川产青牛胆的RAPD分析

目的:为川产青牛胆的物种鉴定和遗传图谱的构建寻找一种新的途径。方法:采用RAPD(Random Amplified Polymorphic DNA,随机扩增多态性DNA)技术对采自4个地区6个居群的32个DNA样品用筛选的15个引物进行扩增,进而进行聚类分析。结果:RAPD能将6个居群的样品明显区分开,居群内的遗传差异小于居群间差异,野生环境的样品遗传分化较大。结论:RAPD技术在分子水平上对青牛胆进行鉴定是一种行之有效的手段,从而为青牛胆物种鉴定、遗传图谱的构建等研究提供分子水平的方法和依据。     

青牛胆属药用植物药理作用研究进展

青牛胆属药用植物药用价值较高,临床应用疗效较好。基于文献调研,分析近年来青牛胆属药用植物国内外药理学研究现状,主要包括抗氧化、抗炎镇痛、抗骨质疏松、抗肿瘤等方面的作用,以期为深入研究该属植物提供参考。     

海南青牛胆挥发油化学成分的研究

海南青牛胆 (ＴｉｎｏｓｐｏｒａｈａｉｎａｎｅｎｓｉｓＨ .Ｓ .ＬｏｅｔＺ .Ｘ .Ｌｉ)系防己科青牛胆属植物 ,为一新种。民间用以治疗关节疼痛和筋骨损伤。主要含有甾酮类、生物碱等化合物。为探讨海南青牛胆中挥发油成分 ,对其藤茎进行了挥发油的研究 ,通过ＧＣ ＭＳ Ｃｏｍｐｕｔｅｒ进行测定分析 ,从中共鉴定出 2 0个化合物。1　材料及样品的制备原材料采集于海南省文昌市龙楼乡 ,经海南师范学院钟义教授鉴定为海南青牛胆 (ＴｉｎｏｓｐｏｒａｈａｉｎａｎｅｎｓｉｓＨ .Ｓ .ＬｏｅｔＺ .Ｘ .Ｌｉ)。取该植物藤茎经切片、干燥 ,粉碎成…     

海南青牛胆非生物碱成分的分离与鉴定(Ⅲ)

目的 研究防己科一个新种——海南青牛胆Tinospora hainanensisH.S.LoetZ.X.Li的化学成分。方法 采用硅胶柱层析分离纯化,通过理化鉴定和波谱分析鉴定其化学结构。结果 从海南青牛胆藤茎中分离出4种非生物碱成分,它们分别鉴定为24-epi-罗汉松甾酮A(24-epi-makisteroneA,Ⅰ)、二十八碳酸(octacosyl acid,Ⅱ)、二十八碳醇(octacosyl alcohol,Ⅲ)和二十六碳醇(hexacosyl alcohol,Ⅳ)。结论 以上4种成分均为首次从该植物中分得,其中化合物Ⅰ、Ⅱ和Ⅳ为首次从青牛胆属植物中得到。     

海南青牛胆抗骨质疏松的药效学研究

目的观察和分析海南青牛胆对维甲酸所致实验性骨质疏松大鼠的防治作用。方法将84只SD雄性大鼠随机分为7组:对照组,模型组,海南青牛胆高、中、低剂量(0.72、0.36、0.18 g/kg)组,仙灵骨葆胶囊组,尼尔雌醇片组。观察海南青牛胆对维甲酸所致实验性骨质疏松大鼠血清生化指标,股骨湿质量、干质量及骨密度的影响。结果 4周后,海南青牛胆可明显增加维甲酸所致实验性骨质疏松大鼠的骨密度以及股骨湿质量、干质量;并能显著升高血清磷水平,降低血清碱性磷酸酶(ALP)活性,与模型组相比有显著差异,并呈剂量依赖性关系。结论海南青牛胆可使维甲酸所致实验性骨质疏松大鼠骨密度增加,改善大鼠的血清生化指标,对于临床预防和治疗骨质疏松症有一定作用。     

青牛胆的生药学研究

目的:对防己科植物青牛胆进行生药学研究。方法:采用性状、显微与薄层鉴别的方法。结果:青牛胆块根横切面、石细胞、草酸钙方晶均可作为其鉴别特征。结论:可为制定药材质量标准、研究和利用药材资源提供理论依据。     

云南青牛胆块根的化学成分研究

目的对云南青牛胆块根的化学成分进行研究。方法用常压硅胶柱色谱、反相色谱、薄层色谱及Sepha-dex LH-20柱色谱法分离,根据理化性质和波谱数据鉴定其结构。结果分离得到11个化合物,分别鉴定为古伦宾(columbin,1)、非洲防己苷C(pal matoside C,2)、去氧黄藤苦素(绿白黄藤素,fibleucin,3)、巴马亭(pal matine,4)、药根碱(jatrorrhizine,5)、非洲防己碱(columbamine,6)、20-hydroxyecdysone(7)、abutasterone(8)、2-deoxy-20-hydroxyecdysone3-O-β-D-glucopyranoside(9)、(+)-lyoniresinol-2α-O-β-D-glucopyranoside(10)和α-D-glucopyrano-syl-(2→1)-α-D-glucopyranoside(11)。结论所有化合物均为首次从云南青牛胆中分离得到。     

武当青牛胆化学成分与抑菌活性的初步研究

 目的 对武当青牛胆[Tinospora sagittata (Oliv.) Gagnep.]的化学成分进行研究,并初步筛选具有抑菌活性的化合物。方法 对青牛胆干燥块根进行渗漉提取,用柱色谱方法（Silica gel, MCI, Rp-8等）对乙酸乙酯部位提取物进行分离纯化,并根据理化性质和光谱数据（MS,1H-NMR,13C-NMR）进行结构鉴定。单体化合物采用比浊法测定最小抑菌浓度(MIC)。结果 从武当青牛胆中分离得到5个化合物,分别鉴定为古伦宾、异古伦宾、药根碱、金果榄苷、巴马汀,其中巴马汀抑菌活性最强,药根碱次之,古伦宾、异古伦宾和金果榄苷最弱。结论 本实验首次以武当道地药材青牛胆为材料进行化学成分分析和单体活性研究,为武当青牛胆的活性成分研究开发提供了理论依据,对于阐明其药理作用的物质基础具有一定的指导意义。     

海南特有种--海南青牛胆的研究进展

从化学成分、药理活性及有效成分的制备三方面对海南青牛胆的研究进展进行综述。     

三种青牛胆植物形态及商品性状鉴定

对金果榄3种主要基原植物青牛胆、云南青牛胆、峨眉青牛胆进行了植物形态及商品性状鉴定。     

三叶青相关序列扩增多态性-聚合酶链式反应体系的建立与优化

目的建立浙江和江西产的三叶青(Tetrastigma hemsleyanum)SRAP-PCR的反应体系和扩增程序。方法应用L9(34)正交设计方法,以三叶青基因组DNA为模板,研究了Mg2+、dNTP、引物和模板DNA 4种PCR反应组分浓度变化对扩增结果的影响,根据梯度PCR仪引物的条带数量及清晰度选择退火温度。结果优化后的25μL反应体系包含:10×PCR buffer2.5μL,2.5mmol/L MgCl2,0.15mmol/Ld NTP,0.15μmol/L引物,1.0U Taq DNA聚合酶,50ng DNA模板。扩增程序的最佳退火温度为51℃。并筛选出8对扩增产物丰富,多态性好的引物。结论正交设计优化的三叶青SRAP反应体系,经过10份样品检验,证明该体系稳定可靠,多态性好,可用于三叶青遗传多样性分析。     

黄花蒿SRAP-PCR反应体系的建立与优化

目的用序列相关扩增多态性(SRAP)这一新的分子标记技术建立稳定可重复的黄花蒿Artemisia annua的SRAP最佳反应体系。方法以黄花蒿DNA为模板,分析了SRAP反应体系中的一些重要参数对PCR扩增的影响。结果建立了稳定可重复的SRAP反应体系;25μL反应体系中,模板DNA为30～105ng,MgCl2为2.0mmol/L,dNTP为0.25mmol/L,Taq酶为1.0U,引物为2.0μmol/L;扩增程序:94℃预变性3min,94℃变性1min,35℃复性1min,72℃延伸1min,5个循环;94℃变性1min,50℃复性1min,72℃延伸1min,35个循环,72℃延伸7min。结论本研究建立的黄花蒿SRAP体系重复性好,稳定性强。     

不同品种郁金的SRAP研究

目的用SRAP技术探讨郁金类药材原植物分类,并为郁金类药材的种质资源提供一定的依据。方法对来源于姜科姜黄属的郁金类药材的9个样品进行了SRAP研究。结果从上、下游各10个引物形成的100个引物组合中筛选出扩增产物条带信号强、重现性好、特征性好的27个引物组合,扩增,得到847条条带,其中多态性条带397条,平均每个引物组合产生14.7条多态性条带。结论SRAP技术可以很好地分析郁金原植物的种间关系。结合形态学资料,将6个郁金品种分为了2个组,一组花序从叶鞘抽出,包括黄丝郁金和黄白丝郁金,黄白丝郁金应为黄丝郁金即姜黄的栽培变种Curcumalonga L.cv.chuanyujin;一组花序从根茎抽出,包括绿丝郁金、白丝郁金、桂郁金和温郁金,其中白丝郁金可能为绿丝郁金即蓬莪术的栽培变种C.phaeocaulis Val.cv.baisi。     

青葙SRAP体系的建立和优化

目的 探讨影响青葙SRAP(sequence-related amplified polymorphism)扩增的各种因素,建立并优化青葙SRAP反应体系,为分子水平鉴定青葙子及其伪品,探讨青葙不同种质问的亲缘关系奠定基础.方法 用CTAB法提取青葙DAN,设计Taq酶浓度(0.02、0.04、0.06 U/μL)、dNTP浓度(0.10、0.20、0.30 mmol/L)、Primer浓度(0.15、0.30、0.45μmol/L)3水平3因素试验和Mg2 浓度(0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0 mmol/L)8水平单因素试验.在25 μL体系中加入模板DNA 20 ng,对体系进行优化,用琼脂糖进行检测.结果 建立了适合青葙的SRAP体系,在25 μL体系中,DNA为20 ng,Taq酶浓度为0.04 U/μL,dNTP浓度为0.30 mmol/L,Primer浓度为0.30 μmol/L,Mg2 浓度为2.5 mmol/L,优化后的体系目标条带增多,且比较稳定,重现性好,得到了较好的扩增效果.结论 本研究建立的反应体系适合青葙SRAP的研究.为从分子水平鉴定青葙子正品与伪品以及鉴定青葙不同种质资源奠定了基础.     

灰毡毛忍冬自然群体遗传多样性的SRAP研究

目的研究灰毡毛忍冬自然群体的遗传多样性。方法以15个不同来源地的野生灰毡毛忍冬及2个花蕾型栽培品种为试材,通过SRAP分析,利用Popgene及Treeconw软件分析处理数据,UPGMA方法聚类,构建亲缘关系系统图。结果通过筛选得到24对SRAP引物,扩增出239条条带,其中210条为多态性条带,多态性条带比率为87.8%;Nei’s多样性指数He为0.239 9,Shannon多样性指数I为0.372 4;从DNA分子水平揭示出灰毡毛忍冬存在着丰富的遗传多样性。遗传相似系数在0.442 3～0.940 2。用UPGMA法得到所有样本的聚类图,可分为两大类群。结论灰毡毛忍冬有着丰富的遗传多样性,SRAP技术可有效运用于灰毡毛忍冬的遗传分析。     

金线莲ISSR反应体系的建立与优化

目的针对台湾金线莲ISSR反应的特点,建立一个稳定性高、重现性好,适合金线莲ISSR遗传差异分析的反应体系。方法确立金线莲ISSR初始反应体系并对引物进行初筛;设定反应体系中各因子的不同浓度并进行PCR扩增,依据稳定性高、重现性好的原则,对该反应体系进行调整与优化,最终建立稳定可靠的ISSR反应体系。结果首次建立了金线莲ISSR反应的最适体系(25μL):1×PCR buffer,2 mmol/L MgCl2,200μmol/L dNTP Mixture,0.2μmol/L引物,1 U Taq酶,DNA模板约20 ng;扩增程序:94℃充分变性7 min,94℃变性30 s,52℃退火45 s,72℃延伸2 min,45个循环后,最后72℃延伸10 min。结论所建立的金线莲ISSR反应体系具有稳定性高、重现性好、标记位点清晰、检测多态性能力强等特点,可以较好地应用于野生金线莲的居群差异研究及经长期组培繁殖后金线莲无菌苗的遗传变异研究。     

明党参遗传多样性的SRAP分子标记

目的:研究明党参的遗传多样性,为明党参种质资源利用提供理论依据.方法:以10个不同居群的明党参为材料,通过SRAP分析,计算各样品间的遗传相似系数,在此基础上采用UPGMA方法进行聚类,构建树状图.结果:从160个引物组合中筛选得到17个多态性引物组合,共检测到363个基因位点,其中多态性位点有314个,平均每个引物组合产生18.47个多态性位点,多态性位点百分率为86.50%,显示了较高的多态性比率;各居群遗传相似系数在0.495 9～0.818 2;根据聚类结果可将10个不同居群的明党参分为两大类.结论:明党参不同居群间具有高度的遗传多样性;不同居群的亲缘关系与其地理分布有一定的相关性.     

广金钱草化学诱变植株表型及SRAP遗传差异

目的:选育优良广金钱草品种(系)。方法:采用迭氮钠(NaN_3),甲基磺酸乙酯(EMS)和秋水仙素最佳剂量对广金钱草种子进行诱变处理,初步筛选出13株表型变异的广金钱草植株,对广金钱草变异植株及对照基因组DNA进行相关序列扩增多态性(SRAP)分析。结果:广金钱草在株高、地茎、分枝状况等方面发生大量变异;10对SRAP引物扩增出多态性条带3 285个,平均每对引物扩增出328.5条带,多态性比例平均为96.45%,广金钱草化学诱变植株遗传相似系数范围0.326~0.476,遗传相似系数较低,表明经化学诱变剂处理后广金钱草在基因组水平上存在真实的遗传差异;相似性差异程度大小顺序为V-13V-7V-6V-11V-10V-12V-9V-8V-4V-5V-3V-2V-1,表明NaN_3在分子水平上对广金钱草的影响比EMS和秋水仙素小;化学诱变处理后广金钱草变异程度高于不同种源地的变异,进一步表明人工诱变育种可以缩短育种年限,提高突变率。结论:该研究揭示了广金钱草化学诱变株表型特异性和遗传多样性,筛选了一些特异资源,为高产优质广金钱草新品种(系)的选育提供重要的科学依据。     

栝楼SRAP引物筛选及遗传多样性分析

目的 分析不同来源栝楼Trichosanthes资源群体的遗传结构和自然亚群间基因漂移分析以及资源的遗传多样性,为栝楼育种奠定基础。方法 从100对相关序列扩增多态性（sequence-related amplified polymorphism,SRAP）引物中筛选出扩增效果好、稳定性高的43对引物对13个来源于3个自然亚群的栝楼资源进行扩增,进行不同亚群间和品种之间的遗传结构和多样性分析。结果 共扩增出691个位点,其中多态性位点百分率达到79.16%,整个群体的多态性信息含量（polymorphic information content,PIC）、观察等位基因数（observing the number of alleles,Na）、有效等位基因数（effective number of alleles,Ne）、香农信息指数（Shannon information index,I）和遗传距离（genetic distance,H）依次为0.495 5、1.791 6、1.374 6、0.359 4和0.231 6,3个自然亚群中其他野生类群的遗传丰富度最高,潜山和合肥自然亚群之...