基于NMR的免疫抑制小鼠模型血清代谢组学研究

目的采用核磁共振氢谱(~1H-NMR)代谢组学技术分析免疫抑制小鼠血清代谢物变化特点。方法将20只KM小鼠随机分为正常组和模型组,模型组用环磷酰胺建立免疫抑制模型,对其血清进行1H-NMR检测,采用正交偏最小二乘判别法(OPLS-DA)对NMR图谱进行分析,并确定两组小鼠血清差异性代谢物。结果与正常组小鼠比较,模型组小鼠血清谷氨酰胺、糖蛋白、不饱和脂类、VLDL、LDL、丙酮含量减少,亮氨酸、丙氨酸、酪氨酸、组氨酸、乳酸、甘氨酸、肌酸、蛋氨酸、缬氨酸、β-羟丁酸和肉碱含量增多。结论免疫抑制小鼠体内存在代谢网络的失调,具体表现为脂肪酸β-氧化、糖酵解和蛋白质分解过程加剧,脂肪动员被抑制。     

代谢组学分析技术及代谢物鉴定

近年来,代谢组学技术在众多科学领域得到了广泛的应用。代谢组学研究的关键在于对大量小分子代谢产物进行快速、准确的分析鉴定,这在很大程度上依赖于相关技术的进步。磁共振、质谱、色谱以及毛细管电泳等技术的发展和联用,使得代谢组学的广泛应用成为可能。磁共振和质谱是代谢组学研究中最重要的两个技术平台,对代谢产物进行明确的鉴定是代谢组学研究的根本任务。本文就代谢组学相关分析技术及代谢物鉴定的研究进展作一综述。     

应用核磁共振代谢组学方法分析食管癌患者血清代谢物

目的 应用核磁共振代谢组学方法研究食管癌患者血清代谢物的特征及其变化.方法 对健康人血清(健康组,10例)和食管癌患者血清(食管癌组,20例)样本检测核磁共振氢谱,运用统计学分析研究食管癌患者血清代谢组的特征及其改变.结果 食管癌患者血清中脂、乳酸和丙酮酸的含量升高,葡萄糖、三甲胺和胆碱/磷酸胆碱的含量降低(P<0.05).结论 血清代谢物的变化可以区分健康人和食管癌患者.这种基于核磁共振氢谱的代谢组学方法可为食管癌的诊断提供可靠代谢依据.     

代谢物组学的研究进展

代谢物组学是继基因组学和蛋白质组学发展起来的一门新的组学(-omics)技术,是研究药物毒理和基因功能的技术平台,通过分析生物的体液、组织中的内源性代谢产物谱的变化来研究整体的生物学状况和基因调节功能.代谢物组学所涉及的主要技术为核磁共振技术和模式识别分析.对代谢物组学研究的样品、核心技术、分析方法和应用等几方面作简要概述.     

基于代谢组学的细胞内源性代谢物研究进展

代谢组学是继基因组学、转录组学和蛋白质组学之后新兴的一种定性和定量分析复杂生物样品中所有小分子代谢物的组学方法,也是目前组学研究领域的热点之一。代谢组学主要考察生物体系受刺激或扰动后内源性代谢物的变化,是系统生物学的有机组成部分。近年来在代谢组学研究中,细胞内源性代谢物的研究已取得了很大进展。本文结合代谢组学的基本含义,综述了细胞样品前处理方法及代谢靶向分析、代谢轮廓分析、代谢组学分析和代谢足迹分析在细胞方面的研究进展。     

基于代谢组学技术探讨间歇性禁食对小鼠粪便代谢物的影响

越来越多的研究表明,间歇性禁食(intermittent fasting, IF)可以改善与肥胖和糖尿病相关的风险因素,并且可以成为健康生活方式的一部分。本研究以代谢组学技术为基础,通过检测小鼠粪便代谢物探讨在正常生理情况下,间歇性禁食对小鼠粪便代谢的影响。实验方案经上海中医药大学实验动物中心福利与伦理委员会审查,符合实验动物福利与伦理相关规范。实验采用24 h隔日禁食法,对小鼠进行持续10周的间歇性禁食,并收集5周和10周时小鼠的粪便。结果表明, IF没有显著改变小鼠的体重和饮食饮水量,但可降低小鼠的空腹血糖水平;通过代谢组学分析,发现在IF第5周时就开始影响粪便代谢物水平,至第10周时影响更为显著;通过对数据的分析与鉴定,在5周和10周中分别筛选出17种和108种差异代谢物,这些差异代谢物主要富集在亚油酸代谢和胆汁酸生物合成等通路;进一步筛选发现10种代谢物在两个时间点具有相同的变化趋势,表明其可能与IF之间存在密切的相关性。本研究表明IF可显著改变小鼠的代谢水平,为其治疗相关疾病的代谢机制提供理论依据。     

脾气虚证模型大鼠尿液的~1H-NMR代谢组学研究

目的建立脾气虚证大鼠模型,分析脾气虚证的代谢通路,探究内源性代谢产物变化与脾气虚证的关系。方法采用苦寒泻下、劳倦过度和饥饱失常复合因素方法建立并评价脾气虚证大鼠模型,检测其血清中肌酸磷酸激酶活性;对大鼠尿液进行~1H-NMR检测,以变化倍数(fold change,FC)>1.2,结合独立样本t检验(P<0.05)的统计学方法筛选脾气虚证模型组和对照组的差异代谢物,进行代谢通路分析与富集分析。结果脾气虚证模型建立成功;模型组的肌酸磷酸激酶活性低于对照组(P<0.05);从主成分分析(PCA)结果得出模型组和对照组的代谢产物得到明显区分;筛选出33种差异代谢物,主要参与的代谢通路涉及能量代谢、氨基酸代谢、核苷酸代谢,同时对肠道菌群存在干扰。结论脾气虚主要扰乱了大鼠的能量代谢通路(三羧酸循环、糖酵解、脂质氧化),抑制了供能作用,导致大鼠出现疲乏和体质量增长抑制的症状。     

代谢物组学在新药研究中的应用研究进展

代谢物组学是近5年来发展起来的与基因组学、蛋白质组学等并列的学科。它运用核磁共振等分析技术，测定细胞和体液中内源性或外源性代谢物的经时变化，评价细胞功能和生物体的病理生理状态。本文综述其在新药开发中的作用。     

代谢组学在缺血性脑卒中研究中的进展

脑卒中是众多发达国家及发展中国家人口致残及致死率居高不下的主要原因之一。本文综述了近10年缺血性脑卒中研究所涉及的与代谢组学相关的主要内源性代谢物及其在脑损伤过程中所产生的作用机制,以代谢组学研究内源性代谢物变化的角度综述了缺血性脑卒中研究的近况。     

代谢物组学技术平台的研究进展

综述了代谢物组学技术平台的研究进展,着重介绍了样品的采集和预处理,样品的检测技术以及数据分析技术。其中,核磁共振、色谱及联用技术是主要的样品检测技术,模式识别是主要的数据分析技术。     

党参HPLC指纹图谱研究

目的 优化党参高效液相色谱指纹图谱分析方法.方法 采用ZORBAX SB-Aq色谱柱;流动相为乙腈-0.1％磷酸溶液(梯度洗脱);检测波长为267nm;柱温为30℃;流速为1.0mL·min-1.结果 不同来源的14批党参样品均标示出13个共有峰;利用中药色谱指纹图谱相似度评价软件进行相似度评价,14批样品的相似度为0.883～0.980,提示党参指纹图谱差异相对较大.结论 方法准确可靠,重复性好,为党参质量控制提供了方法依据.     

党参超微粉对胃溃疡模型大鼠胃黏膜保护作用的研究

目的 研究比较党参超微粉与普通粉对胃溃疡大鼠模型胃黏膜损伤的保护作用。方法 制备乙酸致胃粘膜损伤型大鼠胃溃疡模型,经两种粉末治疗10天后,测定溃疡面积,计算溃疡指数,并比较;分别用放免法检测各组大鼠血清中Gas及血浆中6-keto-PGF1α含量,并采用酶联免疫法测定血清中EGF含量,并比较。结果 两组组大鼠溃疡指数均低于模型组,且超微粉组明显低于普通粉组;超微粉组大鼠血清Gas含量低于普通粉组, 6-keto-PGF1α和EGF含量高于普通粉组。结论 党参超微粉对胃溃疡的疗效优于普通粉,超微粉碎有助于提高党参药效。     

党参多糖滴丸中党参多糖的含量测定

目的建立党参多糖滴丸中党参多糖的含量测定方法。方法采用紫外分光光度法,检测波长为490nm。结果线性范围为50～600μg/ml(r=0.999),平均回收率为100.26%,RSD为1.68%。结论本法简便快捷,准确度高,重复性好,可作为党参多糖滴丸的质量控制方法。     

党参中多糖的含量测定方法研究

目的建立党参药材和党参饮片中多糖的含量测定方法。方法通过方法学考察，建立以无水葡萄糖为含量测定指标、以苯酚-硫酸法测定党参药材和饮片中多糖含量的测定方法。结果以无水葡萄糖为多糖的含量测定指标可以获得理想的测定结果，其平均回收率为93．92％。RSD为2．57％（n=5）。结论用紫外-可见分光光度法测定党参中多糖的含量，方法简便、快速，为党参饮片的质量控制提供了一种可行的测定方法。     

党参药材不同提取方法的比较研究

目的通过不同提取方法的比较,确定党参的提取方法.方法比较冷浸法、甲醇热回流法、索氏回流法和超声提取法,采用高效液相色谱法测定党参炔苷含量.结果建立高效液相色谱法测定条件,测得同一党参样品用上述四种方法所得党参炔苷的含量,分别为冷浸法0.507mg.g-1,甲醇热回流法1.013mg.g-1,索氏回流法0.929mg.g-1,超声提取法0.733mg.g-1.结论确定党参的最佳提取工艺为甲醇热回流法,优选得到的工艺简便易行,稳定性好.     

党参HPLC指纹图谱结合多种化学模式识别研究

目的 基于HPLC指纹图谱对党参药材中多种化学成分进行含量检测,并结合多种化学计量学统计分析评价多产地多来源多批次的党参药材整体质量。方法 用ACE Neptune-C₁₈色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),以乙腈-0.15%甲酸水溶液为流动相,体积流量0.8 mL·min^-1,检测波长260 nm,柱温20℃,对41批次来源于多个产地的党参药材构建HPLC指纹图谱并结合化学计量学分析对党参质量进行评价,同时筛选出特征性成分进行含量检测及分析。结果 建立了党参HPLC指纹图谱,确定了23个共有峰,并指认了其中7个色谱峰;41批党参HPLC指纹图谱的相似度在0.650~0.962;聚类分析将41批次党参聚为2类;主成分分析中6个主要成分分别反映23个共有峰信息;偏最小二乘法判别分析中根据投影重要性指标的值进一步筛选出主要影响党参间差异的9个成分峰,并进行多指标成分的方法学考察,结果各成分的加样回收率在99.09%~103.68%,RSD为1.21%~3.68%。结论 不同产地和来源的党参药材存在一定的质量差异。通过指纹图谱、聚类分析、主成分分析及偏最小二乘法判别分析等方法相结合可全面地评价党参的质量,此方法的建立可以为党参的质量控制、产品评价提供一定的参考依据。     

基于代谢组学研究对乙酰氨基酚片对中国健康成人胆汁酸谱的影响

目的:研究健康成人多次口服对乙酰氨基酚片后胆汁酸代谢的变化。方法:招募10名健康受试者,收集受试者口服对乙酰氨基酚前后的血清标本,分为给药前组(PD),第5次给药后组(FD)及第8次给药后组(ED),采用高效液相串联质谱(LC-MS/MS)的方法,定量检测血清胆汁酸谱,并结合代谢组学的主成分分析(PCA),正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA),研究多次口服对乙酰氨基酚后健康成人胆汁酸代谢谱的变化,检测各组肝功能生化指标,观察在给药前后肝功能生化指标的变化。结果:在给药前和给药后人血清的胆汁酸谱发生了变化,牛磺鹅去氧胆酸(TCDCA),甘氨胆酸(GCA),甘氨鹅脱氧胆酸(GCDCA),牛磺熊去氧胆酸(TUDCA)的浓度与给药前的基线相比显著升高(P<0.05),肝功能生化指标无明显的变化。采用代谢组学的方法筛选出的差异代谢物GCA,GCDCA为口服对乙酰氨基酚后胆汁酸改变最敏感的指标。结论:GCA和GCDCA或可作为对乙酰氨基酚致早期肝损伤的潜在生物标志物。     

板桥党参多糖的含量测定

目的:建立板桥党参多糖含量测定的方法。方法:采用传统的水提醇沉法提取多糖,石油醚脱脂,savage法脱蛋白;以板桥党参精制多糖测得板桥党参多糖对葡萄糖的换算因子,采用苯酚-硫酸法测定多糖含量。结果:平均加样回收率为98.9%,RSD=1.1%;板桥党参中多糖的含量为19.53%。结论:该法简便、快速、准确、重现性好,为板桥党参的质量控制提供一定依据。     

不同剂量硫磺熏蒸对党参化学成分的影响

目的 研究不同剂量硫磺熏蒸对党参化学成分的影响及硫熏党参贮藏不同时间化学成分的变化,为党参饮片的科学炮制及质量评价提供参考。方法 不同剂量硫磺熏蒸党参并贮藏期12个月,采用UV及HPLC方法测定党参多糖、5-羟甲基糠醛、党参炔苷等化学成分的变化。结果 硫磺熏蒸对党参多糖的影响较小,最高剂量（2.0%）硫熏,放置12个月,多糖含量降低5.83%;对5-羟甲基糠醛、党参炔苷的影响大,最高剂量（2.0%）硫熏,放置12个月,5-羟甲基糠醛含量增加83.27%,党参炔苷含量降低54.09%。结论 硫熏对党参化学成分有显著影响。应严格控制药材加工处理及炮制过程中硫磺的使用,确保中药材及饮片的质量。