LPS、PLA_2及氧自由基对线粒体跨膜质子转运和H~+ -ATPase的影响

目的：研究细菌内毒素（LPS）、磷脂酶A2（PLA2）及自由基对质子跨膜转运及H+－ATP酶的影响。方法：采用正常大鼠，制备线粒体、亚线粒体（SMP），用SMP与LPS（100μg／ml）、PLA2（10u／ml）、FeSO4；／VitC（30／900μmol／L）分别共同温育（30C，30min），用ACMA荧光淬灭法测定质子跨膜转运能力。线粒体与不同浓度LPS、PLA2和FeSO4／VitC共同孵育，测定H+－ATP酶、PLA2、MDA。结果：LPS、PLA2、FeSO4／VitC可致亚线粒体ACMA荧光淬灭显著改变，LPS可引起线粒体膜PLA2活性、MDA含量升高（P＜0．05），LPS、PLA2可引起H+－ATP酶的活性进行性下降，小剂量FeSO4／VitC引起H+－ATP酶活性升高，大剂量FeSO4／VitC引起H+－ATP酶活性降低。结论：LPS、PLA2、LPO是造成质子转运能力下降的重要原因．自由基与H+－ATP酶损伤密切相关。     

线粒体电子传递呼吸链及其生物学意义的研究进展

 线粒体为细胞的生命活动提供基本能量。其内膜上的呼吸链酶传递氢和电子到ATP酶复合体,用于合成能量及维持跨内膜氢离子梯度循环。细胞生存所需能量的95%由线粒体呼吸链提供,主要由位于线粒体内膜上的5个复合体(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ)组成的线粒体呼吸链酶完成,即NADPH-泛醌、琥珀酸-泛醌还原酶、泛醌-Cytc还原酶、细胞色素c氧化酶及ATP合成酶。本文对线粒体呼吸链Ⅰ/Ⅱ/Ⅲ/Ⅳ/Ⅴ的分子结构、功能及生物学意义等进行了综述。     

LPS,PLA2及氧自由基对线粒体跨膜质子转运和H^＋—ATPase的 …

目的：研究细菌内毒素（ＬＰＳ）、磷脂酶Ａ２（ＰＬＡ２）及自由基对质子跨膜转运及Ｈ＾２＋－ＡＴＰ酶的影响。方法：采用正常大鼠，制备线粒体、亚线粒体（ＳＭＰ），用ＳＭＰ与ＬＰＳ（１００μｇ／ｍｌ）、ＰＬＡ２（１０ｕ／ｍｌ）、ＦｅＳＯ４（ＶｉｔＣ（３０／９００μｍｏｌ／Ｌ）分别共同温育（３０℃，３０ｍｉｎ），用ＡＣＭＡ荧光淬灭法测定质子跨膜转运能力。线闰体与不同浓度ＬＰＳ、ＰＬＡ２和ＦｅＳＯ４／ＶｉｔＣ     

线粒体蛋白转运的研究进展

线粒体内有1 000～2 000种蛋白质,其中绝大部分由核DNA编码,经胞质核糖体合成后转运进入线粒体.线粒体蛋白质跨线粒体内、外膜转运是维持线粒体功能的重要环节.近年来的研究表明,在线粒体外膜和内膜上存在一系列的蛋白复合物（称为转位分子）,它们具有蛋白通道的功能,能够识别目标蛋白并消耗ATP产能或利用线粒体膜电位（ΔΨ）完成蛋白跨膜转运.本文综述了近年来有关转位分子介导的线粒体蛋白转运的研究进展.     

解偶联蛋白2的研究进展

解偶联蛋白（uncoupling protein,UCP）属于线粒体载体蛋白的亚类,包括UCP1～UCP5。UCPs定位在线粒体的内膜上。它们通过驱散质子梯度使呼吸链的氧化作用与ADP的磷酸化作用解偶联,减少ATP的合成。它们在氨基酸组成上有一定程度的同源性。UCPs借助于其信号序列,通过Tim10／Tim12／Tim22通道向线粒体内膜定向转运。UCPs的共同特征是每个单体具有6个跨膜域,二聚体发挥转运功能。但其表达的主要组织不同,主要的作用也不尽相同。特别是近年来的研究发现,UCP2参与能量代谢、子宫内膜退化、活性氧的产生、衰老等过程。并且与非乙醇性脂肪肝、动脉粥样硬化、局部缺血以及缺血再灌注损伤、抗肥胖及2型糖尿病等有着密切的关联性,故引起人们的广泛重视。     

鞣花酸抑制胃中H~+,K~+-ATP酶和胃酸的分泌

鞣花酸(ellagic acid)是一种天然存在于浆果和蔬菜中的植物酚,具有多种生物活性,包括降血压、镇静、激活哈格曼(Hagoman)因子,抑制致癌和致突变,抑制谷胱甘肽转移酶和抑制血栓素B_2的合成。本文报道鞣花酸对胃中H~+,K~+-ATP酶和胃酸分泌的抑制作用,并研究了胃溃疡的发生。结果表明,鞣花酸是一种强的胃H~+,K~+-ATP酶的抑制剂。动力学研究表明,鞣花酸的抑制作用,对ATP是竞争性的,但对K~+是非竞争性的。H~+,K~+-ATP酶位于胃壁细胞内,在ATP水解时。细胞溶质(cytosolid)中的H~+替换腔内的K~+。在H~+,K~+-ATP酶系统,细胞溶质一侧在Mg~(2+)和ATP存在下发     

胆固醇的跨膜外向转运及调控

组织细胞胆固醇的外向跨膜转运要有ATP结合盒转运体A1(ABCA1)、ABCG1、B族I型清道夫受体(SR-BI)、载脂蛋白AⅠ(apoAⅠ)/高密度脂蛋白(HDL)等多种膜蛋白的共同参与,并且受过氧化物酶增殖活化受体(PPAR)及肝X受体(LXR)的调控.文中就参与胆固醇跨膜转运过程的膜蛋白与调控因子的结构和功能作一综述.     

EGB对缺血心肌线粒体膜脂质过氧化与ATP酶活性的影响

目的：探讨银杏叶提取物（EGB）对缺血心肌的细胞保护机制。方法：用垂体后叶素（20U／kg,腹泻内注射）复制小鼠急性心肌缺血模型, 观察不同剂量（100mg/kg,200mg/kg)EGB对心肌缺血60min线粒体获得率,膜磷脂含量,Ca^2 -ATP酶,Mg^2 -ATP酶活性,MDA及胞浆SOD活性变化的影响。结果：预先给予EGB可有效抑制缺血所致线粒体膜磷脂含量减少,MDA水平增高,提高线粒体Ca^2 ATP酶及胞浆SOD酶活性,其部分作用表现为剂量依赖性,结论：EGB对缺血心肌的保护作用可参与其增加胞液SOD活性,防止线粒体膜脂质过氧化,维持线粒体膜Ca^2 -ATP酶活性,改善缺血心肌细胞Ca^2 转运有关。     

冷暴露大鼠心肌线粒体H^＋运转ATP酶活力及能量偶联的改变

作者以无机磷释放量的测定比较大鼠心肌线粒体H运转ATP酶水解活力的变化;用ANS荧光强度的变化反映大鼠心肌线粒体内膜的能量偶联功能。发现:(1)线粒体H运转ATP酶水解活力对照组为9.94±0.05Piμmol·min/mg,冷暴露1,2,3,4,5周分别为4.21±0.05,5.02±0.06,2.68±0.04,3.26±0.05,4.71±0.08 Piμmol·min/mg。(2)荧光强度对照组为53.00±2.18相对单位,冷暴露1,2,3,4,5周分别为41.44±2.01,48.00±1.22,28.67±1.32,34.33±2.29,32.78±2.82相对单位。结果表明:冷暴露后的大鼠心肌线粒体H~+运转ATP酶水解活力降低,线粒体内膜的氧化磷酸化偶联功能亦降低。     

冷暴露大鼠心肌线粒体H~+运转ATP酶ATP驱动跨膜电位的变化

作者用oxonol-Ⅵ探剂测定线粒体H~+运转ATP酶ATP驱动跨膜电位的变化。发现:正常大鼠心肌线粒体H~+运转ATP酶的ATPΔΑ590～630nm的变化为0.0392±0.0024;冷暴露1,2,3,4和5周分别为0.0207±0.0014,0.0273±0.0024,0.0109±0.0022,0.0172±0.0028和0.0228±0.0011。结果表明:冷暴露大鼠心肌线粒体H~+运转ATP酶ATP驱动跨膜电位明显低于正常对照组。     

败血症大鼠肝线粒体ATP酶的变化与线粒体损伤

目的观察败血症大鼠肝线粒体ATP酶活性的变化,探讨败血症导致细胞变化的机制.方法采用盲肠结扎穿孔术(CLP)复制败血症大鼠模型,比较各组死亡率、原线粒体ATP酶活性以及平均动脉压(MAP)的变化.结果大鼠在复制内毒素休克模型后,24 h死亡率明显增高,肝线粒体钠钾ATP酶、钙ATP酶、镁ATP酶、钙镁ATP酶活性以及MAP均随术后时间延长而下降,且死亡率与各ATP酶活性的改变呈明显的正相关(P＜0.05).结论肝线粘体ATP酶活性降低,细胞内钙超载、镁降低所致的细胞损伤是内毒素休克的重要因素.     

丹酚酸A对胃H~+,K~+-ATP酶的作用

从丹参Salvia militiorrhiza的水提物中分离出一个缩酚酸类成分-丹酚酸A,药理研究表明它具有抑制H~+,K~+-ATP酶的作用。本文就其对胃的H~+,K~+-ATP酶、胃酸分泌和实验性溃疡模型的作用进行了深入研究。 (1)对H~+,K~+-ATP酶的作用:丹酚酸A对于由猪胃粘膜中获得的H~+,K~+-ATP酶的抑制呈剂量依赖性,IC_(50)为5.2×10~(-7)mol。丹酚酸A上的六个羟基的乙酰化可使其活性完全消失。 (2)抑制H~+,K~+-ATP酶的动力学研究:为弄清丹酚酸A作用类型,考察了ATP和     

冷暴露大鼠心肌线粒体内膜流动性及寡霉素敏感蛋白变化

作者以测定无机磷的释放比较线粒体H运转ATP酶对寡霉素的敏感性,藉1,6-二苯基、1,3,5-已二烯探针比较线粒体内膜的流动性。发现:(1)线粒体H运转ATP酶的寡霉素抑制率在正常对照组为99.00±0.20％,冷暴露1,2,3,4和5周分别为:66.71±0.45％,59.51±0.53％,52.01±0.83％,69.32±0.91％和80.63±0.63％。(2)线粒体内膜荧光偏振度在对照组为0.292±0.001,冷暴露1,2,3,4和5周分别为:0.283±0.002,0.278±0.001,0.263±0.001,0.268±0.001和0.272±0.001。结果表明:冷暴露后大鼠心肌线粒体H~+运转ATP酶对寡霉素的敏感性降低。线粒体内膜的流动性增强。     

二氮嗪预处理对大鼠缺血性损伤心肌线粒体功能的保护作用

目的探讨线粒体ATP敏感性钾通道开放剂二氮嗪预处理对大鼠心肌细胞线粒体功能保护作用。方法采用大鼠异丙肾上腺素心肌损伤模型，30只大鼠分成对照组、异丙肾上腺素（ISO）损伤组、二氮嗪（DZ）预处理组；以氧电极法测线粒体呼吸，罗丹明123为荧光探针测定线粒体膜电位，采用定磷法检测Na^＋-K^＋-ATP酶和Ca^2＋-ATP酶活性。比较各组心肌细胞线粒体Ⅲ态呼吸速率、线粒体Ⅳ态呼吸速率、线粒体呼吸控制率和线粒体膜电位以及线粒体ATP酶的活性。结果ISO组线粒体Ⅲ态呼吸速率呼吸控制率、线粒体膜电位以及Na^＋-K^＋-ATP酶和Ca^2＋-ATP酶活性与对照组比较显著下降（P〈0．01）；DZ预处理组Ⅲ态呼吸速率、呼吸控制率和线粒体膜电位（P〈0．05）以及Na^＋-K^＋-ATP酶和Ca^2＋-ATP酶活性较对照组低（P〈0.01），但与ISO组比较明显恢复。各组对Ⅳ态呼吸速率没有明显影响。结论线粒体ATP敏感性钾通道开放剂二氮嗪能增强心肌细胞线粒体酶活性，产生预处理心肌细胞线粒体保护效应。     

EGB对缺血心肌线粒体膜脂质过氧化与ATP酶活性的影响

目的　探讨银杏叶提取物 (EGB)对缺血心肌的细胞保护机制。方法　用垂体后叶素 (2 0U/kg,腹腔内注射 )复制小鼠急性心肌缺血模型 ,观察不同剂量 (10 0mg/kg ,2 0 0mg/kg)EGB对心肌缺血 6 0min线粒体获得率 ,膜磷脂含量 ,Ca2 + ATP酶 ,Mg2 + ATP酶活性 ,MDA及胞浆SOD活性变化的影响。结果　预先给予EGB可有效抑制缺血所致线粒体膜磷脂含量减少 ,MDA水平增高 ,提高线粒体Ca2 + ATP酶及胞浆SOD酶活性 ,其部分作用表现为剂量依赖性。结论　EGB对缺血心肌的保护作用可能与其增加胞液SOD活性 ,防止线粒体膜脂质过氧化 ,维持线粒体膜Ca2 + ATP酶活性 ,改善缺血心肌细胞Ca2 + 转运有关。     

UCP3在心脏缺血/再灌注损伤中的研究进展

解偶联蛋白3(UCP3)是线粒体内膜上的质子载体。既往研究发现,UCP3具有降低质子梯度降低线粒体膜电位、使氧化磷酸化脱偶联影响ATP合成、减少活性氧类生成、转运脂肪酸阴离子、减轻过氧化物损伤等作用。近期研究发现,UCP3对缺血/再灌注损伤心肌有保护作用,表现为减少心肌梗死面积,增强心肌对缺血的耐受性,增加缺血区ATP保有量,降低再灌注心律失常发生率。UCP3参与缺血预适应(IPC)的心肌保护机制,在IPC中发挥至关重要的作用。     

线粒体ATP酶6、8基因及编码蛋白表达改变对移植肝脏能量代谢的影响

目的 探讨肝细胞线粒体DNA ATP酶6、ATP酶8基因及编码蛋白F_0F_1-ATP酶表达改变对移植肝能量代谢的影响.方法 采用改良"二袖套法"制作大鼠肝移植模型,随机分为A组(冷保存30 min组),B组(冷保存6 h组),c组(冷保存12 h组)和D组(假手术对照组),分别于制模后于12 h、24 h、3 d、5 d、7 d采集标本,检测各组大鼠肝脏ATP含量、mtDNA ATP酶6、ATP酶8mRNA和F0F1-ATP酶蛋白表达.结果 冷保存再灌注早期(12 h),各组ATP酶6、ATP酶8 mRNA、F_0F_1-ATP酶蛋白表达(ng/mg蛋白)和ATP含量(U/L)均降低,C组(0.81±o.08,0.71±0.07,0.47±0.07,0.44 ±0.05)显著低于A组(1.11±0.04,1.07±0.07,0.86±0.15,0.70±0.11)、B组(1.02±0.07,0.90±0. 10,0.65 ±0.07,0.55±0.08)(P<0.05).再灌注24 h后各组ATP酶6、ATP酶8mRNA、F_0F_1-ATP酶蛋白表达和ATP含量增加,c组升高较A组、B组缓慢.结论 ATP酶6、ATP酶8基因表达改变后F_0F_1-ATPase蛋白表达异常.可能是导致能量合成障碍的主要原因.     

促红细胞生成素对大鼠脑外伤脑组织线粒体ATP酶活性的影响

目的观察体外注射重组人促红细胞生成素(rhEPO)对大鼠脑外伤脑组织线粒体ATP酶活性的影响,探讨rhEPO对脑外伤后神经保护作用的机制。方法建立大鼠自由落体脑挫裂伤模型,伤后立即腹腔注射rhEPO,采用改良Lowry氏法分别测定治疗后4、12、24和48 h及各自对照组大鼠脑组织线粒体Na -K ATP酶、Ca2 -ATP酶及Mg2 -ATP酶活性。结果脑外伤后大鼠脑组织线粒体Na -K ATP酶、Ca2 -ATP酶及Mg2 -ATP酶活性均显著下降(P<0.05)。rhEPO治疗后12、24和48 h脑组织线粒体ATP酶活性均显著高于各自时间点对照组(P<0.05)。结论外源性rhEPO可通过影响线粒体功能而减轻脑外伤后的继发性脑损害,从而改善预后。     

解耦联蛋白2的生理特性及其在心肌能量代谢中研究进展

解耦联蛋白2(UCP2)是主要存在于线粒体内膜上的质子转运体，可将H^ 从线粒体内膜渗漏到基质中，减少ATP合成。UCP2可调节脂肪酸氧化，控制活性氧簇的产生，抑制胰岛素分泌。同时UCP2的表达可受游离脂肪酸、过氧化物酶体增殖活化受体γ、瘦素、甲状腺素等调控。UCP2在心肌能量代谢中的作用目前尚未明确，需进一步研究。     

复方红景天制剂对大鼠+10Gz暴露后心肌线粒体ATP酶和呼吸酶链复合物活性的影响

目的研究复方红景天制剂对大鼠+10Gz(高正加速度)暴露后心肌线粒体三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)酶和呼吸酶链复合物活性的影响。方法 60只雄性健康SD大鼠随机分为5组,即对照组,+10 Gz组,复方红景天制剂低、中、高剂量组,每组12只。复方低剂量组、复方中剂量组和复方高剂量组大鼠分别按0.75 g/kg、1.5 g/kg和3.0g/kg给予复方红景天中药制剂,其余2组动物每天给等量的生理盐水。各组均灌胃给药14天,第15天进行+10 Gz离心机暴露,观察各组动物心肌线粒体ATP酶和呼吸酶链复合物活性的变化。结果与对照组相比,+10 Gz组大鼠线粒体Na+-K+-ATP酶活性以及呼吸链酶复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ活性均明显降低(P<0.01或P<0.05)。复方红景天制剂预处理大鼠ATP酶和呼吸链酶复合物活性均升高,复方红景天制剂高剂量组大鼠心肌线粒体Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶和呼吸链酶复合物Ⅰ～Ⅳ的活性均明显高于+10 Gz组(P<0.01或P<0.05)。结论复方红景天制剂对+10Gz暴露后大鼠心肌线粒体损伤有明显的保护作用。