+阳性细胞表达。结果:超声结果显示:与正常组比较,模型组小鼠LVEDd和LVESd明显升高, EF和缩短分数(FS)明显降低,(P0.05);与模型组比较,药物组小鼠LVEDd和LVESd明显降低,EF(%)和FS(%)明显升高(P0.05)。与正常组比较,模型组小鼠心肌损伤标志物LDH、CK-MB和cTnI显著升高(P0.05);与模型组比较,药物组小鼠LDH、CK-MB和cTnI显著降低(P0.05)。与正常组比较,模型组小鼠心脏Ly6G+和F4/80+阳性细胞表达显著升高(P0.05);与模型组比较,药物组小鼠心脏Ly6G+和F4/80+阳性细胞显著降低,差异有统计学意义(P0.05)。与正常组相比,模型组小鼠血清IL-1、IL-6、IL-18和TNF-α表达明显升高(P0.05);而与模型组相比,药物组小鼠清IL-1、IL-6、IL-18和TNF-α表达显著降低(P0.05)。结论:消退素E1可显著降低循环和心脏炎症,改善内毒素血症引起的心肌损伤。     

Ghrelin对脓毒症小鼠肺脏炎症及JAK/STAT通路的影响

目的 通过观察生长素释放肽(ghrelin)对脓毒症小鼠肺组织炎症反应、肺组织janus激酶/信号转导通路和转录激活因子mRNA、STAT3蛋白及肺组织炎细胞因子肿瘤细胞α(TNF-α)、IL-6的表达水平的影响,探讨ghrelin在脓毒症炎症反应中的调节作用及可能的分子机制.方法 选用腹腔注射脂多糖的方法制作小鼠脓毒性模型:选取雌性小鼠54只,随机分为对照组、模型组及ghrelin干预组,对照组经腹腔注射等量生理盐水;模型组经腹腔内注射脂多糖(6 mg/kg);干预组先经腹腔注射ghrelin(200 μg/kg),30 min后再经腹腔注射脂多糖(6 mg/kg);各组分别于3、9、18h随机处死小鼠各6只,光镜下观察肺组织炎症改变;反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检查肺组织STAT3mRNA的基因转录水平;酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定肺组织STAT3、TNF-α、IL-6的表达量.结果 Ghrelin可抑制肺组织STAT3mRNA基因转录活性,从而降低STAT3蛋白表达、减少炎症因子TNF-α、IL-6的分泌(P值均＜0.05);改善脓毒症小鼠肺组织病理结构损伤(充血、水肿、炎症细胞浸润).结论 ghrelin可减轻脓毒症小鼠肺脏炎症反应,其作用机制可能与抑制了janus激酶/信号转导和转录激活因子(JAK/STAT通路)、下调TNF-α和IL-6的表达有关.     

Toll样受体4激动剂LPS腹腔注射对大鼠心肌缺血再灌注损伤的预防作用及其作用机制

目的 探讨Toll样受体4(TLR4)激动剂LPS腹腔注射对大鼠心肌缺血再灌注损伤（MIRI）的预防作用及其作用机制。方法 将60只大鼠根据随机数字表法分为LPS干预组（0.1 mg/kg、0.5 mg/kg、1 mg/kg,均为小剂量）、维拉帕米干预组、模型组、假手术组,每组15只。构建MIRI模型前7 d, LPS干预组给予0.1 mg/kg、0.5 mg/kg、1 mg/kg LPS腹腔注射,维拉帕米干预组给予2.5%维拉帕米（2 mg/kg）腹腔注射,假手术组与模型组给予等容量生理盐水腹腔注射;均每日1次。然后,除假手术组外,其余组大鼠进行缺血再灌注处理。处理后72 h,采用超声检测各组大鼠心功能,苏木精—伊红（HE）染色观察各组大鼠心肌组织病理学变化,2,3,5-氯化三苯基四氮唑（TTC）染色测算各组大鼠心肌梗死面积;采用Western blotting法检测大鼠心肌组织FoxO3a、pFoxO3aS253、Beclin-1及LC蛋白。结果 与假手术组比较,模型组大鼠左心室射血分数（LVEF）、短轴缩短率（LVFS）减小（P均<0.05）;心肌损伤严重,心肌梗死面积百分...     

丁苯酞和TLR4抑制剂预处理对冠状动脉微栓塞大鼠心肌损伤的改善作用及其机制

目的 探讨丁苯酞(NBP)联合Toll样受体4(TLR4)抑制剂预处理对冠状动脉微栓塞大鼠心肌损伤的改善作用及机制.方法 将32只SD大鼠按随机数字表法分为NBP+TAK-242组、NBP组、CME组、Sham组,每组8只.NBP+TAK-242组CME术前予NBP 80 mg/kg连续灌胃7 d,CME术前30 min按2 mg/kg尾静脉注射0.5 mg/mL的TLR4抑制剂TAK-242;NBP组CME术前予NBP 80 mg/kg连续灌胃7 d;其余各组同法注射4 mL/kg的生理盐水.然后,NBP+TAK-242组、NBP组、CME组左心室注入直径42μm微栓塞球混悬液0.1 mL,Sham组注射0.1 mL生理盐水.CME术后6 h,检测各组大鼠心功能指标,苏木精—伊红染色(HE)及苏木精—碱性品红苦味酸染色(HBFP)观察心肌组织病理改变;RT-PCR检测心肌组织TLR4 mRNA,Western blotting法检测心肌组织TLR4通路相关蛋白(TLR4、myD88、NF-κB)及炎性因子(IL-1β、TNF-α蛋白).结果 与Sham组相比,CME组大鼠心功能射血分数(LVEF)和短轴缩短率(FS)降低(P均<0.01),左心室收缩末期内径(LVEDs)增加(P<0.01);HE染色可见明显白细胞浸润,心肌微梗死面积增加(P<0.01);心肌TLR4 mRNA相对表达量升高(P<0.01);心肌TLR4通路相关蛋白及炎性因子相对表达量升高(P均<0.05).与CME组相比,NBP组及NBP+TAK-242组LVEF、FS升高(P均<0.01),左心室舒张末期内径(LVEDd)、LVEDs降低(P均<0.01);心肌炎性细胞浸润减少,心肌微梗死面积减少(P均<0.01);TLR4 mRNA相对表达量降低(P<0.01);心肌TLR4通路相关蛋白及炎性因子相对表达量均降低(P均<0.05).与NBP组相比,NBP+TAK-242组LVEF、FS升高(P<0.05);心肌炎性细胞浸润较少,心肌微梗死面积减少(P<0.01);心肌TLR4、MyD88、IL-1β、TNF-α蛋白相对表达量进一步降低(P均<0.05).结论 NBP和TLR4抑制剂预处理可改善冠状动脉微栓塞大鼠的心肌损伤,预处理效果优于单用NBP,其作用机制可能与抑制LR4/myD88/NF-κB信号通路及炎性因子有关.     

重组日本血吸虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂对小鼠急性肝衰竭相关急性肾损伤的保护作用

目的 探究重组日本血吸虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂（rSj-Cys）对急性肝衰竭所致急性肾损伤的保护作用及其机制，为急性肾损伤临床治疗提供科学依据。方法 将24只雄性C57BL/6J小鼠（6～8周龄）随机分为正常对照组、rSj-Cys对照组、脂多糖（LPS）-D-氨基半乳糖（D-GaIN）模型组和LPS/D-GaIN+rSj-Cys治疗组，每组6只小鼠。LPS/D-GaIN组和LPS/D-GaIN+rSj-Cys组小鼠均腹腔注射LPS(10μg/kg)和D-GaIN(700 mg/kg)造模；造模后30 min,LPS/D-GaIN+rSj-Cys组及rSj-Cys对照组小鼠均腹腔注射rSj-Cys(1.25 mg/kg)，正常对照组小鼠注射等体积PBS。造模6 h后，处死各组小鼠，收集小鼠血清及肾组织，检测血清肌酐（Cr）、尿素氮（BUN）含量。苏木精-伊红（HE）染色观察各组小鼠肾脏组织病理形态，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测小鼠血清炎性因子肿瘤坏死因子（TNF）-α和白细胞介素（IL）-6表达，采用免疫组化法检测肾组织炎性因子和焦亡相关蛋白表达水平，采用免疫印迹法检测肾组织焦亡...     

Calpain在脓毒症伴高糖血症小鼠心肌TNF-α mRNA表达以及心功能障碍中的作用

目的探讨calpain对脓毒症伴高糖血症小鼠心肌TNF-α mRNA表达的影响及其在心功能障碍中的作用。方法采用链脲佐菌素（STZ,150mg/kg）腹腔注射进行高糖血症造模,高糖血症小鼠或正常小鼠一周后腹腔内注射脂多糖（lipopolysaccharide,4mg/kg）制备脓毒症伴高糖血症模型,用荧光底物检测心肌组织中calpain的活性,Real-time PCR检测心肌TNF-αmRNA的表达,Lange-ndoff灌注装置评价小鼠心功能。结果在脓毒症小鼠中,心肌组织calpain活性和TNF-αmRNA的表达增高,给予calpain抑制剂calpain inhibitor-Ш或PD150606可抑制TNF-αmRNA的表达。与脓毒症小鼠相比,脓毒症伴高糖血症小鼠中心肌calpain活性增高,TNF-αmRNA表达增加,心功能收缩和舒张功能受损更为严重。结论在脓毒症伴高糖血症小鼠中,心肌calpain活性增高,通过调控心肌TNF-αmRNA的表达,从而导致心功能障碍。     

重组人脑利钠肽对阿霉素小鼠急性心肌损伤时氧化应激和炎症因子的影响

目的探讨重组人脑利钠肽对阿霉素所致小鼠急性心肌损伤时氧化应激水平和炎症因子表达的影响。方法将50只昆明小鼠随机分为正常对照组(10只)、阿霉素组(20只)和rhBNP治疗组(20只)。正常对照组不做任何处理;阿霉素组单次腹腔注射阿霉素15mg/kg;rhBNP治疗组单次腹腔注射阿霉素15mg/kg,每间隔12h给予新活素注射液50μg/kg。观察48h后小鼠心肌组织中超氧化物歧化酶(SOD)、白细胞介素6(IL-6)mRNA表达,以及肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)、血清SOD、丙二醛(MDA)和IL-6水平变化。结果阿霉素处理后小鼠产生急性心肌损伤表现,心肌酶学指标(CK-MB、LDH)升高(P0.05)。与阿霉素组相比,rhBNP治疗组的肌酶学指标(CK-MB、LDH)降低,心肌组织中SODmRNA表达升高,IL-6mRNA表达降低,血清SOD活性升高,MDA含量降低,IL-6水平降低,差异均有统计学意义(P0.05)。结论 rhBNP注射液能够通过提高抗氧化酶活性,降低脂质过氧化,减轻炎症因子,从而减轻阿霉素所致的小鼠急性心肌损伤。     

鞣花酸调控NLRP3/Caspase-1信号通路改善脂多糖诱导的小鼠肠道炎症

目的 探讨鞣花酸(ellagic acid, EA)对脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导的小鼠肠道炎症的治疗作用和相关机制。方法 通过随机数字法将18只雄性C57BL/6小鼠随机分为三组：对照组(CON)、LPS组和LPS-EA组每组6只。LPS组和LPS-EA组小鼠腹腔注射LPS(4 mg/kg),CON组注射等量生理盐水。腹腔注射后12 h, LPS-EA组连续7 d以EA(20 mg/kg)灌胃，CON组和LPS组以等量DMSO灌胃。第7天，测量各组小鼠空腹体质量，在灌胃2 h后，对各组小鼠实施安乐死，取血并取出结肠组织。HE染色光学显微镜下观察结肠组织病理变化。ELISA法测定小鼠血清IL-1β、IL-18水平，Western blotting法测定结肠组织中ZO-1、Occludin、NLRP3、Caspase-1蛋白表达水平。结果 与CON组相比，LPS组小鼠结肠ZO-1、Occludin蛋白表达水平显著降低，血清IL-1β、IL-18水平及结肠组织中的NLRP3、Caspase-1蛋白表达水平显著升高。与LPS组相比，EA上调ZO-1、Occlu...     

芍药苷干预对脓毒症大鼠心肌损伤的影响

目的研究芍药苷干预对脓毒症大鼠心肌损伤的影响。方法采用随机数字表法将SD大鼠分为4组, 每组10只。(1)对照组:大鼠腹腔注射1.4 ml生理盐水;(2)二甲基亚砜组:大鼠腹腔注射5%二甲基亚砜溶液1.4 ml;(3)脓毒症模型组:大鼠腹腔注射1.4 ml生理盐水, 1 h后腹腔注射0.1 ml(5 mg/kg)脂糖造模;(4)芍药苷干预组:大鼠腹腔注射1.4 ml芍药苷(70 mg/kg), 1 h后腹腔注射0.1 ml(5 mg/kg)脂多糖造模。24 h后处死4组大鼠。酶联免疫吸附测定(ELISA)法测4组大鼠血清心肌肌钙蛋白I(cTnI)及心肌组织中肿瘤坏死因子α(TNFα)、白细胞介素(IL)-6、IL-1β、趋化因子C-X-C基序配体1(CXCL1)、趋化因子C-X-C基序配体2(CXCL2)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)水平, 伊文思蓝法测4组大鼠心肌组织中伊文思蓝含量;实时荧光定量聚合酶链式反应法测4组大鼠心肌组织中TNFα、IL-6、IL-1β、CXCL1、CXCL2、VCAM-1mRNA表达;Western-Blot法测血管内皮钙黏蛋白、丝裂原活化蛋白激酶p...     

1-磷酸鞘胺醇受体3参与巨噬细胞迁移及脓毒症诱导的心肌损伤

目的探讨巨噬细胞中1-磷酸鞘胺醇受体(sphingosine 1-phosphate receptor,S1PR)的表达及其作用,观察干预S1PR3(S1P3)对脂多糖诱导的心肌损伤的影响。方法传代培养小鼠Ana-1巨噬细胞,给予脂多糖(lipopolysaccharide,LPS,100 ng/ml)刺激或S1P3特异性抑制剂CAY-10444(10μmol/L)干预,细胞随机分为对照组、LPS组、CAY-10444组、CAY-10444预处理2h+LPS组,Transwell小室观测巨噬细胞迁移,蛋白免疫印迹检测巨噬细胞S1PR的表达,并检测p-Akt/Akt蛋白水平。在体实验,6~8周龄雄性C57/B6小鼠,随机分为对照组、LPS组、CAY-10444组、CAY-10444干预+LPS组,每组12只,LPS(10 mg/kg)腹腔注射,或CAY-10444 1 mg/kg于LPS诱导后30 min腹腔注射干预,24 h后取心脏组织HE染色观察病理改变,免疫组化染色观察巨噬细胞浸润程度以及炎症因子的表达情况,实时荧光定量PCR检测心肌损伤标记分子BNP、巨噬细胞表面分子F4/80、炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6的mRNA水平。结果与对照组比较,LPS诱导巨噬细胞大量迁移S1P3蛋白表达增加(P0.01),p-Akt Ser473/Akt表达上调(P0.01);与LPS组相比,S1P3抑制剂CAY-10444干预后再给予LPS刺激,巨噬细胞迁移被抑制(P0.01),p-Akt Ser473/Akt表达也降低(P0.01);在体实验,LPS诱导小鼠后BNP mRNA水平明显上调(P0.01),同时F4/80以及炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6的mRNA水平上调(P0.01),HE染色可见心肌损伤及炎细胞浸润,免疫组化染色法显示F4/80及炎症因子的大量阳性表达(P0.01);使用S1P3抑制剂后,与LPS组比较,心肌损伤减轻免疫组化中巨噬细胞减少(P0.01),炎症因子表达降低(P0.01),BNP mRNA水平降低(P0.01),F4/80以及TNF-α、IL-1β、IL-6的mRNA水平也明显降低(P0.01)。结论抑制巨噬细胞S1P3表达可抑制巨噬细胞的迁移并提示p-Akt/Akt与了这一过程,此外,S1P3抑制剂的干预可有效减轻LPS诱导的心肌损伤。     

还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶在脂多糖诱导的小鼠急性心肌损伤组织中的表达及意义

目的探讨还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶的非吞噬细胞氧化酶(Nox)家族在脂多糖(LPS)诱导的小鼠急性心肌损伤组织中的表达及意义。方法选取8~10周龄无特定病原体C57/BL6雄性小鼠30只,随机分为对照组和LPS组,每组15只。LPS组小鼠通过腹腔注射大剂量LPS(10 mg/kg)诱导急性心肌损伤模型,对照组腹腔注射等量生理盐水,观察6 h后取材,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测Nox、B细胞淋巴瘤/白血病蛋白-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸天门冬氨酸特异性蛋白酶3(Caspase 3)基因表达,Western blotting检测Nox 2、Nox 4、Bax、Bcl-2和Caspase 3蛋白表达,免疫组织化学法检测4羟基壬烯醛(4-HNE)表达,末端脱氧核糖核酸转移酶(Td T)介导的脱氧尿苷三磷酸(dUTP)切口末端标记技术(TUNEL)法检测心肌组织细胞凋亡,比较两组结果差异。使用SPSS 13.0统计软件对数据进行分析,两组比较采用t检验。结果相比对照组,LPS组小鼠心肌Nox 2、Nox 4、Bax基因和蛋白以及Caspase 3蛋白表达水平明显升高,Bcl-2基因和蛋白表达水平明显降低,差异具有统计学意义(P0.05)。免疫组织化学检测结果表明相比对照组,LPS组心肌组织4-HNE表达明显增加,差异具有统计学意义(P0.05)。TUNEL检测结果表明相比对照组,LPS组心肌组织心肌凋亡细胞明显增加,差异具有统计学意义(P0.05)。结论 NADPH氧化酶通过调控氧化应激和细胞凋亡参与急性心肌损伤的发生发展。     

藏红花醛对脂多糖诱导的脓毒症相关肝损伤小鼠模型的作用及其机制

目的 探讨藏红花醛对脂多糖（LPS）诱导的脓毒症相关肝损伤（SRLI）小鼠模型的保护作用及其机制。方法 采用简单随机分组法将32只实验用C57BL/6雄性小鼠分为对照组、单药组、模型组和治疗组,每组各8只。单药组和治疗组腹腔注射藏红花醛（60 mg/kg）预处理7天,模型组和治疗组腹腔注射LPS(10 mg/kg)诱导急性肝损伤。检测各组小鼠血清ALT、AST活性,HE染色观察肝组织切片标本,免疫组化分析信号通路下游蛋白血红素加氧酶-1(HO-1)的表达差异,TUNEL法分析肝细胞凋亡情况,Western Blot法分析肝组织总蛋白[核因子NF-E2相关因子2(Nrf2)、HO-1]表达差异。采用藏红花醛（100μmol/L）预处理人类肝细胞系L02细胞,通过LPS 100 ng/mL诱导急性肝细胞损伤,DCFH-DA荧光标记氧自由基。结果 藏红花醛预处理后,治疗组小鼠ALT、AST明显低于模型组（P值均<0.01）,治疗组小鼠肝脏维持了较为完整的假小叶结构且坏死面积更小。治疗组小鼠经藏红花醛+LPS处理后肝组织Nrf2、HO-1表达水平相较于模型组明显升高（P值均<0.0...     

内质网应激相关蛋白在阿霉素诱导的急性心肌损伤中的表达及意义

目的探讨内质网应激(ERS)相关葡萄糖调节蛋白78(GRP78)和增强子结合蛋白环磷酸腺苷反应元件结合转录因子同源蛋白(CHOP)在阿霉素诱导的急性心肌损伤中的表达及意义。方法将8~10周雄性野生型C57BL/6J小鼠随机分为对照组与阿霉素组,每组20只,阿霉素组小鼠腹腔注射大剂量阿霉素(20mg/kg)诱导急性心肌损伤模型,对照组小鼠给予腹腔注射等量生理盐水。检测2组小鼠LVEF以及左心室短轴缩短率(LVFS)等心功能指标,记录体质量、心质量,心肌组织行苏木精-伊红染色。采用Real time-PCR和Western blotting法检测小鼠心肌组织GRP78、CHOP、Bax及Bcl-2mRNA和蛋白表达。结果与对照组相比,阿霉素组小鼠体质量、心脏质量、LVEF及LVFS明显降低,差异有统计学意义[(19.92±0.80)g vs(24.34±1.29)g,(96.58±8.37)mg vs(122.37±6.72)mg,(68.67±3.39)%vs(84.20±2.91)%,(27.10±1.24)%vs(39.96±3.53)%,P0.01]。组织病理结果显示阿霉素组小鼠心肌细胞排列紊乱,细胞质空泡化,心肌纤维扭曲,断裂。与对照组比较,阿霉素组小鼠心肌组织中GRP78、CHOP及Bax表达明显上调(P0.05),Bcl-2表达明显降低(P0.05),Bax/Bcl-2显著升高(P0.05)。结论 ERS可能通过调控心肌细胞凋亡,参与阿霉素诱导的急性心肌损伤过程。     

白藜芦醇联合姜黄素腹腔预注射小鼠脓毒症诱发过程中的肺损伤情况观察

目的 观察白藜芦醇联合姜黄素腹腔预注射小鼠脓毒症诱发过程中的肺损伤情况，并探讨其作用机制。方法 90只雄性C57BL/6小鼠随机分为1～5组，每组18只。1～3组小鼠分别腹腔注射100 mg/kg姜黄素、40 mg/kg白藜芦醇、100 mg/kg姜黄素+40 mg/kg白藜芦醇，然后用盲肠结扎穿刺法（CLP）诱发脓毒症，4组小鼠腹腔注射等量0.9%生理盐水后CLP建立脓毒症模型，5组仅腹腔注射等量0.9%生理盐水。记录各组小鼠存活情况。第5天处死各组小鼠取肺组织，计算肺组织湿/干重（W/D），观察肺组织损伤情况，采用ELISA法检测各组肺组织中促炎因子（TNF-α、IL-1β、IL-6）与抗炎因子（IL-10）的表达情况，采用WESTERN Blotting法检测各组各组肺组织中促凋亡蛋白（Bax、cleaved caspase-3、cleaved PARP）和抗凋亡蛋白（Bcl-2）的表达情况，采用双荧光素酶报告基因测算各组肺组织中NF-κB通路的激活情况。结果 第5天时1、2、3、4、5组小鼠分别存活4、5、13、1、18只。(1)与5组比较，第5天时4组小鼠存活率低，肺组织W/...     

人参二醇组皂苷改善内毒素诱导急性肾损伤小鼠肾功能的机制

目的探讨人参二醇组皂苷(PDS)对内毒素(LPS)诱导的急性肾损伤(AKI)小鼠肾功能的保护作用及机制。方法选择C57BL/6小鼠随机分成3组(n=8),分别为对照组(control,腹腔注射0.9%氯化钠),LPS组(腹腔注射LPS 10 mg/kg),PDS+LPS组(先腹腔注射PDS 25 mg/kg,1 h后注射LPS 10 mg/kg)。注射LPS 12 h后麻醉下处死小鼠,取肾脏组织冻存或固定,备蛋白表达与形态学观察用,并收集血液用于生化检测。利用免疫组化方法观察形态学变化。利用免疫印迹方法测定肾脏相关蛋白含量及表达情况。结果 LPS组小鼠肾组织凋亡严重,肝肾功能明显异常,而PDS+LPS组肾脏组织凋亡及肝肾功能损伤较LPS组轻(P<0.05)。LPS组一氧化氮合成酶(iNOS)蛋白表达水平和NO含量与对照组比较明显增加(P<0.05)。而PDS+LPS组iNOS蛋白表达水平和NO含量均显著低于LPS组(P<0.05)。LPS组肾脏丙二醛(MDA)含量与对照组比较明显增高(P<0.05),超氧化物歧化酶(SOD)含量和Mn-SOD的蛋白表达水平都明显低于对照组(P<0.01,P<0.05),而PDS+LPS组MDA含量较LPS组低(P<0.05),SOD含量和Mn-SOD的蛋白表达水平较LPS组高(P<0.05)。结论 PDS有逆转LPS诱导的AKI小鼠肾功能的作用,其保护作用机制为抑制肾脏iNOS表达,减少NO产生与释放,抑制MDA的产生和上调SOD的表达而起到抗氧化应激的作用。