血管内皮生长因子可溶性受体flt-1_(n3)对裸鼠人膀胱癌生长的影响

目的　研究血管内皮生长因子 (VEGF)受体flt 1胞外区基因抗肿瘤新生血管生成的作用。　方法　采用脂质体转染技术将含有flt 1胞外区前三个IgG样结构区域的真核表达质粒 pcD NA3.1/KDRn7转入人膀胱癌EJ细胞 ,用G418筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞克隆 ,经固相结合实验筛选得到表达与VEGF特异结合的目的蛋白的细胞克隆 ,阳性细胞克隆进行PCR和RT PCR鉴定。对裸鼠人膀胱癌组织切片进行免疫组化染色 ,定量分析微血管密度。　结果　PCR和RT PCR结果显示重组质粒转入EJ细胞及在转录水平表达 ;免疫组化的微血管密度实验组明显低于阴性对照组。　结论　阻断VEGF/flt 1信号传导途径能够抑制肿瘤新生血管的形成 ,延缓肿瘤的生长速度     

可溶性血管内皮生长因子受体抑制膀胱癌T24细胞生长的研究

目的 探讨可溶性血管内皮生长因子受体sKDR对膀胱癌T24细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响.方法 RT-PCR方法提取KDR胞外血管内皮生长因子(VEGF)结合区编码基因,构建真核分泌型表达质粒pCI-KDR,脂质体法转染至T24细胞,经G418抗性压力筛选稳定转染细胞株.ELISA法检测细胞培养上清VEGF结合活性,筛选稳定表达sKDR的T24细胞株,RT-PCR检测细胞KDR基因表达水平,四甲基偶氮唑盐比色法测定sKDR对T24细胞及人脐静脉内皮细胞(HUVEC)生长增殖的影响,流式细胞仪观察细胞周期及凋亡情况. 结果稳定表达sKDR的T24细胞KDR mRNA表达水平(0.665±0.048)明显高于空质粒对照组(0.160±0.015)(P＜0.0001),细胞增殖水平下降了55.1%(P＜0.0001),其细胞培养上清抑制HUVEC增殖的能力提高了41.6%(P＜0.0001),出现了明显的G0/G1期阻滞(P=0.0078)和细胞凋亡(凋亡率12.7%).结论 靶向KDR的sKDR通过干扰VEGF/KDR的信号传导通路可抑制膀胱癌T24细胞及HUVEC在体外的生长速度,KDR有可能成为新的膀胱癌抗血管生成治疗靶点.     

反义基因转染对人膀胱癌细胞血管内皮生长因子表达的影响

目的观察以腺相关病毒为载体(rAAV)的血管内皮细胞生长因子(VEGF)反义基因对人膀胱癌细胞中VEGF表达的影响。方法通过用不同量(0、20、100μl)的以腺相关病毒为基因载体的反义VEGF基因转染人膀胱癌细胞T24,采用免疫组织化学和Western blot方法,检测转染前后人膀胱癌T24细胞中VEGF的表达变化。结果免疫组织化学图像分析VEGF平均灰度值分别为364．40±30．31、460．25±36．34、494．18±38．82,Western blot蛋白条带灰度分别为 65 800±13 824、52 470±10 589、31 069±8 642。结果均表明随着转染的反义VEGF基因量的增多, T24细胞中VEGF的表达显著减少。结论反义VEGF基因的转染能显著抑制人膀胱癌T24细胞中VEGF的表达,有望成为膀胱肿瘤基因治疗的一种新方法。     

膀胱癌患者尿液中血管内皮生长因子的检测

目的　探讨血管内皮生长因子 (VEGF)与膀胱移行细胞癌发生及浸润的关系。　方法　应用ELISA法对 36例膀胱移行细胞癌患者、7例BPH患者新鲜尿液中VEGF水平进行检测分析。　结果　膀胱癌患者尿液VEGF浓度 (2 10 .97± 15 4 .6 8)pg/ml,BPH患者尿液VEGF浓度 (3.73±2 .6 3) pg/ml,P <0 .0 0 5 ,差别有显著性意义 ,VEGF浓度随肿瘤病理分级增高而升高 ,浸润性膀胱癌组VEGF浓度 (341.34± 196 .84 ) pg/ml,高于浅表性癌组 (44 .88± 16 .85 ) pg/ml,P <0 .0 0 5 ;复发组VEGF浓度 (2 92 .5 9± 186 .6 7) pg/ml,初发组 (88.4 9± 16 .5 8) pg/ml,差别均有显著性意义 (P <0 .0 0 5 )。　结论　VEGF对膀胱癌生物学行为有重要影响 ,可作为膀胱癌生物学行为的指标之一     

血管内皮生长因子与膀胱癌研究进展

血管内皮生长因子 (VEGF)是肿瘤血管形成的关键因子 ,在肿瘤的发生发展过程中起重要作用。本文就VEGF及其VEGF在膀胱癌中的研究和应用作一综述 ,以便寻求膀胱癌诊断、监测、估计预后及治疗的新手段。     

抗血管内皮生长因子抗血清对小鼠膀胱癌的影响

目的　观察抗血管内皮生长因子 (VEGF)抗血清对小鼠膀胱肿瘤血管生成和肿瘤生长的影响 ,探讨膀胱肿瘤治疗的新途径。　方法　采用重组VEGF蛋白制备抗VEGF抗血清 ,ELISA方法检测其特异性 ;建立小鼠膀胱癌模型 ,并将荷瘤小鼠随机分为抗VEGF抗血清组和对照组 ,分别经腹腔注射抗VEGF抗血清和普通小鼠血清 ;检测肿瘤内微血管密度 (MVD) ,并称取肿瘤重量。　结果　实验制备了高度特异性的抗VEGF抗血清 ,荷瘤小鼠用药后抗VEGF抗血清组MVD值 (7.5 1± 2 .88)明显低于对照组 (14 .4 8± 3.92 ) ,抗VEGF抗血清组小鼠平均瘤重较对照组稍轻 ,P =0 .6 0 5 ,差别无显著性意义。　结论　抑制VEGF作用可以减少膀胱肿瘤的血管生成 ,为膀胱肿瘤抗血管生成疗法提供了依据 ,并可能成为膀胱肿瘤重要的辅助治疗手段之一。     

转化生长因子和表皮生长因子受体在人膀胱癌中的表达

通过分子杂交方法，对膀胱癌产体肿瘤（人）进行ＴＧＦα，ＴＧＦβ和ＥＧＦＲ ｍＲＮＡ表达的研究。结果显示：９例膀胱癌均有ＴＧＦαｍＲＮＡ不同程度的表达，１例癌０旁正常对照未见表达。５对样品（肿瘤和癌旁正常组织自身对照）ＴＧＦββｍＲＮＡ均有表达，其中４例肿瘤样品比自身癌旁正常组织对照量更高。９例肿瘤样品中４例ＥＧＦＲ高表达，均为恶性程度高的肿瘤。由此推测：ＴＧＦαｍＲＮＡ高表达是肿瘤发生发展的早期表     

尿液血管内皮生长因子含量检测在诊断膀胱癌中的作用

目的　探讨尿液中血管内皮生长因子 (VEGF)含量测定诊断膀胱癌的价值。　方法　采用ELISA法测定 33例膀胱癌、10例泌尿系良性疾病患者和 10例健康志愿者尿液中VEGF含量。结果　 33例膀胱癌患者尿VEGF平均含量 (30 9.8± 86 .6 )ng/gCr ,2 0例非肿瘤对照组为 (10 7.6± 35 .4 )ng/gCr,两者差别有显著性意义 (P <0 .0 5 )。T2 、T3 患者尿VEGF平均含量显著高于T1(P <0 .0 5 ) ;G3组尿VEGF平均含量显著高于G1和G2 组 (P <0 .0 5 )。尿VEGF含量与肿瘤体积相关。以对照组尿液VEGF水平上限 (14 3ng/gCr)为阳性界值时 ,诊断膀胱癌的灵敏度为 90 .9% (30 / 33) ,特异性为 80 .0 % (16 / 2 0 )。　结论　尿VEGF含量检测方法简便 ,无创 ,具有较高的敏感性和特异性 ,可作为膀胱癌的诊断指标之一。     

抗血管内皮生长因子抗体对裸鼠原位种植人胃癌的影响

目的 研究抗血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）对胃癌生长和转移的抑制作用。方法 采用人胃癌ＳＧＣ－７９０１组织原位种植裸鼠模型,观察抗ＶＥＧＦ抗体和丝裂霉素Ｃ（ＭＭＣ）的抗肿瘤和抗转移作用。     

可溶性血管内皮生长因子受体1基因转染结肠癌Lovo细胞的实验研究

目的研究人可溶性血管内皮生长因子受体1（sFlt-1）基因转染结肠癌Lovo细胞后对其细胞生长及培养上清液VEGF含量的影响。方法使用脂质体介导方法把含sFlt-1基因的重组质粒pcDNA3-sFlt-1转染Lovo细胞,通过RT-PCR及ELISA法鉴定sFlt-1的表达,MTT比色法及ELISA法检测该蛋白对Lovo细胞生长及VEGF含量的影响。结果pcDNA3-sFlt-1成功转染Lovo细胞．ELISA法检测到转染后培养上清液中sFlt-1蛋白的表达．MTT实验显示此培养上清液可抑制Lovo细胞的生长．转染后2、14、21和28d细胞培养上清的抑瘤率分别为（23．92±9．16）％、（13．98±10．21）％、（22．54±11．92）％和（33．43±9．34）％,与未转染组比较,差异均有统计学意义（P〈0．05,P〈0．01）;ELISA证实细胞培养上清中VEGF的含量降低,与未转染组比较,差异亦均有统计学意义（P〈0．05,P〈0．01）。结论将sFlt-1基因转染至结肠癌Lovo细胞后,可获得具有生物活性的sFlt-1蛋白．抑制癌细胞生长。     

血管内皮生长因子及其受体在膀胱移行细胞癌中的研究进展

膀胱肿瘤的发生、发展、浸润、恶化与肿瘤的血管生成有密切的关系。血管内皮生长因子及其受体在膀胱肿瘤中有重要作用。     

Retroviral delivery of dominant-negative vascular endothelial growth factor receptor type 2 to murine wounds inhibits wound angiogenesis

Vascular endothelial growth factor (VEGF) is a potent paracrine signal for initiating angiogenesis. Although VEGF can bind to several cell surface receptors, VEGF receptor type 2 (VEGFR2, a.k.a. KDR or flk-1) is the primary receptor responsible for VEGF-induced endothelial cell proliferation. To determine whether the VEGF-VEGFR2 signaling axis has an important role in wound healing angiogenesis, we used a retrovirus to deliver a signaling-defective truncated VEGFR2 (tm VEGFR2) to block VEGF-VEGFR2-induced endothelial cell proliferation in murine wounds. We show that the retroviral construct effectively blocked phosphorylation of VEGFR2 in vitro and we were able to express the truncated receptor in murine wounds. We achieved significant reduction of angiogenesis and granulation tissue formation in murine wounds, but this did not lead to delayed wound closure. In contrast, there was a corresponding increase in wound contraction, showing that functional VEGFR2 intracellular signaling is not critical for normal closure of excisional dermal wounds. Our results show a novel relationship between wound bed vascularity and wound contraction.     

血管内皮生长因子-C及其受体3 mRNA在肺癌及癌旁组织中的表达与临床意义

目的　研究肺癌组织 (T)及癌旁组织 (PT )中血管内皮生长因子 C(VEGF C)及其受体 3 (flt 4)mRNA的表达情况 ,分析其在淋巴转移中的作用。方法　采用逆转录 聚合酶链反应(RT PCR)方法分析 3 6例新鲜肺癌组织及癌旁组织标本中VEGF C/flt 4mRNA的表达情况 ,并统计分析其与各临床病理特点之间的关系。结果　癌旁组织中VEGF CmRNA表达与flt 4mRNA的表达呈显著正相关 (P <0 .0 1)。肺癌组织中VEGF C ( )而在肿瘤或 /和癌旁组织中出现flt 4(COMVEGF C) ( )与淋巴结转移 (P <0 .0 1)及临床病理分期 (P <0 .0 1)呈明显正相关。结论　COMVEGF C在肿瘤淋巴转移中起重要作用 ,是一个反映患者淋巴转移的良好指标。     

膀胱移行细胞癌血管内皮生长因子的表达及临床意义

目的探讨血管内皮生长因子与膀胱癌浸润及复发的关系。方法应用ＬＳＡＢ免疫组织化学技术检测４０例膀胱移行细胞癌血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）的表达。结果膀胱癌细胞ＶＥＧＦ的表达率为５５％（２２／４０）,浸润性癌组ＶＥＧＦ的表达显著高于表浅性癌组（Ｐ＜０．０１）,有淋巴结转移癌组显著高于无转移癌组（Ｐ＜０．０５）,复发性癌组较初发性癌组差异有显著性（Ｐ＜０．００１）。结论ＶＥＧＦ可作为判断膀胱癌生物学行为的指标之一。     

Expression and significance of vascular endothelial growth factor receptor 2 in bladder cancer

PURPOSE: Vascular endothelial growth factor has a critical role in maintaining tumor microvasculature and, as such, is an attractive target for anti-angiogenic therapy. Aberrant expression of VEGF receptors, especially VEGFR2, on epithelial tumor cells allows VEGF to stimulate growth and migration of tumor cells in an autocrine and/or paracrine manner. Therefore, we studied the expression of VEGF and VEGFR2 in bladder cancer, and the relationship to disease characteristics. MATERIALS AND METHODS: Expression of VEGF and VEGFR2 was studied in a cohort of 72 patients with transitional cell cancer of the bladder. Tumor tissues from all patients were analyzed by immunohistochemistry and examined by a pathologist blinded to patient outcome. Patient demographics and disease outcome were correlated with expression of these markers. Bladder cancer cell lines that express VEGFR2 were studied in vitro and in vivo to establish the significance of VEGF/VEGFR2 signaling. RESULTS: Expression of VEGF and VEGFR2 was observed in 58% and 50% of urothelial tumor cells, respectively. VEGF expression failed to correlate with clinical variables. However, VEGFR2 expression correlated with disease stage (coefficient 0.23, p = 0.05). In addition, VEGFR2 expression increased with tumor invasion into the muscle (p <0.01). Experiments with VEGFR2 positive bladder cancer cell lines in vitro demonstrated increased invasion in response to VEGF. In addition, VEGF inhibition augmented the effect of docetaxel in a murine xenograft model of bladder cancer with a significant inhibition in proliferative index and microvascular density, and induction of apoptosis. CONCLUSIONS: Increased VEGFR2 expression correlates with several features that predict progression of urothelial cancer, including disease stage and invasive phenotype. VEGF targeted therapy may enhance the efficacy of standard therapy for bladder cancer.     

生长抑素和KDR表达与胰腺癌血管形成关系及临床意义

目的:探讨人胰腺癌组织生长抑素和血管内皮生长因子受体KDR(kinase insert domain con-taining receptor)的表达与血管形成的关系及其临床意义.方法:采用免疫组织化学方法检测62例人胰腺癌组织生长抑素(somatostatin SS)和KDR的表达,并对CD34+血管进行微血管密度(MVD)计数,对KDR及SS表达阳性血管进行半定量计数.结果:胰腺癌组织KDR高、中表达组的MVD明显高于KDR低表达组(P<0.01);而在SS低表达组的MVD明显高于高、中表达组(P<0.01).KDR的表达与肿瘤大小及远处转移相关(P<0.05),SS的表达与肿瘤大小及分化程度有关(P<0.05),并且KDR与SS的表达存在明显负相关(P<0.01).MVD与肿瘤大小相关(P<0.05).结论:KDR、SS在胰腺癌组织中的表达与肿瘤血管形成及调控密切相关,与胰腺癌的发生、发展及转移可能密切相关,可作为评估胰腺癌患者预后的指标.