氯霉素鱼肝油乳剂中氯霉素含量的测定

为建立氯霉素鱼肝油乳剂中氯霉素的含量测定方法，采用紫外分光光度法测定其含量，检测波长为275nm。结果显示，线性浓度范围为4.97μg／ml—29．82μg／ml，平均回收率为99．48％，RSD为2．08％。本法简便、快速、准确。适用于该制剂的含量测定。     

紫外分光光度法测定氯霉素滴耳液中氯霉素的含量

氯霉素滴耳液为抗生素类药，用于外耳炎，急慢性中耳炎，中国药典采用微生物测定法测定其氯霉素含量，但操作周期长，不适合生产时中间体含量控制；本文采用紫外分光光度法测定其含量，结果较为满意。     

高效液相色谱法测定氯霉素泡腾片中氯霉素含量

目的建立氯霉素泡腾片中氯霉素含量测定的高效液相色谱方法。方法采用高效液相色谱法,其中色谱柱为Kromasil 100-5 C18（250 mm×4.6 mm,5μm）;流动相为0.01mol/L庚烷磺酸钠缓冲溶液（取磷酸二氢钾6.8 g,用0.01 mol/L庚烷磺酸钠溶液溶解并稀释至1000 mL,再加三乙胺5 mL,混匀,用磷酸调pH值至2.5）-乙腈为70∶30;柱温为室温;检测波长为274 nm。结果氯霉素在20.7～72.6μg/mL范围内线性关系良好,平均回收率为100.10%,RSD值为0.93%。结论本法操作简便,专属性好,精密度高,可作为氯霉素泡腾片的含量测定方法。     

高效液相色谱法测定氯霉素醇溶液中氯霉素的含量

目的研究高效液相色谱法测定氯霉素醇溶液中氯霉素的含量。方法采用高效液相色谱法,以EclipseXDB—C18（4．6mm×250mm,5μm）为色谱柱;流动相为0．01mol／L庚烷磺酸钠缓冲液（取磷酸二氢钾6．8g．用0．01mol／L庚烷磺酸钠溶液溶解并稀释至1000mL,再加三乙胺5mL,混匀,用0．01mol／L磷酸调节pH值至2．5）-甲醇（68：32）;流速1．0mL／min,检测波长277nm,进样量10μL。结果氯霉素在60—160μg／mL范围内与峰面积呈良好的线性关系,回归方程为A=17．79C＋17．13,r=0．9995;平均回收率为100．24％,RSD=1．26％。结论本方法简便快速,定量准确,结果稳定、重现性好,可用于氯霉素醇溶液中氯霉素的含量测定。     

壳聚糖-碳纳米粒的制备及其体外性质的研究

目的 制备壳聚糖-碳纳米颗粒并研究其理化性质和体外活性。方法 首先，用溶胶法制备出分散性良好的碳纳米粉末，再通过正负电荷相互吸引制备出壳聚糖-碳纳米颗粒；其次，用绿色荧光蛋白（PEGFP-C1）质粒DNA作报告基因，以静电吸附的方式将PEGFP-C1质粒DNA与壳聚糖-碳纳米颗粒结合形成载基因纳米粒；再次，用扫描电镜观察其形态特征，激光粒度分析仪测定其粒度分布及表面电位（Zeta电位），MTT试验检测壳聚糖-碳纳米载体对HepG2细胞和COS7细胞的毒性作用，凝胶阻滞实验确定该基因载体的DNA携带率，DNase Ⅰ保护实验研究其对所携带基因的保护作用，体外纳米粒导入实验定性评价纳米粒进入在体外进入细胞的活性，并用荧光显微镜观察导入效果。结果 壳聚糖-碳纳米粒表面携带正电荷，聚合指数〈0．3；与DNA结合后效率较高，且可保护DNA免受DNase Ⅰ的降解；经FITC标记后能够成功地进入到COS7细胞和HepG2细胞。结论 壳聚糖-碳纳米颗粒能进入到细胞内部，且导入效率较高，可以用作基因递送的非病毒载体系统，值得进一步研究。     

紫外分光光度法测定氯霉素滴眼液的含量

氯霉素为广谱抗生素 ,对多数Ｇ-菌、Ｇ+ 菌、厌氧菌、立克次体、衣原体和支原体具有抗菌活性。其滴眼液与溶液剂是眼科和耳鼻喉科的常用药 ,主要用于眼结膜炎、角膜炎、急慢性鼻炎及中耳炎等感染性疾病[1] 。制剂中氯霉素的含量测定 ,中国药典采用微生物法[2 ] ,该法操作繁琐费时 ,且结果判断易产生误差。本实验采用紫外分光光度法测定其含量 ,具有操作简便快捷、重现性好、结果准确、灵敏度高等优点 ,适用于医院制剂快速检验的要求。1　仪器与药品1 1　仪器　ＷＦＺ80 0 Ｄ3 Ａ型紫外分光光度计 (北京第二光学仪器厂 )。1 2　药品与试剂　…     

紫外分光光度法测定氯霉素栓的含量

以脂溶性基质配制的氯霉素阴道栓 ,对阴道炎、宫颈炎等细菌性妇科疾病有显著疗效 ,但无简易可行的测定方法。为控制该制剂质量 ,常用测定方法有紫外分光光度法、高效液相色谱法等 ,本文采用紫外分光光度法测定其含量。1　仪器与试药UV- 76 0紫外分光光度仪 (上海分析仪器厂 ) ;氯霉素对照品 (东北制药总厂 7835 76 ) ;氯霉素栓 (本院自制 ) ;无水乙醇 (分析纯 344 2 79)2　方法与结果2 .1　氯霉素标准贮备液制备　取氯霉素对照品适量 ,精密称定 ,用无水乙醇溶解成浓度为 0 .2 m g/ ml的溶液 ,作为氯霉素标准贮备液 ,备用。2 .2　空白栓的处…     

高效液相色谱法测定氯霉素滴眼液氯霉素和二醇物的含量

氯霉素滴眼液为一种常见的滴眼液 ,用高效液相色谱法同时测定氯霉素滴眼液氯霉素和氯霉素二醇物含量 ,氯霉素与微生物方法比较及氯霉素二醇物与薄层色谱法比较 ,方法简单 ,重现性好 ,结果容易判断。1　仪器、试药与样品1.1　仪器 :惠普高效液相色谱仪(ＨＰ110 0 )。1.2　试药 :氯霉素标准品 (中国药品生物制品检定所 ) ,含量 :994单位 ｍｇ氯霉素二醇物化学对照品 (中国药品生物制品检定所 ) ,含量未标 ,按 10 0 %计 ,乙腈为色谱纯 ,其它为分析纯 ,水为纯水。2　实验条件与方法2 .1　ＨＰＬＣ法色谱条件 :色谱柱 :迪马Ｃ1 8(5ｕｌ,4 .6ｎｍ…     

氯地滴眼液中氯霉素的含量测定

目的建立一阶导数分光光度法测定氯地滴眼液中氯霉素的含量。方法一阶导数分光光度法，在305nm处测定氯地滴眼液的振幅D。结果线性范围为20．13-30，01μg／ml，r=0．99989（n=5）；平均回收率为99，78％，RSD=0．227％（n=5），氯地滴眼液中地塞米松及辅料无影响。结论该法操作简便、准确，消除了地塞米松的影响，适合于医院制剂氯地滴眼液中氯霉素的含量测定。     

高效液相色谱法测定氯霉素滴眼液的含量

目的 :采用高效液相色谱法 (HPLC)测定氯霉素滴眼液的含量。方法 :以ODS-C18 柱 ,用甲醇和水 (57:43)作为流动相 ,检测波长为278nm。结果 :测得氯霉素在8～80μg/ml(r=0.9999,n=5)浓度范围内呈线性关系,平均回收率为100.5%(n=5),RSD0.53%。结论 :该法操作简便、快速、结果准确。     

无溶剂法荧光碳点的制备及卵巢癌细胞荧光成像研究

目的：构建基于碳点（carbon dots,CDs）的荧光纳米探针CDs@Tf,探讨其材料制备及应用于卵巢癌细胞荧光成像的潜能。方法：以二水合柠檬酸钠和尿素为原料,在高温下经无溶剂法制备一种高效荧光碳点,用新型四唑化合物（MTS）法检测其对人卵巢癌细胞HO?8910及人脐静脉血管内皮细胞EA.hy926的细胞毒性。昆明小鼠经尾静脉注射CDs 7 d和21 d后采集主要器官（心、肺、肾、肝、脾）进行组织学分析,评价CDs的活体毒性。利用1?（3?二甲基氨基丙基）?3?乙基碳化二亚胺盐酸（EDC·HCl）及 N?羟基琥珀酰亚胺（NHS）作为化学耦合剂,将制备的CDs与转铁蛋白（Tf）共价结合成荧光分子探针CDs@Tf。对其表征分析并应用于细胞成像。结果：制得一种平均粒径为3.85 nm的球形荧光CDs,最佳激发波长为400 nm,最大发射波长为520 nm,量子产率高达93%。所制备的CDs具有较高的荧光强度和低细胞毒性等性质。建立的CDs@Tf分子探针能靶向识别H0?8910卵巢癌细胞。结论：成功构建一种光学性能优良、毒性低的靶向性新型荧光纳米探针CDs@Tf,有助于应用于卵巢癌的早期筛查。     

高效液相色谱法同时测定复方氯霉素醇溶液中氯霉素和水杨酸的含量

目的 建立同时测定复方氯霉素醇溶液中氯霉素和水杨酸含量的高效液相色谱法。方法 色谱柱：ZORBAX Eclips XDB—C18（4．6×150mm,5μm）;紫外检测器波长：278nm;流速：0．6ml／min。柱温：30℃;流动相组成：甲醇-水（50：50,V／V）。结果 水杨酸和氯霉素的线性范围分别为0．01mg／ml～0．1mg／ml。平均回收率分别为：100．72％和99．93％。结论 HPLC法可用于该制剂的含量测定和质量控制,方法简便灵敏、结果准确。     

叶酸-聚乙烯亚胺复合碳点的跨膜机制和胞内分布

目的：探讨以叶酸和聚乙烯亚胺（PEI）为原料合成的荧光碳点跨MC3T3-E1细胞膜转运途径、胞内分布其对细胞的影响,并阐明其机制。方法：以叶酸和PEI为原料,通过水热法合成具有细胞成像功能的荧光碳点,采用MTT法筛选碳点的最佳使用浓度。将MC3T3-E1细胞分为空白对照组、叶酸组和碳点组,通过细胞周期、细胞凋亡和细胞活性氧（ROS）水平检测评估碳点的生物相容性;通过胞膜窖途径抑制剂制霉菌素、巨胞饮途径抑制剂诺考达唑的使用,探讨细胞摄取碳点的途径;利用碳点在紫外光激发下发射蓝色荧光的特点,通过各种细胞器探针进行荧光共定位以观察碳点在细胞内的分布。结果：与空白对照组比较,24 h时100~450mg·L^-1碳点组细胞增殖率明显升高（P<0.05）;在48h时,当碳点浓度达到350 mg·L^-1时,细胞增殖率仅有空白对照组的68.4%（P<0.05）。与空白对照组比较,碳点组G₀期和G₁期细胞比例明显下降（P<0.05）,S期细胞比例明显升高（P<0.05）;G₂期和M期细胞比例亦升高,但差异无统计学意义（P>0.05）;与空白对照组比较,叶酸组和碳点组细胞凋亡率无明显改变（P>0.05）,但细胞内ROS水平明显降低（P<0.05）。与空白对照组比较,制霉菌素组细胞摄取碳点量减少（P<0.05）。倒置荧光显微镜观察,碳点的蓝色荧光与线粒体的红色荧光较好重叠,与溶酶体的红色荧光较好重叠,与内质网的红色荧光不完全重叠,与高尔基体的红色荧光重叠得较差。结论：碳点生物相容性较好,被细胞摄取后可以分布至细胞质的主要细胞器上,可作为一种非病毒载体应用到转基因治疗中。     

高生物相容性氮掺杂碳点的合成及其在生物成像中的应用

以柠檬酸为碳源且以不同氨基酸为氮源,在无任何催化剂的条件下通过一步水热合成法合成氮掺杂碳点。预实验表明,以精氨酸为氮源的荧光碳点(CDs-Arg)以相对较高的荧光量子产率(33.25%)被选为进一步的研究对象。进一步通过一系列光谱、电位、粒径、电镜、X射线、元素分析等实验对其理化性质进行表征。同时也考察了CDs-Arg纳米颗粒在不同激发光、温度、pH或氧化还原条件下的稳定性。并通过MTT实验和体内分布实验考察了其细胞毒性和体内代谢分布情况。上述实验证明,该氮掺杂碳点具有较高的荧光效率和较好的稳定性及极低的毒性,这些对其生物成像应用提供了基础。最后,对于这种水溶性小颗粒CDs-Arg纳米粒的生物分布研究表明,该纳米粒可通过肾小球排出体外。这些结果表明CDs-Arg纳米颗粒是一种高生物相容性的纳米粒,并具有生物成像和监测药物代谢的应用潜力。     

石墨烯量子点荧光猝灭-恢复法测定Cu2+与谷胱甘肽的含量

通过在温和条件下氧化石墨粉的方法合成高分散性、高荧光强度的石墨烯量子点(GQDs),并运用此GQDs对Cu²⁺和GSH具有荧光猝灭-恢复的效应,建立对这两种物质简便、快捷的检测方法。Cu²⁺与GSH的浓度分别在1.0~10.0 mmol/L、0.1~1.0 mmol/L范围内与GQDs的荧光强度呈良好线性关系,检测限分别为0.01和0.1 mmol/L。此外,在实际样品的检测中,加标法测得的回收率分别为93%~101%、96%~107%。该方法操作简便,测定准确,精密度高,且常见的金属离子及潜在共存物质对Cu²⁺与GSH的检测均没有干扰。     

葡萄糖酸锌碳点在细胞成像和体外促进成骨分化中的作用

目的：通过一步水热法合成葡萄糖酸锌碳点（Zn-CDs）,探讨Zn-CDs的细胞成像及其对小鼠前成骨细胞向成骨方向分化的促进作用。方法：一步水热法合成Zn-CDs,采用透射电子显微镜（TEM）、荧光光谱仪和傅里叶变换红外光谱仪（FT-IR）观察检测Zn-CDs的表征。将不同浓度（0.01、0.10、1.00、10.00、100.00和1 000.00 mg· L^-1） Zn-CDs浸提液与小鼠前成骨细胞系MC3T3-E1共培养作为实验组,空白对照组仅加入细胞培养液。采用MTT法检测各组MC3T-E1细胞相对增殖率（RGR）;采用激光共聚焦成像观察MC3T3-E1细胞的成像特点;采用qRT-PCR法检测各组MC3T3-E1细胞中Runt相关转录因子2基因（Runx2）、碱性磷酸酶基因（ALP）和骨钙素（OC） mRNA相对表达水平;茜素红染色检测各组细胞中钙化结节数。结果：TEM检测,成功合成粒径为5.25 nm的Zn-CDs。荧光光谱,Zn-CDs具有360 nm紫外光激发和450 nm蓝光发射的荧光性质,并表现激发波长依赖特性。FT-IR检测,Zn-CDs表面主要由羧基和羟基基团构成。与空白对照组比较,共培养24 h时1 000.00 mg·L^-1Zn-CDs组MC3T3-E1细胞的RGR明显降低（P<0.01）。荧光成像,Zn-CDs与MC3T3-E1细胞共培养后,细胞呈现蓝色、绿色和红色的荧光图像,形态轮廓清楚且荧光强度细胞质比细胞核强。qRT-PCR检测,随着Zn-CDs浓度的增加,MC3T3-E1细胞中Runx2、ALP和OCmRNA相对表达水平逐渐升高。茜素红染色,诱导21 d后不同浓度Zn-CDs组MC3T3-E1细胞中钙结节数多于空白对照组。结论：Zn-CDs可以有效地进行MC3T3-E1细胞荧光成像,且Zn-CDs具有一定的促MC3T3-E1细胞向成骨方向分化的作用。     

抗氯霉素单克隆抗体杂交瘤细胞株的制备及筛选

目的获得稳定、高效分泌抗氯霉素单克隆抗体的杂交瘤细胞株。方法以CAP-HS-BSA免疫BALB/c小鼠,用细胞融合技术筛选抗氯霉素单克隆抗体杂交瘤细胞,体内诱生腹水法大量制备单抗。捕获ELISA法测定小鼠免疫球蛋白亚型,间接ELISA法测定腹水效价;用两步硫酸铵法和G蛋白亲和层析法来纯化腹水。结果成功建立了一株分泌抗CAP单克隆抗体（McAb）的杂交瘤细胞4D10。经检测,其分泌的抗体亚类为IgG1,杂交瘤染色体数目90-110条,间接ELISA检测诱生小鼠腹水的抗体效价达1∶2.56×105,纯度达95%,该细胞连续培养生物学性状稳定。结论成功制备的抗氯霉素单克隆抗体4D10效价高、纯度高,为利用该单抗研制检测氯霉素残留试剂盒提供原材料。     

高效液相色谱法同时测定L-苏糖酸钙和柠檬酸的含量

目的建立巨能钙片剂中L-苏糖酸钙和柠檬酸含量同时测定的高效液相色谱法(HPLC)方法。方法以C18色谱柱、0.025mol.L-1pH=2.50NaH2PO4为流动相分离、210nm紫外检测、外标法定量。结果L-苏糖酸钙和柠檬酸的线性范围分别为0.270~13.0、0.431~20.7mmol.L-1;方法回收率大于99.0%;日内及日间RSD小于2.0%。结论本方法不经分离直接同时测定巨能钙片剂中L-苏糖酸钙和柠檬酸的含量,快速、简便、准确,可用于巨能钙片剂的质量控制。     

高效液相色谱法测定氯柳酊中氯霉素和水杨酸的含量

目的建立测定氯柳酊中氯霉素和水杨酸含量的高效液相色谱法.方法采用反相ODS色谱柱,甲醇-水(50:50)为流动相,检测波长为278nm.结果氯霉素和水杨酸的线性范围分别为3.0～18.0μg/ml(r=0.9994),6.0～36.0μg/ml(r=0.9992);加样回收率分别为100.4%,RSD=0.5%及100.6%,RSD=0.7%(n=5);日内RSD分别为0.6%和0.8%(n=5),日间RSD分别为0.8%和1.0%(n=4).结论HPLC法可用于该制剂的含量测定和质量控制,方法简便、灵敏、结果准确.     

抗坏血酸-聚乙烯亚胺复合碳点通过高尔基体应激对MG63细胞增殖、凋亡和氧化应激的影响

目的：探讨抗坏血酸-聚乙烯亚胺复合碳点（CDs）对人骨肉瘤MG63细胞增殖、凋亡和氧化应激等的影响,阐明抗坏血酸-聚乙烯亚胺复合CDs的细胞生物学特性。方法：以抗坏血酸和聚乙烯亚胺为原料,用微波法合成抗坏血酸-聚乙烯亚胺复合CDs。采用MTT法检测MG63细胞增殖率,流式细胞术检测不同细胞周期MG63细胞百分比。将MG63细胞分为空白对照组、转染阴性对照组、转染GOLPH3-siRNA组、CDs组、转染阴性对照+CDs组、转染GOLPH3-siRNA+CDs组。采用RT-PCR法检测各组MG63细胞中高尔基体磷酸化蛋白3（GOLPH3）的基因表达水平并计算基因沉默效率,流式细胞术检测各组MG63细胞凋亡率以及MG63细胞中活性氧（ROS）水平。结果：与空白对照组比较,随着CDs浓度的增加,MG63细胞的增殖率降低;在24和48 h时,CDs浓度大于40 mg·L^-1时,MG63细胞增殖率明显降低（P<0.05）;在72 h,CDs浓度大于20 mg·L^-1时,细胞增殖率明显降低（P<0.05）。与对照组比较,40 mg·L^-1CDs组G₀/G₁期MG63细胞百分比明显升高（P<0.01）,S期MG63细胞百分比明显降低（P<0.01）。倒置荧光显微镜下CDs具有一定的光致发光特性;与非碳点组（空白对照组、转染阴性对照组、转染GOLPH3-siRNA组）比较,碳点组（CDs组、转染阴性对照+CDs组、转染GOLPH3-siRNA+CDs组） MG63细胞凋亡率和细胞中ROS水平升高（P<0.05）。结论：CDs具有低毒性和光致发光特性,可以阻滞细胞周期,并促进细胞凋亡和ROS生成。GOLPH3具有抗凋亡和抑制ROS生成的作用,对细胞的存活起到一定的保护作用。