肿瘤坏死因子与肿瘤治疗

肿瘤坏死因子与肿瘤治疗杨成徐宁施利国（滨州医学院解剖学教研室，滨州市２５６６０３）肿瘤坏死因子（ｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒ，ＴＮＦ）能特异性杀伤肿瘤细胞而对正常细胞无毒性作用，因而受到人们的普遍重视。近年来，随着对ＴＮＦ基础和临床研究的深...     

肿瘤坏死因子与肿瘤基因治疗

<正>肿瘤坏死因子(Tumor Necrosis Factor,TNF)是迄今发现的抗瘤作用最强的细胞因子,体内外实验均显示了强大的抗肿瘤作用。因此,TNF的研究备受人们的关注。现重点介绍近年来有关TNFα结构与功能关系的研究进展及TNFα在肿瘤基因治疗中的应用情况。     

肿瘤坏死因子对移植性胃癌的抗瘤作用

肿瘤坏死因子(TNF)是一种具有非特异性杀伤肿瘤细胞作用,且又不损害正常细胞的可溶性细胞因子。为了摸索重组人肿瘤坏死因子在体内抗瘤活性,为临床抗肿瘤治疗提供实验基础,我们于1992～1994年研究了国产重组肿瘤坏死因子(rhTNF)对小鼠移植性胃癌的抗瘤效果,现报告如下。 材料和方法 一、试剂 rhTNF,6×(10~6)u/mg蛋白,购自中国军事医学科学院。 二、动物 本校实验动物中心提供,6～8周龄,雌性NIH小鼠,共18只;接种肿瘤后随机分为两组,用药组为11只,对照组为7只。     

肿瘤坏死因子αDNA疫苗的制备及其对肿瘤的治疗作用

目的观察pcTNFα真核表达质粒对小鼠Lewis肺癌瘤局部注射的治疗效果及相关免疫机理。方法用双酶切的方法由pBluescdpt／TNFα载体上切下TNFα基因片段，构建真核表达载体，转染COS及Hda细胞，并对小鼠Lewis瘤体内注射pcTNFα重组质粒，观察疗效。结果构建了携带TNFα的重整pcTNFα真核表达质粒，肿瘤局部注射pcTNFα组肿瘤生长缓慢，存活期比对照组明显延长。结论pcTNFα真核表达质粒对小鼠Lewis瘤局部注射，有一定的抗肿瘤效应。     

局部瘤体内注射肿瘤坏死因子治疗晚期恶性肿瘤近期疗效报告

局部瘤体内注射肿瘤坏死因子治疗晚期恶性肿瘤近期疗效报告攀枝花市中心医院（６１７０６７）毛光菊近年来国内外不少文献报道肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）治疗各种类型的中晚期肿瘤，特别是有关结肠癌、胰腺癌、胃癌、肝癌治疗方面的报告较多，也有瘤体内注射的报道，缓解率达...     

肿瘤坏死因子促中瘤生长作用

肿瘤坏死因子(TUmor necrosis factor,TNF)是一种由活化的单核巨噬细胞等产生的细胞因子.它对肿瘤细胞的杀伤作用已被人们所熟知,但现在越来越多的研究表明,TNF亦可诱导肿瘤细胞异常增殖和促进肿瘤细胞浸润与转移.本文对其促进肿瘤生长及其相关机制和影响因素做一综述.     

瘤体注射IL-2重组腺病毒基因治疗小鼠胶质母细胞瘤及其免疫机制的初步探讨

目的：观察瘤体直接注射IL－2重组腺病毒对G422皮下荷瘤的治疗作用,对体内基因转染效率及治疗的免疫机制进行初步分析。方法：将LacZ,IL-2重组腺病毒直接注射到皮下接种的G422胶质母细胞瘤瘤体,X－gal染色检测基因转染的效率,观察肿瘤的大小和荷瘤小鼠的存活期,采用4h^51Cr释放法检测荷瘤小鼠脾细胞诱导的NK、LAK、CTL的杀伤活性,对治疗后的肿瘤进行常规病理分析。结果：采用瘤体注射腺病毒具有较高的体内基因转染效率,瘤体注射IL－2重组腺病毒对皮下建立的胶质母细胞瘤有一定的治疗作用,肿瘤的生长受抑制,荷瘤小鼠的存活期显延长,但没有长期存活小鼠。IL－2基因治疗组小鼠脾细胞的LAK、CTL杀伤活性显增强,肿瘤局部出现更多的坏死和炎性浸润细胞。结论：采用瘤体直接注射IL－2重组腺病毒对胶质母细胞瘤皮下荷瘤有治疗,其机制可能是增强了宿主的局部和全身抗肿瘤免疫反应。     

严重体表烫伤早期TNF对骨骼肌蛋白质分解代谢影响的实验研究

为探讨烧伤后骨骼肌蛋白质解分解代谢的变化规律及其可能机理，以３７％体积表面各Ⅲ度烫伤大鼠为模型，于伤后１周内动态观察了创伤局部与远隔部位骨骼肌蛋白质分解代谢速率与ＴＮＦ含量的动态变化。     

携带人内皮抑素基因的肿瘤特异性增殖型腺病毒对卵巢癌的体内治疗作用

目的:探讨携带人内皮抑素基因的肿瘤特异性增殖型腺病毒CX-hE对卵巢癌裸鼠瘤株OV-90的抑制作用.方法:BALB/c裸鼠右背部皮下接种OV-90细胞成瘤.(1)18只荷瘤裸鼠随机分为PBS对照组、CX-hE治疗组和Ad-hE治疗组,皮下种植瘤内直接注射.各药物隔日注射1次,共注射5次.取肝脏组织行常规病理检查.(2)另15只荷瘤裸鼠随机分3组,分别瘤内单次注射CX-hE、Ad-hE和ONYX-015病毒纯化液.注射后第1、3、7天球后静脉取血ELISA检测人内皮抑素浓度,肿瘤组织行Hexon单克隆抗体免疫组化染色及微血管免疫组化染色.结果:(1)CX-hE组肿瘤生长速度较缓慢,开始治疗后2周肿瘤体积已明显小于Ad-hE组(P＜0.05)和PBS组(P＜0.01).常规H-E染色显示CX-hE组肿瘤组织内见散在坏死灶;肝脏无明显病理变化.(2)瘤内单次注射各药物后,裸鼠血清中均可检测到内皮抑素蛋白表达,随时间延长表达量逐渐升高.CX-hE组人内皮抑素浓度始终高于Ad-hE组(P＜0.01),增长速度较快.CX-hE单次瘤内注射2周,肿瘤Hexon免疫组化染色可见大量密集分布的阳性肿瘤细胞.CX-hE组肿瘤微血管免疫组化可见残余的癌巢内尚有散在分布的阳性血管内皮细胞.结论:瘤内直接注射的治疗方法可使瘤生长速度减慢,CX-hE治疗效果优于Ad-hE,未观察到各治疗组肿瘤生长停止或完全消退的理想治疗效果.     

Dynamic study of TNF effects on skeletal muscle proteolysis in early stage of severe scalding in rats

ＤｙｎａｍｉｃｓｔｕｄｙｏｆＴＮＦｅｆｆｅｃｔｓｏｎｓｋｅｌｅｔａｌｍｕｓｃｌｅｐｒｏｔｅｏｌｙｓｉｓｉｎｅａｒｌｙｓｔａｇｅｏｆｓｅｖｅｒｅｓｃａｌｄｉｎｇｉｎｒａｔｓ￥ＬｉＬｉｎ（李林）；ＤｏｎｇＹａｎｌｉｎ（董燕麟）；ＹａｎｇＣｈｕｎ（杨春）；...     

肿瘤坏死因子突变体TNF60的研究

目的：寻找具有更强抗肿瘤活性及增强或抑制ＴＮＦα生物学活性的ＴＮＦα突变蛋白。方法和结果：应用ＰＣＲ技术对ｒｈＴＮＦα进行大片段缺失突变，构建了ｒｈＴＮＦα分子Ｎ端缺失５９个氨基酸的突变体ＴＮＦ６０的编码基因，插入ｐＢＶ２２０载体并在蛋白酶缺陷的大肠杆菌ＳＧ１１１７中获得较高表达，表达量为２０．４％。重组蛋白经变性、复性和纯化，纯度〉９７％。ＴＮＦ０对Ｌ９２９，Ｈｅｐ－２，Ｕ９３７三株细胞均丧失了     

腺病毒介导的p53对胆管癌细胞生长的抑制作用

目的 研究Ｐ５３基因对胆癌细胞的作用。方法 将重组体腺病毒Ｐ５３转移到人胆管癌细胞ＱＢＣ９３９,用ＲＴ－ＰＣＲ、克隆形成实验、流式细胞仪、ＤＮＡ片段化分析等方法对Ｐ５３基因的表达、细胞的生长抑制及机制进行分析。结果 用Ａｄ－ＬａｃＺ进行重组体腺病毒转导致率的检测,发现当ＭＯＩ为１００以上时,重组体腺病毒可使９０％以上的培养的人胆管癌ＱＢＣ９３９,细胞被传导,用ＲＴ－ＰＣＲ方法检测,在胆管癌ＱＢＣ９     

腺病毒介导的p16对胆管癌细胞的生长抑制作用

目的 研究p16基因对胆管癌细胞的作用。方法 将重组体腺病毒p16转移到人胆管癌细胞QBC939,对p16基因的表达、细胞的生长抑制及机制进行分析。结果 用Ad-LacZ进行重组体腺病毒转导效率的检测,发现当MOI为100以上时,重组体朱病毒可使90%以上的培养的人胆管癌QBC939细胞被转导,用RT-PCR方法检测,在胆管癌QTBC939细胞系中p16呈低表达,重组体腺病毒能介导外源基因p16在胆管癌QBC939细胞系中高效表达,重组体朱病毒介导的p16在QBC939细胞中表达,能抑制QBC939细胞的生长和集落形成。流式细胞计数和细胞DNALadder,证实p16能诱导QBC939细胞发生凋亡并导致其发生G1期阻滞。结论 p16基因通过诱导肿瘤细胞凋亡及G1期阻滞在肿瘤的基因治疗方面发挥作用。     

重组人肿瘤坏死因子对人结肠癌SW－480细胞在体外的杀伤作用研究

文中报道了重组人肿瘤坏死因子（ｒｈＴＮＦ）对人结肠癌细胞株ＳＷ－４８０的克隆抑制和细胞毒作用。改良噻唑兰（ＭＴＴ）法表明ＴＮＦ在６００００ｕ／ｍｌ时才有明显的细胞毒作用说明ＳＷ－４８０对ＴＮＦ低度敏感，而且无剂量依赖关系．但克隆抑制试验表明１０ｕ／ｍｌ就可明显抑制ＳＷ－４８０集落的生长，并有剂量依赖性，且在剂量１５０ｕ／ｍｌ以上时抑制作用随时间而增强．３Ｈ－ＴｄＲ掺入测定的ＴＮＦ抑制ＳＷ－４８０细胞ＤＮＡ合成和ＭＴＴ法测定的细胞毒曲线一致说明ＴＮＦ对ＳＷ－４８０的主要作用是抑制ＤＮＡ合成．ＴＮＦ对ＳＷ－４８０抑制后超微结构变化：最初是胞膜出现微孔，然后细胞内线粒体变性，溶解，核固缩，溶解，最后细胞溶解．这些结果与ＭＴＴ法细胞毒试验及３Ｈ－ＴｄＲ掺入试验相结合说明ＴＮＦ对ＳＷ－４８０杀伤作用主要针对细胞核内外染色体的ＤＮＡ合成上．     

地塞米松对家兔内毒素休克的防治作用及其与TNF的关系

目的　探讨预防性或治疗性给予地塞米松对家兔内毒素休克的防治作用及其与肿瘤坏死因子 (TNF)的关系。方法　5 3只健康家兔分为对照组 (n =13 ) ,内毒素休克组 (n =16) ,地塞米松预防组 (n =12 )及治疗组 (n =12 )。地塞米松预防组和治疗组动物于脂多糖 (LPS)输注前 3 0min或输注后 2 0min给予地塞米松 5mg/kg体重 ,观察MABP、动物死亡率、循环血中TNF水平及其它指标的变化。结果　与内毒素休克组相比 ,地塞米松预防和治疗组动物平均动脉压 (MABP)有明显上升 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1) ,死亡率下降 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1) ,循环血中TNF水平的升高受到明显的抑制 (P <0 .0 1)。同时 ,地塞米松预防和治疗能使内毒素休克动物血浆胰高血糖素、葡萄糖、乳酸和 β 葡萄糖醛酸酶 (β G)的升高得到明显改善 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1)。体外实验亦表明地塞米松预防能完全抑制肝Kupffer细胞释放TNF。结论　地塞米松对内毒素休克的防治效果与其直接抑制LPS诱导TNF的产生有密切关系。     

Intratracheal administration of recombinant adenovirus containing IL-18 gene in treatment of experimental metastatic lung carcinoma

Objective: To study the treatment of experimental metastatic lung carcinoma by intratracheal injection of IL-18 gene recombinant adenovirus. Methods: (1)The mouse IL-18 mRNA was detected by RT-PCR, and the concentration of 1L-18 and associated cytokines in lung lavages and blood were determined by ELISA at different time points after intratracheal injection of IL-18 recombinant adenovirus. (2)The lung metastasis nodes, mouse survival periods and survival rates were evaluated. NK activity and CTL activity were determined by 51Cr 4 h release method. Results: (1)IL-18 mRNA was detectable in lung tissue 6 h after intratracheal use of IL-18 recombinant adenovirus, and the concentration of IL-18 in lung lavage was higher than that in peripheral blood. Neither IL-18 mRNA nor IL-18 was detectable in control group. (2) Intmtmcheal use of IL-18 recombinant adenovirus resulted in increased CTL and NK activity, longer survival time and higher survival rates compared with the control group, showing significant therapeutic effect on experimental lung metastasis. Conclusion: Intratracheal use of adenovirus vector containing IL-18 gene has therapeutic effect on the lung metastasis, denoting that gene therapy of lung diseases could be applied through airway directly with recombinant adenovirus.