石榴皮鞣质对羟自由基和超氧阴离子自由基的清除作用

目的：研究石榴皮鞣质清除自由基的作用。方法：通过罗丹明B—Cu^2＋-H2O2体系产生·OH，邻苯三酚自氧化体系产生O2^-。同时比较石榴皮鞣质提取物，鞣花酸一没食子酸混合溶液，以及维生素C的作用效果，根据作用常数的大小讨论3种溶液及其各自的浓度对自由基的清除作用，并初步推断作用机制。结果：石榴皮鞣质对羟自由基和超氧阴离子自由基均具有较好的清除作用，较低浓度时即可发挥清除作用。结论：石榴皮鞣质对自由基侵害有保护作用。     

维吾尔药木吒栓中石榴皮和石榴花水提取工艺的优化

目的:优化维药木吒栓中石榴花与石榴皮的水提取工艺。方法:以总鞣质和鞣花酸含量为评价指标,以提取时间、提取次数和溶剂用量为考察因素,采用L_9(3~4)正交试验优化石榴花、石榴皮的水提取工艺并进行验证试验。结果:石榴花与石榴皮中总鞣质和鞣花酸的最优提取工艺为将2味药材用10倍量水回流提取3次,每次0.5 h;验证试验中3批药材提取出的总鞣质与鞣花酸平均含量分别为151.69、24.59 mg/g(RSD分别为1.15%、1.41%,n=3)。结论:优化的提取工艺稳定、可行,可用于木吒栓中石榴花、石榴皮中总鞣质和鞣花酸的提取。     

HPLC-ESI-MS对石榴皮中鞣质类化学成分的初步分析

目的:用HPLC-ESI-MS初步鉴定石榴皮提取物中鞣质类化学成分。方法:采用Kromasil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈∶水,梯度洗脱;流速:1.0 ml·min-1,检测波长:256 nm;采用负离子检测模式。结果:初步鉴定出石榴皮提取物中5个鞣质类化学成分,分别为没食子酸,安石榴磷,安石榴苷,鞣云实精,鞣花酸。结论:本方法快速、简便,适合石榴皮中鞣质类化学成分的初步鉴别,为中药活性成分研究提供新的思路。     

新疆不同产地石榴花中总鞣质、没食子酸和鞣花酸的含量测定

目的测定新疆不同产地石榴花中总鞣质、没食子酸和鞣花酸的含量。方法采用紫外-可见分光光度法测定总鞣质的含量,HPLC法测定没食子酸和鞣花酸的含量。结果不同产地石榴花中总鞣质(38.44～113.98 mg·g~(-1))、没食子酸(2.39～3.81 mg·g~(-1))和鞣花酸(2.37～5.34 mg·g~(-1))含量差别均较大,和田皮山县石榴花中3种成分含量相对较高。结论该方法准确、专属性强,可用于石榴花药材的质量控制。     

蓝布正总酚酸的大孔树脂纯化工艺与质量标准研究

目的:优化大孔吸附树脂富集蓝布正总酚酸的纯化工艺,建立蓝布正总酚酸部位指纹图谱,并测定二聚鞣花鞣质A、没食子酸乙酯、鞣花酸及总酚酸含量。方法:采用单因素实验,以总酚酸的吸附率、解吸附率以及总酚酸含量、转移率为指标,筛选最佳大孔树脂型号、吸附条件、除杂条件和解吸附条件;采用HPLC和紫外可见分光光度法,建立总酚酸部位指纹图谱及二聚鞣花鞣质A、没食子酸乙酯、鞣花酸和总酚酸含量测定的质量控制方法。结果:选择HPD-400型大孔树脂,最佳工艺条件为提取物上样质量浓度为8 mg·mL^-1,吸附流速为2 BV·h^-1,径高比为1∶8,上样量为3 BV,10%乙醇4 BV洗脱除杂,除杂流速为3 BV·h^-1,50%乙醇5 BV洗脱,洗脱流速4 BV·h^-1,3批次验证实验得到的总酚酸平均含量67.75%(RSD为3.02%),平均转移率为74.53%(RSD为1.20%);12批样品指纹图谱中共有个18共有峰,指认了其中6个峰,分别为二聚鞣花鞣质B、二聚鞣花鞣质G、二聚鞣花鞣质A、特里马素Ⅱ、没食子酸乙酯、鞣花酸...     

基于UPLC-MS/MS快速测定中药材中6种鞣质类成分

目的 建立快速测定中药材中没食子酸、没食子酸甲酯、没食子酸乙酯、鞣花酸、3，3’-O-二甲基鞣花酸、柯里拉京6种鞣质类成分的超高效液相色谱串联质谱（UPLC-MS/MS）分析方法。方法 采用Agilent RRHD Eclipse Plus C₁₈色谱柱（2.1 mm×50 mm，1.8 μm），流动相为甲醇-0.1%甲酸水溶液，梯度洗脱，流速0.3 mL·min^-1，柱温40℃，进样量1 μL；三重四级杆质谱，采用电喷雾离子源、负离子模式，通过多重反应监测模式对15种中药材中6种鞣质类成分进行定量分析。结果 6种成分在各自浓度范围内线性关系良好（r>0.999），没食子酸、没食子酸甲酯、没食子酸乙酯、鞣花酸、3，3’-O-二甲基鞣花酸、柯里拉京的加样回收率分别为99.8%，98.3%，100.1%，100.3%，100.7%，99.2%，RSD值分别为1.11%，2.23%，1.07%，1.34%，1.64%，1.24%。15种中药材中均含一定量的没食子酸和没食子酸乙酯，且以五倍子中含量最高；鞣花酸含量以覆盆子根最高；另外3种成分不均匀分布于各药材中。结论 所建立的方法稳定、快速、灵敏度高，适用于含有上述6种鞣质类成分中药材的定量分析。     

诃子、西青果和毛诃子的含量比较研究

目的对比分析诃子、西青果和毛诃子的含量。方法采用磷钼钨酸-干酪素法测定鞣质,用HPLC法测定没食子酸和鞣花酸。色谱柱为Ecosil C_(18)色谱柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相为甲醇-2mL·L~(-1)磷酸溶液,梯度洗脱;流速为1.0mL·min~(-1)。结果找出了3种药材中鞣质、没食子酸和鞣花酸含量的变化规律,指出不同药材的相关性和差异性。结论 3种药材存在相同成分,但含量不等,应注意鉴别。     

多指标综合评分正交试验法优选石榴皮炭最优炮制工艺

目的:优选石榴皮炭的最优炮制工艺。方法:采用正交试验法,以外观性状、没食子酸和鞣花酸含量为评价指标,对主要影响因素(投料量、炒制温度、炒制时间)进行考察,根据多指标综合评分结果确定石榴皮炒炭的最优炮制工艺参数并进行验证。结果:最优工艺为取石榴皮饮片200 g,置于炒药锅中400℃炒制20 min。验证试验结果表明,制备的3批石榴皮炭饮片外观性状均符合要求,没食子酸和鞣花酸含量稳定(RSD分别为1.55%、2.11%,n=3)。结论:优选的工艺稳定可行,可用于石榴皮炭饮片的制备。     

UPLC测定余甘子产地、采收时间和炮制对其质量关系影响

目的比较不同产地、采收时间及不同炮制方法对余甘子中没食子酸和鞣花酸的含量影响。方法采用UPLC法建立测定余甘子中没食子酸和鞣花酸的方法,利用ACQUITY UPLC BEH C 18(100mm×2.1mm,1.7μm)色谱柱,柱温为30℃,流动相以甲醇-0.1%磷酸溶液测定没食子酸(检测波长273nm),以乙腈-0.2%磷酸溶液测定鞣花酸(检测波长254nm);体积流量为0.2mL·min^-1,进样量为10μL。测定余甘子不同产地、采收时间和不同炮制品种没食子酸和鞣花酸的含量影响。结果不同的产地中,广东潮汕(没食子酸25.20%、鞣花酸23.73%)、福建泉州(没食子酸26.28%、鞣花酸33.18%)、广西梧州(没食子酸26.59%、鞣花酸20.80%)、四川凉山(没食子酸27.59%、鞣花酸22.48%)、云南楚雄(没食子酸28.36%、鞣花酸25.59%),其中以云南楚雄的余甘子中没食子酸的含量为最高,其他四地产地含量略低;福建泉州的余甘子鞣花酸含量最高,其他四地含量偏低。不同采摘时间的数据均显示在每年的六月中旬季节采收所得的没食子酸和鞣花酸的含量是最高。经过不同炮制方法后,没食子酸的含量:生品>醋炙≈酒炙>盐炙>蜜炙,鞣花酸相比与生品,酒炙、盐炙和蜜炙含量有不同程度的上升,醋炙含量略微下降。结论不同产地、采收季节和炮制工艺对余甘子中的活性成分含量有影响。     

石榴皮鞣质对膀胱癌T24细胞增殖及凋亡的影响

目的：研究石榴皮鞣质对膀胱癌T24细胞增殖及凋亡的影响并探讨其作用机制。方法：采用CCK-8法测石榴皮鞣质对膀胱癌T24细胞的增殖抑制作用、计算半数抑制浓度（IC₅₀）并筛选浓度区间,Hoechst染色法观察石榴皮鞣质作用后细胞核形态变化,Annexin V/PI双染法流式细胞术（FCM）检测细胞凋亡率,JC-1染色标记后流式细胞仪测定线粒体膜电位水平的变化,蛋白免疫印迹法检测细胞色素C （Cyt-C）、Bcl-2、Bax、Caspase-3凋亡相关蛋白表达。结果：石榴皮鞣质抑制膀胱癌细胞增殖呈时间浓度依赖关系,24,48,72 h的IC₅₀分别是72.70,62.26,19.64 μg·mL^-1。Hoechst染色观察石榴皮鞣质作用24 h后,细胞核出现浓染和荧光碎片为典型凋亡细胞。流式细胞术结果表明石榴皮鞣质具有显著的诱导T24细胞早期凋亡,线粒体膜电位下降。蛋白免疫印迹实验证明石榴皮鞣质上调Cyt-C、Bax蛋白的表达、下调凋亡抑制蛋白Bcl-2的表达,并激活Caspase-3蛋白的表达。结论：石榴皮鞣质显著抑制膀胱癌T24细胞增殖并诱导其凋亡,其作用机制可能与线粒体膜电位下降及调控线粒体凋亡途径相关蛋白的表达相关。