醋酸铅对大鼠脑细胞凋亡及bcl-2基因表达的影响

目的　探讨醋酸铅 (PbAc)对大鼠脑细胞凋亡的诱发作用及对bcl 2基因表达的影响。方法　SD大鼠腹腔分别注射PbAc 2 5、5 0、10 0mg/kg 5d ,第 6天用流式细胞仪分别测定其大脑皮层、海马和小脑组织的细胞凋亡率和bcl 2基因的表达产物Bcl 2蛋白含量。结果　染铅大鼠大脑皮层、海马、小脑细胞凋亡率 (% ) :2 5mg/kgPbAc组为 5 .80± 0 .87、4.82± 0 .37、4.82± 1.2 3 ,5 0 mg/kg组值高于 2 5mg/kg组 ,10 0mg/kg组值高于 5 0mg/kg组 ,均比对照组 (1.40± 0 .70、2 .0 0± 0 .6 3、1.6 6±0 .49)高 ,差异有显著性 (P <0 .0 1) ;并有剂量 -反应关系 (r值分别为 0 .998、0 .989、0 .997)。染铅大鼠大脑皮层、海马、小脑bcl 2基因表达 (FI指数 ) :2 5mg/kgPbAc组为 0 .6 8± 0 .0 3、0 .6 1± 0 .0 6、0 .6 9± 0 .0 5 ;5 0mg/kg、10 0mg/kg组值均与 2 5mg/kg组接近 ,但均比对照组 (1.0 0± 0 .13、1.0 0±0 .17、1.0 0± 0 .13)降低 ,差异有显著性 (P <0 .0 1) ;并有剂量 -反应关系 (r值分别为 0 .886、0 .787、0 .832 )。大鼠大脑皮层、海马和小脑细胞凋亡率与Bcl 2含量呈负相关 (r值分别为 - 0 .75 0、- 0 .5 0 9、- 0 .6 6 7)。结论　铅可以诱发大鼠脑细胞凋亡 ,其机制可能与脑组织内bcl 2基因表达下调有关     

醋酸铅对大鼠脑细胞凋亡及bcl-2、bax基因表达的影响

目的：探讨醋酸铅对大鼠脑细胞凋亡的诱发作用及对bcl-2,bax基因表达的影响。方法：24只SD大鼠腹腔注射醋酸铅5d,剂量分别为25,50,100mg/kg体重,第6天取其大脑皮层,海马,小脑组织,用流式细胞仪分别测定其细胞凋亡率和bcl-2 bax基因的表达产物Bcl-2蛋白,Bax蛋白。结果：各染铅组大鼠皮层,海马,小脑细胞亡率明显升高,与对照组相比差异具有显著性,并具有良好的剂量－反应关系;bcl-2基因表达（FI指数）明显降低,而bax基因表达则明显增加,与对照组相比差异均具有显著性（P＜0．01）,并具有良好的剂量－反应关系,Bcl-2/Bax明显下降,与对照组相比差异具有显著性,并具有良好的剂量－反应关系,相关分析表明,大鼠大脑皮层,海马和小脑细胞凋亡率与Bcl-2含量呈负相关,而与Bax含量正相关,与Bcl-2/Bax呈负相关。结论：铅可以诱发大鼠脑细胞凋亡,其机制可能与脑组织内bcl-2基因表达下调,bax基因表达上调以及Bcl-2/Bax下降有关。     

醋酸铅对大鼠成骨细胞凋亡影响

成骨细胞（OB）是骨形成细胞，对骨组织的生长发育骨代谢平衡，骨量维持和损伤修复起关键作用。细胞凋亡（Ap）参与机体许多病理生理过程。骨代谢动态平衡不仅是由破骨细胞分化成熟引起的骨降解，也包括成骨细胞凋亡的参与。有报道认为骨质疏松发生与OB过度凋亡有关。而许多研究认为铅能导致骨质疏松症，由此推断铅可能造成OB凋亡增加。本研究采用原代细胞培养方法观察铅对OB凋亡相关基因Fas和Bd-2的表达情况及细胞凋亡情况。为进一步研究铅对骨骼系统毒作用机制提供依据。     

急性一氧化碳中毒致脑细胞凋亡及相关基因表达

采用ＨＥ、ＴＵＮＥＬ和免疫组织化学法,观察急性一氧化碳中毒脑损伤与凋亡的关系。发现急性一氧化碳中毒可引起小鼠大脑皮层、海马、纹状体等部位脑细胞凋亡,凋亡细胞在中毒３天后明显增加,５～７天达到高峰,１４天后恢复正常;同时可以诱导促凋亡基因Ｆａｓ、ＦａｓＬ蛋白表达,表达高峰在中毒后３～５天,早于凋亡发生时间。由此可看出急性一氧化碳中毒可以诱导脑细胞凋亡及Ｆａｓ、ＦａｓＬ表达,中毒所致迟发性脑病可能与脑     

醋酸铅对小鼠星形胶质细胞凋亡及Caspase-3表达影响

目的 探讨醋酸铅对小鼠星形胶质细胞凋亡和Caspase-3表达的影响.方法 10 μmol/L醋酸铅处理小鼠星形胶质细胞24、48 h后,采用Hoechst33258染色法观察细胞形态学变化;聚合酶链反应(PCR)、细胞免疫化学法测定Caspase-3的转录与表达水平;流式细胞仪检测细胞凋亡率.结果 经10μmol/L醋酸铅处理24、48 h后小鼠星形胶质细胞呈凋亡形态学改变.Caspase-3转录与表达水平升高,醋酸铅组细胞凋亡率与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 醋酸铅可促进小鼠星形胶质细胞凋亡,Carpase-3参与了凋亡过程.     

亚急性一氧化碳中毒诱导小鼠脑细胞凋亡及相关基因表达

目的 研究亚急性一氧化碳（CO）中毒脑损伤与脑细胞凋亡及其相关基因表达的关系。方法 采用CO100ml/kgip,1次/d。连续7d染毒小鼠，在停止给予CO后第1、3、5、7、14和21天。脑组织在体灌流固定，并用TUNEL法和免疫组织化学法检测大脑皮层和海马凋亡细胞及其相关基因Fas,FasL、Bax蛋白表达情况。结果 亚急性CO中毒小鼠大脑皮层和海马在中毒后第1天可见凋亡细胞，高峰期约在5-7d，持续14d；凋亡相关基因Fas,FasL,Bax蛋白表达在中毒后大量表达，基本与凋亡细胞出现相符。时间稍提前，结论 亚急性CO中毒可诱导神经元细胞凋亡及其相关基因Fas,FasL和Bax蛋白表达，这可能是亚急性CO中毒致迟发性脑损伤的病理机制之一。     

铅对大鼠脑细胞凋亡及癌基因表达的影响

目的 通过对醋酸铅诱导大鼠脑细胞凋亡及对fos、jun癌基因表达影响的研究，为进一步揭示铅的神经毒作用机制，预防和治疗铅中毒提供科学依据。方法 取成年SD大鼠，每组6只，醋酸铅染毒剂量分别为25，50，100mg／kg体重，连续染毒5d，经升主动脉灌注4％多聚甲醛内固定后分别取海马、皮层部位脑组织，制备石蜡切片。用原位末端标记法观测细胞凋亡，用免疫组化方法分别测定海马、皮层组织中fos、jun的蛋白含量以检测其表达情况。结果 (1)醋酸铅染毒后各剂量组大鼠海马、皮层组织凋亡细胞数量明显增加。显高于对照组，并和染铅剂量有较好的剂量反应关系。(2)大鼠脑组织海马、皮层fos、jun阳性细胞数显增加，表达强度并升高趋势。(3)相关分析表明，铅诱导的神经细胞凋亡与fos、jun的表达呈正相关。结论 (1)醋酸铅可以诱发大鼠皮层、海马细胞的凋亡，且和染铅剂量呈正相关。(2)醋酸铅可以促进大鼠海马、皮层细胞中fos、jun基因的表达，并有良好的剂量反应关系，提示fos、jun可能作为凋亡的调控因子参与了铅对中枢神经系统损害的毒性过程。     

镉诱导大鼠肾细胞早期凋亡及bax基因表达的实验研究

目的探讨氯化镉(CdC l2)在不同时间、剂量作用下,诱导正常大鼠肾(NRK)细胞早期凋亡的发生情况以及CdC l2染毒不同时间对bax基因表达的影响。方法选择不同浓度(0~60μm ol/L)CdC l2体外作用NRK细胞12 h及20μm ol/L CdC l2体外作用NRK细胞不同时间(10 m in~24 h),用流式细胞仪检测细胞凋亡;用逆转录-多聚合酶链扩增反应(RT-PCR)的方法观察20μm ol/L CdC l2作用NRK细胞不同时间(0.5~6 h)baxmRNA的表达情况。结果0、5、10、20、40、60μm ol/L CdC l2作用NRK细胞12 h,细胞早期凋亡发生率分别为1.49%、3.77%、7.77%、14.83%、9.69%、7.23%;20μm ol/L氯化镉作用NRK细胞10、20 m in和0.5、2、6、12、24 h后,早期凋亡发生率分别为0.69%、1.16%、2.71%、4.11%、16.72%、14.83%、9.63%;20μm ol/L CdC l2处理NRK细胞0.5、2、6 h后,bax的相对表达量(β-actin为内参照)分别为:对照组0.604±0.184,染毒0.5 h组1.017±0.285,染毒2 h组1.424±0.367,染毒6 h组1.742±0.392。结论CdC l2可以诱导NRK细胞早期凋亡,并可使bax基因表达增强。     

醋酸铅对人肾小管上皮细胞凋亡及Caspase-3的表达影响

目的探讨醋酸铅对人肾小管上皮细胞(HK-2)凋亡作用及Caspase-3活性的影响。方法醋酸铅(5、10、20μmol/L)染毒HK-26、12、24、48h后,四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测细胞增殖。经铅(5、10、20μmol/L)染毒24h后细胞免疫化学法、RT-PCR和Western Blotting检测Caspase-3的转录与表达。结果与空白对照组相比,不同浓度的铅均不同程度的抑制了HK-2的增殖(P﹤0.01)。细胞免疫化学法、RT-PCR和Western Blotting结果显示醋酸铅组的Caspase-3转录与表达升高。结论醋酸铅可促进人肾小管上皮细胞的凋亡,Caspase-3参与了凋亡过程。     

醋酸铅对大鼠支持细胞功能的影响

利用原代细胞培养技术，观察了不同浓度的铅（Ｐｂ）对支持细胞（Ｓｅｒｔｏｌｉ）功能的影响。结果发现，Ｐｂ２＋（１０－７～１０－４ｍｏｌ／Ｌ）使处理２４ｈ的Ｓｅｒｔｏｌｉ细胞乳酸含量显著升高；Ｐｂ２＋（１０－５～１０－４ｍｏｌ／Ｌ）也使丙酮酸含量明显升高。Ｐｂ２＋（１０－５ｍｏｌ／Ｌ）使处理６ｈ和２４ｈ的Ｓｅｒｔｏｌｉ细胞乳酸含量分别显著低于和高于对照水平；Ｐｂ２＋（１０－７～１０－４ｍｏｌ／Ｌ）使处理２４ｈ的Ｓｅｒｔｏｌｉ细胞内ｃＡＭＰ含量显著下降。醋酸锌（Ｚｎ２＋）对培养的Ｓｅｒｔｏｌｉ细胞的上述观察指标均无影响。因此，用这些指标的变化可以评价Ｐｂ２＋对睾丸Ｓｅｒｔｏｌｉ细胞的某些毒性。     

两元腺病毒载体系统转移bax基因诱导肝癌细胞凋亡的研究

目的：采用两元腺病毒载体系统，介导bax基因转移至培养的肝癌细胞SMMC－7721，探讨腺病毒介导转移bax基因抗肝癌的活性。方法：常规方法在293细胞中扩增腺病毒Ad/GT-Bax和Ad/PGK-GV16,CsCl密度梯度离心法纯化病毒后测定病毒滴度。结果：（1）Bax蛋白表达情况：感染Ad/GT-Bax和Ad/PGK-GV16的SMMC－7721细胞，其在24、48和72小时的Bax蛋白表达量依次为阴性对照细胞的2．5、3．1和3．9倍；（2）PI染色后，感染Ad/GT-Bax和Ad/PGK-GV16的SMMC－7721细胞出现亚二倍体峰，该峰面积占总面积的值在24、48、72小时时依次为31．65％、50．44％和61．81％。结论：两元腺病毒载体系统介导转移Bax基因可诱导人肝癌SMMC－7721细胞凋亡，可望成为治疗肝癌的有力工具。     

芍药苷抑制醋酸铅诱导大鼠海马神经元凋亡的机制

目的:探讨芍药苷对醋酸铅诱导海马神经元凋亡的影响及潜在机制。方法:于2020年9月,从胎鼠中分离培养原代海马神经元细胞,并利用细胞免疫荧光法进行鉴定。MTT法测定细胞活力确定醋酸铅诱导海马神经元凋亡浓度及时间,芍药苷细胞毒性研究评价芍药苷浓度及其对醋酸铅诱导海马神经元凋亡的影响。依据结果选取不同浓度芍药苷干预海马神经元...     

醋酸铅对人股动脉内皮细胞超微结构及凋亡相关蛋白Caspase-3表达的影响

目的探讨醋酸铅对人股动脉内皮细胞超微结构及凋亡相关蛋白Caspase-3表达的影响。方法实验设染毒组,10、20μmol/L醋酸铅处理体外培养的人股动脉内皮细胞24 h后,用透射电镜观察细胞超微结构的变化;细胞免疫化学法、Western blot法检测Caspase-3的表达;流式细胞仪检测细胞凋亡率。设不加醋酸铅为对照组。结果经染醋酸铅24 h后电镜观察发现染毒组细胞染色质固缩、边移,核质间隙增宽,20μmol/L醋酸铅染毒组凋亡小体形成;细胞免疫化学、Western blot结果显示醋酸铅组的Caspase-3阳性表达较对照组明显升高;流式细胞仪检测发现醋酸铅染毒组细胞凋亡率较对照组显著升高（P〈0.05）。结论醋酸铅可诱发人股动脉内皮细胞凋亡,其机制可能与Capase-3的活化有关。     

二硫化碳对大鼠支持细胞凋亡及FasL表达的影响

目的探讨二硫化碳对离体培养支持细胞凋亡及FasL基因表达的影响。方法以0、0．36、0．72、1．44μmol/ml浓度的二硫化碳作用于离体培养的大鼠支持细胞24 h后,应用噻唑蓝(MTT)法检测支持细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡及逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测凋亡相关基因FasL的表达。结果二硫化碳处理后的支持细胞存活率随作用浓度的增加而下降,当≥1．44μmol/ml浓度时,细胞存活率(73．34%±1．39%)明显下降,与溶剂对照组(99．98%±5．48%)比较,差异有统计学意义(P＜0．05)。随二硫化碳浓度升高,细胞凋亡率增加,当浓度≥1．44μmol/ml时,支持细胞凋亡率(7．93%±0．43%)明显升高,与溶剂对照组(3．63%±0．53%)比较,差异有统计学意义(P＜0．05)。随二硫化碳浓度增加,凋亡相关基因FasL表达量亦明显增加。结论二硫化碳对离体培养支持细胞具有细胞毒性作用,可导致细胞凋亡率升高,凋亡相关基因FasL高表达。     

孕期补碘性高碘对子鼠脑细胞凋亡的影响

目的：观察不同孕期补碘所引起的高碘对子鼠脑凋亡及调节基因表达的影响情况.方法：受精大鼠分成3个组,2个高碘组分别在受孕0 d和7 d一次性经口灌胃给予1 ml/kg.bw 40%碘化油、对照组给予同剂量食用豆油.用免疫组化法测定21、28、35 d龄子鼠海马bc1-2、bax蛋白表达;TUNEL法测定35 d龄子鼠神经元细胞凋亡状况.结果：与对照组比较,在海马各亚区,两个高碘组bcl-2蛋白表达减少,bax蛋白表达增多;高碘Ⅰ组凋亡指数增高,高碘Ⅱ组指数虽增高但无统计学意义.结论：孕期补碘性高碘可使子鼠海马神经细胞凋亡增加,作为凋亡调控基因bcl-2、bax可能参与了高碘诱导海马神经元凋亡的过程.     

雌激素对谷氨酸诱导大鼠脑皮质细胞凋亡的影响

目的：观察雌激素对谷氨酸诱导离体皮层神经元凋亡的作用,探讨雌激素的神经保护作用机制。方法：原代培养大鼠大脑皮质细胞,分为正常对照组、谷氨酸组和谷氨酸＋雌激素组,采用TUNEL和免疫细胞化学检测等方法,分析雌激素对谷氨酸诱导神经元凋亡的作用。结果：谷氨酸可明显诱导神经元凋亡,凋亡指数为34.6%;雌激素能明显拮抗谷氨酸的凋亡毒性作用,凋亡指数下降为18.4%（与谷氨酸组相比P〈0.05）;免疫组化结果显示,雌激素组bcl-2表达阳性细胞明显增加,bax蛋白表达受到抑制。结论：雌激素具有神经保护作用,作用机制可能通过影响凋亡相关基因的表达来实现。     

迷迭香酸对冠脉结扎大鼠心肌细胞凋亡及凋亡相关基因表达的影响

目的通过建立冠脉结扎大鼠心肌缺血模型,探讨迷迭香酸（Rosernarinic acid,RA）对冠脉结扎大鼠心肌缺血细胞橱亡及凋亡相关基因表达的影响。方法取60只雄性Wister大鼠随机分为假手术组、缺血模型组、硝酸异山梨酯组、RA小剂量组、RA中剂量组、RA高剂量组。以结扎冠状动脉前降支造成大鼠急性心肌缺血模型,采用TUNEL标记法检测细胞凋亡,免疫组织化学法检测心肌细胞bcl-2和bax基因的蛋白表达。结果缺血模型组与假手术组比较,凋亡的细胞明显增多（P〈0．01）,RA组凋亡细胞较缺血模型组明显减少（P〈0．01）,与假手术组比,缺血模型组bcl—2,bax蛋白表达量增加,bax表达尤其明显。RA各给药组bcl-2,bax蛋白的表达量比假手术组有所增加,但bax明显较缺血模型组低（F〈0．05或P〈0．01）。结论RA能上调心肌细胞抗凋亡因子bcl-2和下调促凋亡因子bax的表达,从而抑制心肌缺血后心肌细胞凋亡的发生,这可能是其心肌缺血保护作用的机制之一。     

白藜芦醇对裸鼠移植瘤bcl-2与bax基因表达影响

目的 探讨白藜芦醇预防性给药对裸鼠胃癌移植瘤细胞凋亡相关基因bcl-2、bax表达影响。方法 胃癌MGC-803细胞建立裸鼠胃癌移植瘤模型,白藜芦醇低(50 mg/kg)、中(100 mg/kg)和高(150 mg/kg)剂量预防性给药;透射电镜、原位末端标记染色(TUNEL)法观察各组裸鼠胃癌移植瘤细胞凋亡发生情况,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫组化法检测各组裸鼠胃癌移植瘤组织内bcl-2、bax基因和蛋白表达情况。结果 白藜芦醇低、中、高剂量用药组细胞凋亡情况明显高于模型组,中、高剂量组bcl-2值分别为(0.26±0.072)和(0.24±0.083),低于模型组(0.41±0.056),差异有统计学意义(P<0.05);中、高剂量组bax值分别为(1.31±0.11)和(1.47±0.089),高于模型组(1.17±0.045),差异有统计学意义(P<0.05);免疫组化结果显示bcl-2蛋白表达低于模型组,而bax蛋白表达高于模型组。结论 白藜芦醇诱导裸鼠胃癌移植瘤细胞凋亡作用与上调bax和下调bcl-2表达有关。     

醋酸铅对雄性大鼠生殖内分泌器官钙调素的影响

雄性大鼠４８只，按体重随机分为４组，每组１２只。用醋酸铅经饮水染毒，含量分别为０％、０．０５％、０．１％、０．２％，４５天处死各组动物的一半，余下一半９０天时处死。４５天时发现，大鼠血液铅浓度随染毒剂量的升高而增高。血液中钙调素含量的变化虽无显著性差别，但呈逐渐降低趋势。各剂量组大鼠下丘脑、睾丸和精子中钙调素含量与对照组相比均有不同程度的降低。９０天时血铅浓度和血液中钙调素的变化与４５天基本一致，其中以中、高剂量组钙调素的降低最为明显。本研究从性腺轴的多个环节证实了铅对钙调素的影响。