叶绿素铜钠盐对AA模型小鼠的实验研究

目的:探讨叶绿素铜钠盐对再生障碍性贫血治疗的作用机制。方法:建立免疫介导再生障碍性贫血小鼠模型,分别胃饲3种不同剂量叶绿素铜钠25,50,100 mg/(kg.d),以环孢菌素[25 mg/(kg.d)]为阳性对照组,正常对照组及模型对照组胃饲生理盐水,连续15 d。检测血清及骨髓α肿瘤坏死因子,γ干扰素、白介素-6含量。结果:免疫介导再生障碍性贫血模型小鼠血及骨髓IFN-γ、IL-6、TNF-α水平升高,叶绿素铜钠盐组模型小鼠血及骨髓IFN-γ、IL-6、TNF-α水平降低。结论:叶绿素铜钠盐通过调节造血调控因子IFNγ-、TNF-α及IL-6的代谢,促进造血干/祖细胞的造血功能,从而有效治疗AA。     

蚕砂提取物联合环孢菌素A治疗再生障碍性贫血的实验研究

目的:研究蚕砂提取物联合环孢菌素A治疗再障的作用机制。方法:建立免疫介导的小鼠再障模型,随机分为4组,每组10只。对照组胃饲生理水,SCC组胃饲SCC,CsA组胃饲CsA,SCC+CsA组胃饲SCC+CsA,连续胃饲13天,检测外周血象及外周血CD3+、CD4+、CD8+、TNF-α、IFN-γ、IL-6水平。结果:蚕砂提取物联合环孢菌素A灌胃,可提高小鼠外周血白细胞、血红蛋白、血小板,有效调节再障小鼠外周血CD3+、CD4+、CD8+、TNF-α、IFN-γ、IL-6水平。结论:蚕砂提取物联合环孢菌素A治疗再障具有协同增效作用。     

补肾化瘀法治疗再生障碍性贫血的疗效及其对血清IFN-γ、TNF-α水平的影响

目的:观察补肾化瘀中药复方治疗慢性再生障碍性贫血(简称CAA)的疗效以及治疗前后细胞因子IFN-γ、TNF-α水平水平的变化。方法:采用ELISA法检测血清γ-IFN、TNF-α水平,观察补肾化瘀中药治疗前后两者水平的变化。结果:CAA患者造血负调控因子IFN-γ、TNF-α水平明显高于正常(P<0.05,P<0.01),补肾化瘀中药治疗后IFN-γ、TNF-α水平明显下降(P<0.05),与CsA对照组作用基本相似(P>0.05)。提示:补肾化瘀中药能降低造血负调控因子IFN-γ、TNF-α水平,从而减轻造血负调控因子对骨髓的造血抑制,促进造血功能改善和恢复。     

补血合剂对慢性再生障碍性贫血患者造血细胞调节因子的影响

目的:研究补血合剂对慢性再生障碍性贫血患者造血细胞调节因子的影响。方法:对慢性再生障碍性贫血患者随机分组后,治疗组西药加补血合剂,对照组单纯西药治疗。抽取骨髓,对骨髓细胞分离培养,收集培养上清液和骨髓单个核细胞,用双抗夹心ELISA法测定培养上清液中造血细胞调节因子(IL-3、TNF-α、IFN-γ)的活性并比较其水平变化。结果:造血细胞调节因子水平:治疗组与对照组治疗前IL-3水平明显低于正常对照组,P<0.05,TNF-α、IFN-γ水平明显高于正常对照组,P<0.05;治疗后IL-3水平升高,与治疗前相比有显著性差异,P<0.05;治疗后TNF-α、IFN-γ水平降低,与治疗前相比有显著性差异,P<0.05。治疗后治疗组IL-3水平高于对照组,P<0.05;TNF-α、IFN-γ水平低于对照组,P<0.05;IL-3水平升高的差值与TNF-α、IFN-γ水平下降的差值,肾阳虚组均高于肾阴虚组,有显著性差异,P<0.05。结论:补血合剂能提高正调节因子IL-3的水平,降低负调节因子TNF-α、IFN-γ的水平,肾阳虚型患者的治疗效果优于肾阴虚型患者,为中药治疗慢性再生障碍性贫血的作用机制提供依据。     

补髓生血颗粒对慢性再生障碍性贫血负性造血调控因子的影响

目的观察补髓生血颗粒治疗慢性再生障碍性贫血的临床疗效及对负性造血调控因子的影响。方法选取2016年9月—2018年1月收治的慢性再生障碍性贫血患者128例,按照随机数字表法分为观察组(63例)和对照组(65例),观察组使用补髓生血颗粒治疗,对照组使用司坦唑醇片治疗,2组患者均治疗6个月。统计2组患者治疗后临床疗效及治疗前后中医症状积分;检测各组治疗前后外周血象的变化和骨髓中TNF-α、IFN-γmRNA表达情况。结果观察组总有效率(76.19%,48/63)明显高于对照组(61.54%,40/65)(P0.05);治疗后2组的症状积分及外周血象较治疗前明显改善,且观察组较对照组改善更为明显(P0.05);治疗后2组骨髓TNF-α与IFN-γmRNA表达水平均较治疗前有所降低,观察组较对照组明显下降(P0.05)。结论补髓生血颗粒通过调节细胞因子TNF-α与IFN-γmR NA表达水平来改善造血微环境,恢复骨髓造血功能,从而改良慢性再生障碍性贫血患者临床症状及外周血象,提高其临床疗效。     

凉血解毒汤治疗急性再生障碍性贫血的机制探讨

目的 探讨凉血解毒汤治疗急性再生障碍性贫血的机制。方法 采用酶联免疫法检测急性再生障碍性贫血患者及正常对照者骨髓上清液中肿瘤坏死因子a（TNF—a）、γ干扰素（IFN-γ）、可溶性自细胞介素2受体（sIL-2R）的含量，并观察凉血解毒汤在体外对骨髓单个核细胞经植物血球凝集素诱生的造血负调控因子的调变作用。结果 急性再生障碍性贫血患者骨髓上清液中TNF—α、IFN-γ、sIL-2R的含量明显高于正常对照者，差异有显著性意义（P〈0．05）；体外试验显示，在多数急性再生障碍性贫血患者中凉血解毒汤可明显抑制IFN-γ、sIL-2R的分泌（P〈0．05或P〈0．01），而对TNF—α无明显影响（P〉0．05）。结论 急性再生障碍性贫血的发病机制与造血负调控因子（TNF—α、IFN-α、sIL-2R）的异常增多有关；凉血解毒汤在凉血止血、清热解毒的同时，也可能通过下调IFN-γ、sIL-2R的含量而促进造血功能恢复，起到治疗急性再生障碍性贫血的作用。     

补肾活血方与益气补肾方治疗慢性再生障碍性贫血对照研究

目的:观察补肾活血方与益气补肾方治疗慢性再生障碍性贫血的临床效果。方法:94例随机分为两组各47例。对照组用补肾益气方治疗,观察组用补肾活血方治疗,对比两组治疗前后外周血IFN-γ、TNF-α和临床治疗有效率。结果:总有效率观察组与对照组比较差异无统计学意义(P0.05),治疗后血清IFN-γ和TNF-α观察组低于对照组(P0.05)。结论:补肾活血方和补肾益气方治疗慢性再生障碍性贫血均有明显临床效果,但补肾活血方能更显著地降低造血负调控因子水平,改善造血组织血供。     

补肾活血方治疗免疫介导型再生障碍性贫血小鼠的实验研究

目的观察中药补肾活血方治疗免疫介导型再生障碍性贫血小鼠的疗效,并探讨其作用机制。方法建立免疫介导型再生障碍性贫血动物模型,观察中药补肾活血方的疗效,并从造血祖细胞集落培养和骨髓基质细胞黏附功能,造血调控因子等方面探讨其作用机制。结果中药补肾活血方可改善免疫介导型再障小鼠的外周血象,增加骨髓有核细胞计数,延长其生存期,促进红系造血祖细胞 CFU-E、BFU-E 的增殖、分化,调节 T 细胞亚群,抑制 Ts 的活性,促进白细胞介素-10(IL-10)的分泌,抑制造血负调控因子白细胞介素-2(IL-2)、干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的活性。结论中药补肾活血方通过促进 CFU-E、BFU-E的增殖、分化以及调节细胞免疫功能而达到治疗的目的。     

慢性再生障碍性贫血辨证分型与TNF-α、IFN-γ水平相关性研究

目的探讨慢性再生障碍性贫血(CAA)中医辨证分型与TNF-α、IFN-γ水平的相关性,为CAA的中医辨证分型提供客观化依据。方法选择90例患者(脾肾阳虚型、肾阴阳两虚型、肝肾阴虚型各30例),以15例健康志愿者为对照,采用ELISA法检测其血清、骨髓单个核细胞培养上清TNF-α、IFN-γ分泌水平;RT-PCR法检测骨髓单个核细胞TNF-α、IFN-γmRNA表达水平。结果患者血清、骨髓单个核细胞培养上清TNF-α、IFN-γ分泌水平均明显高于正常组(P<0.05,P<0.01);患者三组按照脾肾阳虚组、肾阴阳两虚组、肝肾阴虚组顺序,其TNF-α、IFN-γ水平逐渐升高,两两比较差异显著(P<0.05);TNF-α、IFN-γmRNA表达水平,脾肾阳虚组最低,肝肾阴虚组最高,而肾阴阳两虚组介于两者之间。结论TNF-α、IFN-γ可以作为CAA中医辨证分型的客观化依据。     

补肾益髓法对慢性再生障碍性贫血IL-3、SCF、IFN-γ、TNF-α mRNA表达的影响

目的通过观察补肾益髓中药对慢性再生障碍性贫血患者造血调控因子表达的影响,探讨补肾中药的调节机制。方法将120例患者随机分为补肾益髓法治疗组90例,西药对照组30例;另取志愿献髓者骨髓10例作为正常健康人对照组。通过RT-PCR法观察其骨髓造血细胞调控因子干细胞因子(SCF)、白细胞介素3(IL-3)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、干扰素γ(IFN-γ)mRNA的半定量表达情况。结果两组患者治疗前SCF、IL-3表达水平明显低于健康人组(P<0.01),治疗后升高(P<0.05),治疗组高于对照组;治疗前TNF-α、IFN-γ表达水平明显高于健康人组(P<0.01),治疗后降低(治疗组P<0.01,对照组P<0.05),治疗组低于对照组(TNF-α P<0.01,IFN-γ P<0.05)。结论补肾益髓法中药可调节紊乱的免疫状态,增强正调控因子的作用,解除过高的负调控因子对造血细胞的过度抑制而达到治疗目的。     

健脾药对免疫介导再生障碍性贫血小鼠IL-3、IFN-γ影响的实验研究

目的：检测免疫介导再生障碍性贫血(简称再障)小鼠骨髓造血细胞在含健脾药血清的液体培养体系中IL-3、IFN-γ的浓度，探讨健脾药治疗再障的作用机理。方法：用健脾药灌喂SD大鼠，抽取、制备含中药血清；Balb／C小鼠经^60Co5．5Gyγ射线照射后由尾静脉输入取自DBA／2小鼠胸腺淋巴结混合细胞悬液形成免疫介导再障模型。在含健脾药血清的液体培养体系中培养再障小鼠骨髓造血细胞，检测培养体系中IL-3、IFN-γ的浓度。结果：健脾药对再障小鼠IL-3、IFN-γ的总量无明显影响。结论：健脾药可能通过使局部IFN-γ浓度降低进而影响造血干／祖细胞增殖、分化。     

补肾益髓法对慢性再生障碍性贫血IL-3、SCF、IFN—Y、TNF—αmRNA表达的影响

目的 通过观察补肾益髓中药对慢性再生障碍性贫血患者造血调控因子表达的影响，探讨补肾中药的调节机制。方法 将120例患者随机分为补肾益髓法治疗组90例，西药对照组30例；另取志愿献髓者骨髓10例作为正常健康人对照组。通过RT-PCR法观察其骨髓造血细胞调控因子干细胞因子（SCF）、白细胞介素3（IL-3）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、干扰素γ（IFN-γ）mRNA的半定量表达情况。结果两组患者治疗前SCF、IL-3表达水平明显低于健康人组（P〈0．01），治疗后升高（P〈0．05），治疗组高于对照组；治疗前TNF-α、IFN-γ表达水平明显高于健康人组（P〈0．01），治疗后降低（治疗组P〈0.01，对照组P〈0．05），治疗组低于对照组（TNF-α P〈0．01，IFN—γ P〈0．05）。结论 补肾益髓法中药可调节紊乱的免疫状态，增强正调控因子的作用，解除过高的负调控因子对造血细胞的过度抑制而达到治疗目的。     

淫羊藿对慢性再障模型大鼠造血调控因子影响的实验研究

目的:观察淫羊藿对再障模型大鼠造血调控因子TNF-α及IL-2、IL-3、IL-6的影响.方法:将84只SD大鼠随机分为正常对照组,模型对照组,康力龙组,淫羊藿低、中、高剂量组6组.建立白消安诱发造血功能障碍大鼠模型,分别胃饲康力龙和淫羊藿,观察细胞因子TNF-α及IL-2、IL-3、IL-6水平的变化.结果:与正常对照组对比,模型对照组TNF-α、IL-2、IL-6含量增高,1L-3含量下降,差别有统计学意义(P＜0.05).与模型对照组对比,各药物组的TNF-α、IL-2、IL-6下降,IL-3含量增加,差别有统计学意义(P＜0.05).与康力龙组对比,淫羊藿低剂量组TNF-α、IL-2、IL-6含量差别有统计学意义(P＜0.05),而中、高剂量组较之差别无统计学意义(P＞0.05).淫羊藿中、高剂量组的TNF-α、IL-2、IL-6及IL-3含量与低剂量组对比,差别均有统计学意义(P＜0.05).结论:淫羊藿可通过改善造血调控因子分泌的异常来促进骨髓造血功能的恢复;同时其作用有一定的量效关系,即中、高剂量淫羊藿的作用较低剂量强.     

沙棘汁对再生障碍性贫血小鼠骨髓红系祖细胞、粒单系祖细胞的影响

目的：研究沙棘汁对再生障碍性贫血小鼠模型骨髓造血祖细胞体外增殖水平的影响。方法：采用免疫介导法制作再生障碍性贫血小鼠模型，采集其骨髓有核细胞进行培养。将Balb／c小鼠随机分为正常组、模型组、沙棘汁组、四物汤组，比较观察各组小鼠骨髓细胞体外培养红系祖细胞(CFU-E、BFU-E)、粒单系祖细胞(CFU-GM)集落的形成水平。结果：除正常组外，各组再生障碍性贫血小鼠的CFU-E、BFU-E、CFU-GM集落形成均有显著下降；而沙棘汁组则可促进骨髓细胞的增殖，但与正常组比较仍存在一定的差距。结论：沙棘汁可以促进再生障碍性贫血小鼠骨髓CFU-E、BFU-E、CFU-GM集落的形成。     

排脓散对结肠癌小鼠的抗肿瘤作用

目的考察排脓散对结肠癌小鼠的保护作用及炎症因子水平的影响。方法采用氧化偶氮甲烷(AOM)/葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导结肠癌小鼠模型,并在诱导过程中给予排脓散(1.6 g生药/kg)干预。苏木精/伊红染色观察结肠组织病理形态,免疫组化染色检测结肠组织炎症因子白介素-4(IL-4)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-γ(IFN-γ)蛋白表达。结果与模型组比较,排脓散提取物可降低结肠癌小鼠肿瘤数目、增加结肠长度(P<0.01)。同时排脓散下调IL-6、TNF-α蛋白表达(P<0.01),上调IL-4、IFN-γ蛋白表达(P<0.01)。结论排脓散对AOM/DSS诱导结肠癌小鼠模型具有显著的抗肿瘤作用,可能与调节结肠部位炎症因子水平相关。     

补肾化痰活血中药对再生障碍性贫血小鼠骨髓CD_(34)~+和细胞因子表达的影响

目的:观察和比较补肾化痰活血中药对再生障碍性贫血小鼠骨髓造血生长因子SCF mRNA、GM-CSF mRNA表达和骨髓CD34+的影响。方法:建立再障小鼠模型,各组小鼠分别胃饲生理盐水、补肾化痰活血中药、康力龙和再障生血片,连续喂养14天后,采集骨髓进行单个核细胞培养,应用流式细胞术检测骨髓CD3+4抗原水平;应用RT-PCR方法检测SCFmRNA、GM-CSF mRNA表达水平。结果:①模型组骨髓CD3+4抗原检测结果显著低于正常对照组,治疗后各组小鼠骨髓CD3+4抗原水平明显提高,差异有显著性。②模型组骨髓造血生长因子SCF mRNA、GM-CSF mRNA表达水平均低于正常对照组,治疗后各组小鼠骨髓造血生长因子表达水平均明显提高,差异均有显著性。结论:补肾化痰活血方可能通过增强再障小鼠骨髓造血生长因子GM-CSFmRNA、SCFmRNA表达水平,刺激造血细胞分化成熟,达到调控骨髓造血的目的。     

生血合剂对免疫介导再生障碍性贫血小鼠作用的实验研究

为了探讨生血合剂治疗再生障碍性贫血的疗效机理，本文在成功复制免疫介导再生障碍性贫血小鼠模型的基础上，观察了生血合剂对动物模型的作用。结果表明：生血合剂能降低再障小鼠的死亡率，延长死亡时间；增加外周血象、骨髓有核细胞，与康力龙对照组大致相似（Ｐ〉０．０％）；增加Ｔｈ、降低Ｔｓ百分值和ＩＦＮ－γ含量的作用明显优于康力龙对照组（Ｐ〈０．０５）；病理所见能增加骨髓造血灶，减轻脾萎缩；电镜显示能减轻骨髓造血     

正常妊娠与自然流产模型小鼠Th1/Th2型细胞因子表达的差异

目的:检测母胎界面Th1/Th2型细胞因子TNF-α IFN-γ、IL-4及IL-10在正常妊娠与反复自然流产模型小鼠的不同表达.方法:建立反复自然流产小鼠模型CBA/J×DBA/2及正常妊娠小鼠模型CBA/J×BALB/c,取孕14天的蜕膜组织,免疫组化方法检测细胞因子TNF-α、IFN-γ、IL-4及IL-10的表达.结果:TNF-α、IFN-γ、IL-4及IL-10在自然流产小鼠模型及正常妊娠小鼠模型蜕膜组织均有表达,但与正常妊娠组比较,TNF-α和IFN-γ的表达在反复自然流产小鼠明显升高(P<0.05),而IL-4和IL-10的表达降低(P<0.05).结论:Th1/Th2型细胞因子TNF-α、IFN-γ和IL-4、IL-10的平衡可能在妊娠的维持中发挥主要作用.     

凉血解毒汤对再障小鼠骨髓免疫紊乱的调控

目的:观察再障小鼠骨髓免疫功能及造血负调控因子的变化,及凉血解毒汤的影响。方法:用物理化学复合法复制再障小鼠模型,并给予凉血解毒汤,测小鼠外周血象,骨髓造血干细胞和T细胞凋亡的情况,及骨髓造血负调控因子IFN-γ、TNF-α、IL-2水平。结果:再障小鼠外周血三系减少,网织红细胞下降,骨髓T细胞比例增加,凋亡减少,而造血干细胞比例减少,凋亡增加。凉血解毒汤能在一定程度上促进骨髓T细胞的凋亡,从而减少骨髓造血负调控因子的分泌,抑制造血干细胞的凋亡,促进外周血象及网织红细胞的恢复。结论:凉血解毒汤能有效地改善再障小鼠骨髓T细胞与造血干细胞凋亡失衡的状况,降低造血负调控因子的水平,从实验角度直接说明了热毒与细胞免疫亢进相关。     

鸡油菌粗多糖对小鼠移植性S180肉瘤的抑制研究

目的探索鸡油菌子实体粗多糖对S180荷瘤小鼠的肿瘤抑制活性及对血清中肿瘤坏死因子(TNF-α)、γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-6(IL-6)水平的影响。方法以S180为模型,探索体内抗肿瘤活性;ELISA法检测其对荷瘤小鼠血清中TNF-α、IFN-γ、IL-2、IL-6水平的影响。结果鸡油菌子实体粗多糖高、中、低剂量组对S180肿瘤细胞的抑制率分别为35.72%,31.47%和19.82%,且与空白组相比能提高荷瘤小鼠血清中TNF-α、IFN-γ、IL-2、IL-6四种细胞因子的水平。结论鸡油菌子实体粗多糖对移植性S180肉瘤具有较好的肿瘤抑制作用和免疫调节活性。