用逆转录—多聚酶链反应检测肾癌mdr1基因的表达

用逆转录－多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术研究了２例正常肾，１８例原发性肾癌和１例肾盂癌ｍｄｒｌｍＲＮＡ表达状况，结果显示２例正常肾和１５例（８３．３％）肾癌表达ｍｄｒｌｍＲＮＡ基因，另３例肾癌和１例肾盂癌无此基因表达，ｍｄｒｌ基因的表达与肾癌的分级无关（Ｐ＝０．５１），原发性肾癌ｍｄｒｌ基因的高表达奠定了肾癌内在性耐药的基础。比较不同的基因检测手段显示ＲＴ－ＰＣＲ是简便，快速灵敏，特异的检测ｍｄ     

Fas mRNA在泌尿系肿瘤组织中的表达

目的 了解Ｆａｓ ｍＲＮＡ在泌尿系肿瘤组织中的表达情况。方法 采用逆转录ＰＣＲ（ＲＴ－ＰＣＲ）法检测３７例泌尿系恶性肿瘤组织中Ｆａｓ ｍＲＮＡ的表达，其中肾癌２１例，膀胱癌１１例、肾盂癌４例，前列腺肉瘤１例；原位杂交法检测３４例肾癌和１９例癌旁正常肾组织中Ｆａｓ ｍＲＮＡ的表达。结果 ３７例肿瘤组织中检出Ｆａｓ ｍＲＮＡ阳性表达共２０例，阳性率为５４％，阳性表达组织中未发现有缺失突变的存在。其中肾     

人原发性肝癌病人多药耐药基因表达及意义

目的 探讨原发性肝癌（ＰＨＣ）癌组织及癌周组织ｍｄｒｌ表达与多药耐药性的关系。方法 采用敏感性高,特异性强的逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术,定量检测４８例ＰＨＣ病人癌组织及癌周组织中ｍｄｒｌ表达水平。其中１８例病人要前行肝动脉化疗栓塞（ＴＡＣＥ）治疗。结果 ＰＨＣ癌组织中ｍｄｒｌ阳性率为６３．３％,远高于癌周组织的２６．７％（Ｐ〈０．０１）;术前行ＴＡＣＥ组癌组织中ｍｄｒｌ阳性率为８８．９％,远比未化疗组６３．３％高。结论 ＰＨＣ存在内源性ＭＤＲ和获得性ＭＤＲ,ｍｄｒｌ高表达是ＰＨＣ病人ＭＤＲ产生的重要机制之一。     

Fas配体基因在肾细胞癌中的表达及其意义

目的 探讨Ｆａｓ配体（ｒａｓ ｌｉｇａｎｄ,ＦａｓＬ）基因在肾细胞癌中的表达及临床临床。方法 应用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）及免疫组织技术化学分别检测ＦａｓＬ ｍＲＮＡ及蛋白在５１例肾细胞癌中的表达。结果 ５１例肿瘤 ３２例ＦａｓＬ基因阳性表达。其中１、２、３级肿瘤中ＦａｓＬ的阳性表达率分别为２５．０％、６３．６％、８８．２％,１、２、３、４期肿瘤肿瘤中Ｆａｓｌ的阳性表达率分别为３１．６     

黑色素瘤抗原-3基因在肝细胞癌中的研究

目的 检测黑色素瘤抗原－３（ｍｅｌａｎｏｍａ ａｎｔｉｎｅｇ－３,ＭＡＧＥ－３）ｍＲＮＡ在肝细胞癌（ＨＣＣ）中的表达,探计用ＭＡＧＥ－３基因编码蛋白作为疫苗对ＨＣＣ患者进行免疫治疗在理论上的可行性。方法 用ＲＴ－ＰＣＲ方法对４５例ＨＣＣ患者癌组织和相应癌旁肝组织以及１６例肝硬化组织和１２例正常肝组织的ＭＡＧＥ－３ ｍＲＮＡ表达情况进行研究,对３例ＲＴ－ＰＣＲ扩增产物中目的基因片段进行ＤＮＡ序列测定     

碱性成纤维细胞生长因子及其受体在肾癌组织中的表达

碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）可诱发血管形成、刺激癌细胞生长。本研究试图通过检测ｂＦＧＦ及其受体ＦＧＦＲ－１在正常肾和肾癌组织的表达方式，探讨其临床意义。作者针对３６例石蜡包埋的肾癌及其正常肾组织，配合微波炉抗原修复法进行ｂＦＧＦ和ＦＧＦＲ－１的ＬＳＡＢ免疫组化染色。结果显示：ｂＦＧＦ与ＦＧＦＲ－１的染色结果基本一致；全部正常肾组织和２９例肾癌的细胞外基质为非均一性阳性染色；１２例原发性肾癌、２例癌转移灶和体外培养的ＧＲＣ－１细胞的癌细胞胞浆为阳性染色，且多为均一性染色。癌细胞胞浆的ｂＦＧＦ染色多见于Ｔ３－４期肿瘤，与Ｔ１－２期比较有显著性差异（Ｐ＝０．０２）。作者认为，ｂＦＧＦ和ＦＧＦＲ－１可同时表达于正常肾和肾癌组织，提示ｂＦＧＦ和ＦＧＦＲ－１的表达与功能密切相关；癌细胞胞浆ｂＦＧＦ阳性表达与肿瘤分期有关，提示ｂＦＧＦ是促进肾癌发展的原因之一。     

凋亡相关基因产物Fas/APO-1和bcl-2蛋白在肾癌组织中的表达及意义

目的研究凋亡相关基因Ｆａｓ／ＡＰＯ－１和ｂｃｌ－２在肾癌发生发展中的作用。方法采用免疫组织化学法对３５例肾癌组织和２６例远离肾癌的正常肾组织Ｆａｓ／ＡＰＯ－１和ｂｃｌ－２蛋白的表达进行检测。结果肾癌组织Ｆａｓ／ＡＰＯ－１蛋白表达率为５７．１４％，明显低于正常肾组织中的表达率（８４．６２％，Ｐ＜０．０５），且表达强度也明显低下；而ｂｃｌ－２蛋白表达率为８０．００％，明显高于正常肾组织中的表达率（５３．８５％，Ｐ＜０．０５）。结论Ｆａｓ／ＡＰＯ－１与ｂｃｌ－２基因共同参与了肾癌的发生和发展。     

bcl—２及ＭＤＲ—１基因产物在肾癌组织中的表达及其意义

目的：探讨基因 bcl-２和ＭＤＲ－１产物在肾癌组织中表达的意义及相关关系,了解肿增残与耐药的特点,方法：采用免疫组织化学ＳＡＢＣ法对４８例肾癌和１０例正常肾组织的石蜡包埋标本切片进行bcl-2和ＭＤＲ－１基因产物表达的统计研究,结果：bcl-2在肾癌组织中阳必表达率为７７．１％,与正常肾组织（４０．０％）相比,差异有显著性意义（Ｐ＜０．０５）,但其表达与肿瘤分级、分期及预后无关（P＞０．０５）,ＭＤＲ－１在肾癌组织和肿瘤病理分级及预后无关（Ｐ＞０．０５）。结论：bcl-2蛋白在大多数肾癌组织中呈高表达,其表达在肾肿瘤形成中可能起作用,进一步证实ＭＤＲ－１基因在肾细胞癌抵抗化疗中起作用,与bcl-2无显著相关性,肾癌化疗、放疗不敏感可能涉及ＭＤＲ－１和bcl-2的双重作用。     

逆转录聚合酶链反应技术检测人肝癌nm23-H1基因mRNA表达

为探讨人肝癌中肿瘤转移抑制基因ｎｍ２３－Ｈ１的ｍＲＮＡ表达状况,设计特异性引物,应用逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术检测分析了２０例人肝癌组织及相应癌旁肝组织中ｎｍ２３－Ｈ１基因的ｍＲＮＡ表达。结果 特异性引物能成功扩增ｎｍ２３－Ｈ１基因的几乎整个编码序列：２０例肝癌及癌旁肝组织的ＲＴ－ＰＣＲ结果均为阳性,ｎｍ２３－Ｈ１基因ｍＲＮＡ未发生表达缺失或较大变异现象,由此表明,本实验建立的ＲＴ－Ｐ     

血管内皮细胞生长因子mRNA在肾细胞癌中的表达

用逆转录聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ）方法检测２０例肾细胞癌组织和癌周组织血管内皮细胞生长因子（ＶＥＧＦ）ｍＲＮＡ的表达，有１８例癌组织表达ＶＥＧＦｍＲＮＡ，表达率为９０％；２例无表达。癌周组织仅有３例表达ＶＥＧＦｍＲＮＡ，表达率为１５％，两组间有显著性差异（Ｐ＜０．０１）。结果表明，ＶＥＧＦ在肾细胞癌的生长和进展过程中起重要作用，通过诱导血管内皮细胞通透性和内皮细胞的增生，促进肿瘤生长。以ＶＥＧＦ作为靶分子的基因治疗将提高防治肾癌进展和转移的水平。     

原发性肾癌mdr－1基因产物的表达及临床意义

为探讨肾癌的耐药规律，我们应用ＬＳＡＢ免疫组织化学方法研究了３４例原发性肾癌，２０例正常肾组织多药耐药基因（ｍｄｒ－１）产物Ｐ－糖蛋白（Ｐ－ＧＰ）的表达情况。结果表明：１００％的正常肾组织有Ｐ－ＧＰ的表达，以肾近曲小管的表达最强，远曲小管次之。８５．３％的肾癌组织有Ｐ－ＧＰ的表达。Ｒｉｄｉｔ统计学检验显示Ｐ－ＧＰ的表达与肾癌的组织分级、病理分期无关。研究显示：肾小管是Ｐ－ＧＰ高表达的组织，因此起源于肾小管的肾细胞癌表现高耐药性。消除Ｐ－ＧＰ介导的多药耐药机制的影响是提高肾癌化疗效果的关键。     

nucleostemin基因在肾癌中的表达及其意义

目的 观察nucleostemin基因在肾癌组织和正常肾组织中的表达,探讨其在肾癌发生中的意义.方法 收集肾癌组织标本62例,透明细胞型50例,颗粒细胞型12例.同时取10例癌旁非癌肾组织和10例非瘤正常肾组织作对照组.应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法,以GAPDH为内参照,检测上述组织nucleostemin基因mRNA的表达,统计学分析实验结果.结果 肾癌组织中,nucleostemin基因47例显示阳性表达,阳性率为75.81%.正常肾组织未见有nucleostemin基因阳性表达.nucleostemin基因在肾癌组织中的阳性表达显著高于正常肾组织(P<0.01).nucleostemin基因在透明细胞癌中阳性表达率为74.00%;颗粒细胞癌阳性表达率为83.33%,两者比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 nucleostemin基因在肾癌组织中呈高表达,而在正常肾组织中无表达;nucleostemin基因的表达可能与病理类型无关.提示nucleostemin基因的表达与肾癌的发生密切相关.     

肾癌相关新基因GYLZ-RCC18的表达及意义

目的 探讨GYLZ－RCC18功能及在肾癌发生发展中的作用。方法 应用SMARTRACE技术克隆GYLZ－RCC18全长,应用逆转录聚合酶链式反应（RT－PCR）特异扩增第1阅读框中504bp序列,分析在肾癌中的表达特点及与肾癌分级、分期的关系。结果 GYLZ－RCC18基因全长约为3．5kb,在肾癌组织特异表达,正常肾组织低表达或不表达,两者表达量差异 约1－9倍。GYLZ－RCC18表达在高分级分期肾癌中的表达明显高于低分级分期者。结论 GYLZ－RCC18是肾癌组织相对特异表达的新基因,高表达与肾癌的早期发生及晚期进展密切相关。     

肾细胞癌中Mina53的表达及其与临床病理及预后的关系

目的 探讨肾细胞癌组织中Mina53的表达水平及其与临床病理及预后的关系.方法 采用RT-PCR技术测定96例肾细胞癌组织及20例癌旁正常肾组织中Mina53的表达,免疫组化法测定其蛋白水平的表达,分析其结果与临床病理及预后的关系.结果 Mina53平均模板量在肾细胞癌组织中的表达明显高于正常肾组织的表达(P＜0.01),且在Ⅲ期、Ⅳ期肾细胞癌组织中的表达明显高于Ⅰ期、Ⅱ期的表达水平(P＜0.01),Mina53蛋白在肾细胞癌组织中的表达水平明显高于其在正常肾组织的表达水平(P＜0.01);Mina53高表达者的预后较低表达者明显要差(P＜0.01).结论 Mina53基因及蛋白的高表达与肾细胞癌临床病理分期有关,其表达水平越高,预后越差,Mina53有望成为预后判断的新指标.     

肾癌特异相关基因GYLZ-RCC18的表达及对肾癌细胞生长及增殖活性的影响

目的 通过检测肾癌相关新基因GYLZ－RCC18（基因号：BE825133）在肾癌中的表达特点及其对肾癌细胞生长、增殖的影响，探讨GYLZ－RCC18基因的功能及其在肾癌发生发展中的作用。方法 应用逆转录－聚合酶链式反应（RT－PCR）的方法检测肾癌相关基因GYLZ－RCC18在31例肾癌标本中的表达特点；观察GYLZ－RCC18反义寡核苷酸对肾癌细胞生长、增殖活性、形态学的影响。结果 GYLZ－RCC18基因在肾癌组织特异表达，正常肾组织较肾癌组织低表达或不表达，两者表达量差异为1－9倍。GYLZ－RCC18基因的表达在高分级、高分期肾癌明显高于低分级、低分期肾癌；导入GYLZ－RCC18反义寡核苷酸后，可明显抑制癌细胞的生长和增殖活性，并减少分期肾癌，导入GYLZ－RCC18反义寡核苷酸后，可明显抑制癌细胞的生长和增殖活性，并减少GRC－1细胞的核分裂。结论 GYLZ－RCC18是肾癌组织相对较特异表达的新基因，它的高表达与肾癌发生发展以及生长、增殖密切相关，它的成功克隆为阐明肾癌发生发展的分子生物学机制开辟了新的途径，为今后肾癌的特异诊断，基因治疗提供了新的理论依据。     

肾癌相关新基因GYLZ-RCC18反义寡核苷酸转染对肾癌细胞系GRC-1的作用

目的：探讨肾癌相关新基因GYLZ－RCC18在肾癌发生发展中的作用机制。方法：采用逆转录PCR方法检测GYLZ－RCC18在肾癌和正常肾细胞系中的表达,将第一编码区起始处的20个碱基的反义和正义寡核苷酸导入肾癌细胞系GRC－1,连续观察对肾癌细胞生长、增殖凋亡、死亡率、形态学的影响。结果：GYLZ－RCC18在肾癌细胞系中表达明显高于正常肾细胞系;导入GYLZ－RCC18反义寡核苷酸后,GRC－1细胞的核分裂可明显减少,导致GRC－1细胞死亡,抑制癌细胞的生长和增殖活性,并可特异诱导GRC－1连续凋亡。结论：GYLZ－RCC18是肾癌发生发展密切相关的癌基因,其表达可促进肾癌细胞的生长和增殖,并通过抗癌细胞死亡和凋亡机制对癌细胞起保护作用。     

Expression of COX-2 in normal and pyelonephritic kidney, renal intraepithelial neoplasia, and renal cell carcinoma

OBJECTIVES: The role of inflammation in carcinogenesis is unknown. To determine the relationship between cyclooxygenase 2 (COX-2) expression, inflammation, and carcinogenesis in human renal cell carcinoma (RCC), we looked for COX-2 expression in normal and pyelonephritic kidney, renal intratubular neoplasia (RIN), and RCC tissues. METHODS: COX-2 expression was assessed immunohistochemically in tissues obtained from 20 pyelonephritic kidneys, 16 normal kidneys, 19 RIN, and 75 RCC cases. RESULTS: COX-2 expression was found to be positive in 64% of RCCs. It was positive in 13 chronic pyelonephritic (65%), 9 normal (56%), and 15 RIN (79%) cases. COX-2 expression was significantly higher in RCC and RIN than the normal and pyelonephritic cases (p<0.001 and p<0.001, respectively). No statistically significant difference was noted between RCC and RIN cases. CONCLUSIONS: Although the function of COX-2 in tumor development has not been exactly elucidated, the increased expression of COX-2 in RIN and RCC might be a factor that may play a role in the development of RIN or progression to RCC, which warrants further research.     

肾母细胞瘤过表达基因和WT1基因在肾癌组织中转录水平的定量研究

目的 研究肾癌组织中肾母细胞瘤过表达基因（NOV）及WT1基因mRNA定量表达水平及意义。方法 肾癌组织标本57例。男40例，女17例，平均年龄65岁。T139例、T213例、T3a5例；G114例、G223例、G320例。应用实时RT—PCR方法定量检测癌组织及36例癌旁正常肾组织中NOV和WT1的mRNA表达，并对2种基因表达水平进行相关性分析。结果 肾癌组织NOVmRNA表达水平中位值（1．17）显著低于癌旁正常组织（4．32，P〈0．05），乳头状肾癌组织表达量（2．67）显著高于透明细胞癌（1．06，P〈0．05），G．肿瘤表达量（4．61）显著高于G2～G3肿瘤（1．11，P〈0．05）。NOV表达与肿瘤分期、大小等无显著相关。WT1mRNA在肾癌组织中的表达水平中位值（0．13）显著低于癌旁正常组织（1．93，P〈0．05），WT1表达与肿瘤分期、分级、组织类型等均无关。NOVmRNA与WT1mRNA表达水平无明显相关。结论 NOV基因与肾癌的发生和分化相关。WT1在肾癌组织中表现为低表达。NOV表达是否受WT1的调节尚需进一步研究。