1,5-二羟维生素D3对棕榈酸诱导巨噬细胞炎症因子表达的影响

目的研究1,25-二羟维生素D₃（1,25（OH）₂D₃）对棕榈酸（PMA）诱导THP-1巨噬细胞炎症因子表达的影响及其机制。方法用1,25（OH）₂D₃（10 nmol/L）和/或PMA（250μmol/L）处理THP-1巨噬细胞6 h,采用荧光定量PCR和酶联免疫吸附法（ELISA）法检测肿瘤坏死因子α（TNFα）、白细胞介素（IL）-1β、IL-6和IL-10的表达水平;用1,25（OH）₂D₃和/或PMA处理THP-1巨噬细胞60 min,采用免疫印迹（Western-blot）法检测AMPKα1和磷酸化AMPKα1（p-AMPKα1）水平。结果 1,25（OH）₂D₃（10μmol/L）)明显抑制PMA（250μmol/L）作用下THP-1巨噬细胞TNFα、IL-1β和IL-6的表达,并上调IL-10的表达;1,25（OH）₂D₃显著上调THP-1巨噬细胞AMPKα1的磷酸化水平。结论 1,25（OH）₂D₃抑制PMA诱导的THP-1巨噬细胞炎症因子表达,该效应可能与其激活AMPKα1有关。     

脑皮质星形细胞在1,25-(OH)2D3限定培养中表达NGF

目的：研究原代中枢神经胶质细胞在1,25-二羟维生素D₃［1,25-(OH)₂D₃］化学限定培养中神经生长因子（NGF）基因转录及表达。方法：用新生乳鼠脑皮质制备星形胶质细胞,采用浓度0、10_-7、10^-8、10^-9、10^-10、10^-11及10^-12 mol•L^-1 1,25-(OH)₂D₃化学限定无血清培养液培养后,RT-PCR法检测NGF mRNA转录,双向夹心-ELISA检测NGF。 结果：1,25-(OH)₂D₃化学限定无血清原代培养的神经胶质细胞在1,25-(OH)₂D₃作用下可分泌NGF,实验中1,25-(OH)₂D₃有效浓度范围10^-11~10_-7mol•L^-1;1,25-(OH)₂D₃培养6 h后开始检测到mRNA的表达,12 h时表达最高,36 h后检测不到NGF mRNA的表达;而NGF蛋白的ELISA反应持续时间大于48 h。结论：星形神经胶质细胞的NGF基因可被甾体激素1,25-(OH)₂D₃激活并转录表达。     

血清1,25二羟维生素D3联合超敏C反应蛋白水平对支气管肺炎患儿合并脓毒症的诊断效能

目的 探讨血清1,25二羟维生素D₃[1,25(OH)₂D₃]联合超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平对支气管肺炎患儿合并脓毒症的诊断效能。方法 选择101例支气管肺炎合并脓毒症患儿作为病例组,88例单纯支气管肺炎患儿作为对照组。检测两组患儿血清1,25(OH)₂D₃、hs-CRP、降钙素原、白细胞介素6(IL-6)水平及血清淀粉样蛋白A(SAA)水平,并对两组患儿进行小儿危重病例评分(PCIS)。分析各指标与PCIS的相关性,应用受试者工作特征(ROC)曲线评价血清1,25(OH)₂D₃、hs-CRP、降钙素原、IL-6、SAA水平及血清1,25(OH)₂D₃联合hs-CRP水平对支气管肺炎患儿合并脓毒症的诊断效能。结果 病例组的血清1,25(OH)₂D₃水平和PCIS均低于对照组,血清hs-CRP、降钙素原、IL-6、SAA水平均高于对照组(均P...     

血清PON1及1,25(OH)2D3对银屑病患者并发心血管疾病的预测价值

目的 检测血清氧磷酯酶1(PON1)及1,25二羟基维生素D₃[1,25(OH)₂D₃]水平及其对银屑病患者并发心血管疾病(CVD)的预测价值。方法 选取2018年2月—2022年2月中国人民解放军联勤保障部队第九八〇医院皮肤科收治银屑病患者88例为银屑病组,根据疾病严重程度,再分为轻度亚组(n=34)、中度亚组(n=26)和重度亚组(n=28);根据是否合并CVD分为非CVD亚组63例和CVD亚组25例。选取医院同期体检健康者70例为健康对照组。酶联免疫吸附实验检测血清PON1及1,25(OH)₂D₃水平;比较不同病情程度银屑病患者血清PON1及1,25(OH)₂D₃水平差异;多因素Logistic回归分析影响银屑病患者并发CVD的因素;受试者工作特征曲线分析血清PON1及1,25(OH)₂D₃对银屑病患者并发CVD的预测价值。结果 银屑病组血清PON1及1,25(OH)₂     

1,25(OH)2D3联合黄芪多糖对体外骨骼肌细胞胰岛素抵抗的改善作用及其机制

目的 探讨骨化三醇［1,25（OH）₂D₃］联合黄芪多糖（APS）对骨骼肌细胞胰岛素抵抗（IR）的改善作用及其作用机制,为采用1,25（OH）₂D₃和APS缓解IR提供依据。 方法 采用CCK-8法和己糖激酶法确定棕榈酸（PA）溶液（0.2、0.4、0.6、0.8和1.0 mmol·L^－1）的最佳作用剂量和最佳作用时间、APS（25、50、100和200 mg·L^－1）最佳作用剂量及1,25（OH）₂D₃（1、10、100和1 000 nmol·L^－1）最佳作用剂量。将骨骼肌细胞分为对照组（不进行任何处理）、PA组（给予0.4 mmol·L^－1 PA 作用24 h）、PA+APS组（给予0.4 mmol·L^－1 PA 作用24 h后再给予100 mg·L^－1 APS作用24 h）、PA＋1,25（OH）₂D₃组［给予0.4 mmol·L^－1 PA作用24 h后再给予100 nmol·L^－1 1,25（OH）₂D₃作用24 h］、PA＋APS＋1,25（OH）₂D₃组［给予0.4 mmol·L^－1 PA作用24 h后再给予100 mg·L^－1 APS和100 nmol·L^－1 1,25（OH）₂D₃作用24 h］。酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测各组细胞培养上清中白细胞介素6（IL-6）、白细胞介素10（IL-10）、单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平,流式细胞术检测各组细胞中活性氧（ROS）水平,Western blotting法检测各组细胞中胰岛素受体（InsR）、胰岛素受体底物1（IRS-1）、磷酸化胰岛素受体底物1（p-IRS-1）、葡萄糖转运蛋白4（GLUT4）、P65、磷酸化P65（p-P65）、P38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）和Toll样受体4（TLR4）蛋白表达水平。 结果 与对照组比较,PA组骨骼肌细胞中ROS、IL-6、TNF-α、MCP-1水平和P65、p-P65、p38MAPK及TLR4蛋白表达水平均升高（P<0.05）,IL-10水平和InsR、IRS-1、p-IRS-1及GLUT4蛋白表达水平均降低（P<0.05）;与PA组比较,PA+APS、PA+1,25（OH）₂D₃和PA+APS+1,25（OH）₂D₃组细胞中ROS、IL-6、MCP-1和TNF-α水平及P65、p-P65、p38MAPK及TLR4蛋白表达水平均降低（P<0.05）,IL-10水平和InsR、IRS-1、p-IRS-1及GLUT4蛋白表达水平均升高（P<0.05）。PA+APS+1,25（OH）₂D₃组细胞中ROS水平、p-P65和p38MAPK蛋白表达水平均低于PA+APS和PA+1,25（OH）₂D₃组（P<0.05）,InsR、IRS-1、p-IRS-1和GLUT4蛋白表达水平均高于PA+APS和PA+1,25（OH）₂D₃组（P<0.05）。 结论 1,25（OH）₂D₃联合APS可有效减轻IR,其机制可能是通过抑制氧化应激通路以及炎性因子的释放来实现的,且联合应用效果优于单独应用。     

1,25(OH)2VD3对血管紧张素Ⅱ诱导的足细胞内质网应激的抑制作用

目的 探讨1,25(OH)₂VD₃对血管紧张素Ⅱ(Ang II)诱导的足细胞内质网应激的影响，为临床上应用骨化三醇治疗足细胞损伤产生的蛋白尿提供理论依据。方法 体外培养小鼠足细胞系(MPC5),随机分为对照组、Ang II组(10^-6mol/L的Ang II)、1,25(OH)₂VD₃组[10^-6mmol/L的Ang II+10^-8mol/L的1,25(OH)₂VD₃]。各组均在给药处理6、12、18、24 h后收集细胞，分别应用实时定量PCR、免疫荧光技术检测不同时间点各组样本中葡萄糖调节蛋白(GRP78)及蛋白激酶样内质网激酶(PERK)的mRNA表达量和蛋白表达情况。结果 与对照组比较，Ang II组GRP78、PERK mRNA表达量在各个时间点均显著增加(P<0.01)。与Ang II组比较，1,25(OH)₂VD₃组GRP78、P...     

1, 25-二羟基维生素D3通过下调葡萄糖转运蛋白-1表达抑制膀胱癌细胞增殖

目的：研究 1,25-二羟基维生素 D₃(1,25-(OH)₂-VitD₃)对膀胱癌细胞增殖的影响,并探讨其作用机制。方法：体外培养膀胱癌细胞 T24,MTT 法检测不同浓度 1,25-(OH)₂-VitD₃对细胞活力的影响,并筛选 1,25-(OH)₂-VitD₃干预细胞的最佳时间及半数抑制浓度。将细胞分为 4 组：对照组、葡萄糖转运蛋白-1(glucose transporter-1,GLUT1)抑制组、1,25-(OH)₂-VitD₃组、1,25-(OH)₂-VitD₃+GLUT1 抑制组。采用 Hoechst 33258 染色观察各组细胞形态变化;试剂盒检测细胞内葡萄糖摄取、三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)产生及乳酸形成水平;Real-time PCR 及 Western blot 检测 GLUT1、己糖激...     

维生素D对复发性流产患者早孕期蜕膜基质细胞分泌白细胞介素17、23水平的影响

目的分析维生素D对复发性流产(RSA)患者早孕期蜕膜基质细胞(DSC)分泌白细胞介素(IL)-23、IL-17水平的影响。方法收集5例RSA患者和5例正常早孕者的蜕膜组织,分离出DSC,行原代细胞培养后采用免疫细胞化学法进行鉴定。正常妊娠妇女的DSC加入溶媒无水乙醇(对照组);RSA患者的DSC分为等量的两部分:一部分加入溶媒无水乙醇(RSA组),另一部分加入以无水乙醇+1,25-二羟维生素D₃[1,25-(OH)₂D₃](RSA+VD组)。培养24 h后,采用酶联免疫吸附试验法检测各组细胞培养上清中IL-23、IL-17水平。结果经免疫细胞化学法鉴定,DSC纯度接近100%,符合实验要求。RSA组DSC分泌IL-17水平高于对照组和RSA+VD组(P<0.05)。3组IL-23水平均超过了试剂盒的检测下限。结论 RSA患者早孕期DSC分泌IL-17水平升高;1,25-(OH)₂D₃可抑制DSC分泌IL-17,进而调节母-胎界面的免疫功能,发挥妊娠保护作用。     

雌二醇联合1，25-二羟维生素D3对绝经后骨质疏松症大鼠的治疗作用

探讨雌二醇联合1,25-二羟维生素D3［1,25（OH）₂D₃］对绝经后骨质疏松症（PMOP）大鼠的治疗作用,并阐明其作用机制。     

生命早期VitD缺乏及干预对大鼠肺发育及肺SP-C表达的影响

目的探讨生命早期Vit D缺乏及适量干预对大鼠肺发育的影响及可能机制。方法将18只成年雌性SD大鼠随机分为正常对照组（对照组）、Vit D缺乏组（缺乏组）、1,25-（OH）₂D₃干预组（干预组）,每组6只。对照组及干预组予正常饲料、正常光照,缺乏组予不含Vit D饲料、避光,喂养2周后,与成年雄性SD大鼠交配,受孕第7日开始干预组予1,25-（OH）₂D₃（10μg·kg-1）隔天灌胃,对照组及缺乏组予1mL生理盐水代替,直到分娩后第21天,各组取新生第1、7、14、21天子鼠肺组织,光镜下观察肺形态结构,免疫组织化学方法检测肺SP-C蛋白水平表达。结果缺乏组子鼠较同日龄对照组肺组织肺泡数少,肺泡腔小,形态较不规则,肺泡间隔较宽;干预组子鼠较同日龄对照组肺泡数稍增加,肺泡腔大小均匀,肺泡间隔较薄;3组子鼠随着日龄增加,SP-C的表达量逐渐增多,缺乏组子鼠SP-C表达量均低于同日龄对照组及干预组,差异有统计学意义（P<0.05）;干预组子鼠SP-C表达量均高于对照组,其中第14、21天比较差异有统计学意义（P<0.05）。结论维生素D在生命早期可影响大鼠肺发育,适量补充1,25-（OH）₂D₃有助于大鼠肺发育,其机制可能与影响肺SP-C的表达有关。     

扁蒴藤素调节YAP/TAZ信号通路对创伤性关节炎大鼠的治疗作用研究

目的 探究扁蒴藤素(PM)调节Yes相关蛋白(YAP)/转录共激活因子PDZ结合基序(TAZ)信号通路对创伤性关节炎(PTOA)大鼠的治疗作用。方法 将SD雄性大鼠随机分为对照组、PTOA组、低剂量PM组(PM-L组,100 mg/kg PM)、高剂量PM组(PM-H组,200 mg/kg PM)和高剂量PM+YAP抑制剂VTPF组(PM-H+VTPF组,200 mg/kg PM+10 mg/kg VTPF),每组12只。记录大鼠热痛阈值、压痛阈值的变化。HE染色观察大鼠软骨组织病理学变化,并进行Mankin’s评分,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大鼠软骨组织中炎症因子一氧化氮(NO)、白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和基质金属蛋白酶(MMP)-1、MMP-3水平。TUNEL染色观察大鼠软骨组织细胞凋亡的情况。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)实验检测大鼠软骨组织TAZ、IL-1β、TNF-α mRNA水平。Western Blot检测大鼠软骨组织YAP/TAZ信号通路相关蛋白的表达情况。结果 与对照组相比,PTOA组大鼠热痛阈值、压痛阈值、软骨组织YAP磷酸化水平、TAZ蛋白水平与mRNA水平显著降低(P<0.05),软骨组织IL-1β、TNF-α及其mRNA水平、NO、MMP-1、MMP3水平、细胞凋亡率、Mankin’s评分显著升高(P<0.05),HE显示软骨层变薄,结构不清晰,软骨细胞大量丢失、排列紊乱。与PTOA组相比,PM-L组、PM-H组大鼠相关指标变化与上述相反(P<0.05),软骨组织病变减轻。YAP抑制剂VTPF减轻了PM对PTOA的治疗作用。结论 PM可能通过激活YAP/TAZ信号通路,对PTOA大鼠具有一定的治疗作用。     

强筋合剂对骨关节炎大鼠关节炎症的影响及机制研究

目的 探究强筋合剂对骨关节炎大鼠膝关节炎症的影响及其作用机制。方法使用10%木瓜蛋白酶和0.03mol/LL-半胱氨酸的混合液造模，建立骨关节炎大鼠模型。36只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、强筋合剂低、中、高剂量组、盐酸氨基葡萄糖组，每组6只。其中强筋合剂低、中、高剂量组分别给予蒸馏水制备的体积分数为2.12%、4.35%、8.69%强筋合剂，10mL/（kg·d），盐酸氨基葡萄糖组给予13g/L盐酸氨基葡萄糖，10mL/（kg·d），对照组和模型组给予等量0.9%氯化钠溶液，灌胃治疗4周。治疗期间检测各组大鼠膝关节肿胀度。治疗结束后，采用ELISA法和qPCR法分别检测各组大鼠血清IL-1β水平及膝关节软骨组织中转化生长因子β1（TGF-β1）mRNA相对表达量；采用Westernblot法检测各组大鼠膝关节软骨组织中基质金属蛋白酶（MMP）-13、环氧化酶（COX）-2、Ⅱ型胶原蛋白（CollagenⅡ）相对表达水平；采用HE染色法观察各组大鼠膝关节病理形态。结果与对照组大鼠相比，模型组大鼠膝关节骨细胞损害严重，可见大量炎性细胞，膝关节肿胀明显；血清IL-β1水平升高，软骨组织中TGF-β1mRNA和MMP-13、COX-2蛋白相对表达水平增加，CollagenⅡ蛋白相对表达水平降低，差异均有统计学意义（均P＜0.05）。与模型组大鼠相比，强筋合剂高剂量组和盐酸氨基葡萄糖组大鼠膝关节可见少量炎性细胞聚集，膝关节骨面趋于光滑，膝关节肿胀度降低；强筋合剂中、高剂量组与盐酸氨基葡萄糖组大鼠血清中IL-1β水平显著降低；软骨组织中MMP-13、COX-2蛋白相对表达水平下降，CollagenⅡ相对表达水平增加，TGF-β1mRNA相对表达量降低，差异均有统计学意义（均P＜0.05）。结论强筋合剂可通过降低骨关节炎大鼠血液中IL-1β水平，抑制软骨组织中TGF-β1、MMP-13、COX-2蛋白表达和促进软骨组织中CollagenⅡ表达来改善膝关节炎症。     

雌激素受体介导的柚皮苷抗Aβ25-35损伤PC12细胞凋亡作用研究

目的 探讨雌激素受体介导的柚皮苷(NG)抗β淀粉样蛋白25-35(Aβ_25-35)诱导大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤(PC12)细胞的凋亡作用及其与雌激素受体(ER)信号通路的关系。方法 实验分为空白组、Aβ_25-35组、E2+Aβ_25-35组、NG+Aβ_25-35组、ICI182780+E2+Aβ_25-35组、ICI182780+NG+Aβ_25-35组。实验采用Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率;蛋白免疫印迹法(WB)检测细胞Bax、Bcl-2和Caspase-3的表达;RT-qPCR法检测细胞凋亡因子mRNA的表达。结果 Annexin V-FITC/PI双染色流式细胞术结果显示,与空白组相比,Aβ_25-35组细胞凋亡率升高(P<0.01);与Aβ_25-35组相比,NG+Aβ_25-35组细胞凋亡率降低(P<0.01);与NG+Aβ_25-35组相...     

iPSC-MSCs体外对骨关节炎患者关节软骨组织的基质保护作用全文替换

目的 研究多能诱导干细胞来源的间充质干细胞(iPSC-MSCs)体外对膝骨关节炎(KOA)患者关节软骨组织的基质保护作用及部分机制。方法 经知情同意,收集KOA患者关节软骨,剪碎处理后加入IL-1β(10 ng/ml)刺激96 h,再分别加入不同数量的iPSC-MSCs(1×10~5、1×10~6、1×10~7)细胞,在37℃、5% CO₂培养箱内培养3 d。另设IL-1β(10 ng/ml)诱导组和培养液对照组。硫酸软骨素含量测定法检测软骨组织中糖胺聚糖含量,免疫组化法检测组织中Ⅰ型胶原、Ⅱ型胶原表达,ELISA法检测共培养上清液中MMP13、IL-6、IL-10水平,HE染色检测离体软骨组织的病理改变。结果 与对照组比较,IL-1β可诱导KOA软骨组织中软骨细胞肿胀死亡,炎性细胞比例升高,Ⅰ型胶原水平升高、Ⅱ型胶原水平降低,培养上清液中MMP-13、IL-6水平升高(P<0.01),IL-10和糖胺聚糖含量减少(P<0.01);与IL-1β诱导组比较,iPSC-MSCs不同细胞数共培养可降低上清液中MMP-13、IL-6水平和Ⅰ型胶原水平,促进Ⅱ型...     

1,25（OH）2D3对血管紧张素Ⅱ诱导的肾小管上皮细胞转化的抑制作用

目的探讨1,25(OH)2D3对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的肾小管上皮细胞转化起始过程的抑制作用,为临床肾间质纤维化的防治提供理论依据。方法分离SD大鼠肾小管上皮细胞,将其分为对照组、AngⅡ诱导组(AngⅡ终浓度10-8mol/L)以及AngⅡ(10-8mol/L)+1,25(OH)2D3干预组[1,25(OH)2D3终浓度分别为10-6mol/L、10-7mol/L、10-8mol/L],培养48 h后收集各组细胞。利用酶联免疫吸附实验检测ColⅠ和FN;Real-time RT-PCR检测肾小管上皮细胞TGF-β1mRNA表达;Western Blot检测肾小管上皮细胞TGF-β1蛋白表达。结果实验48 h后,AngⅡ组TGF-β1mRNA表达、蛋白表达及培养上清中ColⅠ和FN浓度均较对照组显著增高,AngⅡ+10-6mol/L1,25(OH)2D3组TGF-β1mRNA表达、蛋白表达较对照组明显增高,但细胞培养上清中ColⅠ和FN浓度仅略有增高,差异无显著性,随着1,25(OH)2D3浓度的降低(10-7mol/L,10-8mol/L),TGF-β1mRNA表达、蛋白表达,细胞培养上清中ColⅠ和FN浓度也随之显著增高(P<0.05)。结论 1,25(OH)2VD3可以部分抑制AngⅡ诱导的肾小管上皮细胞EMT,其机制可能是通过抑制肾小管上皮细胞TGF-β1基因与蛋白表达、减少肾小管上皮细胞ColⅠ和FN分泌实现的。     

参七化痰方含药血清对TGF-β1刺激下气道平滑肌细胞Snail、Slug、MMP-9、TIMP-1水平影响研究

目的 观察参七化痰方(SQHT)含药血清对转化生长因子-β₁(TGF-β₁)刺激下气道平滑肌细胞锌指转录因子Snail、锌指转录因子Snail2(Slug)、金属基质蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶组织抑制物-1(TIMP-1)水平的影响。方法 选择生长良好的气道平滑肌细胞(ASMCs),随机分为5组,分别为对照组、模型组、10%SQHT组、法舒地尔(Fasudil)组、10%SQHT+Fasudi组。TGF-β₁刺激造模后,Western blot检测Snail、Slug蛋白水平的表达;实时荧光定量PCR检测Snail mRNA、Slug mRNA水平的表达;采用酶联免疫吸附试验定量测定细胞上清液MMP-9、TIMP-1水平的变化。同时观察SQHT对上述指标的影响。结果 TGF-β₁干预后,与对照组比较,模型组Snail、Slug蛋白、mRNA,MMP-9,TIMP-1表达水平上升(P<0.01);与模型组比较,10%SQHT组、Fasudil组与10%SQHT+Fasudil组Sn...     

依托咪酯调节MAPK/ERK信号通路对骨关节炎大鼠软骨损伤的影响

目的:探究依托咪酯(ET)对骨关节炎(OA)大鼠软骨损伤的影响以及对丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)/细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路的调节作用。方法:将SPF级SD雄性大鼠72只,随机分6组：假手术组、模型组、阳性组(15mg/kg的双氯芬酸钠)以及ET低(1.5mg/kg)、中(3mg/kg)、高剂量(6mg/kg)组。评估各组大鼠关节水肿和承重不对称情况;检测各组大鼠压痛阈值和热痛阈值;HE观察各组大鼠软骨病理损伤情况并进行Mankin评分;酶联免疫吸附法(ELISA)测定大鼠血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)以及软骨寡聚基质蛋白(COMP)的水平;Western blot检验软骨组织中基质蛋白酶-13(MMP-13)及通路蛋白ERK及其磷酸化p-ERK蛋白的表达。结果:与假手术组相比,模型组大鼠右后肢膝关节水肿和关节承重不对称性增大,软骨组织缺损且软骨层变薄,软骨细胞数量变少,血清中TNF-α、IL-1β、COMP水平升高,软骨MMP-13、p-ERK1/2蛋白表达及p-ERK1/2/ERK1/2比例升高(P<0.05)。与模型组相比,阳性...     

维生素D与性激素及其受体对男性临床孤立综合征复发的预测价值

目的 探讨维生素D、性激素及其受体对男性临床孤立综合征(CIS)患者发病及转归的预测价值。方法 将40例男性CIS患者纳入CIS组,将年龄和长期居住地相匹配的30例健康体检者纳入对照组(HC组),采用超高效液相色谱-串联质谱法检测所纳入者和首次复发为多发性硬化患者(MS组)外周血维生素D水平[1,25(OH)₂D₂和1,25(OH)₂D₃],电化学发光法检测外周血睾酮(T)、孕酮(P)、雌二醇(E2)水平,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测雌激素受体(ERα、ERβ)、雄激素受体(AR)及淋巴细胞上清液中维生素D受体(VDR)水平。结果 中位随访31.5个月后发现,29例(72.5%)CIS患者转归为多发性硬化。与未复发的CIS患者相比,转归为多发性硬化的患者发病年龄小,易出现寡克隆区带阳性。与HC组比较,CIS组维生素D水平降低(P<0.05)。CIS患者转归为多发性硬化时,血清中E₂、ERα和ERβ水平较复发前升高,T及AR水平下降(P<0.05)。相关性分...     

miR-21-5p靶向TGF-β1调节大鼠心肌细胞增殖和凋亡

目的 探讨miR-21-5p通过调控转化生长因子-β₁(transforming growth factor-β₁,TGF-β₁)对大鼠心肌细胞H9c2增殖和凋亡的影响。方法 抑制或过表达TGF-β₁后,通过RT-qPCR检测H9c2细胞中miR-21-5p的表达水平,双荧光素酶报告基因实验验证miR-21-5p和TGF-β₁的靶向关系,CCK-8及Annexin V-FITC/PI检测H9c2细胞增殖和凋亡,Western blotting检测H9c2细胞中TGF-β₁的表达水平。结果 miR-21-5p表达抑制后使H9c2细胞增殖受到抑制并诱导其凋亡(P＜0.05)。miR-21-5p靶向负调控TGF-β₁的表达水平(P＜0.05)。过表达TGF-β₁显著抑制H9c2细胞增殖并诱导其凋亡(P＜0.05)。结论 miR-21-5p通过靶向下调TGF-β₁的表达水平,促进大鼠H9c2心肌细胞增殖和抑制细胞凋亡。     

1,25-二羟维生素D3对哮喘大鼠调节性T淋巴细胞和气道炎症的影响

目的探讨1,25-二羟维生素D3[1,25(OH)2D3]对哮喘大鼠调节性T淋巴细胞(即CD4 CD25 Foxp3 T细胞)及气道炎症的影响。方法28只Wistar大鼠用卵白蛋白作为致敏原制备大鼠哮喘模型,然后随机分为四组(n=7)。治疗组1于激发前1 h给予口服1,25(OH)2D3;治疗组2于激发前1 h给予皮下注射地塞米松;治疗组3则于激发前1 h给予以上两药联合应用;组4于激发前1 h不用药(哮喘对照组)。分别测定各组大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中IL-4和IL-10水平,计数总细胞数和嗜酸性粒细胞数;流式细胞仪检测外周血和脾脏单个核细胞中Treg与CD4 T细胞的比值;检测肺组织中IL-10和Foxp3mRNA表达。以未造模Wistar大鼠作为正常对照组(n=7)。结果哮喘对照组与正常对照组比较各项指标均有显著差异。与哮喘对照组比较,各哮喘治疗组大鼠BALF中细胞总数及嗜酸性粒细胞计数明显减少,IL-4水平降低而IL-10水平增高;外周血和脾脏单个核细胞中Treg与CD4 T细胞比值明显增高;肺组织中IL-10 mRNA和Foxp3 mRNA表达增加。各哮喘治疗组间及其与正常对照组间各项检测指标比较均无显著差异。结论哮喘大鼠给予1,25(OH)2D3可增加外周血和脾脏Treg比例和Foxp3mRNA表达水平。提示1,25(OH)2D3对Treg具有调节作用,对哮喘可能有潜在的治疗作用。