基于UPLC-Q-Exactive-MS代谢组学技术的蒙药塔布森-2对去势大鼠代谢的调控作用研究

目的基于超高效液相色谱联用四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱仪(UPLC-Q-Exactive-MS)代谢组学技术,研究蒙药塔布森-2(由杜仲和蓝刺头配伍而成)对去势大鼠代谢的调控作用。方法 Wistar雌性大鼠随机分为空白组、假手术组、模型组、结合雌激素组(0.065 mg/kg)、骨疏康颗粒组(105.1 mg/kg)和蒙药塔布森-2高、中、低剂量(950、475、237.5 mg/kg)组,每组6只。大鼠进行卵巢摘除术后1周,进行阴道上皮细胞角质化实验,检测造模成功后,各给药组ig相应药物,空白组、假手术组和模型组ig等体积0.9%氯化钠溶液,1次/d,持续8周。末次给药24h后,采集各组大鼠的粪便尿液,进行UPLC-Q-Exactive-MS检测。结果尿液样本中,共鉴定出28个潜在生物标志物及8条代谢通路与蒙药塔布森-2治疗绝经后骨质疏松症有关;粪便样本中,共鉴定出28个潜在生物标志物及7条代谢通路与蒙药塔布森-2治疗绝经后骨质疏松症有关。结论蒙药塔布森-2主要通过调节组氨酸代谢、牛磺酸和亚牛磺酸代谢、丙氨酸及天冬氨酸和谷氨酸代谢、维生素B6代谢,治疗绝经后骨质疏松症。     

蒙药塔布森-2对于绝经后骨质疏松大鼠软骨细胞自噬的影响

目的：采取手术切除大鼠卵巢的方法制造骨质疏松模型,采用复方蒙药塔布森-2干预骨质疏松大鼠,验证蒙医学传统理论骨枯症“治以补暖补精,抑制赫依过剩”,蒙药塔布森-2抗骨质疏松“补暖、补精-抑制赫依-固骨质、壮骨”的生物学效应。方法：选择6月龄SD系SPF级健康雌性大鼠70只,随机分为7组,每组10只,分别为空白对照组,去卵巢骨质疏松模型组,蒙药塔布森-2高、中、低剂量组,中药对照组骨疏康组、阳性对照组己烯雌酚组。实验大鼠以浓度为7%的水合氯醛溶液（3 mL/kg）腹腔注射麻醉,由背部进入,完整摘除双侧卵巢,止血缝合。空白对照组仅将卵巢从腹腔提出而不切除（仅切除卵巢周围少量脂肪组织）。术后10周分别随机选出10只大鼠采用双能X线骨密度仪检测骨密度,以验证造模是否成功。术后正常饲喂12周,从第13周开始,各组给药体积均为1 mL(100 g体质量·d)。连续给药12周。灌胃直至第24周期满,末次给药后活体测量全身骨密度。麻醉致死大鼠,打开大鼠右侧膝关节,用刀片小心刮下附着在膝关节骨表面的关节软骨,取材后-80℃冻存,用于Western Blot免疫印迹分析。数据使用SPSS19.0统计学软件处...     

蒙药塔布森-2对于去卵巢大鼠骨质疏松软骨细胞自噬的作用

目的：绝经后妇女的骨质疏松症是我国妇女的常见病,其发生与血清雌二醇含量的下降有关,表现为全身骨密度绝对值的下降。软骨是关节的缓冲结构,骨质疏松发生时,往往伴有软骨组织的一系列改变。本实验采取手术切除大鼠卵巢的方法来制造骨质疏松模型,来阐明复方蒙药塔布森-2干预骨质疏松的机制,蒙药塔布森-2抗骨质疏松体现了“补暖、补精-抑制赫依-固骨质、壮骨”的生物学效应。方法：选择6月龄SD系SPF级健康雌性大鼠。SD大鼠70只,随机分为7组,每组10只,分别为空白对照组,去卵巢骨质疏松模型组,蒙药塔布森-2高、中、低剂量组,中药对照组骨疏康组,阳性对照组己烯雌酚组。实验大鼠以浓度为7%的水合氯醛溶液（3 mL/kg）腹腔注射麻醉,由背部进入,完整摘除双侧卵巢,止血缝合。空白对照组仅将卵巢从腹腔提出而不切除（仅切除卵巢周围少量脂肪组织）。术后10周从两组分别随机选出10只大鼠采用双能X线骨密度仪进行检测骨密度,以验证造模是否成功。术后正常饲喂12周,从第13周开始,蒙药塔布森高、中、低剂量及阳性药物组和中药对照组分别给予相应药物灌胃,给药体积均为1 mL(100 g体质量·d)。模型组、空白对照组给予...     

蒙药塔布森-2对斑马鱼糖皮质激素性骨质疏松的改善作用

目的：探究蒙药塔布森-2(TBD)及其特征成分抗斑马鱼糖皮质激素性骨质疏松的作用。方法：随机将受精后3天（3 dpf）的斑马鱼幼鱼分为模型组、阳性药物组、空白组、TBD给药组、特征成分单体组（3-羟基肉桂酸、紫云英苷、绿原酸、咖啡酸、原儿茶酸）及配伍给药组。以25 g/mL泼尼松龙诱导斑马鱼糖皮质激素性骨质疏松模型,给药组分别给予低、中、高浓度药物;待幼鱼培养至7 dpf,采用茜素红S染色,正置光学显微镜观察拍照,记录并计算斑马鱼椎骨个数及脊椎硬骨染色面积。结果：泼尼松龙模型组显示造模成功;TBD高浓度组椎体个数及染色面积较模型组均显著增加（P<0.05,P<0.01）,呈一定的量效关系;单体特征成分及其配伍后可不同程度增加椎体个数及染色面积,其中高浓度配伍给药组较模型组椎体个数和染色面积显著增加（P<0.05）。结论：TBD可有效改善斑马鱼糖皮质激素性骨质疏松,其特征成分配伍后抗骨质疏松的作用优于各单体特征成分。     

蒙药蓝刺头对骨折愈合影响的实验研究

目的:观察蒙药蓝刺头对骨折愈合的影响作用。方法:选用健康成年日本大耳白兔75只,制作双侧桡骨中段骨折模型。实验随机分为模型组,阳性对照骨碎补组(0.3g·kg~(-1)),蒙药蓝刺头高、中、低剂量组(3g·kg~(-1)、1.5 g·kg~(-1)、0.3g·kg~(-1)),药物掺入饲料,于造模后d1连续给药8wk。分别于骨折后第2、4、8wk时处死,并处死前取股动脉血,观察蒙药蓝刺头对骨折区域骨组织形态和血清相关骨代谢指标的影响。结果:血清I型前胶原N末端前肽(PINP)、I型胶原C末端肽(CTX-1)检测显示,相同时间点内除PINP各组中的蒙药蓝刺头中剂量组和骨碎补组无差异外,其余各组均有显著差异(P0.001);不同时间点的PIPN和CTX-1在各组间均存在显著性差异(P0.001)。X线片半定量评定,各组间比较显示,蒙药蓝刺头高剂量组在第2、4、8wk时与模型组、蒙药蓝刺头低剂量组比较具有统计学意义(P0.05);骨碎补组和蒙药蓝刺头中剂量组在第2、4wk时与模型组比较具有统计学意义(P0.05)。进行骨折愈合组织学评价,各组间比较显示,各期蒙药蓝刺头高剂量组与模型组、蒙药蓝刺头低剂量组比较均有显著性差异(P0.01);蒙药蓝刺头中剂量组、骨碎补组在第2、4、8wk时与模型组比较也具有显著性差异(P0.01)。结论:蒙药蓝刺头通过增高血清PINP浓度和降低CTX-1浓度,提高成骨细胞活性和成骨能力,促进骨折局部膜内成骨和软骨内成骨速度,促进骨痂早期改建和塑形,加快骨折愈合,其作用存在量-效依赖性、给药持续时间-效应关系。     

医院制剂复方苦参合剂对小鼠急性毒性实验研究

目的:通过对小鼠灌胃给药后出现的快速而剧烈的毒性反应进行观察,探讨复方苦参合剂的临床安全性.方法:应用可供灌胃的最大浓度(1.4 g/mL)、最大容积(0.4 mL/10g)的复方苦参合剂于24 h内重复给药2次,连续观察并记录给药后14 d内小鼠的中毒反应及死亡情况,观察小鼠毛发色泽、活动状态、饮食、排泄物及体质量变...     

复方仙草颗粒的急性毒性研究

目的:考察复方仙草颗粒的急性毒性,评价复方仙草颗粒的安全性。方法:预实验:9只SPF级昆明种小白鼠,禁食12h,随机分为3组,每组各3只。第一组按照0. 4mL/10g一次性灌胃给药,第二组按照0. 4mL/10g灌胃给药2次;第三组按照0. 4mL/10g灌胃给药3次,24h后,观察小鼠死亡情况。正式实验:40只SPF级昆明种小白鼠,禁食12h,随机分为空白对照组雄性组、空白对照组雌性组、给药雄性组、给药雌性组4组,每组10只,给药组按照0. 4mL/10g灌胃给药,在24h内分3次灌服。结果:预实验无实验小鼠死亡,正式实验小鼠均存活,无死亡;小鼠日给药最大量为80. 4g/kg;以成人每天用量30g来算,小鼠的最大耐受倍数为134倍。结论:复方仙草颗粒临床用药安全,无明显毒性。     

复方杠板归胶囊对小鼠的急性毒性实验研究

目的观察复方杠板归胶囊对雌性小鼠的急性毒性。方法小鼠单次灌胃给药进行急性毒性预实验,观察一般状况和死亡情况,无死亡,则不能求出半数致死量,采用1天内最大浓度和最大体积的药量灌胃,连续观察14 d,测其最大给药量。结果小鼠单次灌胃给予复方杠板归胶囊,经预实验提示LD50无法测出,故进行最大给药量实验,小鼠灌胃给药的最大给药量为32.8g/kg(相当于生药262.72g/kg),为临床人推荐用量的400倍。结论复方杠板归胶囊对小鼠急性毒性甚低。     

蒙药蓝刺头对去卵巢大鼠离体骨骨密度及骨最大变形挠度的影响

目的:研究蒙药蓝刺头对去卵巢大鼠骨密度及骨最大变形挠度的影响。方法:将84只雌性大鼠随机分成7组,每组12只,分别为蒙药蓝刺头高、中、低剂量组、骨疏康组、假手术组、己烯雌酚组、模型组。造模成功后,饲养90 d后灌胃90 d,检测离体骨骨密度及骨最大变形挠度。结果:与模型组比较,己烯雌酚组、骨疏康组、蒙药蓝刺头3个剂量组大鼠离体股骨检测部位骨密度均高于模型组(P0.01);蒙药蓝刺头3个剂量组、骨疏康组、己烯雌酚组大鼠骨密度均低于做手术组(P0.05);己烯雌酚组、骨疏康组、蒙药蓝刺头3个剂量组大鼠骨密度未见明显差异(P0.05)。其他6组与假手术组比较,实验大鼠左侧股骨变形挠度均有明显差异(P0.05),而其中未给药干预的模型组与假手术组比较降低显著(P0.01)。给药干预后,与模型组比较,骨疏康组、蒙药蓝刺头3个剂量组、己烯雌酚组实验大鼠左侧股骨的最大变形挠度均明显增加(P0.01)。结论:蒙药蓝刺头可提高去卵巢大鼠骨最大变形挠度及离体骨骨密度,提高骨抵御外力冲击的能力,改善骨质量。     

前药dl-PHPB的急性毒性及伴随毒代动力学研究

目的评价Beagle犬静脉注射丁基苯酞（dl-NBP）前体2-（α-羟基戊基）苯甲酸钾（dl-PHPB）的急性毒性反应及伴随毒代动力学。方法采用近似致死剂量法（ALD）,给药剂量分别为41 mg/kg9、3 mg/kg2、10 mg/kg3、15 mg/kg。同时采用HPLC-UV方法测定血药浓度,使用DAS软件进行数据处理,和毒代动力评价,采血时间为给药后3 min1、5 min3、0 min1、h2、h4、h、6 h和8 h。结果随给药剂量的增加逐渐出现身体颤抖、头部震颤、呕吐、站立不能、后肢肌束震颤等反应,但给药后2 h基本恢复正常;315 mg/kg剂量组动物给药后6 min死亡。dl-PHPB可快速转化为dl-NBP,其AUC0-∞分别为24.8μg hr/mL、49.0μg hr/mL、76.0μg hr/mL,明显低于dl-NBP的AUC0-∞分别为200.8μg hr/mL、340.6μg hr/mL、407.1μg hr/mL。结论 Beagle犬单次静脉注射dl-PHPB的近似致死剂量范围为210 mg/kg~315 mg/kg。伴随毒代动力学研究显示dl-PHPB的毒性反应与其快速转化为dl-NBP密切相关。     

复方野葛根胶囊的急性毒性作用研究

目的 观察复方野葛根胶囊的急性毒性反应.方法 复方野葛根胶囊以最大浓度及最大给药体积的药液灌胃给药,对照组给予同体积蒸馏水,3次/d.连续观察14 d,记录小鼠毒副反应情况.结果 观察14 d后,给药组与对照组比较,全部动物健存;对照组及给药组小鼠体质量平均增长分别为40.56%、40.96%,无明显差异(P>0.05),未见任何毒性反应.计算其最大给药量为2 322 mg葛根素/kg体质量.结论 复方野葛根胶囊毒性较小.     

胃复方的急性毒性实验研究

目的:对胃复方进行急性毒性实验研究,观察其安全性。方法:将实验小鼠按体质量随机分为2组,采用最大给药量法测定小鼠口服胃复方的最大耐受量,给药组24h内2次以最大浓度、最大体积的中药胃复方给予小鼠灌胃,对照组小鼠灌服等剂量蒸馏水,观察记录2组小鼠一般情况及死亡情况,对主要脏器进行病理组织学检测。结果:给药组小鼠一般情况良好,无1例死亡。与对照组比较,体质量变化差异无统计学意义(P0. 05);主要脏器病理组织学检测未见明显异常;最大给药量为221. 7g生药/kg,相当于60kg成人临床推荐剂量的127倍。结论:胃复方无明显毒性,在规定剂量下用药是安全可靠的。     

培元抗感口服液急性毒性及抗炎实验研究

目的：观察培元抗感口服液对昆明种小鼠的急性毒性反应、半数致死量（ LD50）及抗炎作用,为临床安全用药提供参考依据。方法培元抗感口服液（培元抗感口服液原液,0．41 g/mL）20．5 g/kg,给药容积0．5 mL 10 g体质量,每日给药2次,间隔2 h。连续14 d,观察用药后小鼠的反应及死亡率。采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀,以阿司匹林为阳性对照药,观察培元抗感口服液对急性炎症的影响。结果培元抗感口服液的小鼠最大耐受浓度（MTD）﹥20．5 g/kg（相当推荐临床用量的100倍）。培元抗感口服液8．2 g/kg组小鼠耳廓肿胀明显低于空白对照组（ P ＜0．05）。结论培元抗感口服液的MTD﹥20．5 g/kg;对二甲苯所致的急性炎症有一定的抑制作用。     

补正续骨丸小鼠急性毒性实验研究

目的:进行补正续骨丸小鼠灌胃给药毒性实验研究。方法:由于无法测出补正续骨丸小鼠灌胃给药的半数致死量(LD50),故以补正续骨丸所能配制的最大给药浓度和小鼠所能承受的最大灌胃给药容积,进行小鼠灌胃给药的最大给药量的测定。结果:该药在所能配成的最大浓度0.46 g/m L和小鼠所能承受的最大灌胃给药容积40 m L/Kg的情况下,1日内小鼠灌胃给药2次,给药量18.40 g/kg(12.63 g生药/kg),此剂量为成人每日口服量的122.67倍(成人体质量按60 kg计)动物无死亡,观察14 d,未见明显毒性反应。动物在观察期结束后进行大体解剖,肉眼观察心、肝、脾、肺、肾等主要脏器,未见异常改变。结论:通过本次为期14 d的动物实验观察,补正续骨丸对小鼠机体无损害现象,未发生急性毒性反应,为临床用药安全提供了较可靠的依据,值得进一步观察使用。     

特效风湿宁胶囊小鼠灌胃急性毒性试验

目的:观察特效风湿宁胶囊小鼠灌胃的急性毒性,测定LD50或最大给药量,为临床治疗研究提供重要的依据。方法:在预试验中,将10只小鼠分成两组进行给药,观察1组在以0.4mL/10g单次给予91%(最大浓度,620g生药/100mL)的特效风湿宁胶囊浓缩液,对照1组进行等量的饮用水灌胃,两组10只动物无一死亡,遂进行最大给药量测定。正式试验时,取健康昆明种小鼠20只,雌雄各半,将小鼠以雌雄平均分配的方式分成两组,分别为观察组和对照组,观察组灌胃给予91%的特效风湿宁胶囊浓缩液,每隔6h给药一次,连续2次;对照组小鼠进行等量的饮用水灌胃,其他的均与观察组相同,两组小鼠在给药后进行观察14d。结果:观察期内未见动物有严重的急性毒性反应。特效风湿宁胶囊小鼠灌胃的最大给药量是72.8g/kg(相当于496g生药/kg),此剂量相当于临床人用量的1055.32倍(人以60kg计,每天的临床剂量为0.47g生药/kg)。结论:特效风湿宁胶囊"的急性毒性较小。     

啤酒花提取物的急性毒性实验研究

目的:通过小鼠急性毒性试验,探究啤酒花提取物的安全性。方法:通过半数致死量试验和最大给药量试验确定啤酒花提取物给药剂量。半数致死量试验:给药剂量分别为1.59 g/kg、2.28 g/kg、3.23 g/kg、4.59 g/kg、6.57 g/kg,组间剂量比为1∶1.4。灌胃给药2次/d,给药间隔6 h,连续观察7 d,记录动物死亡情况。最大给药量试验:给药剂量为6.57 g/kg,24 h内给药2次,连续观察14 d后进行大体解剖学检查,观察动物器官有无病理变化,测定脏器质量并计算脏器系数。结果:半数致死量试验结果显示,给药后小鼠未死亡,无法测出LD50,最大给药量试验结果显示,小鼠未死亡,剖检的器官无明显异常。雌雄给药组脏器系数和体质量与空白组比较,差异无统计学意义(P0.05)。小鼠最大给药量13.14 g/kg折合生药为52.56 g/kg。结论:啤酒花提取物安全性良好,小鼠最大给药量相当于临床体重为70 kg的人日用量的30倍。     

复方黄芪颗粒对机体免疫调节作用随机平行对照研究

[目的]观察复方黄芪颗粒对机体免疫调节作用。[方法]使用随机平行对照方法,将50只清洁级雌性ICR小鼠按随机数字表法分为5组,复方黄芪颗粒低剂量组、中剂量组、高剂量组、补中益气丸组及空白对照组,10只/组。分组后使用1.25%2,4-二硝基氯苯丙酮液背部皮下注射20μL/只,次日开始灌胃干预。复方黄芪颗粒组(复方黄芪颗粒27.3g生药/kg、54.6g生药/kg、109.2g生药/kg);补中益气丸组补中益气丸7.02g/kg;空白对照组等量蒸馏水。给药体积均为50mL/kg,连续给药9d(1次/d),末次给药24h后于小鼠左耳涂1.25%2,4-二硝基氯苯丙酮液20μL/只。末次给药24h后处死小鼠,使用8mm打孔器打下左右两侧同部位的耳片,精密称重。观测耳肿胀度。[结果]复方黄芪高剂量组、中剂量组、阳性对照组小鼠耳肿胀度均低于空白对照组(P0.05,P0.01);复方黄芪颗粒低剂量组与空白对照组无明显差异(P0.05)。[结论]复方黄芪颗粒对2,4-二硝基氯苯所致迟发型超敏反应小鼠耳肿胀均有抑制作用,可明显改善小鼠机体细胞免疫。     

复方金钱草颗粒抗菌作用和急性毒性实验研究

目的:研究复方金钱草颗粒体内外抗菌作用及其急性毒性。方法:采用平皿2倍稀释法测定复方金钱草颗粒对临床常见的革兰氏阳性及革兰氏阴性菌的体外抗菌作用,选择金黄色葡萄球菌进行小鼠体内细菌感染的保护实验,观察复方金钱草颗粒的抗菌作用。并测定复方金钱草颗粒体小鼠灌服给药的急性毒性。结果:复方金钱草颗粒对金黄色葡萄球菌、变形杆菌作用较强,最低抑菌浓度为4.5%,绿脓杆菌和大肠杆菌有一定的抗菌作用,最低抑菌浓度分别为18.0%和9.0%;对金黄色葡萄球菌感染小鼠具有明显的保护作用;小鼠灌服复方金钱草颗粒的急性毒性实验未观察到明显毒性反应,最大耐受量为157.5 g/kg。结论:复方金钱草颗粒在体外对具有代表性的G+菌、G-菌都有显著的抗菌作用,且大剂量服用比较安全。     

复方解酒药对急性乙醇中毒的影响

目的观察复方解酒药对急性乙醇中毒的影响。方法①取小鼠120只,随机分成对照组与给药组,分别给予酒30,60,90,120,150,180 min后各取小鼠10只经眼眶采血,用气相色谱法测定血中乙醇浓度。②取雄性小鼠30只,随机分成空白对照组、模型对照组、给药组,前2组给生理盐水0.20 mL/10 g,后1组给复方解酒药0.20 mL/10 g灌胃,30 min后前1组给生理盐水0.24 mL/10 g,后2组给酒0.24 mL/10 g连续9 d,第9天灌胃30 min后处死小鼠,用1.15%预冷KCl制作肝、胃匀浆液,用分光光度法测定GST,ADH活性和MDA含量。结果给药组在5个实验点血液中乙醇浓度都显著低于对照组(P<0.05),酒后30~180 min给药组药时曲线大幅度降低。给药组肝、胃ADH活性和肝中GST活性较模型对照组明显升高,给药组肝内MDA含量较模型对照组明显降低。结论复方解酒药可促进乙醇代谢,抑制脂质过氧化反应。     

蒙药复方顺气止痛丸急性毒性实验研究

目的:观察蒙药复方顺气止痛丸对小鼠的急性毒性反应。方法:一次性分别灌胃给予小鼠不同量的蒙药复方顺气止痛丸,观察急性毒性反应,记录死亡潜伏期,用孙氏综合法(改进蔻氏法)计算LD50及其95%可信限。结果:蒙药复方顺气止痛丸昆明小鼠LD50为71.06g/kg,95%可信区间为81.08~62.28g/kg。结论:动物急性毒性试验表明蒙药复方顺气止痛丸急性毒性很大,临床应用上需注意用量。