耐索拉非尼肝癌细胞株的构建及耐药机制研究

［摘要］　目的　构建耐索拉非尼肝癌细胞株并探讨其耐药机制。方法　应用HepG2、Huh7细胞通过浓度递增法建立耐索拉非尼细胞模型。通过CCK8法检测细胞对不同浓度索拉非尼的敏感性。通过划痕实验检测细胞的迁移能力。通过流式细胞术分析细胞凋亡情况。通过荧光实时定量RT-PCR和Western blot实验检测凋亡相关因子caspase-3和自噬标志因子P62、LC3的表达水平。结果　获得耐索拉非尼肝癌细胞株HepG2-SR、Huh7-SR。随着索拉非尼药物干预浓度的升高，耐药细胞株及野生型细胞株的存活率均逐渐降低。HepG2-SR细胞的半数抑制浓度（IC₅₀）显著高于HepG2细胞［（15.74±0.38）μM vs （7.27±0.44）μM ；t=5.450，P<0.001］；Huh7-SR细胞的IC₅₀显著高于Huh7细胞［（11.73±0.27）μM vs （4.92±0.31）μM；t=4.807，P<0.001］。相较于野生型细胞株，耐药细胞株具有更高的抗凋亡和迁徙能力。耐药细胞株的caspase-3、P62表达水平显著低于野生型细胞株（P<0.05），而LC3表达水平显著高于野生型细胞株（P<0.05）。结论　耐索拉非尼肝癌细胞株HepG2-SR、Huh7-SR具有更强的抗凋亡、抗生殖抑制和迁移能力，且自噬水平更高，为研究肝细胞癌对索拉非尼的耐药机制提供了基础。     

美罗华联合CHOP方案治疗B细胞性非霍奇金淋巴瘤效果观察

［摘要］　目的　探讨美罗华联合CHOP方案治疗B细胞性非霍奇金淋巴瘤的临床效果及不良反应。方法　选择B细胞性非霍奇金淋巴瘤60例随机分成观察组和对照组各30例。观察组采用美罗华联合CHOP方案治疗,对照组仅采用CHOP方案治疗,比较两组临床疗效及不良反应情况。结果　观察组患者临床疗效明显优于对照组(P<0.05);不良反应除发热例数多于对照组外（P<0.05）,其余两组比较差异无统计学意义（P>0.05）。结论　对B细胞性非霍奇金淋巴瘤患者采用美罗华联合CHOP方案治疗,能够有效提高患者的临床疗效,值得临床推广。     

黄连素逆转人结肠癌细胞奥沙利铂耐药性的作用及机制

［摘要］　目的　探究黄连素（Ber）逆转人结肠癌细胞奥沙利铂(OXA)耐药性的作用及机制。方法　选用人结肠癌耐OXA细胞THC-8307/OXA进行实验,分为对照组、OXA组和Ber（5、10、20 μg/ml）+OXA组。采用倒置相差显微镜观察细胞形态,MTT法检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡率,RT-qPCR检测MDR-1 mRNA的表达,Western blot检测P-gp、PI3K、Akt和p-Akt蛋白的表达。结果　与OXA组比较,Ber（5、10、20 μg/ml）+OXA组的细胞存活率显著降低（P<0.05）,凋亡率显著升高（P<0.05）;MDR-1 mRNA、P-gp蛋白、p-Akt蛋白、PI3K蛋白的表达水平及p-Akt/Akt值均显著降低（P<0.05）。其中Ber（10、20 μg/ml）+OXA组的效应显著高于Ber（5 μg/ml）+OXA组,Ber（20 μg/ml）+OXA组的效应显著高于Ber（10 μg/ml）+OXA组。OXA组与对照组的检测结果比较差异无统计学意义（P>0.05）。结论　Ber可显著逆转THC-8307/OXA细胞对OXA的耐药性,其作用机制可能与PI3K/Akt信号通路抑制,P-gp蛋白表达下调有关。     

康艾注射液联合化疗对肺鳞癌患者临床疗效和免疫功能及生活质量的影响

［摘要］　目的　探讨康艾注射液联合化疗对晚期肺鳞癌患者临床疗效和免疫功能及生活质量的影响。方法　收集2017年7月至2020年10月广东医科大学附属医院94例肺鳞癌初治患者,按照随机数字表法分为对照组（45例）和观察组（49例）。对照组接受顺铂+吉西他滨化疗,观察组在对照组的基础上联合康艾注射液辅助治疗,两组均治疗4个疗程。比较两组治疗前后T细胞计数、治疗后的临床疗效、生活质量评分及化疗不良反应情况。结果　治疗后,观察组的客观缓解率高于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）,但两组的疾病控制率差异无统计学意义（P>0.05）;观察组KPS评分高于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）;观察组T淋巴细胞总数、T辅助细胞绝对值、T抑制细胞绝对值高于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）;观察组恶心呕吐、血小板减少、白细胞减少不良反应发生率低于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。结论　康艾注射液联合化疗可提高晚期肺鳞癌患者免疫功能和生活质量,降低不良反应,从而提高临床疗效,值得临床推广。     

SNHG3调控miR-186-5p/ZEB1促进肝癌细胞增殖、迁移、侵袭和上皮-间质转化的机制研究

［摘要］　目的　探究SNHG3调控miR-186-5p/E盒结合锌指蛋白1（ZEB1）促进肝癌细胞增殖、迁移、侵袭和上皮-间质转化（EMT）的机制。方法　在HepG2细胞中转染siRNA干扰片段敲除SNHG3、转染pcDNA3.1(+)/SNHG3使SNHG3过表达,通过实时荧光定量聚合酶链式反应（FQ-PCR）检测是否转染成功。克隆形成实验检测HepG2细胞增殖,细胞划痕实验检测HepG2细胞迁移率,Transwell小室实验检测HepG2细胞侵袭数量,双荧光素酶活性检测验证SNHG3与miR-186-5p、miR-186-5p与ZEB1的靶向关系,FQ-PCR和Western blot法检测SNHG3、ZEB1、E-cadherin、N-cadherin、MMP-2、vimentin、MMP-9、Snail的表达水平。结果　肝癌组织中SNHG3表达量高于正常组织,SNHG3表达量低/中的肝癌患者的生存预后优于SNHG3表达量高的肝癌患者,差异有统计学意义（P<0.05）。克隆形成实验结果显示,与pcDNA3.1(+)组相比,pcDNA3.1(+)/SNHG3组HepG2细胞增殖数量显著增加（P<0.05）。细胞划痕实验结果显示,pcDNA3.1(+)/SNHG3组HepG2细胞迁移率显著高于pcDNA3.1(+)组（P<0.05）。Transwell小室实验结果显示,pcDNA3.1(+)/SNHG3组HepG2细胞侵袭数量显著高于pcDNA3.1(+)组（P<0.05）。双荧光素酶活性检测结果显示,miR-186-5p mimic和pGL6-SNHG3-WT共转染后,荧光素酶活性低于其他组,miR-186-5p mimic和pGL6-ZEB1-WT共转染后,荧光素酶活性低于其他组,差异有统计学意义（P<0.05）。FQ-PCR和Western blot检测结果显示,当SNHG3过表达时,E-cadherin mRNA和蛋白相对表达量显著下调,N-cadherin、MMP-2、vimentin、MMP-9和Snail mRNA和蛋白相对表达量以及ZEB1蛋白相对表达量显著上调;当SNHG3敲除后,E-cadherin mRNA和蛋白相对表达量显著上调,N-cadherin、MMP-2、vimentin、MMP-9和Snail mRNA和蛋白相对表达量以及ZEB1蛋白相对表达量显著下调,差异有统计学意义（P<0.05）。结论　SNHG3调控miR-186-5p/ZEB1可促进肝癌细胞增殖、迁移、侵袭和EMT,表明SNHG3是肝癌潜在的治疗靶点。     

TP与IP化疗方案治疗非小细胞肺癌效果比较

［摘要］　目的　探讨TP方案与IP方案在非小细胞肺癌治疗中的应用效果。方法　将136例非小细胞肺癌患者采用随机数字表法分为TP组68例和IP组68例,TP组予紫杉醇+顺铂治疗,IP组予伊立替康+顺铂治疗,21 d为1个周期,治疗3个周期。结果　TP组完全缓解（CR）16例,部分缓解（PR）15例,稳定（SD）22例,进展（PD）15例,IP组依次为17、13、25、13例,两组临床疗效比较差异无统计学意义（P>0.05）;TP组和IP组的不良反应主要为血液系统毒性,两组比较差异无统计学意义（P>0.05）。结论　TP方案与IP方案治疗非小细胞肺癌临床疗效确切,有效率和安全性均较好,无明显差异,应根据患者特点个体化选择化疗方案。     

双切口小梁切除联合超声乳化人工晶状体植入术治疗原发性闭角型青光眼合并白内障的效果分析

［摘要］　目的　分析双切口小梁切除联合超声乳化人工晶状体植入术治疗原发性闭角型青光眼合并白内障的临床效果。方法　回顾性分析2017年8月至2019年8月因原发性青光眼合并白内障在该院行手术治疗的112例患者的临床资料,根据手术方法不同分为观察组62例（67眼）和对照组50例（54眼）,观察组实施双切口白内障超声乳化吸除+非球面人工晶状体置入+小梁切除联合手术;对照组实施同切口白内障超声乳化吸除+非球面人工晶状体置入+小梁切除联合手术。比较两组患者术前、术后6个月视力与眼压（最佳矫正视力、眼压值）、中央前房深度与房角开放度数、角膜内皮细胞平均面积与密度、术后滤过泡形成情况以及并发症发生情况。结果　术后6个月,两组患者最佳矫正视力均较术前提高（P<0.05）,眼压均较术前降低（P<0.05）,但两组术后比较差异无统计学意义（P>0.05）。两组患者中央前房深度和房角开放度数均较术前提高（P<0.05）,且观察组高于对照组（P<0.05）。两组患者角膜内皮细胞平均面积均较术前增加,且观察组高于对照组;密度均较术前降低,且观察组低于对照组,差异均有统计学意义（P<0.05）。观察组患者功能型滤过泡形成率显著高于对照组（P<0.05）。两组术后并发症发生率比较差异无统计学意义（P>0.05）。结论　小梁切除联合超声乳化人工晶状体植入手术治疗原发性青光眼合并白内障的同切口、双切口术式均安全有效,但双切口术式可减少角膜内皮细胞损失,更有利于术后功能型滤过泡的形成。     

不同剂量阿托伐他汀对老年早期糖尿病肾病患者外周血NF-κB活性和尿白蛋白排泄率的影响

［摘要］　目的　观察不同剂量阿托伐他汀对老年早期糖尿病肾病（DN）患者外周血单个核细胞中核因子-κB（NF-κB）P65(ser536)的磷酸化水平、血清炎症因子水平（hs-CRP、TNF-α、IL-6、IL-1β）及尿白蛋白排泄率（UAER）的影响。方法　将72例2型糖尿病早期DN老年患者,半随机分为两组,分别给予阿托伐他汀钙片10 mg/d（DN1组,37例）和20 mg/d（DN2组,35例）,疗程16周。测定两组患者治疗前和治疗16周后外周血NF-κB P65的磷酸化水平、血清炎症因子水平、UAEA、血脂（TC、TG、DHL-C、LDL-C）。结果　两组患者治疗后外周血NF-κB P65水平、血清炎症因子水平、TC及LDL-C均较治疗前降低(P<0.01或P<0.05),以DN2组降低更显著。DN2组治疗后UAER较治疗前显著降低（P<0.01）,DN1组无显著下降（P>0.05）。结论　阿托伐他汀在降低血脂的同时可降低外周血NF-κB P65的活性、血清炎症因子hs-CRP、TNF-α、IL-6、IL-1β水平,改善患者炎症状态,减少尿蛋白,且呈剂量依赖性。     

特应性皮炎患者的舌象图像特征与中医证型关联性分析

［摘要］　目的　分析特应性皮炎(AD)患者的舌象图像特征与中医证型的关联性。方法　选择2018年3月至2020年10月广西中医药大学第一附属医院皮肤科门诊收治的AD患者130例作为病例组,另选择同期健康体检者40名作为对照组。采集研究对象舌象图像,获得了其红绿蓝（RGB）值和色调-饱和度-强度（HSI）的色调（H）值,并分析这些特征值与中医证型的关联性。结果　130例AD患者中脾虚湿盛型49例（37.69%）,湿热内蕴型45例（34.62%）,血虚风燥型36例（27.69%）。血虚风燥型组、脾虚湿盛型组和湿热内蕴型组的R分量值显著小于对照组（P<0.05）。血虚风燥型组的R分量值和B分量值均大于脾虚湿盛型组和湿热内蕴型组,差异有统计学意义（P<0.05）。湿热内蕴型组H值显著小于对照组（P<0.05）。四组G分量值比较差异无统计学意义（P>0.05）。结论　舌诊图像参数R、G、B分量值及H值可作为AD辨证分型的客观指标,有一定的临床意义。     

丙种球蛋白小剂量静注治疗典型与不完全川崎病患儿的临床疗效比较

［摘要］　目的　比较丙种球蛋白小剂量静注治疗典型与不完全川崎病患儿的临床疗效。方法　选择2018年2月至2020年5月廉江市人民医院收治的川崎病患儿86例,按疾病类型不同分为不完全川崎病组（不完全组,52例）和典型川崎病组（典型组,34例）。两组均采用常规治疗（包括雾化化痰、物理降温、营养支持等）,在此基础上使用小剂量静脉滴注丙种球蛋白（1 g/kg）+口服阿司匹林治疗。比较两组住院时间、血液指标、冠状动脉病变发生率。结果　不完全组住院时间为（8.07±0.46）d,典型组为（10.70±0.39）d,两组比较差异有统计学意义（t=27.486,P=0.000）。治疗后,不完全组C反应蛋白（CRP）、血小板、白细胞、血沉水平均显著低于典型组（P<0.05）。与治疗前比较,两组治疗后冠状动脉病变发生率均显著下降（P<0.05）,而不完全组显著低于典型组（P<0.05）。结论　丙种球蛋白小剂量静注治疗不完全川崎病患儿的效果优于典型川崎病患儿,能够缩短住院时间,改善血液指标,降低冠状动脉病变发生率。