紫铆花素通过下调miR-34a对氧化低密度脂蛋白诱导血管内皮细胞损伤的影响

目的 探讨紫铆花素对氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）诱导的人脐静脉血管内皮细胞（HUVECs）损伤的影响。方法 体外培养的HUVECs，将其分为对照组、模型组、低、中、高剂量紫铆花素组、anti-miR-NC组、anti-miR-34a组、高剂量紫铆花素加miR-NC组、高剂量紫铆花素加miR-34a组；分别进行RT-qPCR、流式细胞术和Western blot检测miR-34a表达水平、细胞凋亡率和相关蛋白表达；ELISA检测白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。结果 与对照组比较，模型组细胞凋亡率、炎性细胞因子IL-6、IL-1β和TNF-α表达水平均显著升高（P <0.05）；紫铆花素处理或下调miR-34a均可显著降低细胞凋亡率以及炎性细胞因子IL-6、IL-1β和TNF-α的表达水平（P <0.05）；紫铆花素可显著降低miR-34a的表达水平（P <0.05）；且上调miR-34a逆转了紫铆花素对ox-LDL处理HUVECs凋亡和炎性细胞因子的影响。结论 紫铆花素可能通过下调miR-34a表达缓解...     

下调miR-146a对牙髓炎模型大鼠的干预效果及作用机制

目的 探讨下调微小RNA-146a(miR-146a)对牙髓炎模型大鼠的干预效果及作用机制。方法 选取从河南中医药大学购进的40只SPF级SD大鼠，选取30只建立牙髓炎模型，分为模型组、上调组、下调组每组分别10只，做miR-146a慢病毒滴定，其中未建立牙髓炎模型的10只作为空白组。并针对4组大鼠采用实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-146a基因表达量，采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大鼠白细胞介素(IL)-8、肿瘤坏死因子(TNF)-α、IL-6、IL-1β。采用Western印迹检测大鼠牙髓组织Toll样受体(TLR)4/核因子(NF)-κB信号通路蛋白基因表达量。结果 与上调组相比，下调组miR-146a基因表达量、IL-8、IL-6、IL-1β、TNF-α水平及TLR4、NF-κB表达量显著减少(P<0.05)。结论 下调miR-146a基因可能通过作用于TLR4/NF-κB信号通路，调控TLR4、NF-κB蛋白表达量，可有效保护大鼠牙髓组织，有效抑制大鼠牙髓炎的发生发展。     

下调miR-122对非酒精性脂肪性肝炎小鼠的炎症发生及肝细胞凋亡的影响

目的探讨下调miR-122对非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis, NASH)小鼠的炎症发生及肝细胞凋亡的影响。方法 qRT-PCR检测各组小鼠肝组织中miR-122的表达情况;HE染色观察各组小鼠肝组织病理损伤情况;油红O染色观察各组小鼠肝组织脂肪堆积情况;ELISA检测各组小鼠血清中甘油三脂(TG)、丙氨酸转氨酶(ALT)、天门冬氨酸转氨酶(AST)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-6(IL-6)的表达情况;TUNEL荧光染色观察各组小鼠肝细胞凋亡情况;Western blotting检测各组小鼠肝组织中Bax、Bcl-2蛋白表达水平。结果 miR-122 mRNA的表达水平在MCD组和MCD+miR-NC组小鼠肝组织中表达水平上调(P均0.01),在MCD+miR-122 inhibitor组小鼠肝组织中表达水平下调(P0.001);MCD组和MCD+miR-NC组小鼠的肝脏出现中度至重度肝细胞空泡化和大量脂质滴(P均0.001),MCD+miR-122 inhibitor组小鼠的肝脏组织表现出轻度至中度的肝细胞空泡和脂质滴也减少(P0.05);MCD组和MCD+miR-NC组小鼠血清中TG、ALT、AST、TNF-α、IL-1β和IL-6表达水平上调(P均0.01),MCD+miR-122 inhibitor组小鼠血清中TG、ALT、AST、TNF-α、IL-1β和IL-6表达水平下调(P均0.05);MCD组和MCD+miR-NC组肝细胞凋亡指数升高(P均0.001),MCD+miR-122 inhibitor组肝细胞凋亡指数下降(P0.05);MCD组和MCD+miR-NC组小鼠肝组织中Bax蛋白表达水平上调(P0.01),Bcl-2蛋白表达下调(P均0.001),MCD+miR-122 inhibitor组小鼠肝组织中Bax蛋白表达水平下调(P0.05),Bcl-2蛋白表达上调(P0.05)。结论下调miR-122可抑制炎症的发生、抑制肝细胞凋亡,对NASH有一定的治疗作用。     

新生儿急性呼吸窘迫综合征患儿血清miR-877-5p表达变化及其与病情严重程度和预后的关系

目的 探讨新生儿急性呼吸窘迫综合征（NARDS）患儿血清微小RNA-877-5p(miR-877-5p)表达变化及其临床意义。方法 选择NARDS患儿95例（观察组），病情严重程度：轻度38例、中度35例、重度22例，28 d内临床结局：死亡21例、存活74例，同期选择健康新生儿40例作为对照组。采集所有研究对象外周静脉血，离心留取血清，采用实时荧光定量聚合酶链式反应检测血清miR-877-5p表达，采用酶联免疫吸附试验检测血清IL-1β、IL-6、TNF-α。采用Spearman相关分析法分析NARDS患儿血清miR-877-5p表达与氧指数和血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平的关系。采用受试者工作特征（ROC）曲线分析血清miR-877-5p表达对NARDS诊断和预后的预测价值。结果 观察组血清miR-877-5p表达低于对照组，血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平高于对照组（P均<0.01）。随着病情严重程度增加，NARDS患儿血清miR-877-5p表达逐渐降低，血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平逐渐升高（P均<0.01）。Spearman相关分析显...     

丹皮酚通过上调miR-339-5p靶向HMGB1减轻神经病理性疼痛大鼠的炎症反应

目的:探究丹皮酚(Pae)通过上调微小RNA-339-5p(miR-339-5p)靶向高迁移率族蛋白B1(HMGB1)对神经病理性疼痛大鼠炎症反应的影响。方法:通过L5神经结扎横切构建神经病理性疼痛大鼠模型,将72只SD大鼠随机分为6组,假手术组(Sham)、模型组(Model)、Pae组、Pae+antagomir-NC组、Pae+miR-339-5p-antagomir组、Pae+miR-339-5p-antagomir+HMGB1抑制剂-甘草酸(GA)组,每组12只,给药7 d。手术前1 d及手术后3 d、11 d,测定大鼠行为学机械痛阈值(MWT)、热缩足反射潜伏期(TWL),手术后第12天,酶联免疫吸附法测定脊髓组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)水平,实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)法测定脊髓组织中miR-339-5p、HMGB1、IL-1β、TNF-α mRNA的表达,蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测脊髓组织中HMGB1、IL-1β、TNF-α蛋白表达,双荧光素酶报告实验分析miR-339-5p与HMGB1的靶向关系...     

长链非编码RNA H19靶向miR-194-5p抑制LPS诱导心肌细胞炎症反应

目的研究长链非编码RNA(LncRNA)H19对LPS诱导的心肌细胞炎症因子分泌的影响及其机制。方法建立LPS诱导的心肌细胞H9c2损伤模型;pc-con组(转染pc-con)、pc-H19组(转染pc-H19)、anti-miR-con组(转染anti-miR-con)、anti-miR-194-5p组(转染anti-miR-194-5p)、pc-H19+miR-con组(pc-H19和miR-con共转染)、pc-H19+miR-194-5p组(pc-H19和miR-194-5p共转染)均用脂质体法转染至H9c2细胞;qRT-PCR检测各组细胞中H19、miR-194-5p的表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组细胞中肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6、IL-1β的含量;双荧光素酶报告基因检测实验检测各组细胞荧光活性。结果与Control组相比,LPS组心肌细胞中H19表达下调,miR-194-5p表达上调,且过表达H19、敲减miR-194-5p均可抑制LPS诱导的心肌细胞H9c2炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1β的分泌;miR-194-5p是H19的靶标。过表达miR-194-5p可逆转过表达H19对LPS诱导心肌细胞炎症因子TNF-α、IL-6、 IL-1β的抑制作用。结论 H19可抑制LPS诱导的心肌细胞炎症因子的分泌,其机制可能与靶向miR-194-5p有关,可为心血管损伤的治疗提供新靶点。     

基于Wnt/β-catenin通路探究上调miR-132对认知功能障碍模型大鼠的干预效果

目的 探究上调微小RNA-132(miR-132)对认知功能障碍模型大鼠的干预效果及相关机制。方法 选取40只雄性大鼠，10只为正常组，其余30只建立认知功能障碍模型，并分为模型组、下调组、上调组，下调组尾部静脉注射30 mg/kg下调(antago)miR-132,上调组尾部静脉注射30 mg/kg上调(ago)miR-132,正常组、模型组尾部静脉注射等量生理盐水。检测各组学习、记忆能力，RT-PCR法检测miR-132表达，免疫透射比浊法检测神经生长因子(NGF)β、S100β水平，原位末端标记方法(TUNEL)检测神经元细胞凋亡率，酶联免疫吸附试验检测白细胞介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子(TNF)-α、总抗氧化能力(TAOC)、过氧化脂质(LPO)水平，Western印迹法检测性别决定区Y框蛋白(SOX)2、无翅型MMTV整合位点家族成员(Wnt)3a、β-连环蛋白(catenin)、人类重组蛋白(Beclin)-1、人微管相关蛋白轻链(LC)3-Ⅱ表达。结果 上调组达标所需训练次数、S100β水平、神经元细胞凋亡率、IL-1β、TNF-α、TAOC、LPO水平、Beclin...     

miR-19a-3p靶向上调SOCS3参与急性川崎病病理发展的机制研究

目的:探讨微小RNA-19a-3p(miR-19a-3p)/细胞因子信号抑制物3(SOCS3)信号轴在川崎病(KD)病理发展过程中的调控机制。方法:采集我院川崎病患儿、川崎病治疗后患儿血清,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)及蛋白质印迹(Western Blot)法检测miR-19a-3p、SOCS3 mRNA及蛋白表达变化。小鼠腹腔注射白色念珠菌水溶物(CAWS)建立川崎病模型,分为正常对照组、模型组、si-miR-19a-3p组、ad-SOCS3组、si-NC组、ad-NC组,每组10只。取小鼠冠状动脉组织,采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、血管内皮素(ET)水平;苏木素-伊红(HE)染色法观察冠状动脉病理变化;免疫组化法检测SOCS3阳性表达水平;RT-qPCR及Western Blot法检测miR-19a-3p、SOCS3 mRNA及蛋白表达变化;Western Blot法检测Janus酪氨酸蛋白激酶2(JAK2)、信号转导和转录激活因子3(STAT3)、磷酸化STAT3(...     

姜黄素对大鼠脑缺血后Janus蛋白酪氨酸激酶2信号转导和转录激活子3信号通路的影响

目的探讨姜黄素对大鼠脑缺血损伤后Janus蛋白酪氨酸激酶2(JAK2)/信号转导和转录激活子3(STAT3)信号通路的影响。方法将68只SD大鼠随机分为假手术组、脑缺血组、姜黄素组(尾静脉注射姜黄素40mg/kg)和对照组(注射等量生理盐水),每组17只,后3组建立大鼠局灶性脑缺血模型,观察各组大鼠神经行为学变化,ELISA检测大鼠脑组织TNF-α、白细胞介素(IL)-1β、IL-6表达,Western blot检测大鼠脑组织JAK2、磷酸化JAK2(p-JAK2)、STAT3、磷酸化STAT3(p-STAT3)、高迁移率族蛋白1(HMGB1)表达。结果与脑缺血组比较,姜黄素组大鼠神经行为学评分减低[(1.53±0.62)分vs(2.94±0.87)分,P0.05];与脑缺血组比较,对照组TNF-α、IL-1β和IL-6无明显变化(P0.05),姜黄素组大鼠TNF-α[(57.63±10.27)ng/L vs(99.35±8.97)ng/L]、IL-1β[(33.67±9.10)ng/L vs(58.43±7.22)ng/L]和IL-6[(31.97±6.91)ng/L vs(49.23±6.28)ng/L]表达降低(P0.01),p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3相对含量及HMGB1表达降低(P0.05,P0.01)。结论姜黄素可保护大鼠缺血后脑损伤,其机制可能是通过抑制JAK2/STAT3信号通路,减少HMGB1表达,减轻炎性反应。     

高血压性脑出血患者血清miR-141-3p、 miR-29a-3p水平变化及临床意义

目的 观察高血压性脑出血(HICH)患者血清miR-141-3p、miR-29a-3p水平变化,并探讨其与病情以及预后的关系.方法 选择167例HICH患者(HICH组),根据斯堪纳维亚卒中量表(SSS)评分将患者分为轻型组(0～15分,42例)、中型组(16～30分,67例)和重型组(31～45分,58例),根据出院3个月后格拉斯哥预后(GOS)评分分为预后良好组(>4分,87例),预后不良组(≤4分,80例),另选择同期于我院体检的64例健康志愿者(对照组).比较组间血清miR-141-3p、miR-29a-3p和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-1β和IL-6水平.采用Pearson相关分析miR-141-3p、miR-29a-3p与炎性因子的相关性,多因素Logistic回归分析HICH患者预后不良的危险因素,受试者工作特征(ROC)曲线分析miR-141-3p、miR-29a-3p预测HICH患者预后不良的价值.结果 HICH组血清miR-141-3p、miR-29a-3p水平低于对照组,血清TNF-α、IL-1β和IL-6水平高于对照组(P均<0.01).重型组血清miR-141-3p、miR-29a-3p水平低于中型组和轻型组,血清TNF-α、IL-1β、IL-6水平高于中型组和轻型组(P均<0.01);中型组血清miR-141-3p、miR-29a-3p水平低于轻型组,血清TNF-α、IL-1β、IL-6水平高于轻型组(P均<0.01).HICH组血清miR-141-3p、miR-29a-3p水平与TNF-α、IL-1β、IL-6水平均呈负相关(P均<0.01).高水平miR-141-3p(OR=0.656,95％CI:0.500～0.862,P<0.01)、miR-29a-3p(OR=0.733,95％CI:0.581～0.926,P<0.01)是HICH预后的保护因素.miR-141-3p、miR-29a-3p预测HICH预后不良的曲线下面积为0.675、0.688,联合预测曲线下面积为0.898,高于单独指标预测(Z分别为4.950、5.325,P均<0.05).结论 HICH患者血清miR-141-3p、miR-29a-3p水平均降低,且与神经损伤程度加重以及预后不良有关.     

TLR4介导小鼠小胶质细胞自噬在脑出血后炎症反应的作用机制研究

目的研究TLR4介导小胶质细胞自噬在脑出血后炎症反应的作用机制。方法从C57BL/6J小鼠中提取分离原代小胶质细胞,分组1中,A组:小胶质细胞;B组:小胶质细胞+阴性siRNA转染;应用C组:小胶质细胞+TLR4-siRNA转染。应用Q-PCR和Western Blot检测分组1中TLR4的表达。分组2中,D组:小胶质细胞+等量的对照溶剂(0.9%NaCl);E组:小胶质细胞+自噬抑制剂(3-MA);F组:小胶质细胞+control-siRNA+3-MA;G组:小胶质细胞+TLR4-siRNA+等量的对照溶剂(0.9%NaCl);H组:小胶质细胞+TLR4-siRNA+3-MA。Western Blot检测LC3-Ⅱ/Ⅰ比值、TLR4、MyD88和核转录因子(NF-κB)蛋白表达。ELISA检测细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)水平。结果 (1)A组和B组TLR4 mRNA和蛋白表达水平无明显变化(P>0.05);与B组相比,C组TLR4 mRNA和蛋白表达水平下调(P <0.05)。(2)D组、E组和F组TLR4、MyD88和NF-κB p65蛋白水平无明显变化(P>0.05);与D组相比,G组TLR4、MyD88和NF-κB p65蛋白水平下调(P <0.05);与F组相比,H组TLR4、MyD88和NF-κB p65蛋白水平下调(P <0.05)。E组和F组LC3-Ⅱ/Ⅰ比值、TNF-α、IL-1β、IL-6水平无明显变化(P>0.05);与F组相比,H组LC3-Ⅱ/Ⅰ比值、TNF-α、IL-1β、IL-6水平下降(P <0.05);与G组相比,H组LC3-Ⅱ/Ⅰ比值、TNF-α、IL-1β、IL-6水平下降(P <0.05)。结论 TLR4-siRNA可抑制TLR4介导的小胶质细胞自噬,从而减轻自噬引起的脑出血炎症损伤。     

MiR-506-3p/SOCS-3促进BCG感染巨噬细胞引发的炎症应答反应

目的 探究miR-506-3p在卡介苗(Bacillus Calmette-Guérin, BCG)感染巨噬细胞诱导的炎症应答进程中的作用及其机制。方法 制备BCG感染巨噬细胞RAW264.7模型;采用RT-PCR检测miR-506-3p及细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6和iNOS的mRNA表达水平;利用ELISA方法测定炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-6的分泌水平;用Griess法评估NO的分泌情况;CFU计数法评估BCG存活率;应用双荧光素酶报告实验、RT-PCR及Western Blot法验证miR-506-3p与SOCS-3的靶向调控关系。结果 BCG感染能够引起RAW264.7细胞中miR-506-3p的表达量显著下调,并且具有时间依赖性。另外,miR-506-3p过表达后可显著增加BCG感染的RAW264.7细胞中炎症细胞因子TNF-α、IL-1β和IL-6的mRNA和蛋白水平。同时,miR-506-3p上调能够明显增加BCG感染后RAW264.7中NO的产生及iNOS的表达。此外,过表达miR-506-3p可明显降低胞内BCG的存活率。更为重要的是miR-506-3p能够靶向结合SOCS-3的3′-UTR,并可负调控其表达。结论 MiR-506-3p通过抑制靶基因SOCS-3从而促进BCG刺激诱导的巨噬细胞炎症反应进程,从而导致胞内BCG的存活率降低,有望为结核病的临床研究和治疗提供一个新的潜在靶点。     

MiR-506-3p靶向TRAF6抑制心肌炎的炎性反应和心肌细胞凋亡

目的探讨miR-506-3p调节心肌炎炎性反应及心肌细胞凋亡的潜在作用机制。方法使用SD大鼠制备病毒性心肌炎(VMC)动物模型,RT-qPCR法检测正常SD大鼠和VMC模型大鼠心脏组织中miR-506-3p相对表达水平;分离培养VMC大鼠心肌细胞,将模拟物对照、miR-506-3p模拟物或miR-506-3p抑制剂转染至心肌细胞,分别采用RT-qPCR、ELISA和Hoechst 33342染色法检测转染后细胞中miR-506-3p表达、细胞上清液中肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6、IL-1β水平及细胞凋亡情况。Targetscan在线预测,RT-qPCR和双荧光素酶报告基因实验验证miR-506-3p和肿瘤坏死因子受体相关因子(TRAF)6的靶向关系。结果与正常SD大鼠相比,VMC模型大鼠心脏组织中miR-506-3p表达显著下调(P<0.05)。以VMC模型大鼠心肌细胞为研究对象,转染miR-506-3p模拟物后,细胞中miR-506-3p表达显著上调(P<0.05),细胞上清液中TNF-α、IL-6、IL-1β水平显著降低(P<0.05),细胞凋亡显著减少(P<0.05);转染miR-506-3p抑制剂则结果相反。Targetscan在线预测、双荧光素酶报告基因和RT-qPCR实验结果表明,TRAF6是miR-506-3p的潜在靶基因,并且miR-506-3p可负调控TRAF6表达。结论 miR-506-3p在心肌炎组织中呈低表达,过表达miR-506-3p可抑制心肌炎炎症反应和心肌细胞凋亡,其机制可能与TRAF6有关。     

海南省气候对“候鸟”高血压患者炎性因子和miR-146a的短期影响

目的:调查海南省外地(候鸟)高血压人群的血压水平、血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-1β(IL-1β)以及外周血单核细胞(PBMC)内微小RNA (miR)-146a基因表达的3个月内的变化。方法:共纳入90例研究对象,其中高血压组60例和正常对照组30例。测量并记录两组人群初到海南1周内、1个月和3个月后的血压情况,比较两组人群的血清中TNF-α、IL-6和IL-1β以及PBMC内miR-146a基因的表达情况。结果:与1周内相比,高血压患者1个月和3个月收缩压和舒张压明显降低(P均0.05),TNF-α、IL-1β和IL-6水平以及miR-146a基因表达也明显下调(P0.05)。miR-146a基因与TNF-α、IL-1β呈显著正相关(P0.05),而与IL-6无显著相关性(P0.05)。正常对照组的血压水平、血清炎性因子浓度和miR-146a基因表达在三个时间段无明显差异。结论:高血压患者在海南居住1个月后血压改善,可能与TNF-α、IL-1β和IL-6水平以及miR-146a基因表达降低有关。     

雷公藤多苷通过JAK2/STAT3信号通路减轻溃疡性结肠炎大鼠肠黏膜细胞凋亡及炎症的实验研究

目的研究雷公藤多苷(TG)通过Janus激酶2(JAK2)/信号转导与转录激活子3(STAT3)信号通路对溃疡性结肠炎(UC)大鼠肠黏膜细胞凋亡及炎症的调节作用。方法将SD大鼠分为对照组、UC组、TG组、AG490组,UC组、TG组、AG490组采用三硝基苯磺酸/乙醇灌肠的方式建立UC模型,TG组给予TG灌胃干预,AG490组给予JAK2/STAT3抑制剂AG490干预。检测肠黏膜细胞凋亡率、凋亡基因及JAK2/STAT3表达、炎症细胞因子含量。结果 UC大鼠肠黏膜细胞凋亡率、Caspase-9、Caspase-3、p-JAK2、p-STAT3的表达水平及TNF-α、IL-1β、IL-6的含量均明显高于对照组,Bcl-2、Bcl-xL的表达水平明显低于对照组(P 0. 05); TG组大鼠肠黏膜细胞凋亡率、Caspase-9、Caspase-3、p-JAK2、p-STAT3的表达水平及TNF-α、IL-1β、IL-6的含量均明显低于UC组,Bcl-2、Bcl-xL的表达水平明显高于UC组(P 0. 05)。AG490组大鼠肠黏膜细胞凋亡率、Caspase-9及Caspase-3的表达水平、TNF-α、IL-1β、IL-6的含量均明显低于UC组,Bcl-2、Bcl-xL的表达水平明显高于UC组(P 0. 05)。结论 TG能够通过JAK2/STAT3信号通路减轻UC大鼠肠黏膜细胞的凋亡及炎症。     

黄芩素对大鼠心肌缺血-再灌注损伤的保护作用及对Janus激酶-信号转导与转录激活分子信号通路的影响

目的探讨黄芩素对大鼠心肌缺血-再灌注(I/R)损伤的作用及对Janus激酶(JAK)-信号转导与转录激活分子(STAT)信号通路的影响。方法 50只大鼠随机分为正常对照(C)组、假手术对照(S)组、模型(IR)组、黄芩素低剂量(L)组和高剂量(H)组,每组10只。对IR组、L组、H组采用冠脉前降支结扎释放制备I/R损伤模型,L组、H组黄芩素分别腹腔注射给药0.4和1.2 mg/(kg·d),连续给药7 d。氯化三苯基四氮唑(TTC)法评价心肌梗死率,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β、IL-6水平,实时荧光定量PCR及Western印迹分别检测心肌组织中Bcl-2、Bax、JAK2和STAT3基因mRNA及蛋白相对表达水平。结果 IR组、L组、H组I/R损伤造模成功,C组和S组心肌正常。与S组相比,IR组、H组、L组均出现不同程度灰白色坏死心肌,且血清中TNF-α、IL-1β、IL-6水平明显增加,Bax、JAK2和STAT3基因mRNA及蛋白表达升高,而Bcl-2基因mRNA及蛋白表达降低,差异均有统计学意义(P0.05)。与IR组比,H组、L组灰白色坏死心肌均明显减少,血清中TNF-α、IL-6水平相对降低,Bax、JAK2和STAT3基因mRNA及蛋白表达相对降低,而Bcl-2基因mRNA及蛋白表达相对升高,差异均有统计学意义(均P0.05)。与L组相比, H组灰白色坏死心肌有所减少,血清中TNF-α、IL-6水平降低,Bax、JAK2和STAT3基因mRNA及蛋白表达降低,而Bcl-2基因mRNA及蛋白表达升高,差异均有统计学意义(均P0.05)。结论黄芩素对大鼠I/R损伤具有保护作用,其机制可能与抑制JAK-STAT信号通路有关。     

miR-125a-5p抑制剂对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响

目的探讨miR-125a-5p抑制剂对大鼠心肌缺血再灌注(I/R)损伤的影响。方法将30只大鼠随机分为假手术组(sham组)、I/R损伤组(I/R组)和I/R+miR-125a-5p抑制组。采用生物信息学软件及荧光素酶报告体系预测和验证信号传导与活化转录因子3(STAT3)和miR-125a-5p之间靶向性。分析定量即时聚合酶连锁反应(qRT-PCR)鉴定体系中STAT3和miR-125a-5p表达;苏木素-伊红(HE)检测心肌组织细胞损伤情况;免疫组织化学法检测组织白介素-6(IL-6)表达情况;酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测组织细胞氧化应激产物;免疫印迹试验(Western Blot)测定体系中凋亡相关分子的表达。结果经生物信息学和荧光素酶报告系统验证STAT3和miR-125a-5p具有较强的靶向性。I/R组miR-125a-5p表达量上调,STAT3表达受到抑制,细胞内氧化应激及炎症因子增加,细胞发生凋亡(P0.01);I/R+miR-125a-5p抑制组miR-125a-5p表达量下调,STAT3表达上升,细胞内氧化应激及炎症因子下调,凋亡现象有所改善(P0.01)。结论应用miR-125a-5p抑制剂可有效降低miR-125a-5p对STAT3的抑制效果,减少细胞凋亡和氧化应激反应,进而减缓大鼠心肌I/R损伤。     

夏枯草硫酸多糖下调miR-886-5p对肺结核模型大鼠的干预效果及作用机制

目的 研究夏枯草硫酸多糖下调miR-886-5p对肺结核模型大鼠的干预效果及作用机制。方法 50只大鼠随机选取10只为正常组,其余40只建立肺结核模型,喂养4 w后每组随机抽样2只,取肺组织苏木素-伊红(HE)染色,发现肺组织可见大量炎性细胞浸润为建模成功。建模成功后将建模成功的38只大鼠分为模型组(14只)、低剂量组(12只)、高剂量组(12只)。低剂量组给予夏枯草硫酸多糖60 mg/kg,高剂量组给予夏枯草硫酸多糖100 mg/kg,均4 d/1次,共3次。正常组、模型组给予生理盐水。各组均连续灌胃2 w。对比分析各组miR-886-5p、氨基转移酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6水平及转化生长因子(TGF)-β1/Smad3通路蛋白表达量。结果 相比与正常组,模型组、低剂量组、高剂量组miR-886-5p、ALT、AST、TNF-α、IL-6水平显著升高(P<0.05);与模型组相比,低剂量组、高剂量组miR-886-5p、ALT、AST、TNF-α、IL-6水平显著降低(P<0.05);与低剂量组相比,高剂量组mi...     

白果内酯通过调控miR-93-5p表达对高糖诱导足细胞损伤的保护作用及其机制

目的 探究白果内酯对高糖诱导的足细胞损伤的影响及其机制。方法 体外培养小鼠足细胞(MPC5),经不同剂量(15、30、60μmol/L)白果内酯干预后,建立高糖诱导的损伤模型,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养上清液中炎症因子[肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6、IL-1β]含量,流式细胞术、Western印迹法分别测定凋亡率和凋亡关联蛋白[活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(cleaved-caspase)3、9]表达,实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-qPCR)测定miR-93-5p表达。分别转染miR-93-5p模拟物或抑制剂至MPC5,经0、60μmol/L白果内酯干预后,建立高糖诱导的损伤模型,上述相同方法检测炎症因子水平、凋亡率及凋亡相关蛋白表达。结果 与高糖组比较,白果内酯各剂量组TNF-α、IL-6、IL-1β水平、凋亡率、cleaved-caspase3、9表达显著降低,miR-93-5p表达显著增高(P<0.05)。与高糖+miR-NC组比较,高糖+miR-93-5p组miR-93-5p表达明显升高,TNF-α、IL-6、IL-1β水...     

miR-150-5p对脑小血管病大鼠脑微血管内皮细胞凋亡的影响

目的 分析miR-150-5p对脑小血管病(CSVD)大鼠脑微血管内皮细胞凋亡的影响。方法 56只雄性大鼠14只作为正常组并不做处理，剩余42只建立CSVD模型，建模中途死亡6只。将建模成功的大鼠随机分为模型组、上调组、下调组，每组8只，做miR-150-5p转染，鉴定miR-150-5p转染率、氧化应激指标水平、神经凋亡率和乳酸脱氢酶(LDH)释放率。结果 与正常组、模型组相比，上调组miR-150-5p表达量升高，下调组miR-150-5p表达量降低，具有统计学差异(P<0.05),证明miR-150-5p转染成功。与正常组相比，模型组、下调组细胞凋亡率、LDH释放率、丙二醛(MDA)水平升高，超氧化物歧化酶(SOD)水平降低，上调组细胞凋亡率、LDH释放率、MDA水平降低，SOD水平升高，具有统计学差异(P<0.05);与模型组相比，下调组细胞凋亡率、LDH释放率、MDA水平升高，SOD水平降低，上调组细胞凋亡率、LDH释放率、MDA水平降低，SOD水平升高，具有统计学差异(P<0.05);与上调组相比，下调组细胞凋亡率、LDH释放率、MDA水平升高，SOD水平...