强迫谱系障碍与第Ⅱ组代谢型谷氨酸受体相关候选基因位点的连锁分析

目的 了解代谢型谷氨酸受体mGlu2受体(mGluR2)基因、mGlu3受体(mGluR3)基因等与强迫谱系障碍(OCSDs)的连锁关系.方法 选取一个连续三代发病的强迫谱系障碍家系,采集到该家系中12个正常个体,8个受累个体的血样,选取mGluR2、mGluR3基因附近7对微卫星标记引物,采用两点和多点非参数分析的方法对该家系进行连锁分析.结果 7对微卫星标记位点的两点和多点非参数分析LOD值(NPL值),位于mGluR3基因附近的标记D7S644两点非参数分析NPL值为1.719(P=0.078),多点非参数分析NPL值为1.712(P=0.078),达到验证性连锁的阈值(NPL=1.2),但未达到提示性连锁的阈值(NPL=2.2),D7S2481两点非参数分析NPL值为0.628(P=0.179),多点非参数分析NPL值为0.852(P=0.141),接近验证性连锁的阈值,其余5对微卫星标记位点非参数分析NPL值均未达到验证性连锁的阈值.结论 提示mGluR3基因与OCSDs可能存在连锁关系,不能排除mGluR2基因与OCSDs的相关性.     

代谢型谷氨酸受体与神经发生的关系

谷氨酸作为成熟的神经元中最主要的兴奋性神经递质,可以影响神经发生,其中代谢型谷氨酸受体具有重要作用。本文回顾总结了代谢型谷氨酸受体分类、分子结构和各亚型突触分布,以及各组代谢型谷氨酸受体对神经发生的作用和可能机制。     

代谢型谷氨酸受体7基因的拷贝数变异与精神分裂症的相关性

目的 探讨代谢型谷氨酸受体7( GRM7)基因的拷贝数变异(CNVs)与精神分裂症的相关性.方法 收集180例中国山西汉族精神分裂症患者和33名正常对照的DNA样本及资料.应用实时定量PCR方法检测位于 GRM7基因外显子2上游200 bp处和外显子8附近的CNVs.同时对实时定量PCR扩增区的基因序列进行测序.结果 相对拷贝数分析显示,在 GRM7基因外显子2上游200 bp处,1例精神分裂症患者具有双等位基因缺失,13例患者和1名正常对照具有单个等位基因缺失.测序显示 GRM7基因外显子2上游200 bp处实时定量PCR反向引物(GRM7-SV-1R)的3'末端上游第5个碱基发生了C>G变异,实时定量PCR扩增中发现的等位基因缺失均由碱基变异导致.结论 实时定量PCR结合测序可以避免PCR引物序列变异导致的假阳性缺失,是检测CNVs的有效方法.本研究 GRM7基因的CNVs与精神分裂症无相关性,提示 GRM7基因的CNVs可能不是中国汉族精神分裂症发病的主要原因,然而其潜在的罕见CNVs可能和部分精神分裂症有关,有待于进一步研究.     

代谢型谷氨酸受体5在大鼠急性脑缺血中的变化

目的:观察大鼠大脑皮质中代谢型谷氨酸受体5(metabotropic glutamate receptor 5,mGluR5)在脑缺血不同时段的表达及其动态变化的规律,探讨其在急性脑缺血中变化的意义.方法:35只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、脑缺血1h组、3h组、6h组、12h组、24h组(均为手术组)及其相对应的假手术对照组,采用大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,至上述规定时间点取大脑组织,行HE染色,用光学显微镜观察神经元损伤程度;用免疫组织化学技术判断神经元阳性表达的强弱;用形态分析系统检测各组mGluR.5表达的灰度值.结果:各手术组mGluR5表达均高于假手术对照组及正常对照组,与正常对照组相比,缺血1h其表达即有升高,至12h达高峰.而假手术对照组与正常对照组相比无统计学意义.结论:急性脑缺血可引起mGluR5表达上调,提示mGluR5参与了局灶性脑缺血损伤,可能促进了缺血性脑血管病的发展.但结合以前的研究,我们推测其上调也可能是一种为清除谷氨酸(Glu)而作出的反应性增高,是一种维持机体平衡的自我保护机制.     

大鼠脊髓背角内第5型代谢型谷氨酸受体免疫组织化学特征

应用免疫组织化学方法在光镜下观察到,大鼠脊髓内第5型代谢型谷氨酸受体(mGluR5)主要分布在背角Ⅰ～Ⅲ层内;行单侧背根（L1～L6）切断术后,未见术侧mGluR5免疫反应性明显变化;脊神经节内仅见极少数神经元呈mGluR5免疫反应弱阳性。由此提示,脊髓背角内mGluR5的主要来源为非一级传入神经元。免疫电镜研究显示,在脊髓背角浅层内,mGluR5主要定位在部分神经元胞体和大量树突内,并常见部分含mGluR5的树突与具有一级传入C纤维终末形态特征的轴突终末构成突触小球。mGluR5在脊髓背角浅层内的超微定位特征表明,脊髓背角内的mGluR5可能主要作为突触后受体介导或调节谷氨酸传递一级感觉(包括痛觉)的功能。     

大鼠脊髓背角内第5型代谢型谷氨酸受体免疫组织化学特征

应用免疫组织化学方法在光镜下观察到，大鼠脊髓内第5型代谢型谷氨酸受体（mGluR5）主要分布在背角Ⅰ－Ⅲ层内；行单侧背根（L1－L6）切断术后，未见术侧mGluR5免疫反应性明显变化；脊神经节内仅见极少数神经元呈mGluR5免疫反应弱阳性。由此提示，脊髓背角内mGluR5的主要来源为非一级传入神经元。免疫电镜研究显示，在髓背角浅层内，mGluR5主要定位在部分神经元胞体和大量树突内，并常见部分含mGluR5的树突与具有一级传入C纤维终末形态特征的轴突终末构成突触小球。mGluR5在脊髓背角浅层内的超微定位特征表明，脊髓背角内的mGluR5可能主要作为突触后受体介导或调节谷氨酸传递一级感觉（包括痛觉）的功能。     

代谢型谷氨酸受体基因的多态性对阿立哌唑疗效的影响

目的:探讨阿立哌唑治疗精神分裂症的疗效与代谢型谷氨酸受体-2(m GluR2)基因多态性的关系。方法:选择160例精神分裂症患者为研究组,并选择同期健康志愿者160例为对照组,应用阳性与阴性症状量表(PANSS)、临床总体印象量表-严重程度和改善程度量表(CGI-SI)分别于治疗前和治疗后2、4、8周对研究组患者进行疗效评定。采用DNA测序技术检测上述患者m GluR2基因单核苷酸多态性rs724226和rs1468412的基因型并分组研究,并对精神分裂症患者的谷氨酸受体基因多态性进行关联分析。结果:rs724226基因型的患者PANSS总分从治疗2周起开始显著下降,治疗前后差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);rs1468412的基因型的患者PANSS总分下降不明显,治疗前后差异无统计学意义(P>0.05)。结论:阿立哌唑治疗精神分裂症的疗效可能与谷氨酸受体基因的多态性有关。     

代谢型谷氨酸受体5在吗啡耐受大鼠脊髓中的表达

目的 研究吗啡耐受大鼠脊髓代谢型谷氨酸受体5(mGluR5)的表达变化及mGluR5拮抗剂MPEP对其表达的影响.方法 雄性SD大鼠随机分为4组:对照组(NS),吗啡耐受组(Mor),吗啡加MPEP组(Mor+MPEP)和MPEP组.采用鞘内重复给药方式建立慢性吗啡耐受模型,鞘内注射吗啡10 μg,每日给药2次,连续7 d.通过甩尾实验,观察给药前和给药后30 min大鼠甩尾潜伏期并计算最大镇痛效应百分比[MPE%=(给药后阈值-基础阈值)/(最大阈值-基础阈值)×100%].采用免疫荧光和免疫印迹(Western blot)方法检测并比较各组L4～5脊髓组织mGluR5的表达.结果 鞘内重复注射吗啡后,吗啡组MPE%逐渐下降,到第7天与NS组比较,差异无统计学意义(P>0.05),吗啡加MPEP组第7天仍表现出较强的镇痛效应(P<0.05).免疫荧光和Western blot显示吗啡耐受组mGluR5表达升高,吗啡加MPEP组mGluR5的表达低于吗啡耐受组(P<0.05),但高于NS组(P<0.05).结论 mGluR5拮抗剂MPEP有延缓吗啡耐受的作用.吗啡耐受大鼠脊髓背角mGluR5表达上调,MPEP可能通过部分抑制mGluR5的上调节拮抗吗啡耐受.     

Ⅰ组代谢型谷氨酸受体拮抗剂对吗啡耐受大鼠热痛阈的影响

目的 观察鞘内注射Ⅰ组代谢型谷氨酸受体(mGluRs)拮抗剂对吗啡耐受大鼠热痛阈的影响.方法 36只雄性Spague-Dawley大鼠随机均分为6组,鞘内置管后第4天开始给药.0.9%氯化钠溶液组(C组)予0.9%氯化钠溶液10μL.吗啡耐受组(M组)予吗啡10μg.吗啡+1-胺塞茚满-1,5-二羟酸(AIDA)组(MA组)予吗啡10μg+AIDA 60 nmol.吗啡+2-甲基-6-苯基苯乙炔-吡啶(MPEP)组(MM组)予吗啡10μg+MPEP 60 nmol.AIDA组予AIDA 60 nmol.MPEP组予MPEP 60 nmol.连续给药7 d,每天2次.给药前和给药后30 min测定大鼠甩尾潜伏期(TFL)以观察各组热痛阈的变化.结果 M组在第1、2天的TFL显著高于C组(P值均＜0.05),随着用药天数增加,M组TFL逐渐缩短,到第7天与C组的差异无统计学意义(P＞0.05).MA组和MM组的TFL也呈下降趋势,但明显缓于M组.MA组第3～7天的TFL高于MM组,但差异均无统计学意义(P值均＞0.05).AIDA组和MPEP组TFL的变化不大,与C组的差异均无统计学意义(P值均＞0.05).结论 Ⅰ组mGluRs拮抗剂有抑制吗啡耐受的作用.     

代谢型谷氨酸受体第5亚型与脑梗死的关系

脑梗死是目前我国中老年人群中的常见病、多发病。随着分子生物学技术的进展,对脑梗死的发病机制已经有了更加深入的认识,提出了自由基损害、兴奋性毒性、一氧化氮（NO）学说、亚低温疗法、能量衰竭学说、钙通道阻滞等理论。近来对谷氨酸受体介导的神经毒性研究较多,尤其在代谢型谷氨酸受体的研究上愈发受到重视,其中代谢型谷氨酸受体5（mGluR5）与脑梗死的关系已受到普遍关注。     

第Ⅲ组亲代谢型谷氨酸受体在内脏高敏性大鼠结肠中的表达

目的 探讨第Ⅲ组亲代谢型谷氨酸受体mGluR4、mGluR7、mGluR8在内脏高敏性大鼠结肠中的表达变化。方法 12只SD雄性幼鼠分为母婴分离(neonatal maternal separation, NMS)组和对照组(normal control, NC)组。利用结直肠扩张(colorectal distention, CRD)刺激下的腹壁回缩反射(abdominal withdrawal reflex, AWR)评分和腹壁肌电活动(electromyography, EMG)检验模型有效性;应用RT-PCR、Western印迹法和免疫组化检测第Ⅲ组亲代谢型谷氨酸受体mGluR4、mGluR7、mGluR8在模型组和对照组大鼠结肠中的表达变化。结果 在不同压力CRD刺激下,NMS组大鼠的AWR评分(P＜0.01)和腹壁肌电活动(P＜0.05)明显高于NC组;NMS组大鼠结肠中第Ⅲ组亲代谢型谷氨酸受体mGluR4、mGluR7、mGluR8的mRNA(P＜0.01,P＜0.05,P＜0.01)和蛋白水平表达(积分光度值integrated density, ID)(P＜0.05,P＜0.01,P＜0.01)分别高于相对应NC组的表达;NMS组mGluR4、mGluR7、mGluR8的阳性表达率明显高于NC组。结论 第Ⅲ组亲代谢型谷氨酸受体mGluR4、mGluR7、mGluR8在内脏高敏性大鼠结肠中的表达明显升高,肠易激综合征(irritable bowel syndrome, IBS)发病可能与第Ⅲ组亲代谢型谷氨酸受体相关。     

铅对离体海马神经元代谢型谷氨酸受体基因表达的影响

铅具有很强的神经发育毒性，主要表现为铅对未成熟脑学习记忆的损害，围生期铅暴露可明显抑制海马长时程增强(LTP)的功能。铅对中枢神经细胞信号传递的影响已成为目前铅神经毒性机理研究的热点。胚胎大鼠海马神经元表达的NMDA受体是铅神经毒性作用的主要靶位点之一，代谢型     

代谢型谷氨酸受体4通过Rab5抑制神经病理性痛

目的探讨代谢型谷氨酸受体4（mGluR4）激活后抑制神经病理性痛的机制。方法首先取24只SD大鼠,鞘内置管后随机分为空白对照组（n=6）、假手术组（n=6）和脊神经根结扎（SNL）组（n=12）。空白对照组只行鞘内置管术,其余大鼠均于术前和术后第1～6日测量50％机械缩足阈值（50％PWT）;其次,将SNL组大鼠于术后第7日起,随机分为SNL＋生理盐水组（n=6）和SNL＋VU0155041组（n=6）,分别予以鞘内注射生理盐水和VU0155041（500nm01）10μL,2次／d×7d,注药前和注药后30min测量其50％PWT。最后,末次给药后1h取空白对照组、SNL＋生理盐水组和SNL＋VU0155041组大鼠左侧脊髓腰膨大处送检基因芯片并利用Western blotting检测mGluR4及Rab5各亚型的表达变化。结果SNL大鼠术后1～6d其手术同侧后肢50％PwT较空白对照组及假手术组明显降低（P〈0．01）;SNL＋VU0155041组大鼠手术同侧后肢50％PwT与SNL＋生理盐水组相比自给药第4日起逐渐升高（P〈0．01）;Agilent表达谱基因芯片结果显示：SNL＋生理盐水组的Rab5含量高于空白对照组,而空白对照组和SNL＋VU0t55041组相比无明显差异;Western blotting结果显示：SNL＋生理盐水组的mGluR4表达明显低于空白对照组和SNL＋VU0155041组（P〈0．05）,而Rab5A和Rab5C的表达明显高于空白对照组和SNL＋VU0155041组（P〈0．05）,Rab5B在3组中的表达差异无统计学意义（P〉0．05）。结论mGluR4激活后可能是通过Rab5A和Rab5C调控突触囊泡递质释放从而影响神经病理性痛。     

二次脑损伤后大鼠脑皮层代谢型谷氨酸受体亚型4 mRNA的变化

目的：研究弥漫性脑损伤（DBI）及其合并二次脑损伤（SBI）后大鼠脑皮层代谢型谷氨酸受体亚型4（mGluR4)的变化及意义。方法：SD大鼠随机分为正常对照组、假手术组、单纯SBI组、单纯DBI组及合并SBI组,在Marmarou弥漫性脑损伤模型的基础上,制成SBI模型,于伤后1,6,12,24和72h进行HE染色和代谢型谷氨酸受体4亚型（mGluR4)mRNA原位杂交。结果：与正常对照组相比,假手术组和单纯SBI组阳性神经元数以及信号灰度均无明显改变（P＞0．05）;与假手术组相比,单纯DBI组和合并SBI组,mGluR4mRNA表达于脑损伤后1h即有明显增加（P＜0．01）,单纯DBI组在6h达到高峰,合并SBI组于12h达到高峰,此刻与单纯DBI组相比,合并SBI组亦明显增加（P＜0．01）。结论：mGluR4参与了DBI和SBI的病理生理过程。可能为临床救治重型颅脑损伤提供新的理论依据。     

代谢型谷氨酸受体5在中枢神经系统疾病中的研究进展

代谢型谷氨酸受体5(metabotropic glutamate receptor 5,mGluR5)是中枢谷氨酸能系统的重要受体之一,其广泛参与调控突触传递、突触可塑性、神经兴奋性/抑制性平衡等生理过程.多项研究发现,mGluR5参与介导不同神经和精神疾病的发生发展,因此其作为神经和精神疾病的潜在药物靶标日益受到关注...     

I型代谢型谷氨酸受体在脊髓水平参与疼痛信号的传递

目的 观察Ⅰ型代谢型谷氨酸受体在脊髓水平痛信号传递过程中的作用。方法 先在鞘内分别注射缓冲液或Ⅰ型代谢型谷氨酸受体两种拮抗剂CPCCOEt和MPEP，再给大鼠脚掌注射致痛物质formalin，1 h后立即处死，用免疫组化的方法检测大鼠脊髓背角Fos免疫阳性神经元的数目。结果 分别给予拮抗剂CPCCOEt和MPEP后，大鼠的第二相痛行为反应明显减弱，脊髓背角Fos免疫阳性神经元的数目明显减少。结论 Ⅰ型代谢型谷氨酸受体在脊髓水平促进了痛信号的传递，在脊髓水平阻断Ⅰ型代谢型谷氨酸受体可能成为镇痛药物的新靶点。     

神经病理性疼痛中代谢型谷氨酸受体5型的表达变化

目的研究神经病理性疼痛形成过程中脊髓背角和背根神经节(DRG)代谢型谷氨酸受体5型(mGluR5)表达的改变。方法雄性SD大鼠84只随机分为7组(n=12)Con组为空白对照组;S3、S7、S14组分别为假手术后3、7、14d测痛阈取标本;C3、C7、C14组分别为慢性坐骨神经紧缩性神经病理性疼痛(CCI)模型术后3、7、14d测痛阈取标本。术后3、7、14d分别用VonFrey细丝测量机械性痛阈后处死大鼠,取腰膨大脊髓背角和DRG的标本,用RT-PCR和免疫蛋白印迹方法从转录和翻译水平研究mGluR5的表达变化。结果CCI手术组的术后痛阈均显著低于Con组和同时间段的假手术组(P<0.05)。CCI术后3d脊髓背角水平mGluR5的mRNA和蛋白质表达显著高于假手术3d组和Con组(P<0.05),而术后7和14d时CCI组与假手术组和空白对照组比较差异无显著性(P>0.05)。在DRG水平,mGluR5的表达差异均无显著性(P>0.05)。结论脊髓水平的mGluR5在CCI神经病理性疼痛模型早期表达明显升高,提示参与神经病理性疼痛的形成。     

代谢型谷氨酸受体5在大鼠颞下颌关节疼痛中的作用

目的 探讨代谢型谷氨酸受体5在甲醛诱导大鼠颞下颌关节疼痛中的作用.方法 SD大鼠36只,随机均分为6组:正常对照组(不做任何处理)、生理盐水组(右侧颞下颌关节内注射50 μL生理盐水)、甲醛组(右侧颞下颌关节内注射50 μL5％甲醛)、MPEP-1组[25 μL MPEP(1 mmoL/L)+50 μL 5％甲醛]、MPEP-2组[25 μL MPEP(2.5 mmoL/L) +50 μL 5％甲醛]、MPEP-3组[25 μL MPEP(5 mmoL/L) +50 μL 5％甲醛].将5％甲醛注入右侧颞下颌关节腔内,诱导大鼠颞下颌关节疼痛,计数各组大鼠60 min内伤害性行为反应(包括刮擦头面部及缩头),分光光度计测量颞下颌关节内Evan's蓝结合血浆蛋白渗出量的变化.结果 甲醛组大鼠搔刮头面部及缩头反应持续时间明显高于正常对照组及生理盐水组(P＜0.05),MPEP-3组大鼠搔刮头面部及缩头等伤害性行为反应明显低于甲醛组,差异有统计学意义(P＜0.05).甲醛组颞下颌关节内Evan's蓝结合血浆蛋白渗出量明显高于正常对照组及生理盐水组(P＜ 0.001),MPEP-3组大鼠颞下颌关节内Evan's蓝结合血浆蛋白渗出量明显低于甲醛组(P＜0.05).结论 代谢型谷氨酸受体5介导甲醛诱导大鼠颞下颌关节痛,其拮抗剂能减轻甲醛引起的颞下颌关节疼痛.     

代谢型谷氨酸受体1和5激动剂改善阿霉素诱导的小鼠肾损伤

目的 研究选择性代谢型谷氨酸受体1和5(mGluR1/5)激动剂3,5-二羟基苯甘氨酸(DHPG)对阿霉素(ADR)肾病小鼠模型的作用.方法 18只6周龄BALB/c小鼠随机分为对照组、ADR组(经尾静脉注射阿霉素建立阿霉素肾病小鼠模型)和ADR+DHPG组(建模前预先注射DHPG),每组6只.应用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测小鼠24 h尿白蛋白水平,透射电子显微镜观察足细胞足突形态和宽度;免疫荧光染色激光共聚焦显微镜观察足细胞标志蛋白nephrin和损伤标志蛋白desmin 的表达,免疫组织化学法检测肾小球WT-1表达;TUNEL染色检测足细胞凋亡情况.结果 在对照组、ADR组和ADR+DHPG组24 h尿白蛋白分别为(1.67±0.22)、(22.55 ±2.34)和(8.23±2.74) mg,组间比较差异有统计学意义(P＜0.01).与ADR组比较,ADR+DHPG组小鼠足细胞的足突宽度缩短,desmin表达减少,而nephrin表达增加.肾小球中WT-1阳性细胞数与凋亡细胞数呈显著负相关(R2=0.8 482,P＜0.05);ADR+DHPG组足细胞凋亡数显著少于ADR组(P＜0.01).结论 选择性mGluR1/5激动剂DHPG可抑制ADR诱导的足细胞足突融合、nephrin表达减少和细胞凋亡,减少阿霉素肾病小鼠的白蛋白尿.     

代谢型谷氨酸受体4在ES细胞体外分化为心肌细胞中的表达研究

目的:探索代谢型谷氨酸受体4(metabotropic glutamate receptor 4,mGluR4)在小鼠胚胎干细胞(embryonic stem cells,ES细胞)体外分化为心肌细胞中的表达情况。方法:采用悬滴培养法,体外诱导ES细胞分化为心肌细胞,分别以维甲酸(retinoic acid,RA)和溶剂二甲亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)作为阳性对照和阴性对照;利用免疫荧光法和流式细胞术,鉴定ES细胞衍生心肌细胞团中心肌特异性蛋白α-actinin/Troponin-T和mGluR4共表达情况;用Western Blot法,考察ES细胞定向分化为心肌细胞过程中mGluR4蛋白表达水平;同时观察了小鼠胚胎心脏发育过程中mGluR4基因和蛋白表达变化。结果:ES细胞及其分化来的早期心肌细胞团均表达mGluR4,随着心肌细胞逐渐成熟,mGluR4蛋白表达水平下调。流式细胞术结果显示,贴壁分化11 d的细胞团中mGluR4与心肌特异性蛋白Troponin-T共表达细胞比率仅为(3.00±1.00)%。同时,小鼠胚胎心脏发育过程中mGluR4基因和蛋白表达也呈下降趋势,直至成体小鼠心脏中不表达mGluR4蛋白。结论:ES细胞体外分化为心肌细胞过程中mGluR4有表达并呈下调趋势,与小鼠体内心脏发育过程中mGluR4表达情况基本一致。