miR-139-5p靶向PAK5基因通过Wnt/β-catenin信号通路对胃癌细胞侵袭和迁移的影响

背景胃癌(Gastric cancer,GC)是人类消化系统最常见的癌症类型,发生局部或全身转移是导致患者预后差的主要原因.微小RNA(microRNA,miRNA)是胃癌发生发展的重要调控因子.然而,miR-139-5p对胃癌细胞侵袭和转移的影响及机制尚不清楚.目的探究miR-139-5p靶向p21活化的激酶5(PA...     

PGM5-AS1抑制miR-4728-5p对宫颈癌细胞侵袭、转移的影响

目的 研究长链非编码RNA(lncRNA)葡萄糖磷酸变位酶样蛋白5反义(PGM5-AS)1对微小RNA(miRNA)-4728-5p的靶向调控及对宫颈癌细胞侵袭、转移的影响。方法 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测宫颈癌组织中PGM5-AS1表达。在宫颈癌SiHa细胞中转染pcDNA3.1-PGM5-AS1或anti-miR-4728-5p。采用噻唑蓝(MTT)法检测SiHa细胞的增殖,平板克隆形成实验分析细胞的克隆形成,Transwell小室法评估细胞的侵袭迁移,Western印迹测定细胞中细胞增殖抗原Ki67、E钙黏蛋白(E-cadherin)、N钙黏蛋白(N-cadherin)蛋白表达。生物信息学预测与双荧光素酶报告实验验证PGM5-AS1对miR-4728-5p的靶向调控。qRT-PCR检测miR-4728-5p的表达。结果 宫颈癌组织中PGM5-AS1的表达量明显减少(P<0.05)。转染pcDNA3.1-PGM5-AS1显著降低SiHa细胞的细胞存活率、克隆形成数、迁移细胞数、侵袭细胞数、Ki67和N-cadherin蛋白水平,并明显提高E-cadherin蛋白...     

miR-215对胃癌细胞侵袭转移能力的影响及机制

目的探讨miR-215对胃癌细胞侵袭转移能力的影响及作用机制。方法通过RT-PCR检测miR-215在高转移胃癌细胞株NCIN87,BGC-823,RF-48及低转移细胞株HGC-27及MKN-28中的表达;Transwell迁移及侵袭实验检测miR-215抑制剂对胃癌细胞迁移及侵袭能力的影响;Western印迹检测miR-215抑制剂对胃癌细胞活化白细胞黏附分子(ALCAM),基质金属蛋白酶(MMP)-2,MMP-9,上皮细胞-间充质转化(EMT)相关蛋白E-钙黏附素(E-cadherin),波形蛋白(Vimentin)表达量的影响。结果 RT-PCR结果证实miR-215在高转移胃癌细胞株中的表达高于低转移胃癌细胞中的表达,且miR-215在BGC-823细胞中的表达最高,因此选用BGC-823作为后续实验细胞株。miR-215抑制剂转染BGC-823细胞48 h后,发现下调miR-215表达能显著抑制BGC-823细胞迁移及侵袭能力,并能下调ALCAM,MMP-2,MMP-9及Vimentin表达,上调E-cadherin表达。结论miR-215低表达能显著抑制胃癌细胞BGC-823侵袭及转移能力,与下调MMPs及抑制EMT生成有关。     

微小RNA-381靶向调控HMGB1基因对人主动脉血管平滑肌细胞增殖和迁移的影响

目的:探讨微小RNA-381(mi R-381)对人主动脉血管平滑肌细胞(HA-VSMCs)增殖和迁移的影响及其机制。方法:采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测mi R-381的表达水平,采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT)和Transwell小室实验检测HA-VSMCs细胞增殖和迁移能力,采用双荧光素酶报告基因实验检测mi R-381与高迁移率族蛋白(HMGB1)的靶向关系,采用Western blot检测HMGB1蛋白表达水平。结果:血小板衍生生长因子(PDGF)能够促进HA-VSMCs增殖和迁移,下调mi R-381表达水平;上调mi R-381表达可抑制PDGF诱导的HAVSMCs增殖和迁移;双荧光素酶报告基因实验证实HMGB1是mi R-381的靶基因;上调HMGB1表达能够逆转mi R-381对HA-VSMCs增殖和迁移的抑制作用。结论:mi R-381可通过靶向HMGB1抑制HA-VSMCs细胞增殖和迁移。     

circRNA CDR1as靶向miR-876-5p调控肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭

目的 研究环状RNA CDR1as对肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响.方法 运用实时荧光定量-聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测正常肝细胞L02和肝癌细胞Huh-7、Hep-3B中CDR1as、miR-876-5p的表达;将si-NC组(转染si-NC)、si-CDR1as组(转染si-CDR1as)、miR-NC组(...     

人脑胶质瘤组织中高迁移率族蛋白B1的表达及其与病理分级的关系

目的探讨人脑胶质瘤组织中高迁移率族蛋白(HMG)B1的表达及其与病理分级的关系。方法选取外科手术治疗后经病理证实的脑胶质瘤标本80例为研究组,另外选择同期25例行开颅减压手术的脑外伤患者的正常脑组织为对照组。采用RT-PCR法和免疫组化法检测人脑胶质瘤组织和正常脑组织中的HMGB1表达,分析表达差异性与病理级别的关系。结果实验组HMGB1基因表达量(25.371±2.837)明显高于对照组(6.074±3.309)(P0.05);HMGB1蛋白阳性表达率为75.00%,高于正常脑组织中的20.00%(P0.05);在病理分级中,实验组的Ⅲ~Ⅳ级胶质瘤组HMGB1 mRNA表达量(29.835±3.942)显著高于Ⅰ~Ⅱ级(21.332±2.253)(P0.05),Ⅲ~Ⅳ级胶质瘤组HMGB1蛋白阳性表达率(76.92%)高于Ⅰ~Ⅱ级(70.73%)(P0.05)。结论 HMGB1在人脑胶质瘤的临床治疗中具有重要指导意义。     

持续肾脏替代治疗对严重脓毒症患者血清中高迁移率族蛋白-1、白介素-8和-12水平的影响

目的探讨持续肾脏替代治疗(CRRT)对严重脓毒症的治疗效果及对血清中高迁移率族蛋白(HMG)-1、白细胞介素(IL)-8和-12的影响。方法严重脓毒症患者98例,随机分为观察组和对照组各49例,均参照2008年严重脓毒症和脓毒症性休克治疗指南,除了早期容量复苏、升压药物等常规治疗外,均给予早期经验性广谱抗感染治疗,观察组在此基础上加用CRRT。应用酶联免疫吸附实验检测两组血清HMG-1、IL-8和-12表达。结果观察组治疗效果明显优于对照组,两组治疗后血清HMG-1、IL-8和-12表达均下降,但观察组下降值明显高于对照组。结论 CRRT治疗严重脓毒血症效果显著,且能降低HMG-1、IL-8和-12表达,进而调节微环境。     

慢病毒介导的SUMO1P3基因表达对胃癌细胞侵袭、迁移、黏附能力及EMT的影响

目的探讨小泛素样修饰物基因(SUMO)1P3基因siRNA慢病毒对胃癌细胞侵袭、迁移、黏附能力及上皮细胞间质转化(EMT)的影响。方法将人胃癌BGC-823细胞分为空白组、NC组(转染阴性对照慢病毒载体)和si-SUMO1P3组(转染SUMO1P3基因的siRNA慢病毒载体)。Western印迹检测SUMO1P3下调效果及EMT相关E-钙黏蛋白(cadherin)、波形蛋白(Vimentin)和α-SMA蛋白表达。噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力及黏附能力;Transwell小室检测细胞侵袭和迁移能力。结果 si-SUMO1P3的组SUMO1P3蛋白表达明显低于空白组(P<0.05)。si-SUMO1P3组BGC-823细胞24～72 h细胞活力均明显低于空白组(P<0.05);si-SUMO1P3组在接种的30 min和60 min细胞黏附能力均明显低于空白组(P<0.05);si-SUMO1P3组细胞侵袭能力、迁移能力均显著低于空白组,E-cadherin蛋白表达显著高于空白组,Vimentin和α-SMA蛋白显著表达低于空白组(P<0.05)。结论抑制SUMO1P3基因表达可能通过阻碍EMT降低胃癌细胞侵袭、迁移和黏附能力。     

miR-16通过靶向调控YAP1基因表达影响肺癌细胞的增殖

目的探讨miR-16通过靶向调控Yes相关蛋白(YAP) 1基因表达影响肺癌细胞的增殖。方法采用RT-PCR法检测miR-16在不同肺癌细胞株及人正常胚肺细胞中的表达。脂质体LipofectamineTM3000将miR-16 mimics和miR-16NC转入肺癌细胞中,RT-PCR检测miR-16表达,MTT法检测细胞活力,软琼脂糖克隆形成实验检测细胞克隆数目,Ho-echst33258检测细胞凋亡,流式细胞术检测细胞周期,RT-PCR法及Western印迹检测细胞中YAP1蛋白及mRNA表达,并进行荧光素酶报告基因分析。结果 miR-16在A549、H1050、H1299、NCI-H520、NCI H596及MIRC-5中的表达分别为(0. 38±0. 03)、(1. 35±0. 01)、(1. 10±0. 11)、(1. 43±0. 14)、(1. 56±0. 15)、(2. 38±0. 25);与MIRC-5比较,肺癌细胞中miR-16表达量下调(P<0. 01),且在A549细胞中表达量最低,因此选为后续实验研究对象。与miR-16 NC组比较,miR-16 mimics组miR-16表达量显著提高(P<0. 01);且转染24、48、72 h后,细胞活力均下降(P<0. 01);转染48 h后,细胞克隆形成数目减少(P<0. 01),细胞凋亡率提高(P<0. 01),细胞周期阻滞于G1期(P<0. 01);同时,miR-16 mimics能够靶向调控YAP1,下调YAP1蛋白及mRNA表达(P<0. 01)。结论 miR-16 mimics通过靶向下调YAP1表达进而抑制A549细胞增殖。     

LncRNA LUCAT1通过靶向miR-199a-5p调控宫颈癌细胞活性、侵袭迁移及其分子机制

目的研究长链非编码RNA肺癌相关转录产物(LUCAT)1对宫颈癌细胞的活性、迁移和侵袭的影响,并探讨其机制。方法运用qRT-PCR法检测宫颈癌细胞Hela、正常宫颈细胞Ect1/E6E7中LUCAT1、miR-199a-5p的表达;将si-con组(转染si-con)、si-LUCAT1组(转染si-LUCAT1)、miR-199a-5p组(转染miR-199a-5p模拟物)、miR-NC组(转染miR-NC)、si-con+anti-miR-199a-5p组(共转染si-con和anti-miR-199a-5p)、si-LUCAT1+anti-miR-199a-5p组(共转染si-LUCAT1和anti-miR-199a-5p),均用脂质体法转染至Hela细胞;噻唑蓝(MTT)法检测各组细胞的活性;Transwell法检测各组细胞的迁移和侵袭;双荧光素酶报告基因检测实验检测各组细胞的荧光活性。结果与正常宫颈细胞Ect1/E6E7相比,宫颈癌细胞Hela中LUCAT1表达显著升高,miR-199a-5p表达显著降低;敲减LUCAT1、过表达miR-199a-5p均可明显抑制Hela细胞的活性、迁移和侵袭;miR-199a-5p可抑制野生型LUCAT1细胞的荧光活性,且LUCAT1可负向调控miR-199a-5p的表达;抑制miR-199a-5p可逆转敲减LUCAT1对Hela细胞的活性、迁移、侵袭的抑制作用。结论 LUCAT1可促进宫颈癌细胞的活性、迁移、侵袭,其机制可能与靶向miR-199a-5p有关,将可为宫颈癌的治疗提供靶点。     

hsa-miRNA-424-5p靶向GPR30对宫颈癌恶性生物学行为的影响

目的 探讨hsa-miRNA-424-5p(miR-424-5p)对宫颈癌恶性生物学行为的影响及机制.方法 选取12例正常宫颈组织和33例宫颈癌组织;将宫颈癌HeLa细胞随机分为NC mimics组、mimics组、NC inhibitor组、inhibitor组,分别转染miR-424-5p模拟物阴性对照、模拟物、抑...     

盐酸法舒地尔对老年脑梗死患者疗效及血清高迁移率族蛋白B1、可溶性CD40L和单核细胞趋化因子1的影响

目的分析盐酸法舒地尔对老年脑梗死的治疗效果及对血清中高迁移率族蛋白(HMG)B1、可溶性CD40L(s CD40L)和单核细胞趋化因子(MCP)-1的影响。方法 146例老年脑梗死患者随机分为两组,对照组73例,应用常规治疗,观察组73例,在常规治疗基础上加用盐酸法舒地尔。应用酶联免疫实验检测治疗前、后血清中HMGB1、s CD40L和MCP-1的表达差别。结果两组治疗后显效率差别显著(P0.05)。观察组治疗后血清中HMGB1、s CD40L和MCP-1表达的下降值明显高于对照组(P0.05)。结论盐酸法舒地尔治疗脑梗死老年患者的疗效明显,且能有效下调血清中HMGB1、s CD40L和MCP-1的表达,优化内环境。     

整合素a5b1对胃癌细胞黏附、转移及耐药的影响

目的:探讨整合素a5b1 mRNA表达水平对胃癌细胞黏附、迁移、髓外浸润过程的影响.方法:采用Western blot检测法及RT-PCR分别测量HTB-103、CRL-5822、CRL-5971及CRL-5973等不同对数生长期的白细胞株整合素a5b1蛋白表达水平及整合素a5b1 mRNA水平.将不同胃癌细胞株随机分为实验组及对照组,实验组加入整合素a5b1抗体,对照组加入同型IgG,观察两组胃癌细胞与ECV304细胞系的黏附率、细胞迁移率及白细胞穿过人工基质膜的浸润能力.结果:CRL-5822、CRL-5971及CRL-5973细胞整合素a5b1 mRNA相对表达量分别为(0.0821±0.0128)、(0.185±0.0082)、(0.798±0.042)明显高于HTB-103细胞(0.0002±0.0000)(P<0.05).观察组CRL-5822、CRL-5971及CRL-5973细胞株黏附率(52.16%±2.52%、44.22%±2.59%、33.58%±4.06%)、迁移率(45.96%±1.21%、38.86%±1.99%、24.65%±3.28%)及浸润率(29.85%±4.63%、21.31%±3.24%、13.67%±3.48%)、显著低于对照组黏附率(83.89%±7.21%、71.17%±7.38%、60.89%±10.59%)、迁移率(75.41%±9.51%65.78%±14.62%,49.91%±13.47%)及浸润率(42.63%±7.69%,29.92%±5.47%,21.59%±6.72%)(P<0.05),而两组HTB-103细胞黏附率、迁移率及浸润率无统计学差异(P>0.05).结论:黏附因子整合素a5b1可能参与胃癌细胞的形成、聚集、生长及浸润的过程,其表达水平与胃癌病程进展具有密切的关系.     

姜黄素对输血相关急性肺损伤大鼠肺损伤及肺组织TLR4、HMGB1表达的影响

目的 探究姜黄素(Cur)对输血相关急性肺损伤(TRALI)大鼠肺损伤及肺组织Toll样受体(TLR)4、高迁移率族蛋白(HMG)B1表达的影响。方法 将80只SPF级随机分为假手术组、TRALI组、Cur-200组、Cur-400组及Cur-800组,每组16只,给药1 w。建立TRALI动物模型,处死大鼠。采用苏木素-伊红(HE)染色观察小鼠肺组织病理变化,检测BALF细胞总数和中性粒细胞百分比,肺组织中免疫因子水平白细胞介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子(TNF)-α、人巨噬细胞炎性蛋白(MIP)-2肺组织氧化应激指标超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)含量,Western印迹检测TLR4、CD40、核因子(NF)-κB、HMGB1蛋白表达量,选取合理蛋白与Cur进行分子对接。结果 与TRALI组相比,Cur-200组、Cur-400组和Cur-800组肺组织干/湿重明显减小、肺泡灌洗液细胞总数和中性粒细胞百分比明显减小,肺组织免疫因子IL-1β、TNF-α、MIP-2水平均明显降低(均P<0.01);Cur-200组GSH水平明显升高,MDA均明显...     

miR-324-5 p通过靶向TRIP13基因调控宫颈癌细胞增殖、侵袭、迁移和凋亡

目的 探讨miR-324-5p对宫颈癌细胞增殖、侵袭、迁移和凋亡的影响及调控机制.方法 培养正常宫颈细胞Ectl/E6E7和宫颈癌细胞系Hela、C-33A、CaSki、SiHa,实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测细胞中miR-324-5p和甲状腺激素受体因子(TRIP)13 mRNA表达,Western印迹...     

微小RNA-17-5p通过靶向调控TP53INP1的表达对急性心肌梗死后心室重构的影响

目的：探讨微小RNA(miRNA)mi R-17-5p通过靶向调控肿瘤蛋白53诱导性核蛋白1(TP53INP1)的表达对急性心肌梗死(AMI)后心室重构的影响。方法：选取成年miR-17-5p^-/-、miR-17-5p^+/+和正常型SPF级昆明种小鼠各20只,采用随机数字表法分为假手术组、AMI组、miR-17-5p^-/-假手术组、miR-17-5p^-/-AMI组,miR-17-5p^+/+假手术组和miR-17-5p^+/+AMI组,每组10只,雌雄各半。构建小鼠AMI模型,采用超声心动图检测舒张末期容积指数(EDVI)、收缩末期容积指数(ESVI)和左室射血分数(LVEF),红四氮唑(TTC)染色法检测小鼠心肌梗死面积,实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测小鼠心脏组织miR-17-5p和TP53INP1 mRNA表达水平,Western blot法检测小鼠心脏组织TP53INP1蛋白表达水平。结果：与假手术组比较,AMI组建模后7 d和14 d的ED...     

依达拉奉对急性脑梗死患者血清中白细胞介素-1、-17A和高迁移率族蛋白B1的影响

目的关注急性脑梗死患者应用依达拉奉的治疗效果,观察其对血清中白细胞介素(IL)-1、-17A和高迁移率族蛋白(HMG)B1的影响。方法 70例急性脑梗死患者随机分为观察组和对照组各35例。对照组采用常规治疗方法,观察组在常规治疗的基础上加用依达拉奉注射液30 mg(溶于100 ml生理盐水),2次/d,共治疗14 d。均留取治疗前、后的空腹静脉血,应用酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清中IL-1、IL-17A和HMGB1的表达。结果观察组治疗后显效率显著优于对照组,两组治疗后血清中IL-1、IL-17A和HMGB1的表达均下降(P<0.05),观察组下降值明显高于对照组(P<0.05)。结论急性脑梗死患者应用依达拉奉治疗效果明显,同时能有效下调血清中IL-1、IL-17A和HMGB1的水平,对微环境的调节作用理想。     

lncRNA DGCR5通过靶向调控miR-21抑制鼻咽癌细胞的增殖、侵袭和迁移

目的 探讨lncRNA DGCR5对鼻咽癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其作用机制。方法 将pcDNA-NC、pcDNA-DGCR5、anti-miR-NC、anti-miR-21质粒分别转染至CNE-1、HNE-1细胞中,记为pcDNA-NC组、pcDNA-DGCR5组、anti-miR-NC组、anti-miR-21组;将pcDNA-DGCR5分别与mimic-NC、mimic-miR-21共转染至CNE-1、HNE-1细胞中,记为pcDNA-DGCR5+mimic-NC组、pcDNA-DGCR5+mimic-miR-21组;采用qRT-PCR检测miR-21和DGCR5的表达水平;四甲基偶氮唑蓝(MTT)、Transwell、流式细胞术检测CNE-1、HNE-1细胞增殖活性、迁移、侵袭和凋亡;双荧光素酶报告实验检测DGCR5和miR-21靶向调控。结果 与癌旁组织和人永生化鼻咽上皮细胞NP69相比,鼻咽癌组织和鼻咽癌细胞SUNE-1、CNE-2、CNE-1、HNE-1、HONE-1中DGCR5表达水平显著降低(P<0.05),miR-21表达水平显著增加(P<0.05)...