米非司酮对大鼠异位子宫内膜细胞中BCL-2/BAX表达的影响

米非司酮因对孕激素和皮质醇受体有高度的亲和力,临床上普遍用于抗早孕药物流产、紧急避孕、催经等,而治疗子宫内膜异位症(ectop ic endom etrium,EMT)还在研究阶段。米非司酮可以诱导早孕蜕膜细胞及离体异位子宫内膜细胞凋亡[1],但对大鼠异位子宫内膜的细胞凋亡国内外均未见报道。本实验建立大鼠EMT动物模型,从基因水平探讨其治疗EMT的机制。1材料与方法1·1实验动物及模型制备:雌性SD大鼠32只,体重(200±50)g,参照文献造模[2]。3周后剖腹探查,除假手术组外,可见其余动物的移植子宫内膜均成活。1·2分组:造模成功后分为3组,假手术组(…     

凋亡相关蛋白Bcl-2/Bax与子宫内膜异位症的相关性研究

目的研究子宫内膜异位症(内异症)及子宫腺肌症患者在位及异位内膜组织中细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax表达及其凋亡率比较。方法采用免疫组化法检测各组织标本中Bcl-2、Bax的表达,流式细胞仪测定各组织的细胞凋亡率。结果(1)在正常和正位内膜组织中,Bcl-2或Bax表达相同(P>0.05),具有明显周期性变化,均为增生期高于分泌期(P<0.05);(2)子宫腺肌病和腹壁异位内膜中,Bcl-2或Bax均持续表达,无周期性变化(P>0.05);(3)卵巢内异症的异位内膜,Bcl-2和Bax极少表达;(4)流式结果显示正常子宫内膜、在位内膜凋亡率与异位内膜组织凋亡率有显著性差异(P<0.05)。结论①Bcl-2或Bax在正常和在位子宫内膜的周期性表达,提示它们可能参与月经周期调节;②子宫腺肌病及腹壁异位内膜腺上皮细胞Bcl-2持续存在,使之得以长期增殖而发病;③卵巢内异症极少表达Bcl-2可能是促成细胞凋亡形成,引起巧克力囊肿的原因。     

雌激素对大鼠胸腺细胞凋亡及Bcl-2、Bax表达的影响

目的:探讨苯甲酸雌二醇对大鼠胸腺Bcl-2和Bax表达及细胞凋亡的影响及其机制.方法:雌性大鼠行卵巢切除术,给予苯甲酸雌二醇后,观察胸腺指数的变化,Hochest33342荧光染色及透射电镜标本观察胸腺细胞凋亡情况,免疫组织化学检测胸腺组织中Bcl-2和Bax的表达情况,原位杂交技术检测Bcl-2、Bax m RNA的表达情况.结果:双侧卵巢切除组大鼠胸腺指数较假手术组增加,双侧卵巢切除+雌激素组大鼠胸腺指数较双侧卵巢切除组减小;假手术组和双侧卵巢切除组大鼠胸腺组织中以正常胸腺细胞为主,偶见凋亡细胞或凋亡小体,双侧卵巢切除+雌激素组可见较多凋亡细胞和凋亡小体;双侧卵巢切除+雌激素组大鼠胸腺组织中Bcl-2表达较双侧卵巢切除组和假手术组增高明显降低,而Bax表达呈现相反趋势;Bcl-2 mRNA、Bax mRNA的表达与Bcl-2、Bax的表达呈一致性.结论:雌激素可以降低大鼠胸腺指数,抑制胸腺组织中Bcl-2的表达,促进Bax的表达,从而诱导大鼠胸腺细胞凋亡,促进雌性大鼠胸腺退化.     

复宫宁对大鼠异位子宫内膜细胞形态及caspase-3和Bcl-2蛋白表达的影响

 目的：研究中药复宫宁制剂对子宫内膜异位症（EMT）大鼠异位子宫内膜细胞凋亡、形态学改变及caspase-3和Bcl-2蛋白表达的影响,探讨复宫宁治疗EMT的作用机制。方法：用自体子宫内膜移植法复制EMT大鼠模型,将EMT大鼠随机分为模型组、达那唑治疗组、复宫宁治疗1组和复宫宁治疗2组,灌胃给药4周,观察各给药组及模型组异位病灶体积大小,采用HE染色和透射电镜技术观察各给药组及模型组异位内膜细胞形态结构的变化。应用免疫组化方法观察各组caspase-3和Bcl-2蛋白的表达情况。结果：复宫宁治疗组中,异位内膜体积显著缩小（P<0.01）,病灶生长明显受抑制。异位内膜腺上皮层明显变薄,腺体减少;细胞呈矮柱状甚至扁平状排列松散,并见较多凋亡现象和间质纤维化,而在位内膜未见明显改变。超微结构可见复宫宁组与达那唑组胞体收缩,失去微绒毛,胞浆浓缩,核染色质密度增高并凝聚于核膜周边,核仁裂解;细胞膜内陷和凋亡小体形成;线粒体肿胀,线粒体嵴变低及空泡变性。免疫组化结果显示,模型组异位内膜Bcl-2蛋白表达增强;复宫宁组异位内膜细胞活化caspase-3蛋白表达增高（P＜0.01）,而Bcl-2蛋白表达降低（P<0.05）。结论：复宫宁对大鼠EMT有明显的抑制作用,其作用机制与其诱导细胞凋亡有关。复宫宁通过激活细胞中的caspase及降低Bcl-2蛋白在EMT中的高表达,诱导异位内膜细胞的凋亡,可能是其重要机制之一。     

丙酸睾酮对大鼠胸腺细胞凋亡及胸腺中Bcl-2、Bax表达的影响

目的探讨丙酸睾酮在大鼠胸腺退化过程中的作用及其对大鼠胸腺中Bcl-2和Bax表达的影响。方法雄性大鼠去势后给予丙酸睾酮皮下注射,分别于注射后第1、4、7天取材,用半薄切片甲苯胺蓝染色检测胸腺细胞凋亡情况,免疫组织化学法检测胸腺组织中Bcl-2和Bax的表达情况,采用t检验进行统计学处理。结果丙酸睾酮处理组大鼠胸腺组织中可发现较多的凋亡细胞和凋亡小体;去势组大鼠胸腺组织中Bcl-2表达量明显高于假手术组（P〈0.001）,丙酸睾酮处理后Bcl-2表达量明显减少（P〈0.001）;而Bax的表达正好相反,去势组大鼠胸腺组织中Bax表达量明显低于假手术组（P〈0.001）,给予丙酸睾酮后Bax表达量明显增加（P〈0.001）;结论丙酸睾酮可诱导大鼠胸腺细胞凋亡,并抑制大鼠胸腺组织中Bcl-2的表达,促进Bax的表达。     

超剂量米非司酮对大鼠子宫内膜超微结构的影响

目的 :电子显微镜下观察超剂量使用米非司酮的大鼠子宫内膜超微结构改变 ,为进一步扩大米非司酮临床使用范围提供形态学依据。方法 :实验组大鼠每日灌服米非司酮 30 m g/只 ,分别于第 8,15 ,2 9天处死取子宫 ,超薄切片 ,电子显微镜观察。结果 :子宫内膜纤毛细胞纤毛减少 ,分泌细胞胞质内出现有空泡的圆形颗粒 ,并有顶浆分泌 ,内膜上皮基质呈动情前表现。子宫腺细胞基底及核上区有糖原斑 ,为动情晚期形态。小血管内皮间隙增大 ,其周围大量多形核细胞浸润 ,似人类月经期崩解的子宫内膜。子宫内膜多种细胞及间质内均可见多泡体、巨大溶酶体和残余体。结论 :长期超剂量使用米非司酮会使子宫内膜发育不同步 ,还可能导致细胞代谢失调     

抑郁模型大鼠杏仁核神经元凋亡及Bax/Bcl-2的变化

目的:探讨抑郁模型大鼠杏仁核神经元凋亡现象。方法:将成年健康雄性Wistar大鼠随机分为对照组(15只)和模型组(15只)。采用慢性强迫游泳(4周)制备慢性强迫游泳应激抑郁模型。采用TUNEL和流式细胞术检测杏仁核神经元凋亡和凋亡率,WesternBlot检测凋亡相关蛋白Bax/Bcl-2的表达变化。结果:模型组和对照组凋亡细胞阳性率分别为24.08±4.30和3.08±0.91,凋亡率分别为17.14±2.71和3.34±0.80,Bax/Bcl-2比值分别为1.73±0.15和0.92±0.07,差异均有统计学意义(P0.01)。结论:抑郁模型大鼠杏仁核存在明显的神经元凋亡,这可能是抑郁患者杏仁核体积异常的原因之一。     

苦碟子对恶性黑色素瘤细胞抑制及凋亡蛋白Bcl-2/Bax表达的影响

目的观察不同浓度中药苦碟子对恶性B16黑色素瘤细胞的抑制作用和凋亡蛋白Bcl-2/Bax表达的变化,探讨中药苦碟子抑制B16黑色素瘤细胞生长的可能机制。方法通过细胞培养和MTT实验,检测苦碟子对B16黑色素瘤细胞的生长抑制情况,Western blot测定凋亡蛋白Bcl-2/Bax表达,免疫荧光染色检测Bcl-2/Bax蛋白在不同浓度苦碟子处理的黑色素瘤细胞中的表达。透射电镜观察不同浓度梯度中药苦碟子诱导细胞凋亡,其细胞结构的特征性变化。结果随着苦碟子药物浓度的增加,黑色素瘤细胞活细胞数目逐渐减少,细胞存活率显著下降(<0.05),凋亡抑制蛋白Bcl-2表达水平呈现下降趋势,而促凋亡蛋白Bax呈现上升趋势(<0.05),免疫荧光染色显示Bcl-2表达逐渐减少,Bax表达逐渐增加;电镜下凋亡小体数目不断增加,核固缩逐渐明显,细胞间隙增大,线粒体数目减少。结论中药苦碟子有浓度依赖性抑制黑色素瘤细胞生长,促进细胞凋亡,凋亡蛋白Bcl-2/Bax变化呈线性关系。     

SPK1通过调节Bcl-2/Bax途径干扰LLC细胞凋亡

目的:研究鞘氨醇激酶1(SPK1)是否通过调节Bcl-2/Bax途径干扰小鼠Lewis肺癌(LLC)细胞的凋亡。方法:通过构建SPK1基因小干扰RNA(siRNA)真核表达载体,将siRNA转染至LLC细胞,在荧光显微镜下观察LLC细胞转染的情况。采用流式细胞术检测转染后LLC细胞的凋亡率,Western blot法检测转染后LLC细胞中SPK1、Bcl-2和Bax蛋白表达水平,ELISA法检测Bax和Bcl-2的蛋白表达。结果:转染后的LLC细胞在荧光显微镜下发出绿色荧光。siRNA-SPK1组细胞凋亡明显高于siRNA-SPK1-Neg组(P0.01)。Western blot结果显示, siRNA-SPK1组中Bax蛋白表达明显较siRNA-SPK1-Neg组高,Bcl-2蛋白表达较siRNA-SPK1-Neg组低。ELISA结果显示siRNA-SPK1组中Bax表达水平显著高于siRNA-SPK1-Neg组(P0.01), siRNA-SPK1组中Bcl-2表达水平显著低于siRNA-SPK1-Neg组(P0.01)。结论:SPK1在LLC细胞中的表达与细胞凋亡率有关。SPK1可能是通过Bcl-2/Bax途径干扰LLC细胞凋亡。     

精索静脉曲张大鼠睾丸细胞线粒体钙、Bcl-2/Bax蛋白表达和细胞凋亡的研究

目的：研究精索静脉曲张（VC）大鼠睾丸细胞线粒体钙、Bcl-2/Bax蛋白表达与细胞凋亡及其机制。 方法： 选取35只成年健康雄性 Wistar大鼠，随机分为VC组（VG, n=20）和假手术组（SOG, n=15）。术后10周，取双侧睾丸，采用火焰原子吸收法测定线粒体钙、采用原位缺口末端标记法(TUNEL)检测生殖细胞凋亡,免疫组化SABC法检测Bcl-2/Bax蛋白表达。 结果： VC组大鼠双侧睾丸生殖细胞线粒体钙的含量明显低于SOG组，生殖细胞凋亡显著增多，Bcl-2表达显著降低，Bax表达显著升高,但双侧睾丸生殖细胞凋亡率差异无显著。 结论： VC时，大鼠睾丸生殖细胞凋亡明显增加，提示VC时所致的男性不育可能是在某种凋亡诱发因素（高温、毒素返流、氧自由基等）作用下，线粒体钙、Bcl-2/Bax蛋白表达的变化直接对生殖细胞产生影响,导致男性不育。     

大鼠额叶损伤后细胞凋亡及Bax与Bcl-2蛋白的表达变化

本研究目的为探讨大鼠额叶锐器损伤后细胞凋亡的变化规律及调控机制。通过电镜、TUNEL法及免疫组织化学染色方法检测细胞凋亡和Bax、Bcl2蛋白的表达变化,结果发现凋亡细胞在损伤后3h即可发现,24h达到高峰;伤后3hBax和Bcl2表达明显升高,Bax表达12h达到高峰,而Bcl2表达6h即达到高峰;伤后Bax/Bcl2比值上调,24h达到高峰,随后逐渐下降。结果表明大鼠额叶锐器伤后存在细胞凋亡,凋亡细胞数量的变化与伤后时程有关,Bax/Bcl2比值是决定细胞凋亡的重要因素。     

雌、孕激素对大鼠子宫内膜NO/iNOS系统及细胞凋亡的影响

目的:了解雌、孕激素对卵巢摘除大鼠子宫内膜NO/iNOS系统及细胞凋亡的影响。方法:SD雌性大鼠分为5组:假手术组(Sham)、卵巢摘除组(OVX)、卵巢摘除加肌注苯甲酸雌二醇组(OVX BE2)、卵巢摘除加肌注黄体酮组(OVX P)、卵巢摘除同时加肌注BE2和P组(OVX BE2 P)。实验组分别在激素作用5、10周后取材。酶法测定血清NO含量,SABC法检测子宫内膜iNOS、Bcl-2的活性表达及TUNEL法检测内膜细胞凋亡。结果:OVX BE2组NO/iNOS系统及内膜Bcl-2的活性明显升高;OVX P组、OVX BE2组、OVX BE2 P组凋亡指数均显著减少。结论:雌、孕激素影响子宫内膜NO/iNOS系统活性、Bcl-2的表达及细胞凋亡,可能是激素调控内膜的机制之一。     

雌激素对卵巢摘除大鼠心内神经节细胞Bcl-2和Bax表达的影响

本实验建立了去卵巢和雌激素替代疗法动物模型,用免疫组织化学SABC法结合图象分析方法,观察大鼠心内神经节细胞中Bcl-2和Bax的变化,探讨雌激素对卵巢摘除大鼠心内神经节细胞中Bcl-2和Bax表达的影响。去卵巢(OVX)大鼠心内神经节细胞中Bcl-2的表达较正常对照组明显减弱(P<0.05),雌激素替代治疗组大鼠心内神经节中Bcl-2的表达与正常对照组相比无显著性差异(P>0.05),而较卵巢摘除组显著增高(P<0.05);卵巢摘除后同时给予特异性雌激素受体阻断剂(TAM)和17β-雌二醇(OVX+TAM+ERT)组大鼠心内神经节中Bcl-2的表达较正常对照组显著减弱(P<0.05),但与OVX组无显著性差异(P>.05)。各组中Bax的表达无显著性差异(P>0.05)。实验结果提示雌激素能上调大鼠心内神经节细胞中Bcl-2的表达,但对Bax的表达无影响。     

Bcl-2,Bax基因与肺癌

Bcl-2和Bax是调控凋亡的重要的胞内蛋白质.Bcl-2蛋白的超表达使细胞生存期延长,而Bax的超表达则促使细胞凋亡.二者在肺癌的发生、发展过程中具有不同程度的表达.     

Bcl-2、Bax在功能失调性子宫出血子宫内膜中的表达

目的 研究凋亡调节蛋白Bcl-2、Bax在功能失调性子宫出血(功血)的子宫内膜中的表达.方法 采用免疫组织化学(免疫组化)方法,利用链霉素抗生物素蛋白--过氧化物酶法(SP)检测40例功血患者子宫内膜及40例子宫肌瘤标本的子宫内膜组织中Bcl-2、Bax基因的表达情况.结果 (1)Bel-2基因在正常月经周期子宫内膜组织的表达呈明显周期性变化,差异具有统计学意义(P<0.05).(2)Bcl-2基因随子宫内膜增生程度增加而表达逐渐增强,差异具有统计学意义(P<0.05).(3)Bax在正常月经周期子宫内膜组织的表达呈阳性.(4)Box随子宫内膜增生程度增加而表达逐渐减弱,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 Bcl-2的过度表达和Bax的低表达可抑制子宫内膜细胞凋亡,使子宫内膜增生甚或不典型增生.与功能失调性子宫出血有密切关系.     

粉防己碱对缺血-再灌注损伤大鼠心肌细胞凋亡及Bcl-2/Bax蛋白表达的影响

目的探讨粉防己碱对缺血-再灌注损伤大鼠心肌细胞凋亡及Bcl-2/Bax蛋白表达的影响。方法结扎大鼠左冠状动脉前降支（LAD）30min后松开,再灌注24h建立心肌缺血-再灌注损伤模型。将48只雄性SD大鼠随机分为：假手术组（Sham组）,缺血-再灌注损伤组（IRI组）,粉防己碱预处理组（Tet组）。再灌注结束后检测血清肌酸激酶同工酶MB（CK-MB）和心肌梗死范围（IS/AAR,%）。应用原位末端标记法（TUNEL法）检测各组凋亡细胞,计算凋亡指数（AI）,应用免疫组化法检测心肌Bcl-2、Bax蛋白表达,计算Bcl-2/Bax值,进行组间比较。结果与IRI组相比,Tet可明显降低CK-MB值（976.57±160.69）vs（1910.38±221.10）U/L,P〈0.01,减小心肌IS/AAR%,（23.28±4.38）%vs（43.76±6.30）%,P〈0.01。与IRI组比较,粉防己碱预处理可显著减少心肌细胞凋亡,AI显著降低（8.62±2.45%vs19.36±5.28%,P〈0.01）。粉防己碱预处理使Bcl-2表达增加,Bax表达下降,Bcl-2/Bax值显著升高（P〈0.01）。结论粉防己碱能明显抑制缺血-再灌注损伤引起的心肌细胞凋亡,其作用机制可能与促进Bcl-2蛋白表达,减少Bax蛋白表达、升高Bcl-2/Bax比值有关。     

姜黄素对大鼠胸主动脉瘤Bcl-2和Bax表达的影响

目的 探讨姜黄素对大鼠胸主动脉瘤形成过程中Bcl-2和Bax表达的影响。方法 将30只成年雄性Wistar大鼠随机分为3组,即对照组、动脉瘤组和姜黄素治疗组。采用氯化钙（CaCl2）诱导法制备胸主动脉瘤模型,术后4周取材。HE染色及地衣红染色观察胸主动脉组织学改变;免疫组织化学和Western blotting方法检测动脉瘤壁Bcl-2和Bax的表达。结果 姜黄素可明显抑制胸主动脉的扩张。与对照组比较,动脉瘤组Bax表达水平明显升高,Bcl-2表达水平降低,姜黄素能有效降低动脉瘤中Bax的表达,升高Bcl-2表达水平。 结论 姜黄素可以促进胸主动脉瘤Bc1-2蛋白的表达,抑制Bax蛋白的表达,降低Bax/Bcl-2的比值。     

槲皮素对脑胶质瘤大鼠Bcl-2和Bax表达的影响

目的探讨槲皮素对脑胶质瘤大鼠Bcl-2和Bax表达的影响。方法雌性Wistar大鼠30只,随机分为3组,即假手术组、模型组和槲皮素治疗组,每组10只。建立大鼠C6胶质瘤模型,于接种后17d处死各组大鼠,采用免疫组织化学法和Western blot法检测肿瘤组织Bcl-2和Bax蛋白表达水平的变化。结果与假手术组相比,模型组大鼠脑组织Bcl-2蛋白表达的平均光密度值显著升高,而Bax蛋白表达的平均光密度值显著降低(p0.01);与模型组相比,槲皮素治疗组大鼠脑组织Bcl-2的蛋白表达的平均光密度值显著降低,而Bax蛋白表达的平均光密度值显著升高(P0.01)。结论槲皮素能够降低脑胶质瘤大鼠Bcl-2的表达,上调Bax的表达。     

一氧化氮对大鼠肺泡巨噬细胞增殖、凋亡 及细胞内Bcl-2和Bax含量的影响

目的 :以往的工作表明 ,在平阳霉素诱导大鼠纤维化形成过程中 ,肺内ＮＯ增多期 ,大鼠肺泡灌洗液中细胞数量和凋亡细胞数均增多 ,而细胞的增殖无明显的变化 ;肺纤维化形成期 ,肺泡灌洗液中细胞数量已有恢复 ,但凋亡细胞仍增多 ,细胞增殖受到抑制。为探讨ＮＯ对肺泡巨噬细胞增殖和凋亡的影响作用 ,本实验在离体水平观察ＮＯ供体硝普钠 (ｓｏｄｉｕｍｎｉｔｒｏｐｒｕｓｓｉｄｅ ,ＳＮＰ)、ＮＯ前体Ｌ -精氨酸 (Ｌ -ａｒｇｉｎｉｎｅ,Ｌ -Ａｒｇ)和ＮＯＳ的阻断剂Ｌ -硝基精氨酸 (ＮＷ-ｎｉｔｒｏ -Ｌ -ａｒｇｉｎｉｎｅ ,Ｌ -ＮＮＡ)对正常大…