急性白血病患者骨髓MK和VEGF基因表达及临床意义的探讨

目的:研究急性白血病(AL)患者MK和VEGF基因的表达水平及其与血管新生、临床预后的关系.方法:应用实时荧光定量PCR检测95例不同病程的AL患者骨髓单个核细胞MK和VEGF mRNA的表达.结果:急性非淋巴细胞白血病(AML)和急性淋巴细胞白血病(ALL)患者MK和VEGF表达量均明显高于对照组,P=0.000 0.初治/复发组AL患者MK、VEGF基因表达水平较对照组及完全缓解组升高,完全缓解组MK和VEGF表达水平仍较对照组高,P均＜0.01.缓解组MK表达水平与VEGF和骨髓原幼细胞数存在显著相关性,r=0.673,P＜0.01; r=0.468,P＜0.01.复发组MK和VEGF之间也存在相关性,r=0.526,P＜0.05.初治组和对照组MK、VEGF、骨髓原幼细胞数之间无明显相关性.结论:MK、VEGF高表达可能与AL血管新生、病情进展有关,且两者存在一定的协同作用,共同监测可能对研究急性白血病的发病及指导治疗和估计预后有一定意义.     

急性白血病患者血清中可溶性Fas配基含量的变化

目的　探讨急性白血病患者血清可溶性Fas配基 (sFasL )的水平及其临床意义。方法　采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对 5 0例急性白血病患者的血清sFasL含量进行检测 ,比较不同病理状态急性白血病患者血清sFasL水平的变化。结果血清sFasL含量 :初治急性淋巴细胞白血病 (ALL)为 (0 .2 4± 0 .0 8)ng/ml ,急性髓性白血病 (AML )为 (0 .2 3± 0 .11)ng/ml;未缓解/复发组ALL为 (0 .2 3± 0 .0 9)ng/ml,AML为 (0 .2 1± 0 .0 8)ng/ml ;与完全缓解 /部分缓解组ALL的 (0 .15± 0 .0 6)ng/ml、AML的 (0 .15± 0 .0 5 )ng/ml及正常对照组的 (0 .13± 0 .0 5 )ng/ml相比 ,除AML未缓解 /复发与完全缓解 /部分缓解组相比无显著性差异 (P >0 .0 5 )外 ,其余均有非常显著性差异 (P <0 .0 1)。血清sFas水平与急性白血病未缓解或复发相关。结论　血清sFasL含量的测定可用于评估急性白血病的病理状态、化疗效果及预后     

白血病患者WT1基因表达及其临床意义

目的:探讨WT1基因在白血病中表达情况与临床意义。方法:采用筑巢式逆转录聚合酶链反应(NestRT-PCR)检测K562白血病细胞系、78例急性白血病(AL)患者、10例慢性粒细胞白血病(CML)患者和22例正常对照骨髓或外周血细胞的WT1基因表达。结果:60例初治或复发AL中有44例患者高表达WT1基因,阳性率73.3%。在急性非淋巴细胞白血病(ANLL)和急性淋巴细胞白血病(ALL)阳性率分别为70.8%和83.3%,两组无显著性差异。随着WT1基因表达水平的升高,完全缓解(CR)率有明显下降的趋势,CR后WT1基因表达水平明显下降,复发后又显著升高。结论:用NestRT-PCR测定WT1基因的表达可用作检测白血病微小残留病(MRD)的一项指标。     

急性白血病患者MUC1与WT1基因表达的临床意义

目的：探讨MUC1基因及WT1基因在急性白血病的表达及临床意义。方法：采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法，检测54例初发或复发急性白血病（AL）患者MUC1基因以及WT1基因的表达．观察MUC1基因及WT1基因的表达与急性白血病患者疗效关系。结果：54例初治或复发AL中MUC1基因表达阳性率50.0％．WT1基因表达阳性率74．1％。MUC1基因阴性表达的初治非M3型AL 19例治疗完全缓解率达94．7％，MUC1阳性表达的初治非M3型AL 18例治疗完全缓解率55.6％；两组比较有显著性差异（P〈0.05）。WT1基因表达阳性与否与化疗疗效无关。结论：MUC1和WT1基因在急性白血病中有一定的表达，MUC1基因阳性表达可作为急性白血病患者预后不良的一项分子生物学指标。     

急性白血病WT1基因的表达及其临床意义

目的　探讨WT 1基因表达水平与急性白血病 (AL)预后的关系及在微小残留病 (MRD )检测中的意义。方法　采用荧光定量RT PCR法 (FQ RT PCR ) ,测定 40例不同类型及处于不同疾病阶段 (2 6例初治、5例复发、9例CR >3年 )的AL患者WT1基因的表达。结果　对照组WT1基因均为阴性。 40例AL患者中有 2 6例WT 1基因表达阳性 ,阳性组与阴性组CR率分别为 3 4.6%和 78.5 % (P <0 .0 5 )。其中初治、复发与CR >3年的患者 ,WT 1阳性基因拷贝数的平均值分别为 4.14× 10 3 拷贝 /ml、8.5 8× 10 3 拷贝 /ml和 7.87× 10 1拷贝 /ml。CR后WT 1基因表达水平明显下降 ,复发后又显著升高。结论　FQ RT PCR实验方法客观准确 ,WT1基因的表达水平与AL患者的化疗效果及预后密切相关 ,可以作为检测MRD的标志     

急性白血病患者血清乳酸脱氢酶与白细胞介素-12检测的意义

目的 探讨急性白血病(AL)患者血清乳酸脱氢酶(LDH)与白细胞介素-12(IL-12)检测的意义.方法 对AL初治、复发患者15例及AL缓解患者15例,采用ELSA法检测患者血清IL-12及酶法检测LDH水平,并与健康对照进行比较.结果 AL初治、复发组LDH显著高于AL缓解组及健康对照组,IL-12水平则显著降低,AL缓解组患者血清LDH降低、IL-12升高.结论 AL细胞负荷可抑制AL患者体内IL-12表达.     

骨髓TPO及受体c-MPL表达变化在急性髓系白血病化疗中的意义

目的探讨急性髓系白血病化疗前后骨髓血小板生成素（Thrombopoietin,TPO）及受体c-MPL的变化及其意义。方法  采用ELISA法和流式细胞仪检测急性髓系白血病初治患者化疗前、化疗缓解后及复发患者骨髓TPO以及c-MPL的表达水平。结果  AML初治患者化疗前骨髓TPO及c-MPL的表达分别为（162.21±39.92）ng/ml、（6.04±4.072）%,明显低于复发组的（213.19±48.34）ng/ml、（11.23±5.225）%,化疗前及复发组均明显高于对照组的（122.14±25.75）ng/ml、（2.84±0.724）%;AML患者化疗缓解后TPO及c-MPL的表达分别为（115.82±22.32）ng/ml、（2.81±1.306）%,与对照组比较差异无统计学意义（P>0.05）。各组骨髓TPO与c-MPL的表达呈正相关性。结论 （1）TPO及c-MPL的高表达对AML的诊断具有提示意义,化疗后TPO及c-MPL降至正常,可作为评判AML化疗效果及是否缓解的重要指标;（2）TPO及c-MPL在复发患者骨髓细胞中的表达较初发AML白血病患者明显增高,提示TPO/c-MPL信号通路的高表达可能与急性髓系白血病治疗后复发及难治相关。     

急性髓系白血病血管新生因子的表达及临床意义

背景与目的:研究证实,VEGF和bFGF表达水平与多发性骨髓瘤、非霍奇金淋巴瘤和慢性淋巴细胞白血病等疾病预后有关,本研究观察急性髓系白血病(AML)细胞血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)及其受体的表达谱系、VEGF和bFGF的水平及与临床的关系.方法:RT-PCR方法检测VEGF、bFGF及其受体在转录水平的表达;ELISA检测血浆VEGF和bFGF水平,并分析其表达水平与临床的关系.结果:(1)107例初治AML患者VEGF、Flt和KDRmRNA阳性率分别56.1%、49.5%和2.8%;bFGF和其4个受体mRNA阳性率则分别为21.5%、35.5%、9.4%、35.5%和23.4%.(2)初治AML血浆VEGF水平为(154.75±109.98)pg/ml,明显高于健康对照组(99.91±41.87)pg/ml及AML-CR组(72.05±23.39)pg/ml(P＜0.05);AML-CR组与正常对照组比无统计学差异(P＞0.05).初治AML患者血浆bFGF水平(10.00±6.70)pg/ml与正常对照(9.44±3.04)pg/ml及AML缓解患者(11.28±4.61)pg/ml比较无显著性差异(P＞0.05).2个疗程内获完全缓解患者血浆VEGF水平(124.05±76.57)pg/ml明显低于未获完全缓解者血浆VEGF水平(211.24±169.88)pg/ml(P＜0.05).用Kaplan-Meier生存分析可以评价生存期的86例初治AML患者,显示VEGF和bFGF水平与其生存期呈负相关.结论:AMI细胞表达VEGF、bFGF及其受体,VEGF和bFGF既可能为AML的自分泌因子也可能为旁分泌因子;高VEGF血浆水平可影响患者化疗效果和生存期,以VEGF及其受体作为靶点治疗AML,可能会改善AML患者的预后.     

前列腺凋亡反应因子4及WT1基因在急性白血病中的表达

 目的　观察前列腺凋亡反应因子4（Par-4）、WT1基因在急性白血病（AL）及非白血病患者骨髓细胞中的表达情况,探讨Par-4、WT1基因表达水平与完全缓解（CR）率的关系。方法　采用荧光定量RT-PCR方法检测78例AL患者及23例非白血病患者骨髓细胞中Par-4、WT1 mRNA的表达。结果　Par-4基因在78例AL患者与23例非白血病患者骨髓细胞中均有表达,在AL患者表达量明显下降（9.35×10-4±8.4×10-5）（P＜0.05）。在缓解组表达增强（1.26×10-3±1.1×10-4）,与初治组和复发组间差异有统计学意义,但仍低于对照组（3.25×10-3±2.9×10-4）。初治组和复发组间表达差异无统计学意义。Par-4基因表达水平与CR率无明显关系（P＞0.05）。WT1基因在AL患者骨髓细胞中高表达（2.98×10-3±2.1×10-4）,对照组WT1基因低表达（7.25×10-5±6.7×10-6）（P＜0.05）。在缓解组WT1基因表达下降（6.86×10-4±5.2×10-5）,与初治组和复发组间差异有统计学意义,但仍高于 对照组。初治组和复发组间表达差异无统计学意义。不同WT1基因表达水平与CR率 间差异有统计学意义（P＜0.05）。结论　采用荧光定量RT-PCR的方法证实Par-4基因在AL低表达,而WT1基因高表达,二者呈相反的表达模式。Par-4基因表达水平与CR率无明显关系。     

X染色体相关凋亡抑制蛋白在86例急性白血病中的表达

[目的]探讨急性白血病（AL）患者中X染色体相关凋亡抑制蛋白（XIAP）表达的临床意义。[方法]86例AL患者,其巾初诊未治患者56例,包括44例AML和12例ALL,治疗后完全缓解期（CR）患者22例,缓解后复发患者8例,应用RT～PCR方法检测骨髓细胞中XIAP的mRNA表达。对照组为20名门诊正常人。[结果]比较20例对照组、56例AL初治组、22例AL缓解组和8例AL复发组的XIAPmRNA平均表达水平,差异具有显著性（F=58．77,P〈0．01）;对照组的XIAPmRNA平均表达水平为0．29±0．13,明显低于AL初治患者（0．98±0．30）（P〈0．01）和缓解组（0．45±0．17）（P〈0．05）;缓解组的平均表达水平明显低于初治组（P〈0．01）;复发组的XIAPmRNA平均表达水平最高（1.23±0.30）．不仅明显高于对照组和缓解组（P〈0．01）,也高于初治组（P〈0．05）;XIAP mRNA表达在初治AML和ALL组比较无显著性差异（P=0.21）。[结论]XIAP在急性白血病发病和病情进展中起重要作用,XIAP高表达可能是AL患者预后不良的高危因素之一．     

急性白血病患者WT1基因表达水平及其临床意义

目的：探讨WT1基因与急性髓系白血病（AML）、急性淋巴细胞白血病（ALL）患者预后的关系及其用于微小残留病（MRD）监测的可能性。方法收集58例初发AML、32例初发ALL、40例AML-完全缓解（CR）、28例ALL-CR患者及31例同期三系增生活跃患者（对照组）骨髓单个核细胞,利用荧光定量聚合酶链反应（PCR）方法检测WT1基因的表达,建立WT1基因在各组间的表达阈值,以WT1拷贝数／ABL拷贝数×100%表示WT1基因的相对表达量。结果初发AML患者与对照组间WT1基因中位相对表达量差异有统计学意义[20.880%（3.550%～48.500%）比0.026%（0～0.240%）,Z＝-7.74,P＜0.0001]。AML-CR患者[0.102%（0～5.380%）]与初发AML患者间WT1基因中位相对表达量差异有统计学意义（Z＝-8.34,P＜0.0001）。此外,WT1基因表达高于阈值（20.880%）的AML患者第1个疗程CR率为60.7%（17／28）,而表达低的患者为76.7%（23／30）。AML患者复发时WT1表达升高。与对照组相比,初发ALL患者WT1基因中位相对表达量[0.350%（0.021%～10.780%）]升高（Z＝-2.58,P＜0.05）,但与ALL-CR患者[0.038%（0～2.800%）]相比,WT1基因中位相对表达量差异无统计学意义（P＝0.065）。结论 WT1基因在AML中的表达相对较高,其可能成为AML患者预后评估及MRD监测的有效指标,但并不适用于ALL患者。     

WT1基因在急性白血病中的表达及其临床意义

 【摘要】　目的　探讨急性白血病（AL）患者体内WT1基因的表达情况及其临床意义。方法　采用荧光定量聚合酶链反应对急性髓系、淋巴细胞白血病66例患者WT1基因进行检测,并比较髓系各亚型之间的基因表达量差异,观察基因表达水平与病程及预后之间的相关性,同时分析造血干细胞移植患者的病程与WT1基因表达之间的关系。结果　66例患者中,87.5 %（14／16）的急性淋巴细胞白血病及76.0 %（38／50）的急性髓系白血病患者WT1基因表达阳性;髓系各亚型中,M3的表达水平低于其他各亚型（与M1、M2、M4、M5相比,P值分别为0.040、0.007、0.006、0.010）。WT1基因的表达水平与疾病状态密切相关,完全缓解组表达水平明显低于未缓解组（P＝0.018）及复发组（P＝0.003）,其滴度的再次升高可提前1.5个月预测复发。WT1基因与造血干细胞移植患者的预后相关,WT1基因转阴的患者较持续表达及一度下降后再次上升的患者预后好。结论　WT1基因在AL患者中的表达可代表微小残留病灶,急性髓系白血病各亚型中M3表达水平相对较低,WT1表达水平与临床病程及预后密切相关。     

上皮型钙黏蛋白在髓外白血病患者骨髓单个核细胞表面及血浆中的表达及其临床意义

目的：探讨急性白血病（AL）患者骨髓单个核细胞（MNC）表面上皮型钙黏蛋白（E-cad）及血浆中可溶性 E-cad（sE-cad）的表达在髓外白血病发生、发展和疗效判定中的临床意义。方法初治或复发的 AL 患者87例（L119例,L229例,M214例 M320例,M44例,M51例）均为哈尔滨医科大学附属肿瘤医院血液内科住院患者;对照组血浆来自20名健康志愿者,对照组骨髓来自血液科15例非 AL 的住院患者（血小板减少性紫癜7例,缺铁性贫血4例,发热4例）。应用酶联免疫吸附测定（ELISA）检测47例AL 患者及20名健康志愿者血浆中 sE-cad 的表达;应用流式细胞术检测40例 AL 患者及15例对照者骨髓 MNC 表面 E-cad 的表达。结果 AL 组血浆中 sE-cad 的表达水平为（66.812±52.712） ng／ml,高于健康对照组的（17.976±14.206） ng／ml （P＜0.01）。 AL 患者中,髓外浸润组血浆 sE-cad 的表达水平为（83.545±60.759） ng／ml,高于非髓外浸润组的（42.152±22.043） ng／ml（P＜0.01）;高白细胞血症组血浆 sE-cad 的表达水平为（85.166±57.828）ng／ml,高于非高白细胞血症组的（41.933±32.064）ng／ml （P＜0.05）。 AL 组骨髓 MNC 表面 E-cad 的阳性比例为（13.615±14.038）%,低于对照组的（31.700±16.213）%（P＜0.01）。 AL 患者中,非髓外浸润组骨髓 MNC 表面 E-cad 阳性比例为（18.691±14.917）%,高于髓外浸润组的（6.589±8.959）%（P＜0.01）;非高白细胞血症组骨髓 MNC 表面 E-cad 阳性比例为（20.925±12.081）%,高于高白细胞血症组的（7.446±11.118）%（P＜0.01）。结论 AL 患者骨髓 MNC 表面E-cad 低表达及血浆中 sE-cad 高表达可能与髓外白血病及高白细胞血症的发生相关,可能是白血病细胞发生髓外浸润的重要分子病理机制之一。 AL 患者血浆中 sE-cad 高表达可作为髓外白血病的诊断指标之一。     

流式细胞术联合实时荧光定量聚合酶链反应动态检测急性髓系白血病微小残留病和WT1基因表达水平

目的 探讨流式细胞术（FCM）联合实时荧光定量聚合酶链反应（RQ-PCR）动态检测急性髓系白血病（AML）患者微小残留病（MRD）和WT1基因表达水平的临床意义.方法 采用FCM联合RQ-PCR检测42例AML住院患者（除外M3）化疗前后349份骨髓标本的MRD值及WT1基因表达量.结果 化疗前AML患者的WT1基因表达水平与疗效无关（x2=0.166 3,P＞0.5）,首次诱导化疗后形态学完全缓解（CR）患者34例,其中MRD高水平11例,复发率达63.6 ％（7/11）,低水平23例,复发率21.7％（5/23）,两组之间复发率差异有统计学意义（x2=5.729,P＜ 0.025）.WT1基因高水平表达8例,复发率达87.5 ％（7/8）,低水平26例,复发率23.1％（6/26）,两组之间复发率差异有统计学意义（x2=10.749,P＜0.005）.WT1基因的表达水平在CR后下降（t=4.669,P＜0.001）.CR后WT1与MRD均为低水平表达者的复发率[15.0％（3/20）]明显低于其中有一项为高水平表达者的复发率[64.3％（9/14）],两组之间差异有统计学意义（P＜0.05）.且CR后WT1基因及MRD表达量呈正相关（r=0.835,P＜ 0.001）.结论 FCM联合RQ-PCR动态检测AML患者的MRD及WT1基因的表达水平可以作为AML患者MRD的监测指标,同时提高了MRD检测的阳性率,为临床开展个体化治疗及分层治疗提供一定的实验室依据.     

Clinical Impact of Overexpression of FOXP3 and WT1 on Disease Outcome in Egyptian Acute Myeloid Leukemia Patients

Background: In the last decade, it has become clear that change of gene expression may alter the hematopoietic cell quiescent state and consequently play a major role in leukemogenesis. WT1 is known to be a player in acute myeloid leukemia (AML) and FOXP3 has a crucial role in regulating the immune response. Objectives: To evaluate the impact of overexpression of WT1and FOXP3 genes on clinical course in adult and pediatric AML patients in Egypt. Patients and methods: Bone marrow and peripheral blood samples were obtained from 97 de novo non M3 AML patients (63 adult and 34 pediatric). Real-time quantitative PCR was used to detect overexpression WT1 and FOXP3 genes. Patient follow up ranged from 0.2 to 39.0 months with a median of 5 months. Results: In the pediatric group; WT1 was significantly expressed with a high total leukocyte count median 50X109/L (p=0.018). In the adult group, WT1 had an adverse impact on complete remission induction, disease-free survival and overall survival (p=0.02, p=0.035, p=0.019 respectively). FOXP3 overexpression was associated with FAB subtypes AML M0 +M1 vs. M2, M4+M5 (p =0.039) and the presence of hepatomegaly (p=0.005). Conclusions: WT1 and FOXP3 overexpression has an adverse impact on clinical presentation, treatment response and survival of pediatric and adult Egyptian AML patients.     

Serum midkine levels are increased in patients with various types of carcinomas

The level of expression of midkine (MK), a heparin-binding growth factor, is increased in many types of human carcinomas. An enzyme-linked immunoassay, which utilizes a combination of rabbit and chicken antibodies revealed that serum MK level in the controls (n = 135) was 0.154 +/- 0.076 (mean +/- SD) ng ml(-1)with an apparent cut-off value as 0.5 ng ml(-1). Serum MK level was significantly elevated in the cancer patients (n = 150) (P< 0.001); 87% of the patients showed levels of more than 0.5 ng ml(-1). All ten types of cancer examined showed a similar profile of serum MK level. There was no or weak correlation between C-reactive protein level, a marker of inflammation, and serum MK level. Furthermore, in case of gastric carcinoma and lung carcinoma, patients with stage I carcinoma already showed elevated serum MK levels. The present results indicated that serum MK could serve as a general tumour marker with a good potential for clinical application.     

Low-dose 4N-behenoyl-1-beta-D-arabinofuranosylcytosine (BHAC) in the treatment of atypical leukemia

Four cases of hypoplastic leukemia, one of acute myelocytic leukemia (M2) and one of RAEB-t were treated with a low-dose 4N-behenoyl-1-beta-D-arabinofuranosylcytosine (LD-BHAC) regimen, in which 50 mg BHAC was administered daily intravenously by one-hour drip infusion for 14 days. Among the 6 cases, three (2 hypoplastic leukemia and one M2) obtained complete remission and one (hypoplastic leukemia), partial remission. Response rates were 66.6% of all cases, and 75% of cases of hypoplastic leukemia. During treatment, cytopenia was observed in all cases and a decrease in bone marrow nucleated cell counts was recognized in the aged M2 patient with remission. Although side effects of the drug on the digestive system such as anorexia and nausea were observed in some cases, they were all controllable by conventional treatments. The serum concentration of ara-C was measured in 4 cases. The peak level of serum ara-C concentration, 3.62-18.9 ng/ml (mean: 11.74 ng/ml), was observed at the time of cessation of infusion of BHAC, and an ara-C level of 2.75-4.89 ng/ml (mean: 3.54 ng/ml) was still present in the blood 6 hours after the cessation of infusion. It was concluded that LD-BHAC was useful in the clinical management of atypical leukemia and acute myelocytic leukemia in the aged.     

Elevated serum manganese superoxide dismutase in acute leukemias.

We measured the serum levels of manganese-superoxide dismutase (Mn-SOD) in acute myeloid leukemia (AML) and acute lymphoid leukemia (ALL). Serum Mn-SOD level for normal subjects was 94.1 +/- 23.5 ng/ml (mean +/- S.D.), the levels for AML and ALL patients were 159.6 +/- 77.1 ng/ml and 154.4 +/- 77.0 ng/ml, respectively. The serum Mn-SOD levels were unrelated to individual intracellular Mn-SOD levels, but correlated well with serum lactate dehydrogenase values. Regression of the leukemia was accompanied by decrease in the serum level of Mn-SOD. Serum Mn-SOD may thus serve as a measure of the activity of the disease.     

初治急性髓系白血病患者Bcl11a基因表达水平及其与预后的关系

目的 探讨急性髓系白血病（AML）患者Bcl11a基因表达水平及其临床意义.方法 通过实时荧光定量PCR方法检测80例初治AML患者及16例对照组Bcl11a基因的表达水平,分析其表达水平与疾病特征及临床疗效之间的关系.结果 初治AML患者Bcl11a表达水平高于对照组[0.039（0～ 0.504）比0.014（0.002 ～ 0.086）,P=0.004].以80例初治AML患者Bcl11a基因表达量的中位数作为分界点,将患者分为Bcl11a高表达组和低表达组各40例.Bcl11a低表达组AML患者中位年龄低于高表达组患者（29.5岁比41.0岁）,而初治AML患者在不同分层的性别、FAB分型、外周血象、骨髓原始细胞比例、遗传学危险度分层、免疫分型CD34表达间Bcl11a基因表达水平差异均无统计学意义（均P＞0.05）.Bcl11a基因低表达组患者完全缓解率高于高表达组[90％（36/40）比53％（21/40）,P=0.000],中位生存时间延长（268.0d比101.5 d,P=0.042）.结论 Bcl11a基因表达水平和AML患者年龄、疗效和预后存在一定的关系,Bcl11a基因高表达的AML患者预后较差.