高效液相色谱化学发光检测体液中吗啡

本文叙述了由高效液相色谱化学发光(HPLC-CL)法检测体液中的吗啡.HPLC用不锈钢柱(15cm×4.9mm,id)装填8μm反相苯乙烯-丁二烯苯树脂耐酸性填料.内标(IS)为盐酸N-乙基去甲吗啡.由875ml0.01ml/L焦磷酸和125ml甲醇混合作洗脱液,pH2.2,流速1.0ml/min.氧化剂系6×10~(-4)mol/L KMnO_4氧化剂流速0.4ml/min,检测波长为280nm.实验由水和健康人的血与尿分别制备两种浓度范围的标准曲线,即0.01～500μg/ml吗啡,20μg/ml IS和50～1000ng/ml吗啡,1μg/ml IS.所有     

用HPLC法同时测定比格犬血浆中地西泮、去甲西泮和氟马西尼的浓度

目的:建立测定比格犬血浆中地西泮、去甲西泮和氟马西尼浓度的HPLC法.方法:采用Kromasil 100-5 C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);以氯硝西泮为内标,甲醇(A)-水(B)-四氢呋喃(C)为流动相(55∶40∶5),流速1.0 ml/min,检测波长254 nm;柱温25 C.结果:地西泮、去甲西泮和氟马西尼在浓度范围为0.025～1.000 μg/ml时线性良好(r=0.999 9,0.999 0,0.998 9),日内和日间RSD均＜6％(n=5),回收率接近100％.结论:本方法准确、快速、简便,可用于比格犬血浆中地西泮、去甲西泮和氟马西尼浓度的同时测定.     

反相高效液相色谱法测定血浆中酒石酸双氢可待因/对乙酰氨基酚浓度的方法

目的 建立人血浆中酒石酸双氢可待因/对乙酰氨基酚药物浓度的HPLC测定方法。方法 以间乙酰氨基酚为内标,乙腈-0.025％磷酸三乙胺(1 4:86)为流动相,经乙酸乙酯提取后测定。结果 酒石酸双氢可待因的线性范围为5～160μg·L-1,最低检出浓度为5μg·L-1,回收率为97.25％～100.4％;对乙酰氨基酚线性范围为0.2～20 mg.L-1,最低检出浓度为0.2 mg·L-1,回收率为99.25％～101.6％。结论该方法简单实用,结果准确,适用于酒石酸双氢可待因/对乙酰氨基酚复方制剂的药代动力学研究。     

HPLC法测定生物体液中4-氨基-5-氯-N-[(1-乙基咪唑啉-2-取代)甲基]-2-甲氧基苯甲酰胺(Ⅰ)和它的代谢物(Ⅱ)及其在药动学研究中的应用

(Ⅰ)用于治疗胃-食管返流。本文报道一灵敏、可靠且专一的 HPLC 法测定生物体液中的(Ⅰ)和(Ⅱ),并应用此法研究其药动学。色谱条件 HPLC 色谱柱为 Nucleosil-C_(18)柱(颗粒直径3μm,10×4.6mm,id)。柱温50℃。荧光检测:激发波长270mm,发射波长370nm。流动相为含1ml 三乙胺的乙腈-1g/L 枸橼酸混合液(10∶90),使用前脱气处理,流速1.8 ml/min。0.1g/L的4-氨基-5-(甲氨磺酰基)-N-((卜烯丙基-2-吡咯烷基)-甲基)-2-甲氧苯甲酰胺(Ⅲ)的水溶液为内标。样品制备将1ml 血浆、全血或尿液置50ml 离心管中,加入内标(Ⅲ)50～100μl     

用柱切换HPLC法测定大鼠、狗及人血浆中的氢氯噻嗪

已有的 HPLC 测定生物液体中氢氯噻嗪(Ⅰ)浓度的方法大多需繁琐的样品处理步骤,采用本文方法,血浆样品可直接注入色谱系统作全自动分析。溶液的制备分别配制1.0mg/ml 的(Ⅰ)和内标氢氟噻嗪(Ⅱ)的甲醇溶液作为贮备液,于-20℃保存。将(Ⅰ)的贮备液用10mmol/L 的磷酸盐缓冲液(pH7.2)稀释至100μg/ml,并以空白血浆(先离心去微粒)进一步稀释制得血浆标准液。以相同缓冲液稀释内标液至1500ng/ml。血浆样品室温解冻后离心(3000rpm,10min)去微粒,将150μl 血浆标准液或样品液与150μl 内标液混合,采用自动进样器将100～200μl 混合液注入 HPLC 仪。色谱系统包括提取柱(两个串联的Guard-Pak C_(18)柱,柱长0.4cm)和串联Guard-Pak C_(18)保护柱的分析柱(HypersilODS,5μm,4.6×250mm),分别联于六孔     

高效液相色谱法测定血浆中酮基布洛芬的含量

建立测定血浆中酮基布洛芬简便、灵敏的HPLC法.色谱柱为SpherisorbC18柱(10cm×4.6mm,3μ),流动相为5mmol/L磷酸盐缓冲液(pH6.8)-甲醇(28∶72,V/V),流速1ml/min,在UV262nm波长处检测,检测器灵敏度设为0.005aufs,响应时间0.2s.采用内标法定量,内标物为萘普生.1ml血浆样品盐酸酸化后加入6ml乙醚提取,提取液空气吹干,用250μl流动相重溶解后进行分析.实验结果表明,在此分析条件下酮基布洛芬和内标分离完全且无其它干扰,保留时间分别为12.3和9.5min.在0.01～5.0μg/ml浓度范围内酮基布洛芬峰面积比与其浓度间呈良好的线性关系,r=0.9999,血浆中酮基布洛芬最低检测浓度为3ng/ml,回收率85.9%～90.9%,天内变异1.4%～4.9%,天间变异2.5%～6.2%.     

HPLC法测定机体中巴比妥酸盐类

在临床上或意外事故中常需对病人体液或组织中的巴比妥酸盐类进行测定,但过去的测定方法都不理想.本文用HPLC法对12种常用巴比妥酸盐进行定性或定量测定,方法快速、灵敏、复演性好.作者用μBondapak C_(18)柱子(15cm×3.9mm,id)测定血浆、尿、死者血液和组织中的巴比妥酸盐,该法已正式用于法庭和临床毒理学分析.材料:1mg/ml巴比妥酸盐甲醇液,血浆和血液的工作液(100和10μg/ml)用甲醇稀释;巴比妥酸盐标准液浓度分别为1、2、5、10、20、50和100μg/ml.50μg/ml阿普巴比妥和1mg/ml酚酞的甲醇液为内标.     

高效液相色谱法测定血浆中酮基布洛芬的含量

建立测定血浆中酮基布洛芬简便、灵敏的HPLC法.色谱柱为Spherisorb C18柱(10c m×4.6mm,3μ),流动相为5mmol/L磷酸盐缓冲液(pH6.8)-甲醇(28∶72,V/V),流速1ml/ min,在UV 262nm波长处检测,检测器灵敏度设为0.005aufs,响应时间0.2s.采用内标法定量 ,内标物为萘普生.1ml血浆样品盐酸酸化后加入6ml乙醚提取,提取液空气吹干,用250μl 流动相重溶解后进行分析.实验结果表明,在此分析条件下酮基布洛芬和内标分离完全且无其它干扰,保留时间分别为12.3和9.5min.在0.01～5.0μg/ml浓度范围内酮基布洛芬峰面积比与其浓度间呈良好的线性关系,r=0.9999,血浆中酮基布洛芬最低检测浓度为3ng /ml,回收率85.9%～90.9%,天内变异1.4%～4.9%,天间变异2.5%～6.2%.     

反相HPLC法测定血浆中氯胺酮和安定浓度

采用HPLC法测定了家兔血浆中氯胺酮、安定的浓度,线性范围分别为0.125～5.0μg/ml;0.025～1.0μg/ml。检测最低浓度分别为50ng/ml、2.5ng/ml;日内日间误差<6.5％。药动学研究表明:氯胺酮、安定分别为一室线性、二室线性开放模型。     

人血浆中别嘌醇的HPLC测定

建立了人血浆中别嘌醇的高效液相色谱测定方法，用于人体生物等效性研究。以次黄嘌呤-9-丙酸乙酯为内标，色谱柱BeckmanODS柱，流动相50mmol/L磷酸盐缓冲液（pH3.56)。流速2.0ml/min，柱温35℃，检测波长250nm。血浆样品加高氯酸沉淀蛋白后分析。别嘌醇浓度在0.025-4μg/ml范围内线性良好（r为0.09999)，检测限10ng/ml，回收率为92.7%-96.5%。     

HPLC法测定阿魏酸钠在Beagle犬体内血浆浓度及药动学研究

目的建立测定血浆中阿魏酸钠浓度的HPLC法,并用于阿魏酸钠片剂在Beagle犬体内的药代动力学研究.方法色谱柱为Diamonsil(TM)C18柱,250 mm×4.6 mm,5 μm,流动相为乙腈-水-冰乙酸(2574.20.8),流速为1.0 mL/min,检测波长为320 nm.以替硝唑为内标,用乙腈处理血浆样品,震荡离心分离上清液进样.结果标准曲线线性范围0.025～1.80 mg/L,r=0.999 5.阿魏酸钠平均回收率99.6%,最低检测浓度为5.25 μg/L,日内、日间RSD＜5.3%.阿魏酸钠片剂在Beagle犬体内的血药浓度-时间过程符合一房室模型,T1/2(ka)为10.88 min,T1/2(ke)为29.78min.结论HPLC法方法简便、快速、重现性好,适用于阿魏酸钠血药浓度测定及药代动力学研究.     

高效液相色谱法测定人血浆中非那雄胺的浓度

目的建立测定人血浆中非那雄胺浓度的高效液相色谱（HPLC）法。方法以乙腈-10mmol／L磷酸二氢钾（40：60）为流动相，炔雌醇为内标，血浆样品经乙酸乙酯萃取。结果非那雄胺质量浓度线性范围是9．44～944μg／L，平均相对回收率为94．5％～98．9％，日内和日间RSD均小于10％，非那雄胺的最低定量限为5μg／L。结论该方法快速、准确、灵敏，可用于非那雄胺的药代动力学研究。     

薄层色谱扫描法监测风湿病患者血中解热镇痛药浓度

目的建立风湿病患者血中解热镇痛药的血药浓度监测方法和解热镇痛药中毒的快速检验诊断方法。方法应用血清中解热镇痛药主要成分的提取和薄层色谱扫描定性和定量检测方法进行,血浆2ml,pH=6.0,乙醚10ml分2次萃取,20μl乙醇定容,点于HPGF254板上,环己烷∶三氯甲烷∶无水乙醇∶乙酸乙酯∶冰醋酸(9.0∶2.0∶1.5∶2.0∶1.0)展开5～7cm,薄层色谱扫描定性和定量检测。结果血清中对乙酰氨基酚的线性检测范围为0.2～40μg/ml,最小检出浓度为0.1μg/ml;塞来昔布的线性检测范围为1～35μg/ml,最小检出浓度为0.5μg/ml;氨基比林的线性检测范围为2～40μg/ml,最小检出浓度为1μg/ml;布洛芬的线性检测范围为5～50μg/ml,最小检出浓度为2.5μg/ml;双氯芬酸的线性检测范围为2～40μg/ml,最小检出浓度为1μg/ml。结论本法快速、简便,定性定量准确,可用于解热镇痛药中毒的快速诊断和风湿病患者血药浓度监测。     

气相色谱-质谱法测定复方薄荷脑滴鼻液中2组分含量

目的 :建立以气相色谱 -质谱法测定复方薄荷脑滴鼻液中薄荷脑及樟脑含量的方法。方法 :以DM -5(0 25mm×30m)弹性石英毛细管柱为色谱柱 ,乙萘酚为内标 ,升温程序为80℃～150℃ ,分别选择M/Z为95、71的离子碎片峰对樟脑、薄荷脑进行检测。结果 :樟脑的浓度线性范围为1 04～10 40μg/ml(r=0 9998) ,回收率为101 2 % ;薄荷脑的浓度线性范围为0 824～8 24μg/ml(r=0 9999) ,回收率为99 98 %。结论 :本方法快速、准确 ,可用于同类制剂的质量控制。     

高效液相色谱法测定柴黄颗粒中黄芩苷含量

目的 测定柴黄颗粒中黄芩苷的含量.方法 HPLC色谱条件:C18色谱柱(250mm×4mm,10μm);柱温25℃,流速:1.0ml/min;检测波长280nm;流动相甲醇-磷酸-四氢呋喃(45:55:6)(磷酸为pH=2.7的磷酸水溶液).结果 黄芩苷进样量在3.7～29.6μg/ml范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系,标准曲线Y=57417x-31303,γ=0.9998.平均回收率为99.67%,ESD=0.15%(n=6).结论 本方法简便、准确、重现性好,可用于该制剂的质量控制.     

大鼠血清及组织中阿霉素和阿霉素醇的反相离子对HPLC法

用反相高浓度离子对HPLC法,以柔红霉素为内标,建立大鼠血清及组织(脑、心、肾、肝、肺、小肠和脾脏)中阿霉素及其代谢产物阿霉素醇浓度的测定方法。本法简便,重现性好,可用于常规分析。血清样品提取:取1ml大鼠血清置15ml硅烷化玻璃离心管中,加50μl浓度为2或10μg/ml的盐酸柔红霉素30%甲醇-水溶液。振荡混匀,加3ml 乙腈,振荡30s 后,离心20min(4℃,3000 r/min)。上清液移     

大鼠血浆中野黄芩苷的HPLC测定及其药动学研究

建立了HPLC法测定中药复方茵山莲颗粒灌胃后大鼠血浆中野黄芩苷的浓度,并研究了其在大鼠体内的药动学。以黄芩苷为内标,采用C18柱,乙腈-四氢呋喃-0.4%磷酸(15∶35∶150)为流动相,检测波长为335nm。野黄芩苷浓度在0.025～0.16μg/ml范围内线性关系良好(r=0.9946),定量限为0.025μg/ml,日内和日间RSD均小于10%。主要药动学参数为cmax(0.765±0.158)μg/ml,tmax(3.67±0.47)h,t1/2(10.78±2.63)h,AUC0-36(7.66±1.63)μg·h·ml-1,AUC0-∞(8.46±1.79)μg·h·ml-1。     

用LC/MS法测定人血浆及尿中对乙酰氨基酚和帕马溴的含量

目的：建立LC/MS法测定人血浆及尿中对乙酰氨基酚和帕马溴含量。方法：采用AgilentSB-C18色谱柱,血浆中测定以咖啡酸为内标,尿中测定以青藤碱为内标,流动相为乙腈：0.05%甲酸溶液（10：90）,流速0.3ml/min。用于定量分析离子对：对乙酰氨基酚质荷比（m/z）152.1,帕马溴m/z259.1,咖啡酸m/z181.1,青藤碱m/z330.9。结果：血浆中对乙酰氨基酚浓度在0.051～20.24μg/ml范围内线性关系良好,帕马溴浓度在0.025～10.10μg/ml范围内线性关系良好,对乙酰氨基酚和帕马溴日内、日间精密度均〈15.0%,对乙酰氨基酚及帕马溴相对回收率分别为86.4%～107.4%和95.7%～107.0%。尿中对乙酰氨基酚浓度在2.825～1415μg/ml范围内线性关系良好,帕马溴浓度在2.65～1325μg/ml范围内线性关系良好,对乙酰氨基酚和帕马溴日内和日间精密度均〈15.0%,对乙酰氨基酚及帕马溴相对回收率分别为85.3%～109.1%和98.3%～101.6%。结论：本研究建立的两个方法快速、灵敏、准确,适用于复方氨酚帕马溴片的药动学研究。     

HPLC法测定人血浆中头孢克洛浓度

目的:采用高效液相色谱法测定人血浆中头孢克洛浓度。方法:以头孢拉定为内标,HPLC法测定。结果:头孢克洛的线性范围为0.25～30μg/ml,回归方程为y=0.1105+0.0817x,r=0.9995,最低检测浓度为0.125μg/ml,日内RSD为1.61％～3.54％,日间RSD为2.15％～5.08％。结论:主要药代动力学参数与文献报道相似。     

高效液相色谱法测定大鼠血浆中葛根素的质量浓度

目的建立测定大鼠血浆中葛根素质量浓度的高效液相色谱（HPLC）法。方法以pH=3.0的磷酸盐缓冲液-乙腈（82∶18）为流动相,以绿原酸为内标,血浆样品经过三氯乙酸沉淀蛋白萃取后,采用HPLC法测定血浆中葛根素的质量浓度。结果葛根素质量浓度线性范围为0.10～4.00μg/mL,日内和日间精密度的RSD均小于14%,平均相对回收率为87.81%～105.83%,葛根素的检测限为50ng/mL。结论所建立的HPLC法灵敏、准确、快速,可用于葛根素的体内检测。