γ线1000拉德照射后小鼠肠上皮损伤和修复

隐窝是肠粘膜上皮细胞增生的场所,它供给绒毛所需的细胞,并维持绒毛机能的完整性。已有大量实验证明,肠型放射病的死因主要是肠粘膜细胞更新活动丧失后引起一系列重要形态和机能改变所造成的。因此,研究大剂量照射动物肠上皮的增殖及隐     

WR-2721对小鼠经不同比例中子-γ线混合照射后空肠隐窝干细胞的保护作用

小鼠受超致死剂量全身中子-γ线照射后,由于小肠隐窝细胞对辐射高度敏感,在受照射后数小时内就可观察到隐窝细胞分裂减少或停止,隐窝萎缩,绒毛脱落等。有人将大剂量照射后3—5天内发生的动物早期死亡与射线引起的早期胃肠损伤相联系,并称之为“胃肠型死亡”。隐窝干细胞是小肠隐窝存活、增生的基础,隐窝干细胞具有较强的亚致死损伤修复能力,因而在一定剂量范围内辐射损伤后隐窝数量很快增加,促     

Genistein对小鼠小肠上皮细胞照射后再增殖和TGF—α,EGF—R表 …

目的 研究Ｇｅｎｉｓｔｅｉｎ对小鼠怕上皮细胞受照射后再增殖和ＴＧＦ－α、ＥＧＦ－Ｒ表达的影响。方法 实验鼠分两组：一组为对照组，单纯一次接受全身吸收剂量为５Ｇｙ煌照射；另一组为用药组，照射剂量与方法同对照组，在照射后不同时间注射Ｇｅｎｉｓｔｅｉｎ。在照射后不同时间内杀死小鼠取出空肠，计数隐窝细胞数和分裂指数。并测定隐窝区和绒毛区ＴＧＦ－α和ＥＧＦ－Ｒ的表达。结果 与对照组比较，用药组小鼠小肠隐窝细     

Genistein对小鼠小肠上皮细胞照射后再增殖和TGF-α、EGF-R表达的影响

目的研究Ｇｅｎｉｓｔｅｉｎ对小鼠小肠上皮细胞受照射后再增殖和ＴＧＦ－α、ＥＧＦ－Ｒ表达的影响。方法实验鼠分两组：一组为对照组,单纯一次接受全身吸收剂量为５Ｇｙ的照射;另一组为用药组,照射剂量与方法同对照组,在照射后不同时间注射Ｇｅｎｉｓｔｅｉｎ。在照射后不同时间内杀死小鼠取出空肠,计数隐窝细胞数和分裂指数。并测定隐窝区和绒毛区ＴＧＦα和ＥＧＦＲ的表达。结果与对照组比较,用药组小鼠小肠隐窝细胞的分裂指数和细胞数上升幅度较低,用药组ＴＧＦα在隐窝区表达持续升高,而ＥＧＦ－Ｒ在隐窝区的表达则较对照组低。结论Ｇｅｎｉｓｔｅｉｎ能明显抑制小鼠小肠上皮细胞受照射后的再增殖,这种影响可能是通过作用于ＥＧＦ－Ｒ的表达起作用。     

胶原性肠炎

胶原性肠炎少见有独特的大肠炎症,形态学表现。1976年Lindstrom首先发现,由于其临床、病理特征相当于胶原性口炎腹泻,故选名为胶原性肠炎。1 病因和发病机理 肠粘膜的表面有许多绒毛,固有膜结缔组织组成绒毛的轴心。在固有膜内有许多肠腺,又称李氏隐窝(Crypt of lieberkiihn)。Grouls等认为,隐窝周围成纤维细胞鞘功能和分化异常可能在发病机制中占决定地位,正常隐窝周围成纤维细胞仅产生少量胶原。这种细     

裂变中子照射后小鼠小肠上皮的损伤和修复

小肠上皮是辐射敏感组织,动物受照射后,隐窝细胞的增殖下降,DNA合成很快受到抑制。绒毛上皮得不到成熟隐窝细胞的补充,发生坏死和脱落。由于小肠隐窝细胞增殖能力很强,受损伤的细胞经过一段时间后,能较快地恢复增殖能力,进行分裂增生以补充肠绒毛,使小肠上皮得到修复。本文研究裂变中子照射后,小鼠上肠上皮损伤和修复的规律。材料和方法动物本院繁殖的LACA系雄性小鼠,日龄80天左右,体重27—31克。正常组15只动物,照后每组5只动物。     

急性和慢性γ线照射后小鼠小肠损伤与修复的比较

本文报道LAcA雄性小白鼠,以⁶⁰Coγ线进行全身急性或急性的照射。比较小肠在两秤照射条件下的修复能力。结果表明,在慢性照射条件下小肠的长度、重量、面积和隐窝数始终保持在对照动物的水平,绒毛与隐窝的形态结构亦无明显异常;但在急性照射后四项指标皆随照射剂量的加大而显著减低,形态上呈现明显的破坏图象。作者认为,哺乳动物小肠在慢性照射条件下的修复至少包括四种方式。本文结果推论,在当前现实生活中的各种低照射量率慢性照射,均不会引致小肠发生早期损伤。     

小肠上皮细胞电离辐射损伤修复的分子机制研究进展

小肠属于快速自我更新组织，隐窝细胞对细胞毒性损伤十分敏感，全身放射性损伤（核爆炸、核事故所致）以及腹部肿瘤局部放射治疗等都可引起肠道粘膜屏障受损和吸收功能障碍。另一方面，小肠上皮有独特的组织学结构，隐窝前体细胞区和绒毛分化细胞区有明显界限，细胞增殖、分化移行路线清楚，用射线诱导隐窝细胞凋亡，观察肠上皮细胞的反应和细胞更新是研究小肠干细胞生物学的重要手段。笔者介绍了小肠上皮细胞等级性排列特点，以及对电离辐射的敏感性，     

肠型放射病时小肠隐窝细胞增殖活动变化及WR-272l防护效应

本实验采用³H-TdR掺入,放射自显影方法观察大20Gy全身照射后8天内10个时间点的肠隐窝细胞增殖活动变化,应用WR-2721照前预防观察对肠型放射病时隐窝增殖细胞的辐射防护效应。结果显示,照射后隐窝增殖细胞立即抑制,隐窝内增殖细胞数量和增殖能力急剧下降。照后9小时增殖细胞的DNA合成略有恢复,分裂细胞在照后13小时才开始出现。照前应用WR-2721预防动物,隐窝细胞损伤较轻,增殖活动有一定改善,细胞分裂和DNA合成增多,隐窝细胞数量增多,照射后2.5～3天有少数再生肠腺形成。     

对~(60)Coγ线照射后小鼠大肠某些参数的定量观察

本实验测定了不同剂量~(60)Co γ线照射后小鼠大肠长度、粘膜表面积及隐窝数的改变,得出了剂量-效应曲线。1～100Gy照射后4天,以上参数曲线下降的最低点分别约为对照值的70％,61％和51％。部分剂量组还计数了照射后1～4天隐窝数的改变,观察到在肠型放射病剂量范围内,自第三天开始,隐窝数随着时间的推移而持续下降,且下降幅度随着照射剂量的增加而加大。文中对大肠长度与粘膜面积在照射后减少的发生机理及其和隐窝数减少之间的可能关系进行了讨论。     

重组人白细胞介素-11和姜黄素对中子照射致小鼠肠道损伤的治疗作用

目的 探讨重组人白细胞介素-11(rhIL-11)和姜黄素对中子照射致小鼠肠道损伤的治疗作用。方法 选取二级雄性BALB/c小鼠140只,随机分为健康对照组(20只)、单纯照射组(60只)、IL-11治疗组(30只)和姜黄素治疗组(30只)。单纯照射组小鼠采用3 Gy中子全身均匀照射,两个治疗组于照射后即日分别腹腔注射500μg·kg^-1·d^-1的rhIL-11或200 mg·kg^-1·d^-1的姜黄素,每天1次,连续给药5d。观察各组动物的死亡率。照射后6 h、1、3和5 d分别处死健康对照组和单纯照射组动物,3和5 d分别处死两个治疗组动物。取空肠标本,用HE深色、核仁组成区嗜银蛋白染色、Feulgen氏染色和图像死亡分析等,检测空肠病理形态变化、空肠上皮细胞核内嗜银蛋白含量和DNA含量变化。结果 照后5d,单纯照射组小鼠全部死亡,rhIL-11治疗组存活剩余2只,姜黄素治疗组存活剩余3只。3Gy中子照射后6 h～3 d内,空肠黏膜大面积坏死脱落,3d偶见隐窝细胞再生,5d见较多新生隐窝;IL-11治疗组在照后3d隐窝再生较明显,5d见大量新生绒毛;姜黄素治疗组在照后3d隐窝有部分再生,5d可见新生绒毛,排列结构较IL-11治疗组紊乱,绒毛高度较IL-11治疗组略低。照后5d,两个治疗组小鼠空肠上皮细胞AgNOR含量和DNA含量均高于单纯照射组(F＝0.015～0.035,P<0.05)。结论 3 Gy中子照射引起小鼠空肠明显损伤,rhIL-11和姜黄素治疗可减轻损伤并促进肠道上皮再生修复,对中子辐射肠上皮损伤具有保护作用。     

神经源性分化因子对小鼠放射性肠损伤的治疗作用

目的 研究神经源性分化因子(NeuroD)对放射性肠损伤的治疗作用.方法 采用原核表达系统表达、纯化NeuroD与绿色荧光蛋白(EGFP)的融合蛋白(NeuroD-EGFP融合蛋白),利用倒置荧光显微镜观察NeuroD-EGFP融合蛋白的体外进入细胞的效率.40只C57BL/6J小鼠采用随机数字表法分为正常对照组、磷酸盐缓冲液(PBS)组、EGFP组、NeuroD-EGFP融合蛋白组,每组10只.除正常对照组外,其余3组动物经9 Gy γ射线全身照射后,观察NeuroD-EGFP融合蛋白在小肠上皮细胞内的分布情况和NeuroD对放射性肠损伤的治疗作用.结果 纯化得到了NeuroD-EGFP融合蛋白.细胞上清中加入NeuroD-EGFP融合蛋白后,可见绿色荧光聚集在细胞内部,表明其可穿过细胞膜进入细胞内.小鼠腹腔注射NeuroD-EGFP融合蛋白5 h后,小肠绒毛上皮细胞内部有绿色荧光聚集.小鼠照射后3.5 d,NeuroD-EGFP组小鼠绒毛高度高于PBS及EGFP组(F=49.49,P<0.01),隐窝深度及隐窝数目大于PBS及EGFP组(F=16.72、10.32,P<0.01).结论 NeuroD蛋白可促进放射后肠道绒毛及隐窝的修复,对放射性肠损伤具有治疗作用.     

AET、WR-2721对不同剂量丙线照射后小鼠隐窝细胞周期的影响

我们曾报导了~(60)钴丙线1000拉德照射对小鼠空肠隐窝细胞周期的影响和WR-2721的防护作用。本文报导丙线不同剂量照射后隐窝细胞周期各时间参数的变化,以探讨     

KGF对电离辐射后十二指肠中CTGF和Bcl-2基因表达的影响

目的 观察角质细胞生长因子（KGF）对电离辐射后十二指肠结缔组织生长因子（CTGF）、凋亡相关基因Bcl-2表达的影响,初步探讨KGF在肠道损伤中的分子机制。 方法 将昆明小鼠按随机数表法分为对照组、照射组、治疗组,每组10只。对照组不给予照射,照射组与治疗组给予剂量率为0.678 Gy/min、吸收剂量8 Gy的腹腔γ射线照射;治疗组在照射前2 d及照射后3 d均腹腔注射KGF,给药量为6 mg/kg。照射后第15天处死小鼠,取十二指肠组织做病理切片并观察病理表现;采用荧光定量PCR方法检测十二指肠组织中KGF、CTGF及Bcl-2基因的表达水平。计量资料以x±s表示;两组间差异采用独立样本t检验,P < 0.05表示差异有统计学意义。 结果 对照组十二指肠肠绒毛、隐窝结构完整,排列整齐;照射组十二指肠出现绒毛萎缩、变短或脱落,部分腺窝和绒毛处可见少量凋亡细胞;治疗组肠绒毛组织结构完整,腺窝可见少量凋亡细胞。照射组十二指肠组织中KGF、CTGF、Bcl-2基因表达量上调,与对照组相比差异具有统计学意义（t=-125.55、-6.55、-6.69,均P < 0.05）。与照射组相比,治疗组CTGF基因表达量显著下调、Bcl-2基因表达量显著上调,差异均有统计学意义（t=4.89,-20.96,均P < 0.05）。 结论 KGF可能通过下调CTGF基因修复电离辐射造成的损伤,并且可能通过调节Bcl-2凋亡相关基因的表达水平来降低细胞凋亡。     

WR-2721对受丙线照射小鼠小肠隐窝活存的影响

在肠型放射病中,小肠粘膜上皮的损伤是突出的症状。特别是粘膜细胞的增殖场所一隐窝,照射后如能保留下来继续增殖,对上皮的修复将起很大作用。隐窝活存越多,修复能力越大,恢复也越快。如能通过某种药物使较多的隐窝活存下来,这对控制肠型放     

扁桃体及隐窝上皮结构的研究进展

扁桃体结构的主要特点是具有复杂而特殊的隐窝管道网络系统，不仅有分支，而且分支间广泛吻合。隐窝上皮是该器官中最先接触和摄取抗原，并引起免疫应答的部位，隐窝的特殊结构决定了扁桃体的功能主要是潴留过路的抗原，供免疫系统处置，因此隐窝上皮结构是扁桃体行使免疫功能的重要组织保障。     

氨磷汀对小鼠肠型急性放射病的防护作用及其机制

 目的 研究氨磷汀(amifostine, WR2721)对小鼠肠型急性放射病的防护作用及其机制。方法 建立小鼠肠型急性放射病模型。C57BL/6J小鼠随机分为对照组和WR2721给药组,接受15 Gy ⁶⁰Co-γ全身照射,照后移植健康小鼠骨髓细胞,观察小鼠受照后30 d的存活率和平均生存时间,以及用隐窝细胞微克隆实验,研究照后3.5 d隐窝细胞数量及小肠黏膜情况。结果 对照组小鼠均在10 d内死亡,WR2721给药组存活率提高到80%;对照组和WR2721给药组平均隐窝数分别为(6.1±0.7)个、(28.0±1.1)个,差异有统计学意义(P<0.0001);对照组和WR2721给药组绒毛高度分别为(51.48±2.04)μm、(73.29±3.24)μm,差异有统计学意义(P<0.0001)。结论 WR2721对肠型急性放射病小鼠有保护作用,通过提高隐窝干细胞增殖活性,促进黏膜的恢复,提高小鼠的存活率。     

10—100戈瑞γ线照射后小肠隐窝的定量计数

哺乳动物小肠隐窝上皮是体内更新率高、对电辐射极为敏感的组织。在骨髓型急性放射病中,由于小肠上皮细胞的再生能力很强,故损伤很快即得以修复。照射剂量进入到肠型放射病范围时,隐窝上皮细胞的再生能力随着照射剂量的增加而减弱,超过一定剂量以后即不见再生而只有残留的隐     

白藜芦醇通过Akt/mTOR通路上调自噬改善辐射诱导小肠损伤

目的探讨白藜芦醇是否能够通过调节Akt/mTOR通路改善辐射诱导小肠损伤并研究其机制。方法将24只C57BL/6小鼠随机分为对照组、照射组和照射给药组(每组8只)。照射组和照射给药组小鼠接受9.0 Gy剂量的6MV-X射线全身照射,照射给药组小鼠在照射前3 d至照射后3 d每日腹腔注射白藜芦醇(50 mg·kg~(-1)·d~(-1)),对照组、单纯照射组予等量生理盐水。照射后3.5 d获取小肠组织并制作石蜡块后切片,采用HE染色及免疫组织化学染色行组织学分析;行Western blot试验检测p-Akt/Akt、p-S6RP/S6RP、LC3-Ⅱ、Beclin-1表达。采用ANOVA方差分析进行3组间比较。结果照射给药组小鼠小肠绒毛长度、小肠横断面隐窝数、单个小肠隐窝细胞总数、隐窝细胞Ki67阳性率均高于照射组(均P0.05);照射给药组较照射组小肠组织p-Akt/Akt、p-S6RP/S6RP蛋白表达下降(均P0.001),LC3-Ⅱ、Beclin-1蛋白表达升高(均P0.001)。结论白藜芦醇可能通过抑制Akt/mTOR通路促进受辐射小鼠小肠隐窝细胞自噬从而改善辐射诱导小肠损伤。     

高剂量γ射线辐射后大小肠放射敏感性差异研究

目的 探讨高剂量γ射线照射下小鼠大肠、小肠放射敏感性的差异。方法 选取6~8周龄雄性C57BL/6小鼠,完全随机法分为照射组和健康对照组,照射组接受19 Gy的γ射线全身照射,并于照射后6、12、24、48、72和96 h截取小鼠大肠和小肠,免疫组织化学法检测照射后各时间点大肠小肠及其隐窝干细胞凋亡、增殖的变化,原位杂交法检测大小肠干细胞数目的变化。结果 γ射线照射后,HE染色显示小鼠小肠黏膜受损较大肠更为严重,照后48 h小肠隐窝全部消失,但大肠隐窝增殖指数仍高达0.23(t=4.67,P<0.05)。与小肠相比,大肠隐窝黏膜上皮细胞在12、24 h凋亡指数显著低于小肠(t=-1.92、-2.42,P<0.05)。照后12、24 h大肠干细胞凋亡数显著低于小肠(t=-1.98、-2.33,P<0.05),照后24、48 h大肠隐窝内干细胞数则显著高于小肠 (t=1.98、3.31,P<0.05)。结论 高剂量辐射条件下,大肠小肠的放射敏感性存在明显差异,而二者干细胞的放射敏感性的差异可能是决定大肠较小肠更为辐射耐受的原因之一。