Effect of arsenic trioxide on cytokine expression by acute promyelocytic leukemia cells

Objective To detect the expression of cytokines by acute promyelocytic leukemia (APL) cells before and after exposure to arsenic trioxide. Methods Diagnoses were performed according to the FAB cytological classification criteria and cytogenetic criteria. Bone marrow or blood samples from APL patients were collected in heparinized tubes,then primary APL cells were separated by traditional Ficoll-Hypaque density centrifugation and purified after adherence to plastic surfaces. IL-1β, IL-6, IL-8, TNFα and G-CSF levels in the leukemia cell culture supernatants were detected by ELISA. At the same time, nitro blue tetrazolium (NBT) reduction test was used to detect the differentiation of APL cells. Results After 96 hours exposure to arsenic trioxide, 10(-6) mol/L in vitro or 10 mg/d in vivo, APL cells showed a significant increase of IL-1β(P<0.05) and G-CSF(P<0.05) production, and a significant decrease of IL-6 (P<0.05) and IL-8 (P<0.05). However, there was no obvious variation of TNFα when compared with APL cells without exposure to arsenic trioxide. On the other hand, the proliferation ratio of APL cells in vitro was statistically correlated to the IL-1β secretion ratio or G-CSF secretion ratio. The cell number ratio in patients with detectable IL-1β or G-CSF was higher than that without detectable IL-1β or G-CSF.Conclusion IL-1β and G-CSF secretion may play an important role in the proliferation of APL cells after exposure to arsenic trioxide.     

Notch信号在急性早幼粒细胞白血病患者骨髓中的表达

目的：通过检测急性早幼粒细胞性白血病（APL）患者治疗前后骨髓中Notch信号途径中受体、配体和靶基因的表达情况,探讨其在APL发生中的作用.方法：采用半定量RT-PCR技术检测APL患者治疗前后骨髓中Notch1,Notch2,Notch3,Notch4,Delta-like-l,Delta-like-4,Jagged1,Jag-ged2,Hes1,Hes5的表达.结果：受体Notch2、配体Jagged1、靶基因Hes1的表达在APL完全缓解后明显下调,其它受体、配体及靶基因的变化无统计学意义.结论：在APL患者治疗前后存在Notch基因的改变,Notch信号的这些改变在APL的发病机制中可能有重要作用.     

硒化壳聚糖诱导急性早幼粒白血病细胞凋亡的研究

目的 研究硒化壳聚糖对体外培养的NB4细胞增殖和凋亡的影响,探讨这种作用与端粒酶活性和survivin蛋白的关系。方法MTT法检测细胞增殖;细胞形态学观察和流式细胞仪检测细胞凋亡;PCR-ELISA法检测端粒酶活性;western blot法检测survivin蛋白含量。结果50~200mg/L硒化壳聚糖可时间剂量依赖性地抑制NB4细胞增殖,诱导其凋亡,降低端粒酶活性和下调survivin蛋白含量。结论 硒化壳聚糖可通过抑制端粒酶活性,下调survivin蛋白含量,诱导细胞凋亡从而抑制体外培养的NB4细胞增殖。     

Chromosomal changes in acute promyelocytic leukemia

Summary In this study cytogenetic analysis of 5 cases of acute promyelocytic leukemia (APL) is described and 3 (60%) of them showed t(15; 17) in karyotype. In recent years more than 130 cases of hematological disorders were studied cytogenetically in our laboratory and this kind of translocation has not been found except in APL. As shown in these patients t(l5; l7) might occur in adults as well as in children and likewise in patients with or without DIC. The chromosome study by G-banding technique demonstrated that the breakpoint of chromosome No. 15 was located between q²⁴ and q²⁵, and that of chromosome No. 17 was located at q²¹. The structural rearrangement was reported as rcp(15;17) (q²⁵⁰⁰; q^2102?).     

尿多酸肽诱导急性早幼粒细胞白血病细胞株凋亡的实验研究

目的探讨尿多酸肽(CDA-Ⅱ)对急性早幼粒细胞白血病(acute promyelocytic leukemia,APL)细胞NB4及耐维甲酸的NB4-R1细胞的凋亡作用。方法以NB4和NB4-R1细胞作为体外模型,观察CDA-Ⅱ作用前后细胞的形态和生长增殖情况。流式细胞术检测细胞凋亡特征。Western印迹法检测凋亡调控蛋白蛋白激酶C(PKCδ)及Caspase-3的水解活化。结果 CDA-Ⅱ作用于NB4和NB4-R1细胞后,细胞生长受到抑制;形态上观察到分化和凋亡现象;Annexin V-PI法发现,用药24 h后NB4和NB4-R1细胞凋亡比例分别上升至(58.7±3.1)%和(87.8±0.5)%;PKCδ和Caspase-3水解活化。结论 CDA-Ⅱ作用于细胞后,水解活化Caspase-3,裂解PKCδ生成活性片段,诱导细胞凋亡。     

Long-term survey of outcome in acute promyelocytic leukemia

Ａｃｕｔｅｐｒｏｍｙｅｌｏｃｙｔｉｃｌｅｕｋｅｍｉａ (ＡＰＬ)ｉｓａｄｉｓｔｉｎｃｔｓｕｂｔｙｐｅｏｆａｃｕｔｅｌｅｕｋｅｍｉａｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚｅｄｂｙａｂａｌａｎｃｅｄｒｅｃｉｐｒｏｃａｌｔｒａｎｓｌｏｃａｔｉｏｎｂｅｔｗｅｅｎｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ 15ａｎｄ 17ｒｅｓｕｌｔｉｎｇｉｎｔｈｅｃｈｉｍｅｒｉｃｇｅｎｅｅｎｃｏｄｉｎｇＰＭＬ ＲＡＲαｐｒｏｔｅｉｎ 1Ａｌｌ ｔｒａｎｓｒｅｔｉｎｏｉｃａｃｉｄ (ＡＴＲＡ)ｉｎｄｕｃｅｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｏｆｐｒｏｍｙｅｌｏｃｙｔｅｓｉｎｔｏｍ…     

急性早幼粒细胞白血病合并出血63例临床分析

目的: 研究急性早幼粒细胞白血病(acute promyelocytic leukemia,APL)合并出血的临床特点和防治方法。方法: 回顾性分析63例APL患者的临床特点、实验室检查及疗效。结果: 初诊时合并出血症状54例(85.7%),合并弥漫性血管内凝血(DIC)47例(74.6%)。早期死亡11例(17.5%),放弃治疗3例,完全缓解49例(77.7%)。结论: APL出血发生率高,全反式维A酸(ATRA)或复方青黛片的应用、血小板及凝血因子输注、抗DIC治疗可以减少早期出血病死率。     

三氧化二砷对急性早幼粒细胞性白血病细胞组织因子表达的影响

目的探讨三氧化二砷（Ａｓ２Ｏ３）对急性早幼粒细胞性白血病（ＡＰＬ）细胞组织因子（ＴＦ）表达的影响。方法利用复钙时间检测使用１μＭＡｓ２Ｏ３处理ＡＰＬ细胞株ＮＢ４细胞以及使用Ａｓ２Ｏ３治疗中不同时间的ＡＰＬ病人的骨髓细胞的促凝活性（ＰＣＡ）,并用ＥＬＩＳＡ方法检测其ＴＦ抗原、利用半定量ＲＴＰＣＲ检测ＴＦｍＲＮＡ的转录水平。结果Ａｓ２Ｏ３可以以时间依赖的方式下调ＡＰＬ细胞的促凝活性、ＴＦ抗原水平以及ＴＦｍＲＮＡ的转录;此外,通过对ＰＣＲ产物进行测序,发现ＡＰＬ细胞中还存在ＴＦ第五个外显子缺失的转录本,其生物学意义尚不明了。结论Ａｓ２Ｏ３可下调ＡＰＬ细胞ＴＦ的表达;而且在使用Ａｓ２Ｏ３诱导ＡＰＬ细胞凋亡的同时,Ａｓ２Ｏ３有可能通过下调ＡＰＬ细胞ＴＦ的表达而预防ＤＩＣ的发生     

序贯疗法治疗急性早幼粒细胞白血病的临床观察

目的:探讨序贯疗法治疗急性早幼粒细胞白血病(APL)的长期疗效.方法:对39例初诊和3例复诊病人给予三氧化二砷(As2O3)诱导治疗,完全缓解(CR)后给予联合化疗和维甲酸交替治疗.结果:39例初诊病人中完成诱导分化治疗35例,均获得CR,有效率90%.3例复诊者经As2O3治疗后获CR,总有效率91%.4例复发者经As2O3治疗再获CR.总CR率达91%.经序贯疗法治疗后,全部病例均无病生存.结论:As2O3诱导治疗APL缓解率高,序贯疗法治疗APL患者CR期长,副作用轻.     

亚砷酸钠抑制肝癌细胞增殖与PML蛋白表达

目的：研究亚砷酸钠抑制肝癌（HCC）细胞增殖是否与早幼粒细胞白血病（PML）蛋白表达有关。方法免疫组织化学法、免疫荧光、蛋白免疫印迹法（Western blot）和荧光定量PCR检测HCC组织PML蛋白及基因表达。结果免疫组织化学分析显示随机选择15例高分化、中度分化和低分化HCC组织和细胞均不同程度表达PML蛋白。Western blot 分析发现24例HCC组织、HuH7、HepG2、Hep3B、SMMC‐7721和 L02细胞均表达 PML 蛋白。免疫荧光提示 HuH7、HepG2、Hep3B、SMMC‐7721细胞核均有PML蛋白颗粒,其中 HuH7和 Hep3B细胞表达PML蛋白较 HepG2、SMMC‐7721细胞多。24例 HCC组织, Hep3B、HepG2、SMCC‐7721和HuH7细胞都表达PML基因。亚砷酸钠不仅可下调HuH7和原代 HCC细胞表达PML蛋白,而且亚砷酸钠抑制HuH7,HepG2,Hep3B和SMMC‐7721细胞生长,随着暴露时间延长亚砷酸钠对HCC细胞抑制作用增强。结论HCC 组织和细胞系普遍表达PML 基因和蛋白,PML 蛋白可能是砷剂直接靶向作用的分子基础。     

维甲酸治疗急性早幼粒细胞白血病的临床研究

应用国产全反应维甲酸治疗急性早幼粒细胞白血病（ＡＰＬ）１３例，完全缓解（ＣＲ）率为８４．６％。治疗过程中病情稳定好转，直至ＣＲ。未并发弥漫性血管内凝血（ＤＩＣ），无骨髓抑制，副作用较轻。本研究表明ＲＡ诱导分化治疗是ＡＰＬ的最佳疗法。     

Berbamine selectively induces apoptosis of human acute promyelocytic leukemia cells via survivin-mediated pathway

Background Currently, resistance and relapse are still major problems in acute promyelocytic leukemia （APL） cases. Thus, new agents that override the resistance are crucial to the development of curative therapies for APL. In this study, we investigated the effects of berbamine on the proliferation of APL cell line NB4 and its possible mechanisms. Methods NB4 cells were treated with berbamine at different concentrations （0-64 μg/ml） for 72 hours. MTT assay was used to determine proliferation inhibition of NB4 cells. Cell apoptosis was evaluated by both flow cytometry （FCM） and morphological examination. PML/RAR-α and survivin mRNAs were measured by nested-RT-PCR and RT-PCR, respectively. Activated-caspase 3 was determined by FCM. Results Berbamine greatly inhibited the proliferation of NB4 cells in dose- and time-dependent manners, and its IC50 value was 3.86 μg/ml at 48 hours. Both morphological observations and FCM results showed that berbamine induced apoptosis of NB4 cells with concomitant increase of activated caspase-3 and decrease of survivin mRNA. After treatment with berbamine at 8 μg/ml for 48 hours, the percentage of apoptotic cells increased from 2.83% to 58.44% （P〈0.01）, and the percentage of cells with activated-caspase 3 elevated from 2.06% to 70.89% （P〈0.01）, whereas, level of survivin mRNA was reduced to 38.24% of control （P〈0.01）. However, no significant change was observed in PML/RAR-α mRNA. Conclusions Berbamine induces caspase-3-dependent apoptosis of leukemia NB4 cells via survivin-mediated pathway, suggesting that berbamine may be a novel potential agent against APL with a mechanism distinct from that of all-trans retinoic acid （ATRA） and arsenic trioxide （ATO）.     

三氧化二砷治疗初发急性早幼粒细胞白血病的临床观察

目的 观察三氧化二砷注射液(AS2O3)对初发急性早幼粒细胞白血病(APL)患者的疗效.方法 22例APL初发患者三氧化二砷诱导缓解,再予DA方案巩固强化治疗.观察持续缓解时间及药物不良反应.结果 22例患者完全缓解率(CR)81.8%.20例随访患者均成活,最长5年.结论 三氧化二砷用于初发APL患者,疗效良好.     

三氧化二砷治疗急性甲幼粒细胞白血病临床观察

目的：观察As2O3治疗急性早幼粒细胞白血病（APL）的临床疗效，作用特点及毒副作用。方法：As2O3注射液10mg/d静脉滴注初治APL41例，复发APL21例。治疗过程中每周检查血象、骨髓象，随机检查凝血纤溶指标和肝、肾功、心电图。达完全缓解者49例进行随访。结果：As2O3治疗初治APL41例，达完全缓解35例（85.4%)，应用ATRA治疗或化疗复发者21例，再次缓解者14例（67％），49例全部随访，随访时间1－5年，初治缓解35例中3例存活＞3年，27例生存期＞5年，复治缓解者14例，生存期＞3年者6例，生存期＞5年者4例。用药过程中以出现胃肠道反应者居多，无骨髓，造血功能抑制，不诱发DIC。结论：Ss2O3治疗APL为有效和相对安全的药物，与ATRA无交叉耐药性，对于ATRA化疗复发APL仍有效。     

不同锑剂对早幼粒细胞白血病凋亡诱导作用比较

目的：通过不同锑剂对早幼粒白血病细胞株NB4细胞的凋亡诱导作用的比较，力求找到有效治疗早幼粒细胞白血病锑剂药物。方法：采用细胞生长曲线、形态学及NBT（硝基四氮唑蓝）还原试验判定NB4细胞的生长、分化及功能；细胞周期分析和DNA电泳研究细胞凋亡。结果：三价锑剂能够诱导早幼粒白血病细胞凋亡，且具有时间剂量依赖性，而五价锑剂对早幼粒白血病细胞没有凋亡诱导作用。结论：三价锑剂能够有效地诱导早幼粒白血病细胞凋亡，提示酒石酸锑钾作为临床治疗寄生虫病有效药物，可以老药新用，有望用于临床治疗早幼粒细胞白血病。     

全仅式维甲酸(ATRA)和三氧化二砷(As2O3)对APL细胞组织因子表达的影响

目的　探讨全反式维甲酸 (ATRA)和三氧化二砷 (As2 O3)在体内外对急性早幼粒细胞性白血病 (APL)细胞组织因子 (TF)表达的影响。方法　利用复钙时间测定、ELISA和RT PCR等方法 ,分别检测了ATRA和As2 O3 治疗前后APL患者骨髓单个核细胞的促凝活性、TF抗原及其mRNA的转录水平 ,同时还检测了使用ATRA和As2 O3 处理APL细胞株NB4细胞和NB4 R1细胞以及转染PML RARa融合基因的U937细胞的促凝活性、TF抗原及其mRNA的转录水平。结果　ATRA和As2 O3 在体内和体外均可以时间依赖的方式下调NB4细胞的促凝活性、TF抗原水平以及TFmRNA的转录。转染PML RARa融合基因的U937细胞与仅转染逆病毒载体的U937细胞相比 ,其TF表达水平显著升高 ;使用ATRA或As2 O3 分别处理转染PML RARa和转染逆病毒载体的U937细胞 ,其TF抗原水平均显著降低。结论　ATRA和As2 O3均可下调APL细胞TF的表达并降低其PCA ,As2 O3在诱导APL细胞凋亡的同时有可能通过下调APL细胞TF的表达而改善APL患者与DIC相关的出血症状。结果还提示APL细胞染色体易位产生的融合蛋白PML RARa可能对TF的异常表达有一定的影响 ,而ATRA和As2 O3对TF的下调作用可能不依赖于对融合蛋白PML RARa的降解。     

CD2+急性早幼粒细胞白血病的临床特点分析

目的:探讨CD2+急性早幼粒细胞白血病(APL)的临床特点.方法:采用流式细胞术(FCM)对19例APL的免疫表型进行检测,根据检测结果分为CD2+组及CD2-组,对2组的临床表现、实验室检查、治疗效果等方面进行比较.结果:19例患者中,CD2+ 4例,CD2- 15例;CD2+组发病时外周血WBC高于CD2-组(P<0.05),纤维蛋白原浓度降低(P<0.05),而2组在发病时血小板计数和治疗达到完全缓解时间差异均无统计学意义(P>0.05);4例CD2+ APL患者均伴有CD34表达,治疗后均完全缓解;15例CD2- APL患者中,伴有CD34表达者1例,治疗完全缓解14例.结论:CD2+APL病例发病时往往伴有高WBC,具有更高的并发严重出血的风险,可作为APL的预后不良指标及微小残留病变监测指标.