RNA干扰核糖核苷酸还原酶M2对耐药卵巢癌细胞凋亡及侵袭性的影响

目的探讨RNA干扰核糖核苷酸还原酶M2(RRM2)对耐药卵巢癌细胞凋亡及侵袭性的影响。方法将RRM2基因的特异性小干扰(siRNA)转染SKOV3/DDP设为干扰组,SKOV3/DDP细胞、SKOV3/DDP-RRM2非特异性阴性细胞设为空白组、阴性组。检测细胞增殖抑制率,计算RI、耐药转染率,荧光PCR技术检测RRM2基因mRNA表达,并分析siRNA转染对SKOV3/DDP耐药指数、RRM2蛋白的影响,采用Transwell观察SKOV3/DDP细胞侵袭能力。结果空白组、阴性组及干扰组转染率均90%。DDP对SKOV3/DDP细胞属低度耐药,吉西他滨对SKOV3/DDP细胞仍较为敏感。DDP、吉西他滨对干扰组、阴性组、空白组的DDP对细胞的半数抑制浓度(IC50)值比较,差异有统计学意义(P0.05),DDP、吉西他滨对干扰组细胞的IC50值显著低于阴性组、空白组(P0.05)。SKOV3/DDP细胞、SKOV3细胞RRM2蛋白的相对表达量比较,差异有统计学意义(P0.05),且转染Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组相对表达量均显著低于阴性组、空白组,其中以转染Ⅰ组细胞的RRM2蛋白相对表达量下降最显著(P0.05)。干扰组细胞凋亡率显著高于空白组、阴性组,穿膜细胞数显著低于空白组、阴性组(P0.05)。结论 siRNA可有效抑制RRM2基因在卵巢癌中的增殖与侵袭性,增加耐药细胞的药物敏感性,尤其是促进DDP诱导的耐药细胞凋亡。     

肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体联合顺铂对小鼠移植型肝癌抑制作用的研究

目的探讨肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体（TRAIL）联合顺铂（DDP）对小鼠移植型肝癌的抑制作用。方法 H22肝癌移植瘤小鼠随机分为生理盐水（对照）组、TRAIL组、TRAIL＋DDP组和DDP组,称取瘤重分析其抑瘤作用、流式细胞检测细胞凋亡率。结果 （1）与对照组相比,TRAIL、DDP对小鼠移植性肝癌生长均有明显的抑制作用（P〈0.01）,TRAIL与DDP联用有增效作用（P〈0.05）。TRAIL组、DDP组及TRAIL＋DDP组的抑瘤率分别为45.14%、57.98%和77.23%。（2）与单一用药组相比,TRAIL与DDP联用可明显提高肿瘤细胞的凋亡率。结论 TRAIL与DDP联用对小鼠H22肝癌移植瘤的生长具有协同抑制作用。     

Smac和XIAP与卵巢癌细胞耐药及凋亡关系的研究

目的探讨Smac与卵巢癌耐药及凋亡机制。方法采用RT-PCR、Western blot方法分别从基因和蛋白水平检测卵巢癌细胞系SKOV3及其耐药细胞系SKOV3/DDP中Smac与XIAP的表达水平的差异。构建Smac真核表达载体pc DNA3.1(+)/EGFP+Smac。采用脂质体转染法将pc DNA3.1(+)/EGFP+Smac真核表达载体导入卵巢癌顺铂耐药细胞系SKOV3/DDP。运用Western blot法检测转染前后细胞内Smac与XIAP表达的变化,MTT法检测Smac表达增加后细胞生长抑制率,观察Smac基因对卵巢癌细胞凋亡的影响。结果 SKOV3、SKOV3/DDP细胞系中均表达Smac/DIABLO与XIAP,且SKOV3中Smac的相对含量高于SKOV3/DDP。SKOV3中XIAP的相对含量低于SKOV3/DDP。Western blot检测转染后耐药细胞Smac蛋白表达增加,XIAP表达无明显改变。MTT结果转染48 h与72 h后细胞生长抑制率出现明显增加,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 Smac表达的上调对卵巢癌细胞XIAP表达无明显影响,但对肿瘤细胞生长有明显的抑制作用。提示Smac确实促进卵巢癌细胞凋亡,但其凋亡机制并不是促进XIAP降解,而是与XIAP相互结合抑制其与caspase结合,激活caspase进而起到促凋亡作用。     

2-DG增强TRAIL诱导白血病细胞HL-60凋亡的作用

本研究旨在探讨2-脱氧葡萄糖(2-DG)增强HL-60细胞对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)敏感性的作用及其可能机制。采用MTT法检测不同浓度2-DG、TRAIL对HL-60细胞增殖的影响。选择低于半数抑制浓度(IC50)的10 mmol/L的2-DG和100 ng/ml的TRAIL单独或联合处理细胞,用PI单染流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测RIP1、GRP78、PARP蛋白的表达,试剂盒检测caspase-3的活性变化。结果表明,2-DG(10mmol/L)与TRAIL(100 ng/ml)联合作用于HL-60细胞48 h的凋亡率为(45.1±4.3)%,较单用2-DG、TRAIL的凋亡率明显提高(P<0.01),同时二者联合应用能增强GRP78蛋白的表达及caspase-3的活性,下调RIP1蛋白的表达。结论:2-DG能增强TRAIL诱导HL-60细胞的凋亡的敏感性,其机制可能是通过引起过度的内质网应激反应、下调RIP1蛋白的表达以及增加caspase-3的活性。     

肿瘤坏死因子凋亡诱导配体蛋白对前列腺癌及膀胱癌细胞抑制作用的研究

目的研究重组并纯化的肿瘤坏死因子凋亡诱导配体蛋白(TRAIL)对前列腺癌(PC-3)及膀胱癌细胞(5637)的抑制作用。方法 PC-3和5637细胞分为对照组(仅加培养液)和实验组(加入40 ng/ml的TRAIL蛋白处理),细胞培养12 h后加入TRAIL蛋白,24 h后应用PCR、Western blot技术检测细胞内抗凋亡蛋白Bcl-2及凋亡信号通路中Caspase-3和Caspase-8基因和蛋白的表达。结果应用SPSS统计分析软件,组间比较采用t检验,结果显示:PC3和5637细胞在TRAIL蛋白作用24 h后Bcl-2基因和蛋白表达水平均降低,而Caspase-8、Caspase-3基因和蛋白表达则增加。与对照组相比,其差异具显著性意义。结论 TRAIL蛋白通过下调抗凋亡基因Bcl-2的表达,增强Caspase-8、Caspase-3的表达从而诱导两种肿瘤细胞的凋亡达到抑癌效应。     

重组TRAIL抑制7402肝癌细胞生长的实验研究

目的　重组TRAIL对BALB/c裸鼠肝癌细胞皮下移植模型的抑瘤作用。方法　建立裸鼠 740 2肝癌细胞皮下移植瘤模型 ,纯化后的质粒DNA与PEI混合后经肌肉注射进行基因转染 ,体内验证重组蛋白的抑瘤活性 ,采用原位缺如末端标记 (TUNEL)法 ,进行肿瘤组织凋亡检测。结果　肿瘤体积测定显示TRAIL对肝癌生长有明显抑制作用 ,凋亡检测表明实验组镜下有蓝紫色凋亡细胞。结论　荷瘤小鼠经肌肉注射TRAIL质粒DNA后 ,能引起肿瘤细胞的凋亡 ,有效抑制 740 2肝癌细胞在裸鼠体内的生长。     

DIM联合顺铂诱导PC-3细胞凋亡机制的研究

目的探讨顺铂(DDP)和3,3-二吲哚基甲烷(3,3-diindolylmethane,DIM)联合诱导人前列腺癌PC-3细胞凋亡的机制。方法采用免疫组化技术观察细胞内bcl-2,caspase3和caspase9蛋白的表达,利用RT-PCR和western blot检测bcl-2,caspase3和caspase9基因和蛋白表达变化。结果细胞培养及免疫组化可见:各给药组与对照组比较均有不同程度抑制PC-3细胞增殖并诱导其凋亡作用;RT-PCR结果显示:各给药组均能使caspase3和caspase9基因表达上调,bcl-2表达下调;western blot结果表明:各给药组与对照组相比caspase3和caspase9蛋白表达上调,bcl-2表达下调,且0.4mg.L-1DDP 60μmol.L-1DIM联合应用与10倍剂量DDP(4 mgL-1)单独应用效果相同。结论DIM与DDP均可抑制PC-3细胞增殖并诱导其凋亡;其细胞凋亡机制可能与上调caspase3、caspase9基因表达,下调bcl-2表达有关;DIM与DDP联合抗瘤具有明显的减毒增效作用。     

IFN-γ对肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体诱导正常人骨髓单个核细胞凋亡的影响

目的以正常人骨髓单个核细胞(BMMNC)为细胞模型,探讨IFN-γ对肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)诱导BMMNC凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法流式细胞仪检测对照组、TRAIL组、IFN-γ组、IFN-γ+TRAIL组细胞的凋亡率及IFN-γ作用0、6、12和24 h后,细胞表面膜结合型TRAIL及其受体DR5蛋白的表达。结果对照组、TRAIL组、IFN-γ组、IFN-γ+TRAIL组,流式细胞仪检测BMMNC的凋亡率分别为(23.50±2.170)%,(23.85±1.44)%,(29.97±1.16)%,(38.00±2.21)%,差异有统计学意义(P<0.05);IFN-γ作用0、6、12和24 h后,流式细胞仪检测BMMNC表面TRAIL的平均荧光强度分别是20.29±1.07、24.91±0.40、28.55±0.81、33.26±2.00,及其受体DR5的平均荧光强度分别是14.51±0.82、17.59±1.31、24.61±0.88、32.49±2.61,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 IFN-γ和TRAIL联合作用能显著提高BMMNC的凋亡率,其机制可能与IFN-γ能上调TRAIL及其受体DR5蛋白的表达有关。     

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体诱导的细胞凋亡在再生障碍性贫血发病中的意义

目的通过检测肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)诱导正常骨髓单个核细胞(BMMNC)凋亡率,及抑制TRAIL凋亡途径后再生障碍性贫血(AA)患者骨髓单个核细胞凋亡率,探讨TRAIL在AA患者骨髓造血细胞凋亡中的作用。方法采用流式细胞术检测43例骨髓象正常者(正常组)及TRAIL作用后(TRAIL组)其骨髓单个核细胞凋亡率;14例AA患者(AA组)及TRAIL抗体作用后(TRAIL-Ab组)其骨髓单个核细胞凋亡率。结果 (1)AA组凋亡率较正常组明显增高,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)TRAIL组(浓度为30 ng/ml,作用24 h)凋亡率[(39.98±4.594)%]高于正常组[(19.90±6.656)%],差异有统计学意义(P<0.05)。(3)TRAIL-Ab组凋亡率[(30.28±4.594)%]较AA组[(51.29±7.355)%]减少,差异有统计学意义(P<0.05)。结论一定浓度的TRAIL可使正常骨髓单个核细胞凋亡增加,抑制TRAIL诱导的凋亡途径后,AA患者骨髓单个核细胞凋亡减少,提示TRAIL诱导的细胞凋亡,可能在AA发病中发挥一定作用。     

海带多糖对人鼻咽癌HONE1细胞裸鼠移植瘤的抑制及凋亡相关基因的调控

目的:观察海带多糖(laminaria japonica polysaccharides,LJP)对人鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)HONE1细胞移植瘤生长抑制及凋亡相关基因调控效应,探讨其抗癌机制.方法:以人NPC细胞株HONE1建立裸鼠皮下移植瘤模型及LJP行体内抑瘤实验,并以RT-PCR检测移植瘤Bax,Bcl-2,Caspase-3,8,9 mRNA表达.结果:LJP中、高剂量组抑瘤率分别为33.7％和47.0％,具有明显抑瘤作用;RTPCR检测结果显示,Bax mRNA表达随着LJP浓度的增加而增高(P＜ 0.05);Bcl-2mRNA表达随着LJP浓度增加而降低(P＜0.05).Caspase-3mRNA表达随着LJP浓度增加而增高(P＜ 0.05);LJP组Caspase-8,9mRNA表达无差异,且Caspase-9mRNA表达均低于顺铂(cisplatin,DDP)组.结论:LJP具有抑制NPCHONE1细胞生长的作用,其机制是促进癌细胞凋亡而实现的.     

茶多酚联合顺铂对人卵巢癌细胞SKOV3生长的影响及机制

目的观察茶多酚(TP)、顺铂(DDP)及二者联合对人卵巢癌细胞SKOV3增殖及凋亡的影响,初步探讨二者联合对SKOV3细胞生长影响的机制。方法人卵巢癌细胞SKOV3经低毒剂量TP、DDP单独或联合作用后,MTT法检测细胞增殖情况,DAPI核染色法荧光显微镜观察细胞凋亡形态变化,AnnexinV-FITC双染流式细胞术分析细胞凋亡,Westernblot方法检测细胞中Akt及p-Akt的表达。结果低毒剂量TP单药组、DDP单药组与联合用药组对细胞的增殖抑制率分别为(11.47±2.07)%、(32.26±4.85)%、(52.62±3.23)%,联合用药组的细胞增殖抑制率明显高于DDP单药组,差异有统计学意义(P=0.000);荧光显微镜下可见低毒剂量TP单药组的细胞核形态及染色与阴性对照组无明显差异,联合用药组细胞核比DDP单药组着色更重,核浓缩、核碎裂现象更加明显,呈现典型的细胞凋亡征象;低毒剂量的TP对细胞的凋亡无明显影响,联合用药组的凋亡率明显高于DDP单药组,差异有统计学意义(P=0.000);各用药组细胞中总的Akt蛋白表达无明显变化,p-Akt蛋白表达降低,其中联合用药组细胞中p-Akt蛋白表达降低最明显,与对照组及单药组比较,差异均有统计学意义(P<0.001)。结论 TP与DDP联合后可显著增强DDP的抑制细胞增殖、促细胞凋亡效应,可能是通过抑制Akt蛋白的磷酸化来实现的。     

抑制葡萄糖调节蛋白78基因表达逆转卵巢癌顺铂耐药作用的实验研究

目的探讨以葡萄糖调节蛋白78(GRP78)基因为靶向的RNA干扰(RNAi)抑制GRP78基因的表达,对人卵巢癌顺铂耐药细胞株SKOV3/DDP的影响。方法以GRP78基因为靶向的pSilencerTM3.0-H1-GRP78 siRNA重组质粒的构建,脂质法转染至细胞中;RT-PCR及Western blot方法检测GRP78 mRNA及蛋白表达;Western blot方法检测CHOP蛋白表达;MTT法检测不同浓度顺铂作用下细胞存活率,计算IC50及耐药指数。结果 RT-PCR及Western blot检测转染GRP78 siRNA重组质粒24 h、48 h7、2 h均能明显抑制SKOV3/DDP细胞GRP78基因表达,其中48h抑制效果最为明显;抑制SKOV3/DDP细胞GRP78基因表达能上调CHOP蛋白表达;顺铂作用24h,SKOV3/DDP细胞的IC50(26.13μg/ml)是其亲本SKOV3细胞IC50(8.25μg/ml)的3.1倍;转染pSH1Si-GRP78重组质粒后SKOV3/DDP细胞IC50(11.62μg/ml)明显降低。结论转染GRP78 siRNA重组质粒有效抑制SKOV3/DDP细胞GRP78基因表达;抑制GRP78基因表达能逆转SKOV3/DDP细胞的顺铂耐药性。     

超声辐照联合造影微泡和盐酸阿霉素对不同卵巢癌细胞的凋亡效果评价

目的观察超声辐照联合造影微泡（SonoVue）和盐酸阿霉素（DOX）对不同卵巢癌细胞的凋亡效果,并比较同一超声波辐照剂量、超声微泡和DOX浓度杀伤两株卵巢癌细胞之间的差异。方法 MTT法检测DOX对卵巢癌A2780s细胞的毒性作用,并计算出24 h的50%抑制浓度（IC50）值。将A2780s和SKOV3两株卵巢癌细胞均分为对照组（C组）、单纯DOX组（D组）、超声＋DOX组（U＋D组）、超声＋微泡＋DOX组（U＋M＋D组）。用相同参数（超声辐照声强为0.5 W/cm2、照射时间为30 s、超声脉冲波频率为1.0 MHz）的超声波辐照,并加入相同剂量的DOX（终浓度为1.0μg/ml）及微泡（W/V为10%）,以MTT法检测两株卵巢癌细胞的各组细胞存活率;倒置显微镜观察两株卵巢癌细胞的形态学变化;并用Hoechst染色法观察A2780s卵巢癌细胞中各组细胞的凋亡情况。结果 DOX对卵巢癌A2780s细胞的IC50值约为1.0μg/ml。MTT检测发现,各处理组A2780s细胞的存活率分别为（58.2±2.5）%、（54.4±3.2）%、（52.4±1.0）%,SKOV3细胞的存活率分别为（71.4±5.9）%、（60.1±3.6）%、（58.0±4.6）%,各处理组A2780s与SKOV3细胞与各自对照组相比均有明显的增殖抑制（对照组细胞存活率均假设为100%）,但同一细胞株的各处理组间细胞存活率比较,差异无统计学意义;各处理组A2780s细胞存活率略低于对应组SKOV3细胞存活率,但差异无统计学意义;倒置显微镜观察发现各处理组A2780s与SKOV3卵巢癌细胞均出现形态学变化;Hoechst染色法进一步发现各处理组A2780s细胞核存在凋亡现象,凋亡的细胞核数量有如下趋势：对照组〈D组〈U＋D组〈U＋M＋D组,但差异无统计学意义。结论 DOX（终浓度为1.0μg/ml）体外能诱导卵巢癌细胞凋亡,但超声辐照（辐照声强为0.5 W/cm2、辐照时间为30 s、脉冲频率为1.0 MHz）与10%微泡（W/V）联合DOX并未导致该凋亡率显著增加,同时两株不同的卵巢癌     

CpG ODN1826体内增强人肺癌细胞株A549对放射治疗的敏感性

目的 观察CpG ODN对荷瘤鼠肺癌皮下种植瘤生长和血管生成的作用.方法 建立荷瘤鼠皮下种植瘤模型,随机分为4个治疗组:单纯给药组[CpG ODN1826(1 μg/μl)]、照射给药组[CpG ODN1826(1 μg/μl)+β射线(RT:8 Gy)]、对照照射组[生理盐水(NS:100 μl/只)+β射线(RT:8 Gy)]、对照组[生理盐水(NS:100 μl/只)].接种肺癌细胞后7 d开始瘤内注射药物并照射5 d,计算抑瘤率.免疫组化法检测肿瘤组织血管内皮生长因子-C(VEGF-C)、neuropilin-1(NRP-1)的表达,RT-PCR法测定瘤组织中VEGF-C mRNA、NRP-1 mRNA的表达.结果 在抑瘤率方面,CpG ODN1826+RT组抑瘤率为(69.80±26.54)%,显著高于CpG ODN1826组(21.5±14.96)%、NS+RT组(15.10±49.45)%和NS组,差异有统计学意义(P<0.01).四组荷瘤鼠肿瘤组织中VEGF-C的阳性表达率分别为10%(1/10)、50%(5/10)、80%(8/10)、100%(10/10);NRP-1的阳性表达率分别为10%(1/10)、40%(4/10)、90%(9/10)、100%(10/10).在NRP-1和VEGF-C阳性表达率方面,CpG ODN1826+RT组和CpG ODN1826组的阳性表达率显著低于NS+RT组和NS组(P<0.01),CpG ODN1826+RT组明显低于CpG ODN1826组(P<0.01).VEGF-C mRNA相对表达水平分别为18.34±3.19、29.62±3.14、51.13±2.81、53.46±5.67;NRP-1 mRNA相对表达水平分别为23.57±5.73、34.72±5.13、59.95±4.76、62.49±6.34,CpG ODN1826+RT组和CpG ODN1826组较NS+RT组和NS组显著下降(P<0.01),CpG ODN1826+RT组明显低于CpG ODN1826组(P<0.01).结论 CpG ODN1826可显著抑制荷瘤鼠种植瘤的生长,其作用机制可能与抑制VEGF-C和NRP-1的表达、抑制血管生成有关.     

拉帕替尼对人卵巢癌SKOV3裸鼠移植瘤的影响

【目的】探讨新型靶向治疗药物拉帕替尼对人卵巢癌SKOV3裸鼠移植瘤生长的影响。【方法】将人SKVO3细胞株接种于裸小鼠胸壁皮下建立卵巢癌裸小鼠移植瘤模型。随机将其分为空白对照组（A组）和实验组（B组）,实验组根据拉帕替尼药物浓度的不同分为两个亚组：100 mg/kg （B1）和200 mg/kg （B2）,检测各组拉帕替尼用药前后荷瘤体积及裸鼠体质量的变化。【结果】拉帕替尼可显著抑制SKOV3裸小鼠移植瘤的生长,呈剂量依赖性,B2组抑瘤率显著高于B1组,其差异有统计学意义（P＜0．05）,但小鼠体质量用药前后比较无显著性差异（P＞0．05）。【结论】拉帕替尼可显著缩小人卵巢癌细胞株SKVO3裸鼠移植瘤的体积,为卵巢癌新型靶向治疗提供了理论基础。     

参麦及顺铂对人胃癌SGC-7901细胞生长的协同抑制作用

目的 探讨参麦及顺铂对人胃癌SGC-7901细胞生长的协同作用及其可能机制.方法 体外培养人胃癌SGC-7901细胞,MTT法测定细胞增殖情况;Hoechst33258染色观察细胞凋亡形态学变化;RT-PCR检测VEGF、Bcl-2和Caspase-3 mRNA的表达.结果 MTT法显示参麦及顺铂能抑制胃癌SGC-7901细胞增殖,其作用具有时间及浓度依赖性,单用顺铂组,有效浓度为1.25 μg/ml,起效时间为72 h,其抑制率为(8.70±0.57)%,联合用药组,有效浓度为顺铂0.625 μg/ml,起效时间为48h,其抑制率为(8.87±0.10)%.行Hoechst33258染色可见细胞核出现固缩、边集,形成凋亡小体等凋亡现象;RT-PCR检测显示:与对照组相比,药物作用后Bcl-2、VEGF的mRNA表达降低,Caspase-3mRNA表达升高.结论 参麦与顺铂联合对胃癌细胞的抑制具有协同作用,与单用顺铂相比,参麦与顺铂联合可有效减少顺铂的用药剂量,促进凋亡,其作用与协同促进Caspase-3的高表达及Bcl-2、VEGF的低表达有关.     

丙氨瑞林对人子宫内膜癌细胞裸鼠皮下移植瘤生长的影响及机制研究

目的 探讨不同剂量的醋酸丙氨瑞林对人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤生长及其可能的作用机制.方法 建立子宫内膜癌裸鼠移植瘤模型,选32只雌性荷瘤裸鼠随机分为4组,即空白对照组、醋酸丙氨瑞林干预组（20 μg/kg、40μg/kg、80 μg/kg）,不同剂量醋酸丙氨瑞林组均采取肌肉注射方式连续给药,4周后处死裸鼠,将移植瘤完整取出,测量肿瘤体积、绘制肿瘤生长曲线、计算抑瘤率,并应用免疫组织化学法检测瘤组织中TGF-β1、Smad2/3、Smad7蛋白的表达.结果 实验对照组、低、中、高剂量醋酸丙氨瑞林组中移植瘤生长曲线斜率依次减小,生长速度依次减慢.低、中、高剂量醋酸丙氨瑞林抑瘤率分别为（13.03±5.4）％、（26.42±7.3）％、（43.27±6.9）％,组间两两比较差异有统计学意义（P＜0.05）.随着醋酸丙氨瑞林浓度的升高,各干预组TGF-β1、Smad2/3蛋白表达水平明显升高,Smad7蛋白表达水平明显下降,且与对照组相比,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 醋酸丙氨瑞林对子宫内膜癌细胞株Hec-1-B裸鼠皮下移植瘤生长有抑制作用,且呈一定的剂量依赖效应,其作用机制可能与调节TGF-β1/Smads信号转导通路有关.     

门静脉高压性胃病小鼠模型的建立

目的:建立门静脉高压性胃病(PHG)小鼠模型;检测PHG小鼠胃黏膜细胞凋亡和活化Caspase-3表达情况。方法:分别采用部分缩窄门静脉联合左肾上腺静脉结扎(PPVL+LAVL)、腹腔注射四氯化碳建立C57BL/6小鼠门静脉高压模型(32只小鼠随机分为4组,包括假手术组、PPVL+LAVL组以及对照组、四氯化碳组),测量门静脉压力,进行肝胃组织苏木素-伊红染色、TUNEL标记检测染色计算凋亡指数、免疫组织化学检测活化Caspase-3表达情况,比较各组结果。结果:与假手术组相比,PPVL+LAVL组门静脉压力高[(9.5±0.8)mm Hg对比(5.9±0.4)mm Hg,P<0.01],凋亡指数高(9.2±0.9对比0.7±0.3,P<0.01),胃组织损害明显;与对照组相比,四氯化碳组肝组织呈中重度肝纤维化,门静脉压力高[(8.8±0.9)mm Hg对比(6.1±0.5)mm Hg,P<0.01],凋亡指数高(8.2±1.9对比1.9±0.6,P<0.01),胃组织出现损害。PPVL+LAVL组和四氯化碳组小鼠胃黏膜活化Caspase-3表达明显增多。结论:该研究成功建立两种小鼠PHG模型;PHG小鼠胃黏膜细胞凋亡增多,活化Caspase-3表达增多。     

As2O3对人宫颈癌裸鼠皮下移植瘤的抗肿瘤作用

目的探讨不同剂量三氧化二砷（As2O3）对人宫颈癌裸鼠皮下移植瘤的抗肿瘤作用及机制。方法将4×10^6个Hela细胞接种于裸鼠皮下,建立人宫颈癌裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为As2O3低剂量（1.0 mg/kg）、中剂量（2.5 mg/kg）、高剂量（5.0 mg/kg）组及生理盐水空白对照组、顺铂阳性对照组,腹腔连续给药10 d,停药后24 h处死裸鼠留取标本计算抑瘤率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,RT-PCR方法检测移植瘤组织caspase-3基因的相对表达量,免疫组化SP法检测磷酸化细胞外信号调节激酶（pERK）的表达。结果各剂量As2O3组及顺铂组瘤质量与生理盐水组相比均有统计学意义（F=39.14,P〈0.05）;As2O3高、中、低剂量组流式细胞仪检测时均出现典型凋亡峰,凋亡率分别为17.89%、17.19%、18.52%;As2O3作用后caspase-3基因的表达较生理盐水组明显升高,差异均有统计学意义（F=8.76,q=3.06～5.81,P〈0.05）;As2O3各剂量组pERK的表达较生理盐水组降低。结论 As2O3对人宫颈癌移植瘤的生长具有明显的抑制作用,其机制与上调caspase-3基因的表达诱导细胞凋亡,下调pERK的表达与抑制MAPK信号传导通路有关。