腺病毒介导的FasL基因诱导肺癌细胞凋亡

目的研究外源性FasL基因对人肺癌细胞凋亡的影响以及FasL基因治疗肺癌的可能性.方法构建腺病毒载体介导FasL基因转移到低水平表达FasL的人肺腺癌细胞系A549,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、流式细胞术(FCM)检测FasL基因的表达,并观察A549肺癌细胞凋亡和生长,对肿瘤生长模型的治疗效果进行分析.结果外源性FasL基因在A549肺癌细胞获得高水平的表达,FasL能显著抑制A549的生长和集落形成,流式细胞仪检测显示细胞G1期阻滞并发生了凋亡.瘤内注射Ad-FasL对裸鼠体内移植瘤有较强的抑瘤作用.结论FasL基因参与了肺癌细胞凋亡的诱导,能抑制肺腺癌细胞的生长,因此该基因在肿瘤的基因治疗上有广泛的应用前景.     

基因转移FasL诱导人脑胶质瘤细胞凋亡的体外实验研究

目的：探讨体外基因转移Fas配体（Fas-Ligand,FasL)对恶性人脑胶质瘤细胞凋亡的影响，方法：用携带人FasL cDNA的缺陷型重组腺病毒载体（Ad-FL)，在体外转导5株人脑胶质瘤细胞，并使其表达，通过流式细胞仪，RT－PCR，TUNEL法及荧光显微镜分别进行Fas/FasL表达检测和相关凋亡检测，分析，结果：RT－PCR和流式细胞仪检测5株胶质瘤细胞表达均表达Fas，不表达FasL,而Ad-FL转导的5株胶质瘤细胞均能表达FasL,Fas表达水平与抗Fas抗体诱导胶质瘤细胞凋亡敏感性无相关性，Ad-FL能显著诱导5株胶质细胞瘤在体外凋亡或抑制其生长，结论：重组腺病毒FasL在体外诱导人脑胶质瘤凋亡效果显著。     

热、放射诱导的SHG-44细胞凋亡与Fas/FasL、Caspase-3表达关系

目的 了解热疗联合放射对SHG-44细胞凋亡的影响及凋亡相关基因Fas／FasL和Caspase-3的变化。方法 采用流式细胞仪(FCM)检测对照组、单纯放射(2Gy)组、放射(2Gy) 42℃加热(加热时问40分钟)组细胞凋亡的改变,并用RT-PCR法检测Fas／FasL和Caspase-3的表达。结果 空白对照组、单纯放射组、放射 热疗组凋亡比率分别为20．2％、29．3％和59．1％;Fas在三个实验组中均表达,但FasL和Caspase-3仅在单纯放射组、放射 热疗组中表达。结论 凋亡是热杀灭脑胶质瘤细胞SHG-44的主要方式,凋亡与Fas／FasL、Caspase-3有关。     

罗哌卡因诱导大鼠脊髓背角细胞凋亡中Fas/FasL的表达

目的 明确Fas/FasL在罗哌卡因诱导大鼠脊髓背角细胞凋亡中的表达情况,探讨罗哌卡因神经毒性的可能机制.方法 成年雄性SD大鼠25只,随机分为空白对照组,模型对照组,罗哌卡因小、中、大剂量组,每组5只.除空白对照组外,其余各组大鼠均进行鞘内置管,并在造模3 d后分别鞘内注射0.9％氯化钠溶液或0.5％,1％,2％罗哌...     

环磷酰胺诱导白血病细胞株凋亡及FasL、FADD基因蛋白表达

目的 研究环磷酰胺（CP）诱导白血病细胞株（Jurkat）凋亡的机制,进一步探讨FasL和FADD在CP诱导白血病细胞凋亡中的作用。方法 CP刺激人T淋巴细胞白血病细胞株Jurkat,分别培养12、24、48h,在相应的时间点收获细胞,碘化丙啶（PI）染色细胞DNA,流式细胞术（FCM）检测DNA片段的亚二倍体峰（subG1）阳性的凋亡细胞;并用Western Blot技术测定FasL和FADD的表达。结果 CP3mg／L刺激Jurkat白血病细胞12h几乎未见细胞凋亡（P〉0．05）,在24h也只有26．40％的细胞出现凋亡;但随着时间的延长,CP诱导细胞凋亡明显增加,到48h则有74．95％的细胞发生凋亡（P〈O．01）。CP也上调FasL和FADD的表达,并随CP刺激细胞时间的延长其表达量也逐渐增加。结论 CP诱导白血病细胞株Jurkat凋亡的起效时间较晚,诱导细胞DNA片段形成,上调FasL和FADD的表达,表明CP诱导白血病细胞凋亡依赖于Fas／FasL通路。     

中药对Fas/FasL细胞凋亡系统的作用

Fas及其配体FasL是近年来研究得最为深入的有关细胞凋亡的膜表面分子,而中药因其作用广,疗效好,毒副作用小而成为目前药物研究最为热门的领域之一。现选择中药对Fas/FasL细胞凋亡系统作用进行了综述,希望能因此为中药影响细胞凋亡机制作为疗效的中药新药研发提供参考。     

细胞凋亡与肿瘤的关系

细胞凋亡 (Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ)在 1972年由Ｋｅｒｒ等病理学家首先提出 ,近年来越来越引起医学界的重视 ,尤其在令人棘手的肿瘤防治过程中 ,使人们看见了新的曙光 ,试图从此找到制服肿瘤的突破口。引起人们极大兴趣的是细胞凋亡与肿瘤的关系 ,当细胞的增殖数量与细胞的凋亡数量大致相等时 ,机体的器官总细胞数才维持一个恒量 ,如果细胞的凋亡数量大于细胞的增殖数量则器官就逐渐萎缩 ,反之如果细胞的凋亡数量小于细胞的增殖数量则形成肿瘤 ,如何使已形成的肿瘤细胞发生凋亡正是目前临床研究的一大热点。施作霖[1 ]在“细胞凋亡的基本概念和…     

老年性白内障晶状体上皮细胞凋亡及Fas、FasL表达的临床意义

目的探讨老年性白内障晶状体上皮细胞凋亡及Fas、FasL表达的临床意义。方法采用免疫组化法检测25例老年性白内障患者(观察组)和10例成人尸体解剖非白内障眼球(对照组)的晶状体前囊膜组织中Fas、FasL的表达,并应用TUNEL方法检测两组LECs的凋亡情况。结果观察组LECs中凋亡细胞百分率为(30.4±3.7)%,对照组LECs中凋亡细胞百分率为(0.27±0.12)%。两组凋亡细胞百分率比较,观察组显著高于对照组,差异有统计学意义(t=11.59,P0.01)。观察组LECs中Fas、FasL蛋白的阳性表达率为60.0%、68.0%,而对照组LECs中Fas、FasL蛋白的阳性表达率为10.0%、20.0%,两组Fas、FasL蛋白阳性表达率比较,观察组显著高于对照组,差异有统计学意义(t=8.95,7.68,P0.01)。25例老年性白内障患者的LECs中Fas、FasL蛋白的表达与细胞凋亡数间均呈正相关(r=0.574,0.614,P0.01)。结论老年性白内障形成过程可能与LECs的凋亡及Fas、FasL的调控有关。     

奥美拉唑对胃癌前病变细胞凋亡的影响

目的:研究奥美拉唑治疗对胃癌前病变细胞凋亡的影响。方法:胃镜活检经病理证实为胃癌前病变患者32例,随机分为治疗组(奥美拉唑20mg,qd)与对照组(硫糖铝1.0g,tid)各16例,分别利用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和TUNEL方法检测治疗前、后胃癌前病变组织bcl-2、baxmRNA表达率以及凋亡指数的变化。结果:奥美拉唑组治疗后细胞凋亡指数和baxmRNA表达率明显升高,而bcl-2mRNA表达率降低;对照组治疗前后各项指标均无明显变化。结论:奥美拉唑可诱导胃癌前病变组织细胞凋亡,其机制可能与增强baxmRNA的表达,抑制bcl-2mRNA的表达有关。     

膀胱移行细胞癌中Survivin的表达与Fas/FasL表达的关系

目的：探讨在膀胱移行细胞癌中Survivin的表达与膀胱移行细胞癌病理分级及Fas／FasL系统之间的关系。方法：用免疫组织化学方法检测64例膀胱移行细胞癌、15例膀胱良性病变和12例正常膀胱黏膜中Survivin、Fas、FasL的表达。结果：在93．8％膀胱移行细胞癌和66．7％膀胱良性病变Survivin表达阳性，正常膀胱黏膜组织Survivin无表达．3组比较差异有统计学意义（P〈00．1），且Survivin的表达与膀胱癌的分级密切相关。Fas在3组中的表达率分别为50％、80％和100％，FasL在3组中的表达率分别为90．6％、60％和16．7％。Survivin在膀胱移行细胞癌中的表达上调，并与Fas／FasL的表达密切相关。结论：Survivin与膀胱癌的恶性度有关，其可能通过与Fas／FasL系统协同作用共同参与了膀胱移行细胞癌的发生发展。     

三叶因子Ⅰ在胃癌及癌前病变中的表达及意义

目的探讨三叶因子Ⅰ（TFF1）在胃正常黏膜、癌前病变、胃癌中的表达及临床病理意义。方法应用免疫组织化学S—P法检测20例胃正常黏膜、20例萎缩性胃炎伴肠化生、20例不典型增生、15例早期胃癌、45例进展期胃癌组织中TFF1的表达。结果TFF1在胃正常粘膜、萎缩性胃炎伴肠化生、不典型增生、早期胃癌、进展期胃癌阳性表达率分别为100．0％、80．0％、75．0％、26．7％、57．8％，其表达进展期胃癌高于早期胃癌（P〈0．05）；与肿瘤细胞分化程度有关，分化愈低，表达愈强，分化愈高，表达愈弱（P〈0．05）。结论TFF1在癌前病变和胃癌中表达呈下降趋势，与胃癌的发生、发展有关。     

大肠癌组织Survivin基因表达与细胞凋亡的相关性研究

目的：检测大肠癌组织中Survivin基因的表达及凋亡指数,探讨二者的相关性及其临床意义。方法：采用分子信标荧光探针实时定量PCR法,检测49例大肠癌和14例大肠正常组织中Survivin基因mRNA模板拷贝数,TUNEL法检测凋亡细胞,计算凋亡指数（AI）。结果：肿瘤组织与正常组织比较Survivin基因模板拷贝数和AI差异均有统计学意义;肿瘤组织中mRNA拷贝数与肿瘤部位、性别、年龄和Dukes分期无关,与淋巴结转移和病理类型有关;结肠组AI显著高于直肠组;肿瘤组织中Survivin基因表达阴性组AI显著高于阳性组。结论：Survivin基因在肠癌组织中高表达,可成为预测淋巴结转移的参考指标。     

子宫内膜异位症患者在位子宫内膜Fas、FasL的表达及其意义

目的检测子宫内膜异位症患者在位子宫内膜Fas及其配体(FasL)的表达,探讨其在子宫内膜异位症发生机制中的作用.方法采用免疫组织化学法(SP法)对45例盆腔子宫内膜异位症和44例壁间型子宫肌瘤患者在位子宫内膜进行Fas、FasL表达检测.结果(1)对照组Fas、FasL主要表达于子宫内膜腺上皮细胞胞浆和/或胞膜.增生期Fas、FasL表达显著低于分泌期(P＜0.05).(2)子宫内膜异位症组Fas、FasL亦主要表达于子宫内膜腺上皮细胞胞浆和/或胞膜.增生期与分泌期Fas、FasL表达差异无显著意义.(3)与对照组比较,子宫内膜异位症组分泌期Fas、FasL表达显著低于对照组(P＜0.05).结论子宫内膜周期性生理变化与Fas及其配体的表达水平改变有关.子宫内膜异位症在位子宫内膜分泌期凋亡敏感性降低.推测这种具有抗凋亡活性的子宫内膜细胞逆流至盆腹腔后,因其Fas低水平表达,得以逃避机体免疫清除系统的影响而在异位存活、种植,为子宫内膜异位症的发生创造了先决条件.     

Fas及其配体在卵巢上皮癌和正常卵巢上皮细胞表达的研究

目的研究Fas和Fas配体在卵巢上皮癌和正常卵巢上皮细胞的表达。方法采用免疫组织化学方法了解Fas和Fas配体在卵巢上皮癌和正常卵巢上皮细胞的表达情况。结果免疫组织化学正常卵巢上皮Fas表达阳性率85.7%,Fas配体完全不表达;而卵巢上皮癌Fas表达阳性率31.9%,Fas配体表达阳性率8.5%。结论Fas在卵巢上皮癌细胞低表达,可能是肿瘤细胞逃避Fas介导的宿主免疫的机制。     

Survivin在乳腺癌及癌前病变中的表达及P53蛋白关系

目的本实验采用免疫组织化学方法研究了Survivin在乳腺癌组织及癌前病变中的表达情况,并探讨其与突变型P53蛋白表达之间的关系。方法采用免疫组织化学ABC法检测了10例正常乳腺组织,42例乳腺癌组织（其中浸润性导管癌31例,髓样癌6例,腺癌4例,派杰氏病1例）和乳腺增生组织34例（包括普通增生11例,不典型增生23例）中Survivin、P53蛋白表达的情况,探讨其与突变型P53蛋白表达之间的关系,以揭示Survivin在乳腺癌发生、发展过程中的作用。结果Survivin在乳腺癌组织及癌前病变中表达的组织化学记分和阳性率显著高于正常乳腺组和普通增生组（P〈0．01）,P53蛋白在乳腺癌及不典型增生组的阳性率显著高于正常组和普通增生组（P〈0．05）;P53蛋白表达阳性组Survivin的组织化学记显著高于P53蛋白表达阴性组（P〈0．05）。结论Survivin蛋白的异常表达与乳腺癌的发生与发展密切相关,Survivin蛋白表达与P53基因突变相关,两者可能通过某种作用共同参与乳腺癌的发生与发展。     

E-钙黏素在上皮性卵巢癌中的表达及临床意义

目的 :探讨E 钙黏素 (E cad)在上皮性卵巢癌中的表达及临床意义。方法 :采用免疫组化SP法检测E cad在32例正常卵巢、38例良性上皮性卵巢肿瘤及106例上皮性卵巢癌中的蛋白表达 ;RT PCR技术检测31例上皮性卵巢癌E cadmRNA的表达 ,以凝胶成像分析系统进行分析。结果 :E cad的表达在正常卵巢表面上皮未见 ,在恶性组中低于良性组 (P<0 05) ,且与临床分期有关 (P<0 05)。E cad表达阳性者生存时间长于表达阴性者(P<0 01)。结论 :E cad的表达与卵巢癌的分化程度、浸润转移等恶性行为有关。E cad可作为评价上皮性卵巢癌生存预后的指标。     

Survivin在乳腺癌及癌前病变中的表达及P_(53)蛋白关系

目的本实验采用免疫组织化学方法研究了Survivin在乳腺癌组织及癌前病变中的表达情况,并探讨其与突变型P53蛋白表达之间的关系。方法采用免疫组织化学ABC法检测了10例正常乳腺组织,42例乳腺癌组织(其中浸润性导管癌31例,髓样癌6例,腺癌4例,派杰氏病1例)和乳腺增生组织34例(包括普通增生11例,不典型增生23例)中Survivin、P53蛋白表达的情况,探讨其与突变型P53蛋白表达之间的关系,以揭示Survivin在乳腺癌发生、发展过程中的作用。结果Survivin在乳腺癌组织及癌前病变中表达的组织化学记分和阳性率显著高于正常乳腺组和普通增生组(P<0.01),P53蛋白在乳腺癌及不典型增生组的阳性率显著高于正常组和普通增生组(P<0.05);P53蛋白表达阳性组Survivin的组织化学记显著高于P53蛋白表达阴性组(P<0.05)。结论Survivin蛋白的异常表达与乳腺癌的发生与发展密切相关,Survivin蛋白表达与P53基因突变相关,两者可能通过某种作用共同参与乳腺癌的发生与发展。     

骨肉瘤中Fas、FasL的表达和意义

目的 检测Fas、FasL在骨肉瘤中的表达,探讨其生物学意义。方法 免疫组化法（SP法）检测41例骨肉瘤和15例正常骨组织中Fas、FasL的表达。结果 Fas在骨肉瘤中阳性表达率为53．66％,显著低于正常骨组织中的86．67％（P〈0．05）;骨肉瘤的病理分级、临床分期较高者Fas表达水平低于较低者（P〈0．05）。FasL在骨肉瘤中呈高表达,阳性率为82．93％,高于正常骨组织中的20％（P〈0．01）。FasL在骨肉瘤中的表达与其病理分级、临床分期无关（P〉0．05）。结论 骨肉瘤中Fas／FasL的异常表达可能参与了骨肉瘤细胞的免疫逃避机制。