白细胞介素17在大鼠慢性阻塞性肺疾病和支气管哮喘模型中的变化及意义

目的了解白细胞介素17(IL17)在大鼠慢性阻塞性肺疾病(COPD)和支气管哮喘(简称哮喘)模型中的变化。方法SD雄性大鼠随机分为COPD组(13只)、哮喘组(11只)、吸烟组(11只)和正常对照组(12只);观察各组大鼠气道病理改变,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)及肺组织匀浆IL17水平;免疫组化及图像分析法检测肺组织IL17及胞间黏附分子1(ICAM1),CD3、CD4、CD8的表达。结果COPD组和哮喘组肺组织匀浆IL17和BALF中IL17均显著增高,与正常对照组和吸烟组比较差异有显著性(P均<001);COPD组IL17主要在支气管上皮细胞内表达,哮喘组则在气道周围单核淋巴细胞内表达;COPD组和哮喘组IL17表达量均显著高于正常对照组及吸烟组(P<001或<005)。COPD组肺组织匀浆IL17与BALF中中性粒细胞(r=0676,P=0002)以及BALF中IL17与小气道平滑肌增生均呈正相关(r=0641,P=0046);肺组织匀浆IL17与ICAM1呈正相关(r=0550,P=0051);哮喘组肺组织匀浆IL17分别与BALF中嗜酸粒细胞(r=0884,P=0001)和肺组织CD3T细胞呈正相关(r=0812,P=0002)。结论COPD中IL17可能通过增强ICAM1的表达等途径促进中性粒细胞在气道内聚集,参与对COPD气道炎症的调节。IL17在哮喘中的作用可能与其促进嗜酸粒细胞在气道内聚集有关。     

外周血TNF-α、Th17、Treg水平与COPD患者病情程度的关联性及临床意义

目的探讨外周血肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、辅助性T细胞17(Th17)、调节性T细胞(Treg)水平与慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者病情程度的关联性及临床意义。方法 COPD患者70例为观察组,另选同期健康体检者40例为对照组。均行外周血TNF-α、Th17、Treg检测。比较两组外周血TNF-α、Th17、Treg、Th17/Treg水平,并分析其与COPD病情程度相关性。结果经单因素方差分析,观察组外周血TNF-α、Th17、Treg、Th17/Treg水平与对照组比较,差异有统计学意义(P0.05);AECOPD患者外周血TNF-α、Th17、Th17/Treg水平高于COPD稳定期患者,Treg水平低于COPD稳定期患者(P0.05);COPD稳定期患者外周血TNF-α、Th17、Th17/Treg水平高于对照组,Treg水平低于对照组(P0.05);经Pearson检验,外周血TNF-α、Th17水平与COPD病情程度呈正相关(P0.05);Treg水平与COPD病情程度呈负相关(P0.05)。结论外周血TNF-α、Th17水平在COPD中异常升高,且随病情程度逐渐上升;Treg水平在COPD中异常下降,并随病情程度逐渐下降,有助于判断病情,为制定治疗方案提供依据,还可监测疗效及评估预后。     

青蒿素对 AECOPD 患者外周血中炎症因子及 Th17/Treg 失衡的调控

目的：通过检测青蒿素干预前后慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)患者外周血中 Th17细胞,Treg 细胞占 CD4+ T 细胞的比例,炎症因子 IL-6、IL-21、转化生长因子β(TGF-β)的含量,初步探讨青蒿素对 COPD 患者外周血中炎症因子和 Th17/Treg 失衡的调控机制。方法随机收集 AECOPD 20例,将其分为1640干预组和青蒿素干预组,收集同一时期肺功能正常健康体检者20例作为对照组,抽取清晨空腹静脉血,采用流式细胞术检测所有实验对象 CD4+ Th17细胞和 Treg 细胞占 CD4+ T 细胞的比例;采用 ELISA 方法检测所有实验对象血清中炎症因子 IL-6、IL-21、TGF-β的水平。结果①CD4+ Th17细胞/CD4+ T 细胞和 Th17/CD4+ Treg 细胞的比例1640干预组高于青蒿素干预组和对照组,青蒿素干预组高于对照组,差异有统计学意义(P <0.05)。Treg 细胞/CD4+ T 细胞的比例1640干预组则低于青蒿素干预组和对照组,青蒿素干预组低于对照组,差异有统计学意义(P <0.05)。炎症因子 IL-6和 IL-21的水平1640干预组高于青蒿素干预组和对照组;青蒿素干预组高于对照组,差异有统计学意义(P <0.05)。④炎症因子 TGF-β的水平1640干预组则低于青蒿素干预组和对照组,青蒿素干预组低于对照组,差异有统计学意义(P <0.05)。⑤Th17/Treg 细胞的比值与炎症因子 IL-6(r =0.095,P <0.05),IL-21(r =0.051,P <0.05)的水平呈正相关,与 TGF-β(r =-0.002,P <0.05)的水平呈负相关;炎症因子 TGF-β的水平与炎症因子 IL-6(r =-2.075,P <0.05),IL-21(r =-2.869,P <0.05)的水平呈负相关。结论 AECOPD 患者外周血中存在 Th17/Treg 的失衡,炎症因子 IL-6、IL-21、TGF-β与 Th17/Treg 的失衡密切相关,青蒿素可能能够通过下调 IL-6和 IL-21的表达,上调 TGF-β的表达来调节其失衡。     

老年慢性阻塞性肺疾病患者外周血HIF-1α、IL-18、Th17和Treg的表达及与肺功能的关系

目的探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)老年患者外周血中低氧诱导因子(HIF)-1α、白细胞介素(IL)-18、辅助性T细胞(Th)17和调节性T淋巴细胞(Treg)的表达情况及与肺功能的关系。方法随机选取COPD稳定期,且吸烟≥20年的老年(≥60岁)患者24例作为观察组,另选取门诊体检肺功能健康且吸烟≥20年的老年人20例作为对照组,肺功能正常且不吸烟的老年人30例作为健康组。采用酶联免疫法(ELISA法)检测所有老人外周血血清中HIF-1α和IL-18的水平进行,采用流式细胞术对所有老人外周血中Th17和Treg的表达进行检测。结果三组血清中HIF-1α和IL-18的水平存在显著差异(P0.05),观察组对照组健康组;三组外周血中Th17和Treg细胞的表达率(%)存在显著差异(P0.05),观察组对照组健康组;观察组和对照组外周血Th17/Treg比值显著高于健康组(P0.05),而观察组和对照组间无显著差异(P0.05);血清HIF-1α、IL-18,Th17和Treg与吸烟量呈正相关(P0.05),HIF-1α、IL-18、Th17、Treg和Th17/Treg与FEV1/预计值和FEV1/FVC均呈负相关(P0.05)。结论 COPD且吸烟的老年患者外周血中HIF-1α、IL-18、Th17和Treg水平均上升,HIF-1α、IL-18、Th17和Treg可能参与了COPD持续性炎症反应的形成,吸烟可能导致并促进炎症反应加重。     

慢性阻塞性肺疾病患者辅助性T细胞17/调节性T细胞变化及其与肺功能的相关性研究

目的观察慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者辅助性T细胞17(Th17细胞)/调节性T细胞(Treg细胞)变化,探讨其与肺功能的相关性。方法选取2013年9月—2015年9月四川省成都市西区医院收治的老年COPD稳定期患者36例作为稳定期组,COPD急性加重期患者29例作为急性加重期组;另选取同期在本院体检健康者50例作为对照组,其中吸烟者22例作为吸烟对照组,不吸烟者28例作为正常对照组。比较4组受试者外周血Th17细胞分数、Treg细胞分数、Th17细胞/Treg细胞比值,血清IL-17、IL-10水平及肺功能指标〔第1秒用力呼气容积占预计值百分比(FEV1%)、用力肺活量占预计值百分比(FVC%)及第1秒用力呼气容积与用力肺活量比值(FEV1/FVC)〕,并分析外周血Th17细胞分数、Treg细胞分数及Th17细胞/Treg细胞比值与肺功能指标的相关性。结果急性加重期组和稳定期组患者外周血Th17细胞分数、Th17细胞/Treg细胞比值及血清IL-17水平高于吸烟对照组和正常对照组,外周血Treg细胞分数及血清IL-10水平低于吸烟对照组和正常对照组(P0.05);急性加重期组患者外周血Th17细胞分数、Th17细胞/Treg细胞比值及血清IL-17水平高于稳定期组,外周血Treg细胞分数及血清IL-10水平低于稳定期组(P0.05);吸烟对照组受试者外周血Th17细胞分数、Th17细胞/Treg细胞比值高于正常对照组(P0.05)。4组受试者FVC%比较,差异无统计学意义(P0.05);急性加重期组和稳定期组患者FEV1%、FEV1/FVC低于吸烟对照组和正常对照组,急性加重期组患者FEV1%、FEV1/FVC低于稳定期组(P0.05)。Pearson相关性分析结果显示,外周血Th17细胞分数与FEV1、FEV1%/FVC呈负相关(r值分别为-0.736、-0.694,P0.05),Th17/Treg细胞比值与FEV1、FVC%、FEV1%/FVC呈负相关(r值分别为-0.892、-0.222、-0.748,P0.01),而外周血Treg细胞分数与FEV1、FVC%、FEV1%/FVC呈正相关(r值分别为0.837、0.368、0.822,P0.01)。结论 COPD患者存在Th17/Treg细胞失衡,而Th17/Treg细胞失衡与吸烟、COPD病情变化及肺功能损伤等密切相关。     

Treg/Th17细胞在不同时期慢性阻塞性肺疾病患者中的改变及意义探讨

目的 探讨CD4+ CD25+ CD127low调节性T细胞(Treg细胞)、Th17细胞特异性分泌因子IL-17在COPD急性加重期(AECOPD)及COPD稳定期中的改变及临床意义.方法 选取住院AECOPD患者26例,随访COPD稳定期患者20例,健康对照患者15例.流式细胞仪检测患者外周血CD4+ CD25+ CD1271.wTreg细胞比例、ELISA检测外周血IL-17浓度.结果 ①AECOPD组患者外周血Treg细胞比例较COPD稳定期组、对照组均明显升高[分别为(10.319±2.154)％,(6.406±1.498)％,(6.307±1.626)％;P＜0.05],COPD稳定期组患者Treg细胞比例高于对照组但差异无统计学意义;②A ECO PD组及COPD稳定期组外周血IL-17水平较对照组明显升高[分别为(0.813±0.233) ng/L,(o.547±0.157) ng/L,(0.408±0.169) ng/L;P＜0.001],AECOPD组IL-17水平高于COPD稳定期组(P＜0.01),COPD稳定期组IL-17水平高于对照组(P=0.046);③各组Treg细胞、IL-17水平与各指标之间未见相关性.结论 Treg细胞、IL-17在AECOPD及COPD稳定期中的水平异常说明在COPD的不同时期存在着不同的炎症,Treg/Th17细胞失衡可能导致COPD的免疫紊乱和慢性炎症持续.     

白介素17抗体减轻吸烟所致慢性阻塞性肺疾病模型小鼠的气道炎症

目的 研究白介素17(interhukin-17,IL-17)抗体在吸烟所致慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)模型小鼠气道炎症中的作用.方法 C67/BL6雄性小鼠随机分为COPD组(8只)、COPD+IL-17抗体干预组(简称COPD+干预组,8只)和正常对照组(10只).对支气管肺泡灌洗液(BALF)进行细胞计数、染色和分类;用酶联免疫吸附试验检测小鼠肺组织匀浆IL-17水平,观察各组小鼠气道病理改变.结果 COPD组与COPD+干预组相比肺功能差异无统计学意义.COPD组、COPD+干预组小鼠与正常对照组相比BALF细胞总数显著增高[分别为(19.64±1.89)×104/ml,(15.47±2.99)×104/ml和(5.13±1.00)×104/ml,P＜0.01];COPD+干预组较COPD组细胞总数下降(P＜0.01);中性粒细胞比例[分别为(8.58+6.77)%,(22.98±8.46)%]及绝对值[(1.28±0.96)×104/ml,(4.53±1.73)×104/ml]显著下降(P值均＜0.01).肺组织HE染色病理评分COPD+干预组(73.25±18.58)较cOPD组(106.13±36.27)炎症有所减轻(P＜0.05).COPD+干预组小鼠肺组织匀浆中IL-17含量(0.084±0.041)pg/mg pro与COPD组(0.221±0.081)pg/mg pro相比显著降低(P＜0.01).结论 吸烟所致COPD小鼠模型中IL-17参与了中性粒细胞引起的气道炎症,抑制IL-17的表达,可以减少气道内中性粒细胞的数量,减轻气道炎症.     

不同慢性阻塞性肺疾病全球倡议分级慢性阻塞性肺疾病稳定期患者外周血辅助性T细胞17、调节性T细胞含量的对比分析

目的对比不同慢性阻塞性肺疾病全球倡议(GOLD)分级慢性阻塞性肺疾病(COPD)稳定期患者外周血辅助性T细胞17(Th17)、调节性T细胞(Treg)含量,以期为临床有效治疗COPD稳定期患者提供新的靶点。方法选取2017年6—12月于新疆医科大学附属中医医院接受门诊随访的COPD稳定期患者96例,参照2013版GOLD分级标准分为B级组40例、C级组23例、D级组33例;另选取同期体检且年龄匹配的健康者30例作为对照组。比较4组受试者一般资料(包括性别、年龄、身高、体质量),外周血白介素17a(IL-17a)、白介素10(IL-10)水平,外周血Th17、Treg含量及Th17/Treg比值。结果 (1)4组受试者性别、年龄、身高比较,差异无统计学意义(P0.05);B级组、C级组、D级组患者体质量小于对照组,C级组、D级组患者体质量小于B级组,D级组患者体质量小于C级组(P0.05)。(2)B级组、C级组、D级组患者外周血IL-17a水平高于对照组,C级组、D级组患者外周血IL-17a水平高于B级组,D级组患者外周血IL-17a水平高于C级组(P0.05);B级组、C级组、D级组患者外周血IL-10水平低于对照组,C级组、D级组患者外周血IL-10水平低于B级组,D级组患者外周血IL-10水平低于C级组(P0.05)。(3)B级组、C级组、D级组患者外周血Th17含量及Th17/Treg比值高于对照组,C级组、D级组患者外周血Th17含量及Th17/Treg比值高于B级组,D级组患者外周血Th17含量及Th17/Treg比值高于C级组(P0.05);B级组、C级组、D级组患者外周血Treg含量低于对照组,C级组、D级组患者外周血Treg含量低于B级组,D级组患者外周血Treg含量低于C级组(P0.05)。结论随着GOLD分级增加,COPD稳定期患者外周血Th17含量逐渐升高、Treg含量逐渐降低,炎性反应、免疫功能紊乱程度逐渐加重;有效控制Th17/Treg失衡有可能成为中医宏观、西医微观防治稳定期COPD的新靶点。     

IL-35、Th17/Treg细胞失衡在大鼠肺纤维化中的表达及意义

目的研究IL-35、Th17/Treg失衡在大鼠肺纤维化中的表达及意义。方法随机将60只健康雌雄各半Wistar大鼠分为两组:对照组30只(生理盐水组)、肺纤维化组30只(博来霉素组),分别于实验第7天、第14天、第28天处死对照组、模型组各10只大鼠,留取各组大鼠肺组织、肺泡灌洗液,观察大鼠肺组织形态病理学变化(HE染色和Masson三色染色);测定支气管冲洗液及肺组织中Treg、Th17细胞,IL-35、IL-17表达水平,并分析IL-35与Th17/Treg的相互关系。结果 1.肺纤维化组与对照组相比,肺组织炎症程度、肺纤维化程度显著,肺部炎症以造模第7d最明显。2.两组相比,肺纤维化组IL-35、Treg细胞表达水平显著低于对照组,IL-17、Th17细胞表达显著高于对照组,差异均具有统计学意义。3.肺纤维化组IL-35与IL-17表达水平呈明显的负相关(r=-0.378,P0.01),IL-35与Treg细胞表达水平呈正相关(r=0.461,P0.01),IL-35与Th17/Treg细胞表达水平呈负相关(r=-0.386,P0.01)。结论本研究通过对大鼠肺纤维化组、对照组IL-35、IL-17、Th17/Treg细胞表达水平与相关性分析;提示IL-35可能参与肺纤维化Th17/Treg细胞平衡的调节,对IL-35的调控有可能成为肺纤维化治疗的新的靶点。     

Th17与Foxp3~+Treg在胃癌患者外周血中的表达

目的:研究胃癌患者外周血CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(Treg)及Th17细胞表达的临床意义.方法:收集胃癌患者(n=77)与健康志愿者(n=20)外周血并分离获取PBMC;流式细胞术分析CD4+CD25+Foxp3+Treg表达;PMA+Ionomycin联合刺激后,流式细胞术检测CD4+IL-17+Th17表达;结合临床资料分析Treg及Th17表达的临床意义.结果:胃癌组患者外周血Th17和Treg表达均显著高于正常组(P<0.05).进一步临床分析发现,胃癌患者外周血中Treg细胞表达水平与胃癌临床分期、肿瘤浸润深度及淋巴结转移有关;未见Th17与胃癌临床分期、浸润深度及淋巴结转移相关.结论:尽管两群Th细胞在胃癌患者体内显著升高,但仅Treg与肿瘤进展相关,Th17的作用尚需进一步探讨.     

Th17、Treg在肺纤维化小鼠外周血、肺组织中的表达及意义

目的观察CD4+IL-17+辅助性T细胞(Th17)及Th17/CD4+CD2+5Foxp3+调节性T细胞(Treg)在博来霉素皮下注射致小鼠肺纤维化模型外周血及肺组织的表达及意义。方法 20只雌性BALB/c小鼠随机分为模型组和对照组各10只:模型组皮下注射博莱霉素4周,对照组相同条件下注射0.1 mL PBS。采用HE染色和Masson’s染色观察两组肺组织炎症和纤维化的病理改变;流式细胞术检测两组肺组织及外周血Th17、Treg及Th17/Treg的表达;应用酶联免疫吸附试验检测两组血清IL-17水平;免疫荧光定量PCR法检测两组肺实质组织中IL-17和维甲酸相关孤独受体(RORγt)的mRNA的表达,并分析上述各指标的相互关系。结果模型组肺部纤维化评分、肺组织炎症程度和羟脯氨酸的含量均显著高于对照组(P均<0.01);外周血和肺组织Th17、Th17/Treg及外周血IL-17含量较对照组均显著增高(P均<0.01);肺实质RORγt和IL-17 mRNA水平较对照组明显增高(P均<0.05)。相关性分析结果显示,外周血和肺组织Th17及Th17/Treg、外周血IL-17的水平与肺组织羟脯氨酸水平、肺部纤维化评分、肺组织炎症反应均呈显著正相关(P均<0.01)。结论肺纤维化模型Th17及Th17/Treg表达均增高;Th17可能通过分泌IL-17参与肺纤维化的发病,Th17/Treg失衡可能通过加重肺纤维化免疫炎症,促进肺部胶原纤维的沉积,在肺纤维化的发病发挥重要作用。     

先天性心脏病患者免疫因子Th17/Treg失衡与肺动脉高压的关系

目的:探讨患者外周血中Th17细胞、CD4+D25+FoxP3+调节性T细胞(Treg)的变化及意义。方法:75例先天性心脏病(CHD)合并肺动脉高压(PAH)患者,分为轻度肺动脉高压组(28例)、中度肺动脉高压组(32例)及重度肺动脉高压组(15例),20例健康体检者作为对照组。采用流式细胞分析法检测外周血中Th17细胞、Treg细胞占CD4+T细胞的比例,分析Th17细胞与Treg细胞的比例与肺动脉压的相关性。结果:Th17/CD4+T细胞比例、Treg/CD4+T细胞的比例和Th17/Treg细胞比值,两组间差异具有统计学意义(P<0.05),随着肺mPAP的增加,Th17/CD4+T细胞比例明显升高;Treg/CD4+T细胞的比例明显下降;Th17/Treg细胞比值显著升高。mPAP与Th17/Treg比值呈显著正相关(r=0.95,P<0.05)。结论:先天性心脏病合并肺动脉高压患者外周血中存在Th17/Treg失衡,且与肺动脉高压程度呈正相关,Th17/Treg失衡可能参与了肺动脉高压的发生发展。     

外周血白介素-17检测在气道慢性炎症性疾病诊断中的临床价值

目的探讨外周血CD4+T细胞亚群Th17代表性细胞因子IL-17在哮喘、慢性阻塞性肺疾病(COPD)以及哮喘COPD重叠综合征(ACOS)等气道慢性炎症性疾病鉴别诊断中的临床价值。方法收集哮喘患者26例、COPD患者33例及ACOS患者14例的血清、临床资料及实验室检查资料,检测哮喘、COPD、ACOS患者外周血IL-17等细胞因子、炎症介质、外周血白细胞分类计数、血清免疫球蛋白亚型以及肺通气功能,并进行组间比较。健康体检者69例作为对照。结果 Th17细胞因子IL-17在哮喘及ACOS组升高较COPD组更为明显(P0.01)。调节性T细胞的主要细胞因子IL-10在哮喘患者中的水平明显低于COPD患者(P0.05)。外周血炎症细胞比例、免疫球蛋白亚型在哮喘、COPD、ACOS鉴别诊断中具有一定参考价值。但肺通气功能指标对于以上三者的鉴别价值有限。哮喘及ACOS组患IL-17与肺通气功能指标呈负相关关系。结论 IL-17作为新型Th17细胞分泌的代表性细胞因子,在鉴别上述疾病中具有重要的参考价值。Th17/Treg细胞失衡可能是难治性哮喘的潜在发病机制。     

烟草烟雾暴露大鼠中CD4白细胞介素-17+T细胞与CD+4Foxp3+调节性T细胞的变化及意义

目的 观察烟草烟雾暴露大鼠外周血与BALF中CD+4白细胞介素(IL)-17+T细胞(Th17细胞)与CD; Foxp3+调节性T细胞(Treg细胞)及相关因子的水平变化,探讨Th17和Treg细胞在烟草诱导气道炎症和COPD的发生与发展中的作用.方法 将40只健康清洁级雄性Wistar大鼠分为暴露12周组和24周组、对照12周组和24周组,每组10只.用烟熏法复制大鼠气道炎症的动物模型.收集BALF进行细胞学计数和分类,采用酶联免疫吸附法检测大鼠血清和BALF上清液中IL-17和IL-6水平,用流式细胞术检测Th17和Treg细胞比例,用实时荧光定量PCR法检测IL-17和Foxp3 mRNA的表达.多组间比较采用单因素方差分析,组内两两比较采用SNK法和GamesHowell法.结果 暴露12周组和24周组大鼠外周血IL-17浓度分别为(52.6±1.8) ng/L和(75.4±6.0) ng/L,BALF中IL-17浓度分别为(78.1 ±5.8) ng/L和(95.0±6.8)ng/L,均显著高于对照12周组[(40.0±3.2) ng/L和(54.5±4.6) ng/L]及24周组[(36.7±3.2) ng/L和(53.9±3.7) ng/L],暴露24周组与其他3组比较,差异均有统计学意义(均P＜0.05).暴露24周组大鼠外周血中IL-6浓度为(31.4±2.1)ng/L,显著高于对照24周组[(11.5±0.5)ng/L];暴露12周组和24周组大鼠BALF中IL-6浓度分别为(33.3 ±2.3)ng/L和(44.6±3.0)ng/L,显著高于对照12周组和24周组[(15.6±1.8)ng/L和(18.0±1.9) ng/L].暴露12周组和24周组大鼠外周血中Th17细胞比例分别为(1.81±0.19)％和(3.74±0.55)％,BALF中Th17细胞比例分别为(7.84±0.28)％和(8.01±0.39)％,均显著高于对照12周组[(0.97±0.08)％和(5.64±0.54)％]及24周组[(1.08±0.10)％和(5.95±0.48)％],暴露24周组与其他3组比较,差异均有统计学意义(均P＜0.05).暴露12周组和24周组大鼠BALF中Treg细胞比例分别为(8.81±0.49)％和(11.98±0.72)％,均显著高于对照12周组和24周组[(4.34±0.28)％和(5.21±0.42)％].暴露12周组和24周组大鼠外周血中IL-17 mRNA表达量分别为25.7±2.0和33.9±1.5,BALF中IL-17 mRNA表达量分别为22.2±1.8和34.7±4.2,均显著高于对照12周组(11.3±2.6和11.6 ±2.4)及24周组(11.1±2.0和13.5±3.4);暴露12周组和24周组大鼠BALF中Foxp3 mRNA表达量分别为24.4±2.7和30.3±2.7,显著高于对照12周组和24周组(12.7±2.7和14.6±3.8).暴露组大鼠BALF中Th17细胞与其BALF中细胞总数和巨噬细胞数呈正相关(r值分别为0.512和0.543,均P＜0.05).结论 烟草暴露可导致大鼠气道炎症模型的Th17细胞和Treg细胞及相关炎症因子水平升高,提示Treg细胞可能参与气道炎症的免疫调节,Th17细胞异常升高可能与大鼠气道炎症反应的发生及持续进展有关.     

调节性T细胞和辅助性T细胞17的平衡变化在慢性乙型肝炎病毒感染中的作用

目的 研究调节性T细胞(Treg)和辅助性T细胞17(Th17)的平衡变化在慢性HBV感染中的作用.方法 应用ELISA法和流式细胞术分别对34例慢性乙型肝炎(CHB)患者、20例HBV相关慢加急性肝功能衰竭(ACHBLF)患者和20例健康对照者外周血中Treg和Th17分化相关细胞因子及外周血Th17和Treg细胞水平进行检测.计数资料应用Fisher's确切概率法,计量资料应用单因素方差分析和Tukey's多重比较检验.结果 ACHBLF组Th17分化相关因子IL-1β为(3.97±2.85) pg/mL,IL-6为(12.75±8.87)pg/mL,IL-21为(360.0±335.7)pg/mL,比健康对照组的IL-1β[(1.87±0.94)pg/mL,q=4.559,P＜0.01)、IL-6[(5.28±o.72)pg/mL,q=7.309,P＜0.01)和IL-21[(46.68±20.17) pg/mL,q=6.946,P＜0.01)均明显上调.ACHBLF组外周血Th17细胞比例明显高于健康对照组(q=3.972,P＜0.05).与健康对照组和ACHBLF组相比,CHB组Treg细胞分化相关因子TGF-β明显升高(q=4.536、5.323,均P＜0.01),外周血Treg比例也明显升高.ACHBLF组Th17细胞效应因子IL-17A水平最高,ACHBLF患者外周血Th17细胞比例与血清TBil水平呈正相关(γ=0.74,P＜0.01).结论 慢性HBV感染中,宿主免疫存在Th17和Treg失衡,ACHBLF组以Th17细胞活动为主,CHB组以Treg细胞活动为主.     

吸烟对稳定期COPD患者外周血Th17/Treg免疫平衡影响研究

目的观察稳定期COPD患者和健康人吸烟和非吸烟者外周血中的T辅助细胞(Th细胞)17和调节性T细胞(Treg细胞)比例差异,分析吸烟对稳定期COPD患者Th17/Treg的影响,探讨吸烟引发COPD发生发展的可能免疫机制。方法①选取2012年12~2013年4月我院就诊的稳定期COPD患者73例,分别设为不吸烟组46例、吸烟组27例,同时选取同期进行社区流行病学调查及医院体检中心的健康人26例设为对照组,不吸烟组16例和吸烟组10例。所有受试者均填写统一的调查问卷,明确个人史,现病史、用药史,完善肺功能检查;②各组受试者空腹6 h后清晨抽取静脉血2 ml,应用细胞内染色的流式细胞术检测各组受试者外周血中Th17/Treg细胞比例;③多组间比较采用单因素方差分析,多组内两两比较采用SNK检验(方差齐)和Games-Howell法(方差不齐),Th17/Treg细胞的比例与吸烟指数及肺功能关系用Spearman相关分析进行相关性检验。结果①COPD组吸烟者和非吸烟者与对照组吸烟与非吸烟者外周血Th17/Treg细胞比例分别为(3.23±0.86)%、(2.97±0.98)%和(2.07±0.40)%、(1.96±0.30)%,多组间比较差异呈显著性(P0.01);②COPD患者吸烟组和非吸烟组第1秒用力呼气容积实测值与预计值比(FEV1%prep)分别为(55.66±20.61)%、(64.04±13.80)%,第1秒用力呼气容积/用力肺活量比(FEV1/FVC)分别为(55.23±10.52)%、(62.62±5.49)%,两组间差异存在统计学意义(P0.05);③外周血Th17/Treg细胞比例与FEV1%prep和FEV1/FVC存在显著相关性(r=-0.517、-0.512,P值分别为0.00,0.00)。结论吸烟与COPD患者Th17/Treg细胞比例失衡相关;Th17/Treg细胞比例失衡可能参与了发病和进展过程;吸烟可能通过引起Th17/Treg细胞比例失衡导致COPD的发生发展。     

外周血Th17/Treg失衡及Irisin浓度在老年慢性阻塞性肺疾病合并冠心病中的临床价值

目的 分析外周血中Irisin浓度及Th17/Treg失衡情况在老年慢性阻塞性肺疾病(COPD)合并冠心病(CHD)中的临床价值。方法 选取老年COPD合并CHD患者110例作为病例组,并以50例健康体检者作为对照组。所有患者采用流式细胞术检测外周血中辅助型(Th)17及调节性T细胞(Treg)水平,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒检测血清中Irisin浓度,并研究其与患者肺功能参数[第1秒用力呼气量(FEV1)、用力肺活量(FVC)、FEV1/FVC、FEV1/Pred]的相关性。结果 与对照组相比,病例组FEV1、FVC、FEV1/FVC、FEV1/Pred均显著降低(P<0.001)。病例组Th17比例及Th17/Treg比值显著高于对照组(P<0.001),Treg比例及血清Irisin水平显著低于对照组(P<0.001)。Treg及Irisin水平与FEV1、FVC、FEV1/FVC、FEV1/Pred均呈正相关(P<0.05),而Th17及Th17/Treg表达水平与肺功能指标呈负相关(P<0.05),其中Th17与FVC相关性无统计学...     

Th17细胞与Treg细胞在HBV感染患者中的检测意义

目的了解HBV感染后肝细胞不同程度损伤的患者外周血中辅助性T细胞17(Th17)和调节性T细胞(Treg)的比例变化。方法选取乙型肝炎患者109例,其中无症状HBV携带者32例(ASC组)、慢性乙型肝炎47例(CHB组)、肝细胞癌伴活动性肝炎30例(HCC组)。另选健康体检者25名作为对照组。采用流式细胞术检测外周血Th17细胞和Treg细胞以及CD3+、CD3+CD4+T细胞含量,自动生化分析仪检测血清ALT、AST。结果与对照组Treg细胞比较,ASC组稍高,但差异无统计学意义(t=0.809,P0.05);CHB组、HCC组升高明显(t=2.988、7.569,P0.05),均高于ASC组(t=2.456、7.177,P0.05);HCC组患者外周血Treg细胞比例高于CHB组,差异有统计学意义(t=4.057,P0.05);外周血Treg细胞比例与血清ALT和AST水平呈正相关(r=0.546、0.587,P0.01)。与对照组Th17细胞比较,ASC组略有升高,但差异无统计学意义(t=1.459,P0.05);CHB组和HCC组均明显升高(t=3.910、6.725,P0.05),且HCC组高于CHB组(t=6.580,P0.01);外周血Th17细胞比例与血清ALT和AST水平呈正相关(r=0.546、0.617,P0.01)。在Th17/Treg比值上,外周血Th17细胞和Treg细胞在HBV感染者中呈正相关(r=0.487,P0.05),对照组Th17/Treg比值最低(0.15%±0.14%),CHB组、HCC组升高明显(t=2.015、5.056,P0.05),Th17升高更为明显。结论随着HBV感染患者病情的发展,外周血Th17/Treg细胞比例升高,Th17、Treg细胞构成免疫的平衡状态被破坏,机体受到Th17细胞介导的炎性反应,造成肝细胞损伤。     

粉防己碱抑制支气管哮喘小鼠肺组织核因子-κB和诱导型一氧化氮合酶的研究

目的：探讨粉防己碱对支气管哮喘(简称哮喘)小鼠肺组织核因子-κB(NF-κB)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达、气道炎症和气道高反应性的影响。方法将32只 SPF 级 BALB/c 小鼠随机分为正常组、哮喘组、地塞米松组(激素组)和粉防己碱组(Tet 组)。卵白蛋白(OVA)致敏和激发建立哮喘小鼠模型。末次激发24 h 后,肺功能仪测定小鼠气道阻力;HE 染色观察气道炎症细胞浸润;ELISA 检测血清总 IgE、OVA 特异性 IgE(OVA-sIgE)及 BALF 中 Th2细胞因子 IL-4和 IL-13水平;显微镜下计BALF 中细胞总数,瑞氏染色计嗜酸粒细胞分类计数;Western blot 检测肺组织 NF-κB 和 iNOS 蛋白表达水平。结果与正常组比较,哮喘组气道阻力、气道炎症浸润、BALF 炎症细胞总数和嗜酸粒细胞分类计数、血清总 IgE 和 OVA-sIgE、BALF 中 IL-4和 IL-13以及 NF-κB 和 iNOS 蛋白表达水平均显著增高(P <0.05);与哮喘组比较,激素和 Tet 干预组上述各项指标均显著降低(P <0.05)。结论粉防己碱可下调哮喘小鼠肺组织 NF-κB 和 iNOS 表达并抑制气道炎症和气道高反应性。     

他汀类药物对慢性阻塞性肺疾病大鼠气道炎症及黏液高分泌的作用及机制

目的探讨他汀类药物对慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠气道炎症及黏液高分泌的作用及机制。方法通过烟熏和气管注入脂多糖建立大鼠COPD模型。将21只SD大鼠随机分为对照组、COPD组、辛伐他汀组,每组7只。对照组、COPD组每日用生理盐水灌胃1次,剂量为1 ml/100 g;辛伐他汀组每日用0.5 g/L的辛伐他汀溶液按1 ml/100 g剂量灌胃1次。检测大鼠肺功能指标,苏木素-伊红(HE)染色观察支气管和肺组织的病理变化;酶联免疫吸附法(ELISA)检测支气管肺泡灌洗液(BALF)上清液中细胞因子白细胞介素(IL)-8、IL-17、肿瘤坏死因子(TNF)-α含量;免疫组化法检测肺组织中核转录因子(NF)-κB、黏附分子1、黏蛋白5AC、Toll样受体(TLR)4的表达;Western印迹和RT-PCR检测肺组织黏蛋白5AC、TLR4蛋白和mRNA的表达。结果辛伐他汀组大鼠肺功能指标明显高于COPD组,低于对照组(P<0.01);辛伐他汀组大鼠病理学改变较COPD组明显减轻。COPD组大鼠BALF中IL-8、IL-17、TNF-α含量明显高于辛伐他汀组和对照组,辛伐他汀组明显高于对照组(P<0.01)。COPD组、辛伐他汀组大鼠肺组织中NF-κB、黏附分子1、黏蛋白5AC、TLR4水平均明显高于对照组而低于COPD组(P<0.01)。COPD组大鼠组织黏蛋白5AC、TLR4蛋白和mRNA表达量均明显高于对照组,辛伐他汀组明显低于COPD组(P<0.01);辛伐他汀组与对照组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论辛伐他汀可有效降低COPD大鼠的气道炎性反应,抑制气道黏液高分泌,主要通过抑制NF-κB下游信号通路和TLR4/NF-κB信号通路来实现。